1. ДЕТЕКТОР СУБПОПУЛЯЦИЙ КЛЕТОК ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ

ОТЧЕТ
О выполнении работ на 4 этапе по государственному контракту
от «06» июня 2007 г. № 02.522.11.2009,
Лот № 2 Шифр «2007-2-2.2-04-08-004»
Разработка технологии и создание
опытных образцов приборов и
диагностических наборов
для ранней диагностики
иммунозависимых заболеваний
Институт аналитического приборостроения РАН
ГП ГНЦ «Институт иммунологии ФМБА России»
ООО НПЦ «Медицинская Иммунология»
Институт химической физики имени Н.Н. Семенова РАН
1
Общая потребность в определении иммунного статуса
составляет 10 – 15% населения страны и имеет тенденцию
постоянного роста
Для своевременного выявления нарушений иммунитета,
необходима комплексная оценка, включающая
исследование
клеточного
и
гуморального
звеньев иммунной системы
2
Цель проекта – разработка комплекса
приборов и диагностических тест-систем
для ранней диагностики
иммунозависимых заболеваний
Кроме этого, в рамках проекта проводится разработка методов, средств
и технологий коллективной работы с корпоративными данными,
получаемыми при эксплуатации приборов и диагностических наборов
для ранней диагностики иммунозависимых заболеваний
3
КОМПЛЕКС ДЛЯ РАННЕЙ ДИАГНОСТИКИ
ИММУНОЗАВИСИМЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ВКЛЮЧАЕТ В СЕБЯ:
1. ДЕТЕКТОР СУБПОПУЛЯЦИЙ КЛЕТОК
Клеточное
звено
ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ и диагностические тестсистемы
2. ПРИБОР РЕГИСТРАЦИИ РЕЗУЛЬТАТОВ
ИММУНОДИФФУЗИОННЫХ МЕТОДОВ
и диагностические тест-системы
3. КОМПЛЕКС ПРИБОРОВ ДЛЯ УСКОРЕННОЙ
ПОСТАНОВКИ И РЕГИСТРАЦИИ РЕАКЦИИ
ЛАТЕКСНОЙ АГГЛЮТИНАЦИИ В ПЛАНШЕТАХ
и диагностические тест-системы
4. Методы, средства и технологии работы с
корпоративными данными, получаемыми при
эксплуатации разрабатываемых приборов
Г
у
м
о
р
а
л
ь
н
о
е
4
з
в
е
н
о
1. ДЕТЕКТОР СУБПОПУЛЯЦИЙ КЛЕТОК
ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ «ДСКФ-01»
Назначение прибора:
Автоматизированный анализ статистических параметров
ансамблей клеток с использованием внесенных
люминесцентных меток одновременно в двух спектральных
диапазонах
Разрабатывается как более доступная по цене альтернатива
проточным цитометрам
В приборе использован принципиально новый подход к
анализу иммунокомпетентных клеток:
- Клетки помещены в камеру Горяева и находятся в поле зрения специализированных
видеокамер
- производится автоматическое обнаружение клеток и определение индивидуальных
параметров для каждой из них
- Регистрация изображений нескольких сотен полей зрения, автоматически
сменяющих друг друга каждую секунду, проводится попеременно в двух режимах – в
проходящем свете и с засветкой лазером
5
Основные параметры прибора
Размер анализируемых клеток (объектов)
Скорость анализа (при концентрации более 107 кл. / мл)
Число градаций интенсивности флуоресценции
Порог обнаружения флуоресценции (краситель FITC)
Пространственное разрешение в поле зрения
Формат изображения поля зрения
Длина волны лазера
Мощность в рабочем режиме
Полоса пропускания сменных светофильтров
от 2 до 30 мкм
> 100 клеток / с
> 103
1 × 103 MEF *
1 мкм
500 × 500
пикселей
473 нм
20 мВт
521-545 нм ;
564-592 нм ;
656-694 нм
*) – MEF = Molecules of Equivalent Fluorochrome – число молекул соответствующего
красителя в объеме раствора, равном объему клетки.
6
ДЕТЕКТОР СУБПОПУЛЯЦИЙ КЛЕТОК
ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ «ДСКФ-01»
- Созданы технологии разработки и
изготовления опытных партий ОДК1
- Проведен выпуск опытных партий
ОДК1
-Разработаны программы и методики
предварительных испытаний ОДК1
- Разработаны программы и методики
приемочных испытаний ОДК1
- Проведены предварительные и
приемочные испытания ОДК1
РАЗМЕР АНАЛИЗИРУЕМЫХ КЛЕТОК
ОТ 3 ДО 30 МКМ
СКОРОСТЬ АНАЛИЗА
> 100 КЛЕТОК / С
ЧИСЛО ГРАДАЦИЙ ИНТЕНСИВНОСТИ
ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ В ДВУХ
СПЕКТРАЛЬНЫХ ДИАПАЗОНАХ
>103
ПОРОГ ОБНАРУЖЕНИЯ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ
(КРАСИТЕЛЬ FITC)
1 х 103 MEF
Разработанные диагностические системы (ОДК 4):
количественного определения внутриклеточных цитокинов лимфоцитов;
оценки функциональной активности естественных киллерных клеток;
количественного определения популяций лимфоцитов (с набором моноклональных
антител);
оценки пролиферативной активности лимфоцитов;
оценки поглотительной активности фагоцитов периферической крови человека;
оценки бактерицидной и фунгицидной функций фагоцитов периферической крови
(завершенность фагоцитоза);
оценки продукции активных форм кислорода фагоцитарными клетками периферической
крови;
оценки апоптоза активированных лимфоцитов периферической крови человека с помощью
пропидиума иодида;
8
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ НАБОРЫ ДЛЯ ОБЕСПЕЧЕНИЯ РАБОТЫ
ДЕТЕКТОРА СУБПОПУЛЯЦИЙ ЛИМФОИДНЫХ КЛЕТОК
СОЗДАНО 8 НАБОРОВ
ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
КОЛИЧЕСТВЕННЫХ
И ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ
ХАРАКТЕРИСТИК
ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ
КЛЕТОК
Подготовлен пакет
научно-технической документации
на продукцию
Выпущены 3 серии каждого набора
в промышленном масштабе
Подготовлены документы
для регистрации изделий
в Минздравсоцразвития9
2. ПРИБОР РЕГИСТРАЦИИ
РЕЗУЛЬТАТОВ
ИММУНОДИФФУЗИОННЫХ
МЕТОДОВ «РИД-01»
Назначение прибора:
автоматизированный учёт результатов и
расчет концентрации белка в методе
радиальной иммунодиффузии
Фотография 90 мм чашки Петри с
результатами анализа IgA методом
радиальной иммунодиффузии
10
Основные параметры комплекса
Время
Обработки изображения, не более, с
5
Тип носителя проб
чашка Петри
Измеряемый параметр
диаметр преципитационных
колец
Диапазон измерений радиусов, мм
2,5...12
Суммарная относительная ошибка
идентификации результатов, не более,
%
5
Суммарная относительная ошибка
измерения концентрации, не более, %
5
Режим работы (регистрация, обработка
данных, оформление протокола)
автоматический
11
РЕГИСТРАТОР РАДИАЛЬНОЙ
ИММУНОДИФФУЗИИ «РИД-01»
- Созданы технологии разработки и
изготовления опытных партий ОДК2
- Проведен выпуск опытных партий ОДК2
-Разработаны программы и методики
предварительных испытаний ОДК2
- Разработаны программы и методики
приемочных испытаний ОДК2
- Проведены предварительные и приемочные
испытания ОДК2
Прибор обеспечивает автоматическое определение
концентрации иммуноспецифичных белков в гелевых
средах в стандартных пластмассовых чашках Петри
однократного применения диаметром 90 мм
Программное обеспечение предоставляет пользователю
удобный и комфортный диалоговый интерфейс для работы
с прибором
Прибор предназначен для работы в клиникодиагностических лабораториях научно-исследовательских
и лечебно-профилактических учреждений здравоохранения
Высокая контрастность изображения без использования
специальных красителей
12
Разработаны диагностические
тест-системы (ОДК 5):
- определения IgA, IgG, IgM в сыворотках и
других биологических жидкостях человека
«ИДМ - Ig-s»
- определения С3 и С4 компонентов комплемента
в сыворотках и других биологических жидкостях
человека «ИДМ – С3-С4»
- определения IgA, IgG и s-IgA в слюне, а также
других биологических жидкостях человека
«ИДМ - s-Ig»
13
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ НАБОРЫ ДЛЯ ОБЕСПЕЧЕНИЯ РАБОТЫ
РЕГИСТРАТОРА РАДИАЛЬНОЙ ИММУНОДИФФУЗИИ
СОЗДАНО 3 НАБОРА
ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ИММУНОГЛОБУЛИНОВ
В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
Подготовлен пакет
научно-технической документации
на продукцию
Выпущены 20 серий каждого набора
в промышленном масштабе
Подготовлены документы
для регистрации изделий
в Минздравсоцразвития
3. КОМПЛЕКС ПРИБОРОВ ДЛЯ
УСКОРЕННОЙ ПОСТАНОВКИ И
РЕГИСТРАЦИИ РЕАКЦИИ
ЛАТЕКСНОЙ АГГЛЮТИНАЦИИ В
ПЛАНШЕТАХ «КУПРА-01»
Назначение:
-экспресс-постановка реакции латексагглютинации
- автоматизированная обработка и архивация
результатов анализа
Латекс-агглютинация в
планшете
15
СОСТАВ КОМПЛЕКСА:
Блок
ускоренной
постановки
реакции
Сканерная
регистрирующая
система
(интерпретация и
документирование результатов
латексных агглютинационных
тестов)
16
Комплекс выполняет следующие основные функции:
- получение осадка латекс-агглютинации
в стандартных планшетах за 15 мин
Блок ускоренной
постановки реакции
- получение высококачественных фотографий планшетов
с результатами анализа и архивацию полученных
фотографий
- обработку фотографий с целью идентификации
результатов анализа
С
к
а
н
е
р
н
а
я
с
и
с
т
е
м
а
- архивацию результатов проведённых исследований
17
р
е
г
и
с
т
р
а
ц
и
и
Технические характеристики устройства для
ускоренной постановки реакции агглютинации
время проведения анализа
~15 мин
максимальный рабочий объём
рабочей среды
200 мкл
максимальная температура
рабочей среды
37 °С
частота УЗ
3,0–4,5 МГц
Технические характеристики сканирующего
комплекса
оптическое разрешение получаемых снимков
600х600 dpi
количество одновременно обрабатываемых
планшетов
2
время получения одного снимка и обработки
изображеия
2 мин
18
КОМПЛЕКС ПРИБОРОВ ДЛЯ УСКОРЕННОЙ
ПОСТАНОВКИ
И РЕГИСТРАЦИИ РЕАКЦИИ ЛАТЕКСНОЙ
АГГЛЮТИНАЦИИ
В ПЛАНШЕТАХ «КУПРА-01»
- Созданы технологии разработки и
изготовления опытных партий ОДК3
- Проведен выпуск опытных партий
ОДК3
-Разработаны программы и методики
предварительных испытаний ОДК3
- Разработаны программы и методики
приемочных испытаний ОДК3
- Проведены предварительные и
приемочные испытания ОДК3
Разработаны диагностические системы
(ОДК 7):
- определения антител к ЛПС клеточной стенки
Staphilococcus aureus;
- для определения антител к ЛПС клеточной
стенки Staphilococcus epidermidis cutis;
- определения антител к ЛПС клеточной стенки
Escherichia coli (энтеропатогенные штаммы);
- определения антител к ЛПС клеточной стенки
Streptococcus pyogenes в сыворотке крови
человека
20
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ НАБОРЫ ДЛЯ ОБЕСПЕЧЕНИЯ
РАБОТЫ
КОМПЛЕКСА ПРИБОРОВ ДЛЯ УСКОРЕННОЙ
ПОСТАНОВКИ
И РЕГИСТРАЦИИ РЕАКЦИИ ЛАТЕКСНОЙ АГГЛЮТИНАЦИИ
В ПЛАНШЕТАХ
СОЗДАНО 4 НАБОРА
ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ИММУНОГЛОБУЛИНОВ
В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
Подготовлен пакет
научно-технической документации
на продукцию
Выпущены 10 серий каждого набора
в промышленном масштабе
Подготовлены документы
для регистрации изделий
в Минздравсоцразвития
4. Распределенные информационные ресурсы для ранней
диагностики иммунозависимых заболеваний
Верхний уровень:
- запросы на поиск данных
- работа с онтологиями
- представление данных
- формирование коллекций
Архив
клинической
лаборатории
сервисы
интеграции
данных
Архив данных
поликлиники N…
Архив данных
диагностического
центра М…
сервисы семантического
поиска данных
сервисы
взаимодействия
с пользователем
Репозиторий
метаописаний
(база данных)
Промежуточный уровень:
распределенное
хранилище
метаописаний, связей
между данными,
шаблонов для поиска и
отображения данных
связывает данные
в онтологии
22
На четвертом этапе по разделу ОДК 7 выполнено:
- Проведена отладка прототипа и разработка технологии применения созданных
методов и средств для сбора, хранения и организации данных, получаемых от
автоматизированных приборов и диагностических наборов для ранней диагностики
иммунозависимых заболеваний;
- Проведено тестирование разработанного комплекса методов и средств для сбора,
хранения и организации данных
- Проведена подготовка технологической документации.
23
Основные результаты работы:
- Созданы технологии разработки и изготовления опытных партий приборов ОДК1-3.
- Проведен выпуск опытных партий приборов ОДК1-3.
- Проведен выпуск опытных партий диагностических тест-систем ОДК4-6.
- Разработаны программы и методики предварительных испытаний.
- Разработаны программы и методики приемочных испытаний.
- Проведены предварительные и приемочные испытания.
- Созданы методологии использования комплекса приборов и диагностических тестсистем.
- Проведена отладка прототипа и разработка технологии применения созданных
методов и средств для сбора, хранения и организации данных, получаемых от
автоматизированных приборов и диагностических наборов для ранней диагностики
иммунозависимых заболеваний ОДК7.
- Проведено тестирование разработанного комплекса методов и средств для сбора,
хранения и организации данных и подготовка технологической документации.
- Разработана документация для обращения в Федеральную службу по надзору в сфере
здравоохранения и социального развития на предмет готовности к медицинским
испытаниям.
Полученные результаты полностью удовлетворяют требованиям Технического задания и Календарного
плана работ.
24
Базовые и фундаментальные исследования
на данную тему проведены ГП ГНЦ
«Институт иммунологии ФМБА России»,
Институтом аналитического
приборостроения РАН и Институтом
химической физики им. Н.Н. Лебедева РАН
25
Индикаторы проекта
Индикатор
Прираще
ние на
отчетном
этапе
Выпол
нение
нараст
ающим
итогом
на
конец
отчетн
ого
этапа
Требование ТЗ
Ед.
изм.
Знач
ение
Достигну
то к
началу
этапа
шт.
2
0
2
2
%
20
0
20
20
Число патентов (в том числе
международных) на результаты
интеллектуальной
деятельности,
полученные в рамках выполнения
комплексных проектов
шт.
2
1
1
2
И2.2.4
Численность
молодых
специалистов, привлеченных к проведению
исследований в рамках комплексных
проектов
чел.
15
15
0
15
И2.2.6
Число публикаций, содержащих
результаты интеллектуальной
деятельности, полученные в рамках
выполнения комплексных проектов
шт.
8
1
7
8
Обозн.
Наименование
И2.2.1
Число разработанных технологий,
соответствующих мировому уровню
либо превосходящих его
И2.2.2
Доля завершенных проектов,
перешедших в стадию
коммерциализации
И2.2.3
26
затраты внебюджетных средств
фактически произведенных
при выполнении государственного контракта
от «06» июня 2007 г. № 02.522.11.2009, шифр «2007-2-2.2-04-08-004»
на «30» октября 2008 г.
№
п/п
Приращение на
отчетном этапе
(Рублей)
Наименование внебюджетных источников
1.
Собственные средства организации
2.
Кредиты
3.
Средства иностранных инвесторов
4.
Заемные средства
5.
Прочие
11 000 000
ИТОГО
Достигнуто к началу этапа
11 000 000
0 000 000
Выполнение нарастающим итогом на конец отчетного этапа
11 000 000
Задано ТЗ, КП на конец отчетного этапа
11 000 000
Превышение(+)/отставание(-)
-
27
Распределение внебюджетных расходов по видам работ,
произведенных при выполнении этапа № 4 государственного контракта
от «06» июня 2007 г. № 02.522.11.2009
Лот № 2 Шифр «2007-2-2.2-04-08-004»
Документ на выделение средств
№
п
/
п
1
Наименование работы,
услуги
2
Наименование
источника
средств
Документ об исполнении
Номер
Фирменное
название
исполнителя
Наименование
документа на
выполнение
Дата
Наименов
ание
Дата
3
4
5
6
7
8
9
30. 04.
2008 г.
1
Строительство и
подготовка
производственных
площадей под выпуск
опытной партии и
серийное производство
продукции ОДК1,
ОДК2, ОДК3
Прочие
Инвестиц
ионный
договор
30.04.20
08
1и
ООО “Сканди”
Инвестиционный договор
2
Участие
в
выпуске
опытных партий ОДК5,
ОДК6.
Прочие
Контракт
20.04.20
08
152
ГНЦ «Институт
иммунологии
ФМБА России
Акт ввода в
эксплуатацию
оборудования
3
4
Аренда программмнотехнических средств
прототипа
информационновычислительного
комплекса и
техническое
обслуживание
Подготовка проектов
опытно-промышленных
регламентов по ОДК4.
Исполнение работ
(предоставление услуг)
Исполнитель
Прочие
Прочие
Приказ
02.06.08
01.07.08
01.08.08
01.09.08
01.010.0
8
Приказ по
НПЦ
16.06.
2008 г.
3/08
26/08
32/08
51/08
67/08
2
ООО
«Современные
технологии»
ООО НПЦ
Медиммунология
Приказ
Приказ по НПЦ
05.06.08
01.07.08
01.08.08
01.09.08
01.10.08
16.06.
2008 г.
Номер
Объем
выполнения,
рублей
Наименова
ние
Дата
Номер
10
11
12
13
14
1-и
Акт
выполнени
я работ
30.10.
2008 г.
2
6 534 000
Акт ввода
в
эксплуатац
ию
оборудова
ния
15.10.
2008 г.
Б/н
Акт
28.06.08
31.07.08
29.08.08
30.09.08
25.10.08
1
2
3
4
5
Акт
выполнени
я работ
25.10.
2008 г.
3/08
26/08
32/08
51/08
2
3 366 000
660 000
3
Итого расходов
440 000
11 000 000
28
Строящееся здание
ИАнП РАН
29