Принцип диско-диффузионного метода определения чувствительности к антибиотикам Бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар, после чего на его поверхность пинцетом помещают на равномерном расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных антибиотиков. Посевы инкубируют при 37 0 С в течение суток. По диаметру зон задержки роста культуры судят о ее чувствительности к соответствующим антибиотикам. При зоне задержки роста до 15 мм культура расценивается как нечувствительная или низко чувствительная, 15 – 24 мм – средняя чувствительность, 25 мм и более – высокочувствительная. Бактериальную взвесь распределяют на поверхности чашки равномерно, а ее избыток удаляют путем отсасывания пастеровской пипеткой. На поверхность засеянного агара пинцетом раскладывают диски с антибиотиками. Каждая чашка может служить для испытания действия 5—6 антибиотиков. Диски раскладывают на расстоянии 2,5 см от центра чашки. Необходимо плотное прилегание диска к поверхности агара. Затем чашки инкубируют в термостате при 37° в течение 16—18 ч. Результаты учитывают путем изменения зон задержки роста микробов вокруг дисков (включая диаметр самого диска). Зависимость величины зон от степени чувствительности микроорганизмов Степень чувствительности штамма Диаметр зоны задержки роста в мм Высокочувствительный и чувствительный 15—25 и более Умеренно чувствительный 11—15 Устойчивый Менее 10 или полное отсутствие зон во многом аналогичен методу разведений в жидких средах, но определение МБК требует более сложных манипуляций. Готовят двойные серийные разведения препарата от 1:10 000 до 1:320 000, затем вносят по 1 мл каждого разведения в пробирки, содержащие по 4 мл (или 9 мл) охлаждённого до 45 °С агара. Процедуру проводят одной пипеткой с перенесением препарата от меньшей концентрации к большей. Содержимое пробирок можно быстро внести в чашки Петри, либо пробирки «скашивают» до застывания агара. Затем агар засевают исследуемой стандартизированной тест-культурой (петлёй или специальным дозатором, засевающим чашку 36 видами различных микроорганизмов) и инкубируют 18-20 ч при 37 "С. После инкубации определяют МИК по отсутствию роста на чашках (пробирках), содержащих наименьшие концентрации препарата.
