ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ДЕЙСТВИЙ ПРИ ПОДОЗРЕНИИ НА СИБИРСКУЮ ЯЗВУ В ЛВСЭР И В РАЙОННЫХ ВЕТЕРИНАРНЫХ ЛАБОРАТОРИЯХ РОСТОВСКАЯ ОБЛАСТНАЯ ВЕТЕРИНАРНАЯ ЛАБОРАТОРИЯ ЛАБОРАТОРИИ ВСЭ РЫНКОВ Документы (ветеринарное свидетельство, отметки о предварительной экспертизе) Осмотр туши (размеры туши должны соответствовать размерам головы и паренхиматозным органам, предъявляемым к осмотру) Осмотр лимфатических узлов головы Должен учитываться вид животного ОСОБЕННОСТИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ У свиней протекает в виде местного патологического процесса (ангинозная форма) Заболевание может принимать хроническое, затяжное течение Животные часто подвергаются терапии антибиотиками Терапия антибиотиками не всегда адекватная При ангинозной форме температура не высокая СИБИРСКАЯ ЯЗВА У СВИНЕЙ С.Г. Колесов из 380 свиней больных с.я. у всех была ангинозная форма и только у 2 были поражены селезенки и у 1 почки Л.С. Невский из 50 свиней с ангинозной формой у 47 наблюдал односторонее поражение подчелюстных л.у. Кровь при ангинозной форме остается стерильной СИБИРСКАЯ ЯЗВА У СВИНЕЙ С.Г. Колесов в л.у. обнаруживал тени в 45 случаях из 360 (1976 г.) Наряду с тенями с.я. бактерий много посторонней микрофлоры Только в 15 % отмечался геморрагический лимфаденит, в остальных случаях наблюдался серозный и фибринозный лимфаденит, при этом в л.у. обнаруживались палочки с.я. ЛИМФАТИЧЕСКИЕ УЗЛЫ ТРУДНОСТИ ДИАГНОСТИКИ Низкая инцидентность заболевания - снижение настороженности специалистов Отсутствие изменений в паренхиматозных органах Изменения только в единичных л.у., не всегда типичные Лимфаденит от серозного, гнойно-абсцедирующего, до геморрагического (отсутствие типичной картины, особенно при применении антибиотиков) ВЫВОДЫ При ВСЭ туш свиней мазки для обнаружения палочки с.я. делают при любых изменениях хотя бы в одном л.у. Необходимо проверять все доступные л.у. на туше БАКТЕРИОСКОПИЯ НАТИВНОГО МАТЕРИАЛА Bacillus anthracis Мышечная ткань. Нативный материал. Окраска по Романовскому БАКТЕРИОСКОПИЯ НАТИВНОГО МАТЕРИАЛА Bacillus anthracis Мышечная ткань. Нативный материал. Окраска по Романовскому БАКТЕРИОСКОПИЯ НАТИВНОГО МАТЕРИАЛА В ряде случаев в нативном материале могут обнаруживаться только тени палочек, что также является основание для подозрения на с.я. Bacillus anthracis Лимфатический узел. Нативный материал. Окраска по Романовскому БАКТЕРИОСКОПИЯ НАТИВНОГО МАТЕРИАЛА Наличие капсулы дает большие основания для подозрения на с.я. Bacillus anthracis Лимфатический узел. Нативный материал. Окраска по Романовскому ЛАБОРАТОРИЯ ВСЭ При обнаружении любых палочек в нативных мазках, материал передается в районные или областную лабораторию ЛАБОРАТОРИЯ ВСЭ Мазки отпечатки из пораженных л.у. Окраска по Граму Окраска по Романовскому-Гимзе (с предварительной фиксацией) или по Ребигеру (без фиксации) При обнаружении палочек в мазке-отпечатке: приостанавливют работу ЛВСЭ, отбирают пробы для отправки в районную или областную лабораторию, в водонепроницаемой таре отправляют с нарочным, до получения результатов исследования тушу и органы изолируют в отдельной камере при температуре 4 С, В ЛВСЭ рынка из помещения убирают все продукты не имевшие контакта с сибиреязвенной тушей и проводят 3-кратную дезинфекцию: помещение и оборудование орошают 10% горячим раствором едкого натра или раствором хлорной извести (5% активного хлора), экспозиция 1 час, норма расхода дез.раствора-1литр на 1 метр площади пола, вилки, мусаты и другие металлические предметы кипятят 30 мин., спецодежду автоклавируют, в случае установления сибирской язвы по результатам бактериоскопии в районной лаборатории ( 2 часа с момента поступления материала), тушу, органы сжигают при соблюдении установленных ветеринарно-санитарных правил. ВАЖНО!!! в каждой лаборатории ВСЭ должен быть рабочий микроскоп с иммерсией набор для окраски мазков (сами краски, чашки Петри, пипетки, иммерсионное масло) ОБУЧЕННЫЙ ПЕРСОНАЛ дезинфицирующие растворы постоянная настороженность РАЙОННАЯ (ОБЛАСТНАЯ) ЛАБОРАТОРИЯ Лабораторные исследования клинического, патологоанатомического и полевого материала при подозрении на с.я. проводят лаборатории, имеющие разрешительную документацию на работу с материалом зараженным микроорганизмами 2 группы патогенности Все работы с материалом, подозрительным на заражение возбудителем с.я., включая забор, транспортировку, подготовку и исследование проводятся в соответствии с нормативнометодическими документами, регламентирующими работу с возбудителями 1-2 групп патогенности РАЙОННАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Даем информацию в 1-й день - не позднее 2 ч. после получения материала по данным бактериоскопии 2-й день – по результатам посева на питательные среды (до 72 часов) 3-й день – по результатам биопробы в исключительных случаях, при сомнительных результатах биопробы до 10 дней ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ Все основные мероприятия проводим в первый день, затем только ведем учет реакций Микроскопия Бактериология (посевы на МПБ и МПА) Биология (заражение белых мышей) Подготовка материала для РП (1 г материала в термостат при 37 С) 1. БАКТЕРИОСКОПИЯ НАТИВНОГО МАТЕРИАЛА В ПЕРВЫЕ 2 ЧАСА ОКРАСКА МАЗКОВ –ОТПЕЧАТКОВ НЕПОСРЕДСТВЕННО С ПОСТУПИВШЕГО МАТЕРИАЛА, НЕ ВСЕГДА ДАЕТ ОДНОЗНАЧНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ (ОКРАСКА ПО ГРАМУ И РОМАНОВСКОМУ-ГИМЗЕ) ПО ОТРИЦАТЕЛЬНЫМ РЕЗУЛЬТАТАМ ДАННОГО ЭТАПА ИССЛЕДОВАНИЯ НЕЛЬЗЯ ВЫДАВАТЬ ЗАКЛЮЧЕНИЕ Bacillus anthracis Мышечная ткань. Нативный материал. Окраска по Романовскому 2. ПОСЕВЫ НА ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ Посевы на МПА, МПБ, кровяной агар (вторые сутки – 72 часа) На кровяном агаре гемолиза не вызывает, в виде снежинок Серовато-белые колонии с изрезанными краями, слизистой консистенции На кровяном агаре гемолиза не вызывает, края не ровные (под малым увеличением «голова медузы Гаргоны» 2. МИКРОСКОПИЯ БУЛЬОННОЙ КУЛЬТУРЫ Окраска по Граму Первые 72 часа, грам-положительные палочки, образующие цепи, возможно спорообразование 3. ПРОВЕДЕНИЕ БИОПРОБЫ При гибели мышей, проводим вскрытие, микроскопию, делаем посевы из селезенки на питательные среды БАКТЕРИОСКОПИЯ МАЗКОВ ОТПЕЧАТКОВ ИХ ОРГАНОВ ПОДОПЫТНЫХ ЖИВОТНЫХ ОКРАСКА МАЗКОВ -ОТПЕЧАТКОВ 1.ПО ГРАМУ 2.ПО РОМАНОВСКОМУ-ГИМЗЕ ИЛИ ПО РЕБИГИРУ BACILLUS ANTHRACIS Селезенка белых мышей. Окраска по Романовскому ПОИСК КАПСУЛЫ НЕОБХОДИМО ПОСТАРАТЬСЯ НАЙТИ ПАЛОЧКИ С ЯВНО ВЫРАЖЕННОЙ КАПСУЛОЙ Bacillus anthracis Селезенка белых мышей. Окраска по Романовскому 4. РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ 1. ЗАГНИВШИЙ МАТЕРИАЛ 1:10 С ФИЗ. РАСТВОРОМ 2. КИПЯТИМ НА ВОДЯНОЙ БАНЕ 30 МИНУТ 3. ФИЛЬТРУЕМ ЧЕРЕЗ АСБЕСТОВЫЙ ФИЛЬТР 4. НАСЛАИВАЕМ НА СЫВОРОТКУ СИБИРЕЯЗВЕННУЮ ПРЕЦИПИТИРУЮЩУЮ 5. СТАВЯТ ДВА КОНТРОЛЯ (ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ И ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ), РЕАКЦИЯ ДОЛЖНА ПРОЙТИ НА ПЕРВОЙ МИНУТЕ ПОЛОЖИТЕЛЬНАЯ РП (ОСНОВНАЯ РЕАКЦИЯ ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ МАТЕРИАЛА ОТ СВИНЕЙ И ПРИ ЗАГНИВШЕМ МАТЕРИАЛЕ) ОСНОВАНИЕ ДЛЯ ПОСТАНОВКИ ДИАГНОЗА 1. АЯ 2. 3. 4. 5. 6. ПРИ БАКТЕРИОСКОПИИ НАТИВНОГО МАТЕРИАЛА ОБНАРУЖЕНЫ ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ НЕПОДВИЖНЫЕ ПАЛОЧКИ ИМЕЮЩИЕ КАСУЛУ ПРИ ПОСЕВЕ НА МПА ОБНАРУЖИВАЮТСЯ ХАРАКТЕРНЫЙ РОСТ, СЛИЗИСТЫХ ШЕРОХОВАТЫХ КОЛОНИЙ ГИБЕЛЬ ПОДОПЫТНЫХ ЖИВОТНЫХ НА 3 ДЕНЬ ПРИ БАКТЕРИОСКОПИИ ИЗ ОРГАНОВ ПОДОПЫТНЫХ ЖИВОТНЫХ ВЫДЕЛЕНИЕ ПАЛОЧЕК ИМЕЮЩИХ КАПСУЛУ ИССЛЕДУЕМ КУЛЬТУРУ ОТ МЫШЕЙ ПОЛОЖИТЕЛЬНАЯ РП (ОСНОВНАЯ РЕАКЦИЯ ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ МАТЕРИАЛА ОТ СВИНЕЙ И ПРИ ЗАГНИВШЕМ МАТЕРИАЛЕ) СТАВИМ ДИАГНОЗ ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ «Сборник правил ветеринарно-санитарной экспертизы продуктов животноводства и растениеводства» , М.: 2000 Ипатенко Н.Г. «Сибирская язва», М.: «Колос», 1996 Житенко П.В. «Ветеринарно-санитарная экспертиза продуктов животноводства», М.: «Колос», 1998 Колесова С.Г. «Сибирская язва», М.: «Колос», 1976 Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.7.2629-10 «Профилактика сибирской язвы» РОССИЙСКАЯ ГАЗЕТА 30 июня 2010 г. зарегистрировано в Минюсте РФ 17 июня 2010 г.