Иммунодефициты Этапы ВИЧ 1. Асимптоматический этап 2. Лимфоаденопатия (LAS) 3. СПИД-связанный комплекс: LAS + Жар, потеря веса, Диарея 4. СПИД Популяции лимфоцитов I T клетки наивные память активированные CD3+, TcR+ CD3+/CD45RA+ CD3+/CD45R0+ CD3+/HLA-DR+/CD25+ T клетки-хелперы Хелперы-индъюсеры Супрессоры-индъюсеры CD3+, CD4+ CD4+/CD29+ (15 %) CD4+/CD45RA+ (30 %) T клетки-супрессоры активированные CTL CD3+, CD8+ CD8+/CD38+/HLA-DR+ CD8+/CD38+/HLA-DR+ Популяции лимфоцитов II B клетки CD19+, IgM+ и IgD+ наивные CD19+/CD45RA+ память CD19+/CD45R0+, CD5+/активированные CD19+/CD23+/CD38+ NK клетки CD16+, CD56+ LGL-NK клетки CD2+, CD16+, CD56+, CD57+/T-NK клетки CD2+,CD3+, TcR+, CD16+, CD56+, CD57+/- Типирование лимфоцитов при ВИЧ Определение Каждые 3 месяца Этап Результат Острая инфекция Лимфоаденопатия инверсия соотношения T4/T8 CD4+/CD45R0+ CD8+/CD56+/CD16+ CD8+/CD38+/HLA-DR+ T4 абсолют. к-во < 400/ml крови WBC < 4000/ml крови СПИД-связанный комплекс СПИД T4 абсолют. к-во < 200/ml крови BM-недостаточность Фенотипические изменения в период течения болезни • Прогрессирующее снижение CD4+ T клеток • Увеличение количества CD8+ T клеток с последующим снижением • Снижение общих Т клеток на последнем этапе Супрессорные T клетки отвечают на ВИЧ 1200 1000 CD4 хелперные клетки CD8 супрессорные клетки Количество клетокr 800 600 400 200 0 Норма Асимптом. Прогрессирующий СПИД CDC-панель Revised Guidelines for the Performance of CD4+ T-cell Determinations in Persons with Human Immunodeficiency Virus (HIV) Infections, CDC (Center for Disease Control), MMWR, January 10, 1997/Vol. 46 Пересмотренные руководящие принципы для выполнения определений CD4+ T-клеток на персонах инфицированных Человеческим Вирусом Иммунодефицита (ВИЧ) FITC IgG CD45 CD3 CD3 CD3 CD3 PE (=RD1) IgG CD14 CD19 CD4 CD8 CD56 (+/-CD16) Контроль Ворота T/B-клетки T-хелперы T-супрессоры NK-клетки Экспрессия CD8 на лимфоцитах периферической крови Экспрессия HLA-DR на лимфоцитах периферической крови Ко-экспрессия CD16 и CD56 на лимфоцитах периферической крови Экспрессия CD4 на лимфоцитах периферической крови Среднестатистический фенотип здорового донора В клетки (CD3-/CD19+/CD20+/HLA-DR+) 12 + 5% NK клетки (CD3-/CD16+/CD56+/CD2+/CD8+) 15 + 5% Т клетки (CD3+/CD19-) 73 + 10% Т хелперы (CD3+/CD4+) 45 + 7% Т супрессоры (CD3+/CD8+) 27 + 7% Т хелперы-индюсеры (CD3+/CD4+/CD45R0+/CD29+) 30 + 10% Т супрессоры-индюсеры (CD3+/CD4+/CD45RА) 15 + 10% Т-NK клетки (CD3+/CD16+/CD56+) 3 + 3% Т клетки активированные (CD3+/CD19-/HLA-DR+/CD25+) 3 + 3% Индекс (Т хелперы/Т супрессоры) 1,5-2,6 Нормальный иммунный статус T- и В-клетки Т-хелперы NK и Т-NK клетки Т-супрессоры Активированные Т-клетки Асимптоматичный иммунодефицит T- и В-клетки Т-хелперы NK и Т-NK клетки Т-супрессоры Активированные Т-клетки СПИД T- и В-клетки NK и Т-NK клетки Т-хелперы Т-супрессоры Активированные Т-клетки Содержание IFN, TNF, IL2, IL4положительных Т-лимфоцитов у здоровых детей разных возрастных групп: Показатель 3-6 лет 7-14 лет Лимфоциты, 109/л 3.65±0.23 1.99±0.46 CD3+/IFN +, % 14.33±1.46 15.79±3.52 CD3+/IFN +, 109/л 0.52±0.06 0.331±0.150 CD3+/TNF +, % 16.73±1.42 20.93±2.48 CD3+/ TNF +, 109/л 0.60±0.06 0.437±0.144 CD3+/IL2+, % 14.13±1.48 9.35±2.79 CD3+/IL2+, 109/л 0.50±0.05 0.154±0.038 CD3+/IL4+, % 1.09±0.20 2.64±0.87 CD3+/IL4, 109/л 0.04±0.01 0.051±0.019 Содержание IFN, TNF, IL2, IL4положительных лимфоцитов у здоровых CD3+ детей 7-14 лет: CD4+ CD8+ Т-клетки Т-клетки Т-клетки IFN , % 15.79±3.52 IFN , % 8.31±2.03 IFN , % 6.31±1.95 TNF , % 20.93±2.48 TNF , % 11.22±2.60 TNF , % 6.10±1.52 IL2, % 9.35±2.79 IL2, % 8.73±1.96 IL2, % 2.62±0.99 IL4, % 2.64±0.87 IL4, % 2.23±0.52 IL4, % 0.84±0.39 CD16+ -клетки IFN , % 5.74±2.16 TNF , % 7.38±2.09 Содержание IFN, TNF, IL2, IL4положительных Т-лимфоцитов у 18-45 летних доноров: Показатель: Доноры 18-45 лет Лимфоциты, 109/л 2,38±0,27 CD3+/IFN +, % 21,46±3,50 CD3+/IFN +, 109/л 0,502±0,087 CD3+/TNF +, % 32,59±3,81 CD3+/ TNF +, 109/л 0,773±0,120 CD3+/IL2+, % 27,86±4,54 CD3+/IL2+, 109/л 0,642±0,104 CD3+/IL4+, % 2,80±0,813 CD3+/IL4, 109/л 0,071±0,029 9 10 /л Содержание CD3- лимфоцитовпродуцентов IFN у больных менингеальной формой КЭ 0,16 0,14 0,12 0,1 0,08 0,06 0,04 0,02 0 1-7 8-14 15-21 контроль МФ КЭ 22-28 10 9/л Динамика стимулированного синтеза Менингеальная форма клещевого энцефалита цитокинов Т-лимфоцитами 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 контроль CD3+IFNy+ 1-7 8-14 CD3+IL4+ 15-21 CD3+IL2+ 22-28 CD3+TNFa+ Стимулированный синтез Тh1-цитокинов у больных МФ КЭ резко снижен на 1-7 сутки от начала заболевания. 10 9/л Динамика стимулированного синтеза Лихорадочная форма клещевого энцефалита цитокинов Т-лимфоцитами 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 контроль CD3+IFNy+ 1-7 8-14 CD3+IL4+ 15-21 CD3+IL2+ 22-28 CD3+TNFa+ Снижено содержание Т-лимфоцитов-продуцентов IL2 , стимулированный синтез TNFa снижен на 1-7 сутки от начала заболевания. Соотношение IFN- и IL4синтезирующих Т-лимфоцитов в динамике острого периода при клещевом энцефалите Th1 (стимулированный синтез) 6 4 2 0 -2 -4 Th2 -6 1-7 8-14 15-21 22-28 сутки Менинг.форма КЭ Лихор.форма КЭ При лихорадочной форме КЭ в течение первых трех недель от начала заболевания преобладают IFNсинтезирующие Т-лимфоциты. Менингеальная форма КЭ отличается резко сниженным в 1-7 сутки от начала заболевания содержанием Т1-лимфоцитов с последующим восстановлением их численности в динамике заболевания. Дифференциально-прогностические признаки лихорадочной и менингеальной форм клещевого энцефалита Лихорадочная энцефалита форма клещевого (100%): -0,4398 (Лейкоциты, абс.) + 0,2464 (Гранулоциты, %) + 0,1264 (CD3- IFN+ стим.,%)+0,2822 (CD3+IFN+ стим., %) + 0,6369 (CD3+IL4+ стим., %) – 11,2436 Менингеальная энцефалита 1,0028 форма (Лейкоциты, абс.) клещевого (88,8%): + 0,2132 Стимулированный синтез цитокинов Тлимфоцитами периферической крови и синовиальной жидкости при ревматоидном артрите 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 * * * * СD3+IFN+ CD3+TNF+ контроль CD3+IL2+ РА (кровь) CD3+IL4+ РА (син.ж)