Wilkins Chalgren Anaerobic Agar / Broth Анаэробный агар по Вилкинсу-Чалгрену / Анаэробный бульон по Вилкинсу-Чалгрену M832 / M863 Этот агар используют для выделения и культивирования, а также определения чувствительности методом разведения в агаре анаэробных бактерий. Состав**: Ингредиенты Гидролизат казеина Пептический перевар животной ткани Дрожжевой экстракт Глюкоза Натрия хлорид L-Аргинин Натрия пируват Гемин Менадион Агар-агар М832 грамм/литр М863 грамм/литр 10,00 10,00 5,00 1,00 5,00 1,00 1,00 0,005 0,0005 10,00 10,00 10,00 5,00 1,00 5,00 1,00 1,00 0,005 0,0005 – Конечное значение рН (при 25ºС) 7,1 ± 0,2 ** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление: Размешать 43,0 г порошка М832 или 33,0 г порошка М863 в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в соответствующую посуду. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121ºС) в течение 15 мин. Перед внесением антибиотиков остудить до 50ºС. Осторожно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри. Для культивирования анаэробов в стерильную расплавленную среду перед розливом в чашки внести добавку FD001 или добавку FD002 (по желанию). Принцип и оценка результата: Эти среды готовят по прописи Wilkins и Chalgren (1), предложенной для определения минимальных ингибирующих концентраций (МИК) антибиотиков в отношении анаэробных бактерий. Последние хорошо растут на этих средах. В отличие от других сред, в данном случае не требуется добавление крови. Дрожжевой экстракт является источником витаминов и других факторов роста, например, пуринов и пиримидинов, которые важны для роста Prevotella melaninogenica. Аргинин служит источником аминокислот, в частности, для Eubacterium lentum, а пируват – источником энергии для асахаролитических кокков, например, вейллонелл (2). Гемин нужен для роста бактероидов (3), а менадион – для роста Prevotella (Bacteroides) melaninogenica. Пептический перевар животной ткани и гидролизат казеина способствуют стандартизации условий в среде. Контроль качества: Внешний вид порошка: Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета. Плотность готовой среды: Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0%-ному агаровому гелю (М832). Цвет и прозрачность готовой среды: Среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель. Кислотность среды: При 25ºС водные растворы М832 (4,3% вес/об) или М863 (3,3% вес/об) имеют рН 7,1 ± 0,2. Культуральные свойства: Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35ºС в анаэробных условиях. Штаммы микроорганизмов (АТСС) Bacteroides fragilis (25285) Bacteroides melaninogenicus (15930) Clostridium perfringens (12924) Escherichia coli (25922) Рост Обильный Обильный Обильный Подавляется Ссылки: Условия и сроки хранения: Порошок хранить при температуре ниже +25ºС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.