Казахский национальный медицинский университет имени С.Д. Асфендиярова Научно-исследовательский институт фундаментальной и прикладной медицины имени Б.Атчабарова Научная клинико-диагностическая лаборатория СОСТОЯНИЕ ЗАЩИТНОЙ И ГРИБКОВОЙ МИКРОФЛОРЫ ВЛАГАЛИЩА БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН В РАЗЛИЧНЫЕ ТРИМЕСТРЫ Заведующая НКДЛ, к.м.н. Батырбаева Д.Ж. Алматы, 2014 НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Актуальность проблемы Вагинальный кандидоз, являясь актуальной проблемой в целом, особую значимость приобретает во время беременности в связи с высокой распространенностью, осложненным течением беременности и родов, поэтому проблема диагностики кандидоза имеет особое медикосоциальное значение. По данным статистического анализа кожновенерологического диспансера г. Алматы, заболеваемость вагинальным кандидозом среди ИППП, за 2013 год составила 43 %, за 2014 год – 56 %. НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ Изучить видовой состав грибов рода Candida влагалища беременных женщин в зависимости от триместра беременности, определить их значение в развитии вагинального кандидоза и кандидоносительства НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Объем проведенных исследований при взятий материала Обследованные группы Количество (абс. число) 1 этап Беременные женщины, всего 264 - с инфекционной патологией 170 - относительно здоровые 94 - с вагинальным кандидозом 82 - кандидоносители 33 2 этап Пролеченные женщины 82 3 этап Повторно пролеченные женщины 4 4 этап Обследованные группы, всего 115 1 – ВК с уровнем защитной микрофлоры в пределах нормы 27 2 – ВК с уровнем защитной микрофлоры ниже нормы 55 3 - кандидоносителей 33 Обследовано женщин в зависимости от триместра Беременные женщины, всего 264 I 88 II 88 III 88 НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Основные использованные в работе методы и объем проведенных микробиологических исследований Методы исследования Количество (абс. число) Микробиологические исследования: Выделено и идентифицировано микроорганизмов, всего штаммов 908 штаммов - до лечения - после первого курса лечения - после второго курса лечения 598 штаммов 293 штамма 17 штаммов Из них: - Lactobacillus spp. - Candida spp. - Staphylococcus spp. - Bifidobacterium spp. - Streptococcus spp. - E.coli - Sarcina - Klebsiella spp. - Proteus spp. - Corynebacterium spp. - Flavobacterium spp. - H.influenzae 294 штамма 161 штамм 160 штаммов 122 штамм 89 штамм 35 штаммов 18 штаммов 13 штаммов 7 штаммов 5 штаммов 2 штамма 2 штамма Микроскопически изучено мазков (нативный препарат, окраска по Граму, Романовскому-Гимзе) 430 мазков Изучены биологические свойства микроорганизмов в различные триместры беременности и в динамике лечения: - антилизоцимная активность грибов - адгезивная активность грибов и лактобактерий - хемотаксис грибов - каталазная активность грибов -микробный антагонизм грибов и лактобактерий - антимикотикочувствительность грибов 161 штамм 455 штаммов 161 штамм 161 штамм 80 штаммов 161 штамм РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Методы выявления вагинального кандидоза и кандидоносительства у беременных женщин Микроскопическая картина мазков, выделенных из влагалища беременных женщин, у которых выявлен вагинальный кандидоз (n=82) Типы вегетации грибов Дрожжевые клетки (++ и более) Дрожжевые клетки + псевдомицелий Дрожжи + почкующиеся клетки Дрожжевые клетки + псевдомицелий почкующиеся клетки Дрожжевые клетки + псевдомицелий бластоспоры Дрожжевые клетки + псевдомицелий почкующиеся клетки + бластоспоры Дрожжевые клетки + почкующиеся клетки бластоспоры Дрожжевые клетки + бластоспоры Дрожжевые клетки + истинный мицелий Дрожжевые клетки + истинный мицелий почкующиеся клетки + бластоспоры Всего Количество (абс., M±m) 27 32,9±0,05 18 22,0±0,05 12 14,6±0,04 9,8±0,03 + 8 + 6 7,3±0,03 + 5 6,1±0,03 + 3 3,7±0,02 + 1 1 1 1,2±0,01 1,2±0,01 1,2±0,01 82 100 НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Частота встречаемости грибов рода Candida, выделенных из влагалища беременных женщин, больных с вагинальным кандидозом и кандидоносителей в различные триместры беременности (M±m) 42,4 39,4 41,5 32,9 I 58,3 18,2 25,6 ВК II III носители Видовая идентификация грибов рода Candida 24,1 8,3 C.tropicalis C.albicans C.krusei 6,5 C.kefir 2,8 C.glabrata НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Частота встречаемости различных видов грибов рода Candida, выделенных из влагалища беременных женщин, больных вагинальным кандидозом и кандидоносителей (%) C.glabrata 6.1 1.3 9.1 C.kefir C.krusei 5.3 6.1 9.3 C.albicans 51.5 22.7 27.3 C.tropicalis 61.3 кандидоносители больные с вагинальным кандидозом Средние показатели интенсивности обсеменения влагалища женщин с вагинальным кандидозом и кандидоносителей различными видами грибов рода Candida (КОЕ/мл) Виды грибов C.albicans C.kefir C.krusei C.tropicalis C.glabrata Больные с ВК Носители M±m, % M±m, % 4,3х105 2,5х105 1,4х105 1,1х105 4,2х104 3,2х104 7,3х104 4,9х104 4,0х104 4,1х104 НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Частота встречаемости грибов рода Candida и защитной микрофлоры, выделенных совместно, из влагалища беременных женщин, больных с ВК и кандидоносителей (абс., %) Микробы, совместно выделенные Больные с ВК кандидоносители Всего абс. % абс. % абс. % Candida spp. Lactobacillus spp. + 46 71,9 23 71,9 69 71,9 Candida spp. Bifidobacterium spp. + 18 28,1 8 25,0 26 27,1 Candida spp. Lactobacillus spp. Bifidobacterium spp. + + - - 1 3,1 1 1,0 Всего 64 78,0 32 97,0 96 100 Средние значения обсеменения грибковой и защитной микрофлорой, выделенных совместно, из влагалища беременных женщин, больных с ВК и носителей, (КОЕ/мл) Микроорганизмы, совместно выделенные Больные с вагинальным кандидозом Кандидоносители Candida spp. + Lactobacillus spp. 1,1х105±2,6х104* 4,0х105±1,1х105 3,9х104±8,2х103* 6,3х105±2,4х105 Candida spp. + Bifidobacterium spp. 1,3х105±5,4х104 7,4х105±5,1х105 5,6х104±9,8х103 1,9х105±8,9х104 Candida spp. + Lactobacillus spp. + Bifidobacterium spp. - 1,4х104 6,9х104 4,2х105 НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Межмикробное сокультивирование грибов рода Candida и лактобактерий Грибы рода Candida и лактобактерий при совместном сокультивировании Антагонизм Комменсализм АНТАГОНИЗМ МЕЖДУ ГРИБАМИ РОДА CANDIDA И ЛАКТОБАКТЕРИЯМИ, ВЫДЕЛЕННЫМИ ОТ БОЛЬНЫХ С ВАГИНАЛЬНЫМ КАНДИДОЗОМ И НОСИТЕЛЕЙ В РАЗЛИЧНЫЕ ТРИМЕСТРЫ БЕРЕМЕННОСТИ 96% 90% 98% 95% 90% 86% I II кандидоносители III НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Антимикотикочувствительность грибов рода Candida Чувствительность грибов рода Candida, выделенных от больных с вагинальным кандидозом и носителей к антимикотическим препаратам 98% 96% 90% 95% 90% 86% I II кандидоносители III НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Чувствительность различных видов грибов, выделенных от больных с вагинальным кандидозом и носителей, к антимикотическим препаратам Миконазол Нистатин Клотримазол Антими котики Виды больные носител больные носител больные носител ВК и ВК и ВК и грибов C.glabrata 100 100 - 100 C.tropicalis 63,0±0,0 7 64,7±0, 1 C.krusei 57,1±0,2 50,0±0, 57,1±0,2 5 C.kefir 50,0±0,3 33,3±0, 3 C.albicans 47,1±0,1 55,6±0, 35,3±0,2 66,7±0, 2 2 - - Флуконазол больные ВК носител и - - 37,0±0,0 29,4±0, 23,9±0,0 11,8±0, 41,3±0,07 52,9±0, 7 1 7 1 1 - - 57,1±0,2 - - - 33,3±0, 3 - - 50,0±0,3 - 11,8±0,2 44,4±0, 2 17,6±0,2 22,2±0, 2 НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ МИКРОФЛОРА ВЛАГАЛИЩА БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН В ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ Частота встречаемости различных видов грибов у беременных женщин в динамике лечения Виды грибов До лечения После 1 курса лечения После 2 курса лечения абс. % абс. % абс. % C.tropicalis C.albicans C.krusei C.kefir C.glabrata 63 26 9 7 3 39,1 16,1 5,63 4,3 1,9 30 11 5 3 - 18,6 6,8 3,1 1,9 - 1 2 1 - 0,6 1,2 0,6 - Всего 108 67,1 49 30,4 4 2,5 НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Интенсивность обсеменения влагалища беременных женщин различными видами грибов рода Candida в динамике лечения (M±m), (КОЕ/мл) Виды грибов абс. До лечения M После 1 курса лечения абс. M После 2 курса лечения абс. M C.albicans 26 2,9х105 11 6,6х104 2 1,7х103 C.kefir 7 1,7х105 3 1,9х102 - - C.krusei 9 1,2х105 5 2,1х103 1 3,2х102* C.tropicalis 63 7,8х104 30 7,4х102 1 3,5х102 C.glabrata 3 2,9х104 - - - - НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Частота встречаемости защитной микрофлоры у беременных женщин в динамике лечения (абс, M±m) Микроорганизм ы Lactobacillus spp. Bifidobacterium spp. До лечения абс. 178 73 После 1 курса лечения M±m абс. M±m 67,4±0,0 110 70,5±0,03 * 3 44 28,2±0,04 46,8±0,0 * 4 Примечание: * достоверность различий р<0,05 После 2 курса лечения абс. 6 5 M±m 60,0±0,04 * 50,0±0,02 * НАУЧНАЯ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ Антимикотическая активность различных видов грибов рода Candida, выделенных от беременных женщин в динамике лечения (M±m) Вид гриба C.tropicalis C.albicans C.krusei C.kefir C.glabrata Всего до лечения после 1 курса лечения после 2 курса лечения 19,4±0,006* 16,6±0,01 23,5±0,02** 11,6±0,04 30,7±0,02 20,4±0,005 46,3±0,01* 53,9±0,02* 20,4±0,02** 100 55,2±0,01 88,4±0,03 90,0±0,03* 78,3±0,05 85,6±0,02 Примечание: * достоверность различий р<0,01 между сравниваемыми группами ** достоверность различий р<0,05 между сравниваемыми группами