Оптический имиджинг Выполнил: студент ФБ10-01С Ускова Т.А. Методы оптического имиджинга делятся по разрешению: а)методы клеточного разрешения: - Конфокальная микроскопия - Многофотонная флуоресцентная микроскопия (МФМ) - Оптическая когерентная микроскопия (ОКМ); - Оптическая флуоресцентная просветная томография (ОФПМ) б) методы разрешения на уровне слоев/групп клеток: - Оптическая когерентная томография (ОКТ) в) методы разрешения на тканевом уровне - Оптическая диффузионная томография (ОДТ) Оптический имиджинг Флуоресцентный имиджинг Биолюминесцентный имиджинг Биолюминесцентный имиджинг • • • • Высокая чувствительность Нетоксичность Возможность исследования динамики in vivo Отсутствие фона Направления исследований с использованием оптимизированной люциферазой светляка (Luc2): • Картина генной экспрессии • Активность клеточных рецепторов • Процессинга РНК и белок-белковых взаимодействий • Исследования стволовых клеток • Процесс апоптоза • Наблюдения первичных опухолевых узлов для детектирования метостазов • Рис.1 . Определение чувствительности метода биолюминесцентного имиджинга на основе Colo 26-luc2 in vivo. Подкожные инъекции клеток основе Colo 26-luc2 в количестве 25,50,100 и 200. *N.V. Klementyeva, M.V. Shirmanova, E.O. Serebrovskaya at all.: In vivo Bioluminescence imaging of Tumor cells using optimized firefly luciferase luc2, CTM 2013- том 5. №3 Биолюминесцентный имиджинг метостазов опухоли основе Colo 26-luc2 *N.V. Klementyeva, M.V. Shirmanova, E.O. Serebrovskaya at all.: In vivo Bioluminescence imaging of Tumor cells using optimized firefly luciferase luc2, CTM 2013- том 5. №3 *N.V. Klementyeva, M.V. Shirmanova, E.O. Serebrovskaya at all.: In vivo Bioluminescence imaging of Tumor cells using optimized firefly luciferase luc2, CTM 2013- том 5. №3 Флуоресцентный имиджинг • Конфокальная и многофотонная лазерная сканирующая микроскопия (регистрация сигнала флуоресценции, возбуждаемой в объекте исследования с помощью лазерных остросфокусированных пучков) Флуорофоры для оптического имиджинга • Антитела конъюгированные с флуоресцентной меткой • Флуоресцентные белки • Кальций чувствительные красители • Потенциал-зависимые красители Флуоресцентные белки • GFP белки обнаружены у люминесцирующей медузы Aequorea victorea • О. Симомура с соавторами 1962 г. • Нобелевская премия за 2008 г. О. Симомура совместно с М. Чалфи и Р. Тсиеном. Использованные источники • N.V. Klementyeva, M.V. Shirmanova, E.O. Serebrovskaya at all.: In vivo Bioluminescence imaging of Tumor cells using optimized firefly luciferase luc2, CTM 2013- том 5. №3 • James G. Fujimoto, Daniel L. Farkas : Biomedical Optical Imaging, Оxford university press (2009) • Оптический имиджинг в приложении к исследованию нейробиологических систем мозга, cоставитель Митрошина Е.В. Электронное учебно-методическое пособие. – Нижний Новгород: Нижегородский госуниверситет, 2012. – 40 с.