ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ СИБИРСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИНСТИТУТ ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ БИОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ Особенности функционирования перфузированной фиброзированной печени крыс Выполнила И.Е. Захарова Руководитель Н.А . Сетков. Красноярск 2011 ФИБРОЗ Избыточное разрастание соединительной ткани ФУНКЦИИ ПЕЧЕНИ Защитная Регуляторная Депонирования Биосинтетическая Переваривания жиров СХЕМА УСТАНОВКИ Перфузат Оксигенатор Термостат Насос О2+СО2 Блок артериальных датчиков Теплообменник Термостат ОРГАН Блок венозных датчиков Забор проб ЦЕЛЬ Оценить параметры жизнедеятельности изолированной перфузируемой фиброзированной печени крыс в динамике развития фиброза ЗАДАЧИ o o o Оценить уровень сосудистого сопротивления органа через 24 и 48 часов после окончания экспериментального воздействия Оценить динамику содержания кислорода в оттекающем от изолированной печени перфузате через 24 и 48 часов после окончания экспериментального воздействия Оценить динамику содержание глюкозы и лактата в оттекающем от изолированного органа перфузате через 24 и 48 часов после окончания экспериментального воздействия СХЕМА ЭКСПЕРИМЕНТА контроль масло CCl4 +масло МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Работу выполняли на крысах-самцах Wistar массой тела 200250г Экспериментальный фиброз печени крыс вызывали введением гепатотоксического яда четыреххлористого углерода в оливковом масле Операция проводилась под общим тиопентал натриевым наркозом по стандартной схеме Состав перфузионной среды: раствор Кребса – Хенселейта с добавлением глюкозы, лактата и аспарагиновой кислоты МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИЙ МЕТАБОЛИТОВ Параметр Определение концентрации глюкозы Определение концентрации лактата Определение сосудистого сопротивления Содержание кислорода Метод Глюкозо -оксидазный Энзиматически колориметрический Монометрический Полирографический Относительные единицы РЕЗУЛЬТАТЫ Сосудистое сопротивление 24h 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 конт om 24 CCl4 24 Относительные единицы 0 20 40 60 80 100 120 140 Время, мин Сосудистое сопротивление 48h 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 конт Om 48 CCl4 48 0 20 40 60 80 100 120 140 Время, мин РЕЗУЛЬТАТЫ Относительные единицы O2 24h 1,2 1 0,8 конт 0,6 Om 24 CCl4 24 0,4 0,2 0 0 20 40 60 80 100 120 140 Время, мин Время, мин Относительные единицы O2 48h 1,4 1,2 1 конт 0,8 Om 48 0,6 CCl4 48 0,4 0,2 Время, мин 0 0 20 40 60 80 100 120 140 РЕЗУЛЬТАТЫ Относительные единицы глюкоза 24h 1,2 1 0,8 контр 0,6 О.m 24h CCl4 24h 0,4 0,2 0 0 20 40 60 80 100 120 140 Время, мин Относительные единицы глюкоза 48h 1,2 1 0,8 конт 0,6 om 48h CCl4 48h 0,4 0,2 0 0 20 40 60 80 100 120 140 Время, мин РЕЗУЛЬТАТЫ Относительные единицы лактат 24h 1,4 1,2 1 конт 0,8 Om 24h 0,6 CCl 24h 0,4 0,2 0 0 20 40 60 80 100 Время, мин 120 140 Время, мин Относительные единицы лактат 48h 2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 контр O.m 48h CCl4 48h 0 20 40 60 80 100 120 140 Время, мин ВЫВОДЫ: Гемодинамика фиброзированного органа изменяется: импеданс сосудов фиброзированного органа выше, чем у здорового органа и органа с маслом Содержание кислорода в оттекающем от фиброзированного органа перфузате значительно ниже, чем в жидкости, оттекающей от печени интактных животных и животных, которым вводили растворитель – оливковое масло Наряду с этим наблюдается усиление анаэробного гликолиза Можно предположить, что низкое содержание кислорода в оттекающем от органа перфузате в сочетании с усилением анаэробного гликолиза отражает наличие изменений в кислородном метаболизме подвергшейся токсическому воздействию четыреххлористого углерода печени.