Yersinia Selective Agar Base Основа селективного агара для иерсиний M843 Эта среда рекомендуется для селективного выделения из клинического материала и пищевых продуктов: Yersinia enterocolitica (с добавкой FD034, в соответствии с рекомендациями комитета ISO) или Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis (с добавкой FD208). Состав**: Ингредиенты Пептон специальный Дрожжевой экстракт Маннит Натрия пируват Натрия хлорид Магния сульфат Натрия дезоксихолат Нейтральный красный Кристаллический фиолетовый Агар-агар грамм/литр 20,00 2,00 20,00 2,00 1,00 0,01 0,50 0,03 0,001 12,50 Конечное значение рН (при 25ºС) 7,4 ± 0,2 ** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление: Размешать 58,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121ºС) в течение 15 мин. Остудить до 45ºС и асептично добавить растворенное содержимое 2 пузырьков с селективной добавкой для иерсиний FD034 (для выделения Y. enterocolitica) или содержимое 1 пузырька с селективной добавкой для иерсиний FD208 (для выделения Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри. Принцип и оценка результата: Данная среда с селективной добавкой используется для выделения энтеропатогенных иерсиний из клинического и другого материала. Она основана на прописи агара CIN (ЦИН) Schiemann (1, 2) и рекомендована специалистами международного комитета ISO (3). Schiemann (1) модифицировал первоначальную пропись агара ЦИН, заменив в ней смесь желчных кислот на дезоксихолат натрия. На среде можно отличить бактерии, ферментирующие и не ферментирующие маннит. Ее селективные свойства связаны с присутствием дезоксихолата натрия и кристаллического фиолетового, которые подавляют рост грамположительных и многих грамотрицательных микроорганизмов. Добавление антибиотиков делает ее высоко селективной в отношении иерсиний. Поскольку в состав добавки FD208 не входят беталактамные антибиотики, на среде с ней не подавляется рост Y. pseudotuberculosis, а вырастающие дополнительно некоторые грамотрицательные неферментирующие бактерии не обладают характерной для энтеропатогенных иерсиний морфологией. Типичные колонии Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis на данной среде (с добавкой FD034 или FD208) имеют малинового цвета четко отграниченный центр и прозрачный бесцветный край («бычий глаз»). Размер колоний, их гладкость и соотношение размеров центра и края варьируют у разных сероваров. Поскольку колонии Serratia marcescens, Citrobacter freundii и Enterobacter agglomerans могут напоминать колонии энтеропатогенных иерсиний, требуется дальнейшая идентификация, например, в биохимических тестах. Контроль качества: Внешний вид порошка: Гомогенный сыпучий желтый порошок. Плотность готовой среды: Образуется среда, соответствующая по плотности 1,25%-ному агаровому гелю. Цвет и прозрачность готовой среды: Среда имеет оранжево-красную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель. Кислотность среды: При 25ºС водный раствор (5,8% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2. Культуральные свойства: Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 32ºС Штаммы микроорганизмов Характер роста и колоний на среде (АТСС) с добавкой FD034 с добавкой Рост Колонии Рост Yersinia enterocolitica (27729) Хороший или Хороший или прозрачные с обильный обильный малиновым «глазком» в центре Yersinia pseudotuberculosis Подавляется – Хороший или обильный Escherichia coli (25922) Proteus mirabilis (25933) Enterococcus faecalis (29212) Pseudomonas aeruginosa (27853) Подавляется Подавляется Подавляется Хороший или обильный Stenotrophomonas maltophilia Подавляется – – – Непрозрачные крупные желтозеленые – Подавляется Подавляется Подавляется Хороший или обильный Хороший или обильный Ссылки: Условия и сроки хранения: Порошок хранить при температуре ниже +25ºС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.