FR E-2900 Пролактин Набор реагентов для ИФА для

FR E-2900 Пролактин
Набор реагентов для ИФА для количественного определения пролактина в сыворотке человека.
Только для in-vitro диагностики.
1. Дополнительные необходимые материалы и оборудование, не входящие в комплект:
- прецизионные микропипетки с одноразовыми наконечниками на 25- 150 мкл
- дистиллированная или деионизированная вода
- микропланшетный шейкер или инкубатор (37±1) ˚С
- микропланшетный вошер (рекомендуется)
- микропланшетный анализатор с фильтром, установленным на длине 450 нм и пределом ОП 3.0
или больше
2. Реагенты
Храните реагенты при температуре 2 - 8 ° C до истечения срока годности
TF E-0030
Концентрат
1 х 50 мл Концентрат; Прозрачная или слегка
промывочного буфера
опалесцирующая жидкость, бесцветная или
х25
бледно-желтая, может допускаться осадок,
который растворяется при 35-39 ˚С и встряхивании.
TF E-0055
Субстрат
1 х 12 мл Готов к использованию, содержит раствор
тетраметилбензидина (ТМБ)
TF E-0080
Стоп-раствор
1 х 15 мл Готов к использованию, содержит 0,2 М H2SO4
FR E-2901
Калибратор 0
1 х 2 мл
Готов к использованию
FR E-2902
Калибратор 1
1 х 0,5 мл Готов к использованию
FR E-2903
Калибратор 2
1 х 0,5 мл Готов к использованию
FR E-2904
Калибратор 3
1 х 0,5 мл Готов к использованию
FR E-2905
Калибратор 4
1 х 0,5 мл Готов к использованию
FR E-2906
Калибратор 5
1 х 0,5 мл Готов к использованию
FR E-2931
Микропланшет
1 х 96
Один 96-ти луночный (разборный) планшет
покрытый антилунок
покрытый моноклональными антителами
Пролактин антителами
пролактина. После вскрытия следует использовать
в течение одного месяца.
FR E-2940
Конъюгат
1 х 12 мл Пролактин конъюгированный с пероксидазой
хрена (HRP). Содержит 0,1% проклин 300, 0,004%
гентамицина сульфата в качестве консерванта.
После открытия конъюгат следует использовать в
течение одного месяца.
FR E-2951
Контрольная сыворотка 1 х 0,5 мл Готова к использованию. Сыворотка человека с
определенной величиной свободного пролактина.
после вскрытия контроли и калибраторы должны быть использованы в течении месяца.
Калибраторы были откалиброваны согласно рекомендациям ВОЗ 3rd IS 84/500.
3. Процедура анализа
Перед использованием все реагенты должны достичь комнатной температуры. Стандарты,
контроли и образцы проб должны быть исследованы в дублях. Как только процедура начата, все
этапы должны быть завершены без перерыва.
Приготовление рабочего промывочного раствора:
Тщательно встряхните концентрат промывочного буфера. Для приготовления рабочего
промывочного раствора нужно взять необходимое количество концентрата и смешать с
очищенной водой (в соотношение 1:25) в отдельном флаконе. Тщательно перемешайте раствор.
Рабочий промывочный раствор можно хранить в течение 3 дней при температуре 2-8 ° С .
1. Извлеките необходимое количество стрипов для исследования калибраторов, контроля и
сыворотки в дублях. Неиспользованные поместите обратно в алюминиевую упаковку, не
удаляйте сухой силикогель, герметично закупорьте и поместите в полиэтиленовый пакет.
Храните при температуре 2-8 ° С в течении месяца.
2. Добавьте 25 мкл каждого стандарта, контроля и исследуемых образцов сыворотки в
соответствующие лунки в дублях.
3. Добавьте 100 мкл конъюгата в каждую лунку
4. Инкубируйте в шейкере при 500-800 об./мин. в течение 60 минут при комнатной
температуре или в инкубаторе при температуре (37±1) ˚С в течение 60 минут.
5. Промойте каждую лунку по 5 раз: внося по 300 мкл раствора промывочного буфера,
удаляя остатки влаги абсорбирующей бумагой (мы рекомендуем использовать вошер).
6. Добавьте 100 мкл ТМБ-субстрата в каждую лунку через заданные интервалы времени
7. Инкубируйте 20-30 минут при комнатной температуре в темном месте.
8. Добавьте 150 мкл Стоп-раствора в каждую лунку через те же интервалы, что и в этапе 6.
Осторожно перемешайте в течении 5-10 секунд.
9. Считайте результат на микропланшетном анализаторе при 450 нм в течении 20 минут
после добавления стоп-раствора.
4. Расчет результатов.
1. рассчитайте среднюю оптическую плотность каждого стандарта в дублях
2. рассчитайте среднюю оптическую плотность каждого неизвестного в дублях.
3. Вычтите среднее значение абсорбции "пустой" из средних значений оптической
плотности калибраторов, контроля и образцов сыворотки.
4. Нарисуйте калибровочную кривую на логарифмической бумаге со средней оптической
плотности на Y-оси и концентрацией стандарта на X-оси
5. Рассчитайте значение неизвестных при помощи калибровочной кривой.
6. Если образец получается более 2000 мМЕ/мл, то разведите его Калибратором О.
Полученный результат следует умножить на фактор разведения.
5. Типичная таблица данных (не используйте для расчета)
Калибратор
ОП 1
ОП 2
Средняя ОП
1
2
3
4
5
Неизвестная
0,199
0,378
0,744
1,538
2,588
0,810
0,214
0,391
0,779
1,565
2,621
0,776
0,160
0,338
0,715
1,505
2,558
0,746
Концентрация
(мМЕ/мл)
100
200
500
1000
2000
529,3
6. Типичная калибровочная кривая (не используйте для расчета)
см. оригинал инструкции.
Проверка теста
Анализ считается действительным при соблюдении следующих критериев. Если эти критерии не
соблюдаются, то анализ считается недействительным и должен быть повторен.
1. ОП «пустой»: Оптическая плотность не должна быть более 0,1 при 450 нм.
2. ОП Калибратора 5 (2000 мМЕ/мл) не должна быть меньше 1,3.
3. Полученное значение контрольной сыворотки должно быть в пределах установленного
диапазона.
Чувствительность: 10 мМЕ/мл
Ожидаемые нормальные значения:
Группа
Мужчины
женщины
Концентрация
45-320
74-745