Roche / SYSMEX еминар пользователей C гематологических анализаторов Х-серии
реклама
Roche / SYSMEX Cеминар пользователей гематологических анализаторов Х-серии 3 апреля, Москва, Россия Концепция X-класса анализаторов: Новые клинические возможности расширенной панели тестов Tanja Tornow Head of Product Management Haematology Sysmex Europe Концепция X-класса XE-5000 Все анализаторы имеют одинаковые функции, черты, технологию, реагенты и систему флагов Отличия заключаются только в числе каналов, скорости и способе загрузки проб XE-2100 XT-2000i & XT-1800i X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow XS-1000i & XS-800i 2 Линейка анализаторов Sysmex’ X-класса: Гематология сегодня – это проточная цитофлюориметрия XE-5000: Case Manager 76 параметров, 8 скатеррограмм, 2 гистограммы (вкл. NRBC, расширенное меню для RET, IG, HPC, IPF) Отдельный режим для анализа жидкостей тела Самая быстрая система в мире: 150 проб/час. XE-2100: 45 параметров, 7 скатерограмм, 2 гистограмм (вкл. NRBC, расширенное меню RET, IG, HPC, IPF) Самая быстрая система в мире: 150 проб/час. X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 3 Линейка анализаторов Sysmex’ X-класса: Гематология сегодня – это проточная цитофлюориметрия XT-2000i и XT-1800i: 33 или 26 параметров (вкл. расширенное меню RET, IG) 5 или 2 скатеррограммы, 2 гистограммы Производительность 80 проб/час в любом выбранном режиме в т.ч. RET XS-1000i и XS-800i: 24 параметра (+ IG#, IG%) 1 скатеррограмма, 3 гистограммы 60 проб/час. X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 4 Систематизация X- класса XT-2000i XS-1000i XE-2100 + дополнительное программное обеспечение: мастер-модули XE-5000 SP-1000i DM96 SIS X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 5 Высокие технологии – проточная цитофлюориметрия Уникальная технология: дифференцировка лейкоцитов посредством определения концентрации нуклеиновых кислот. 1999 3 различных вида информации для каждой клетки: Содержание ДНК/РНК Сложность внутренней структуры Размер X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 6 Дифференцировка лейкоцитов методом проточной цитофлюориметрии: Что особенного? Мы получаем много информации о ядре и гранулярности клетки, используя прямое, боковое светорассеивание лазерного луча и импедансный метод. Почему мы определяем содержание нуклеиновых кислот в клетке? X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 7 Для корректной дифференцировки требуется взгляд внутрь клетки.......... X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 8 Почему нуклеиновые кислоты? Повышенное содержание нуклеиновых кислот в клетках крови указывает на их метаболическую активность: 1.В ядре Митотическая активность увеличивается содержание РНК/ДНК 2.В цитоплазме Синтез белка увеличивается содержание РНК X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 9 Почему флюоресценция в приборах X-класса? Повышенное содержание нуклеиновых кислот в клетке (ДНК или РНК) эквивалентно повышенному флюоресцентному сигналу. X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 10 Преимущества проточной цитофлюориметрии Количественное определение активированных В-лимфоцитов (OTHER) бысто информирует нас об иммунном ответе в случае реактивных заболеваний (например, вирусных инфекциях.) Напр. Плазматические клетки Напр. Лимфоплазмоциты Напр. Иммуноциты X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow Клетки, продуцирую щие антитела 11 Включая системные гематологические болезни Параметр «Others» дает превосходную корреляцию с результатами определения активированных В-лейкоцитов, полученных путем фенотипирования и микроскопии Linssen J. et al., 2007: Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 72B, 157-166 X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 12 Преимущества счета параметра “OTHER” Детекция второй фазы иммунного ответа, осуществляемого активированными Влимфоцитами Оценивается число активированных Влимфоцитов, что особенно важно у новорожденных: предсказание результата переносимой инфекции выздоровление после инфекции или сепсиса X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 13 Преимущества флюоресценции Размер клеток не имеет значения в relevant DIFF канале. Нет интерференции фрагментами клеток : Клетки, не содержащие нуклеиновые кислоты, такие как зрелые эритроциты не окрашиваются НЕТ интерференции при наличии эритроцитов, Фрагменты устойчивых к лизису клеток Неклеточные структуры, например пузырьки воздуха не определяются Фоновый счет всегда очень низкий Это особенно важно при анализе ликвора X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 14 Преимущества флюоресценции Количественное определение незрелых гранулоцитов (IG) как исследовательский параметр быстро информирует о наличии бактериальной или паразитарной инфекции или воспалении Промиелоцит Миелоцит Метамиелоцит X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 15 Расширение аналитических возможностей с помощью дополнительных программ для XE-2100 и XT-серии IG Мастер: Незрелые гранулоциты (IG# and IG%) 1. Уменьшает потребность в мазках 2. Точный мониторинг терапии 3. Улучшенная детекция воспалительных заболеваний 4. Полезен в прогнозе сепсиса X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 16 IG Мастер – в чем отличие от стандартного программного обеспечения? НЕТ фиксированных границ в скатерограмме, надежный и хорошо воспроизводимый счет IG# и IG% с помощью гибкого алгоритма Диагностический параметр, может передаваться в ЛИС, мониторируется КК, распечатывается и отображается в результатах пациента Флаг “IG?” заменен на “IG present” Диапазон нормальных значений может определяться пользователем X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 17 Счет IG – Что конкретно считается? X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 18 Корреляция счета IG на ХЕ-2100 при сравнении с мануальной дифференцировкой промиелоцитов, миелоцитов и метамиелоцитов 400 образцов крови составила r = 0.78 Корреляция счета IG на XE-2100 при сравнении с референсным методом проточной цитофлюориметрии составила r = 0.96 Briggs C. et al., 2003: Lab Hematol 9, 117-124 X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 19 Точный мониторинг терапии Т.к. IG являются патологическими клетками, у пациентов с неизвестным диагнозом необходимо с помощью микроскопии мазка определить их морфологию. Как и при автоматической дифференцировке лейкоцитов, НЕ нужно делать мазок для проверки автоматического счета IG у пациентов с известным диагнозом. Точный мониторинг эффективности терапии у пациентов с высоким содержанием IG, например при химиотерапии у пациентов с AML X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 20 Синдром системного воспалительного ответа (SIRS): c инфекцией или нет? SIRS Синдром системного воспалительного ответа без инфекции X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 21 IG при сепсисе – SIRS - гипертермия Группа 1 Сепсис n = 40 Группа 2 Тяжелый сепсис n = 32 Группа 3 Экстракорпоральная циркуляция n = 27 Группа 4 Гипертермия n=8 Группа 5 Здоровые доноры n = 38 Barbara Montag, Axel Nierhaus Klinik und Poliklinik für Anästhesiologie Direktor: Prof. Dr. med. Dr. h.c. J. Schulte am Esch X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 22 IG присутствуют у пациентов с сепсисом 1,0 ,8 ,6 ,4 IG_1 day 1 ,2 Результат: Содержание IG не увеличивается при SIRS (ЭКК) При гипертермии и SIRS значения IG имеют незначительное увеличение IG_2 day 2 IG_3 day 3 0,0 group 1 Сепсис X-CLASS: extended parameters of clinical value 2 ECC Tanja Tornow 23 Временной мониторинг IG у септических пациентов 1.8 Пациенты без GM (ликвор) 1.4 Результат: 1.0 Уменьшение содержания IG является 0.6 хорошим прогностическ 0.2 им признаком IG у выживших IG у умерших 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 Дни X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 24 Заключение Подсчет IG является быстрым и точным инструментом для мониторинга эффективности различных видов терапии у пациентов с инфекцией или лейкемией. При SIRS присутствие IG может указывать на инфекцию с начинающимся сепсисом Чем раньше увеличиваются значения IG у септических пациентов, тем меньше шансов на выживание Снижение значений IG является крайне важным для выживания пациентов с сепсисом. X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 25 Расширение аналитических возможностей с помощью дополнительных программ для XE-2100 и XT-2000i Доступно только при наличии RET-канала RET Мастер: новый параметр RET-He (Эквивалент гемоглобина ретикулоцитов) Для оценки гемоглобинизации ретикулоцитов RET-He = «качество» эритропоэза RET# и RET% = «количество» эритропоэза X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 26 Параметр RET-He X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 27 Уровни автоматической детекции эритропоэза в RET- канале Первый уровень: Зрелые эритроциты Второй уровень: Ретикулоциты Параметры: RBC / HCT / MCV / MCH / MCHC Мониторинг: «история» концентрации гемоглобина за последние 120 дней Параметры: RET#, RET%, IRF Мониторинг: активность эритропоэза путем оценки абсолютного количества развивающихся эритроцитов Третий уровень: Информация о функции эритроцитов Параметр: RET-He (гемоглобинизация ретикулоцитов в пг) Мониторинг: активность эритропоэза путем оценки содержания гемоглобина в развивающихся эритроцитах X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 28 Информация о функции RBC в RETканале Норма Аномалия – анемия RET-He около 35 пг RET-He около 22 пг X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 29 Успешное лечение функционального железодефицита RET-He RET-He RET-He 21.9 пг 29.6 пг 31.3 пг RET-He – единственный параметр, который позволяет убедиться в эффективности терапии железодефицита уже через 3 дня, т.к. отражает появление ретикулоцитов с нормальным содержанием гемоглобина. X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 30 Функциональный железодефицит Ретикулоцитарные параметры помогают определить железодефицит, когда использование классических биохимических тестов не приемлимо X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 31 Распределение Fe в организме Всего: 4.2 г (мужчины) 3.5 г (жещины) - только связанное с белком Функциональное железо: 65 % Гем 5 % Миоглобин 0.2 % гем-содержащие ферменты 10 % негемовое железо 80 % от общего количества Запасы Fe: Ферритин, гемосидерин 20 % от общего количества (у мужчин) Транспортное Fe: Трансферрин (=“Fe в дороге”) 0.1 % от общего количества Andrews N: New Engl J Med 1998; 341: 1986; modified X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 32 5 причин железодефицита Потребление в низком количестве: мальнутриция (вегетарианцы, пожилые люди) Мальнутриция: Хронические гастриты, частичная резекция желудка, синдром Крона, кальций, танины (в чае или кофе) Увеличенная потребность: беременные, новорожденные, дети Потеря крови: Менструации, хирургические вмешательства, роды, язва, etc... Функциональный железодефицит: Потребность эритропоэза в железе превышает способность организма освобождать Fe из запасов. (Cavill I: Blood 1993; 82: 1377) X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 33 Биохимические тесты Железо Ферритин Трансферрин Нельзя использовать при воспалении Насыщение трансферрина Является очень специфическим тестом при низких значениях. Повышенные значения не специфичны для оценки запасов железа, т.к. могут наблюдаться в острой фазе воспаления Не достаточно специфичен при воспалении Растворимый рецептор трансферрина (sTfR) Высокоспецифичен и инертен при воспалении, но не является чувствительным параметром sTfR – log ферритин индекс Индекс отражает статус железа лучше, чем все другие параметры X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 34 Спавнение параметров при функциональном железодефиците Ферритин sTfR sTfR / log ферритин СРБ 5 mg/L СРБ > 5 mg/L X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 35 Thomas C+L: Clin Chem 2002; 48: 1066 Использование RET-параметров в диагностической диаграмме “ThomasPlot” достаточно Доступное Fe мало много запасы Fe X-CLASS: extended parameters of clinical value мало Thomas C+L: Clin Chem 2002; 48: 1066 Tanja Tornow 36 Заключение Все RBC-параметры, включая MCV, MCH, гипохромные RBC дают нам историческую информацию об анемии хронических заболеваний RET%: информация о количестве вновь образованных RBC RET-He: информация о качестве вновь образованных RBC RET-He: первый параметр, который указывает на выздоровление при железодефиците RET-He = 28 пг может рассматриваться как критерий решения (cut-off) при лечении анемии хронических заболеваний X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 37 Заключение С параметром RET-He возможен прогноз развития анемии: Улучшение состояния и выздоровление Улучшение состояния без полного выздоровления Развитие анемии у здоровых людей Ухудшение состояния у пациентов, страдающих анемией X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 38 Общее заключение: клиническое использование расширенного меню параметров Расширенное меню дифференцировки лейкоцитов: Ранняя детекция инфекции у пациентов группы риска – HIV, паразитарные инфекции, мальнутриция и т.д.… Улучшенная детекция воспаления (IG) Простой и удобный мониторинг терапии – напр. Химиотерапии или воспаления (IG) Прогноз сепсиса (IG, OTHER) Расширенное меню счета эритроцитов: Анемия: одно из наиболее недооценных заболеваний, широко распространенных по всему миру. Мониторинг анемии хронических заболеваний (RET-He, Delta-He) X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 39 www.sysmex-europe.com Спасибо! X-CLASS: extended parameters of clinical value Tanja Tornow 40
