Основа агара для теста на токсигенность коринебактерий Diphtheria Virulence Agar Base (Modified) Основа агара для определения токсигенности дифтерийных М882R микроорганизмов (модифицированная) Эту среду используют для проверки токсигенности Corynebacterium diphtheriae. Состав**: Ингредиенты грамм/литр Вытяжка из мозга теленка 10,00 Вытяжка из бычьего сердца 10,00 Натрия хлорид 5,00 Натрия карбонат 0,60 Агар 10,00 Конечное значение рН (при 25°С) 7,8 ± 0,2 ** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление: Размешать 35,6 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц и разлить по 17 мл. в соответствующие пробирки . Стерилизовать автоклавированием при 110°С в течение 30 мин. Остудить до 45-50°С. Асептично добавить 3 мл лошадиной сыворотки (RM1239) или сыворотки КРС (Рекомендуется использовать свободную от бактерий и вирусов лощадиную сыворотку или сыворотку КРС) в каждую пробирку. Перемешать и быстро вылить в чашку Петри. Принцип и оценка результата: Эта среда предложена Hermann и соавт. (1) для получения обильного роста Corynebacterium diphtheriae. Илек (2) показал возможность использования техники диффузии в агаре для выявления дифтерийного токсина in vitro. Стандартизацию метода в сравнительных опытах на животных провел King и соавт. (3). Однако было показано, что сыворотки животных разных видов дают разные результаты, и Hermann и соавт. (1) разработали среду, на которой этого удается избежать. В соответствии с их предложением, среда обогащается 1 г кислотного гидролизата казеина, 1 мл глицерина и 1 мл твина-80 (4). После инкубирования токсигенных штаммов в среде образуется линия преципитата. Теллурит калия подавляет рост большинства грамотрицательных микроорганизмов и большинство представителей нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей, но не действует на дифтерийную палочку, а также Streptococcus mitis, Streptococcus salivarius, энтерококки и некоторые штаммы Staphylococcus epidermidis. Контроль качества: Внешний вид порошка: Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок. Плотность готовой среды: Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю. Цвет и прозрачность готовой среды: Среда имеет янтарную окраску, слегка опалесцирует, когда в чашках Петри образуется гель. Кислотность среды: При 25°С водный раствор (3,75% вес/об) имеет рН 7,8 ± 0,2. Культуральные свойства: Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-72 ч при 35-37°С. Штаммы микроорганизмов Линия Рост (АТСС) преципитата Corynebacterium diphtheriae gravis Обильный + Corynebacterium diphtheriae intermedius Обильный + Corynebacterium diphtheriae mitis Обильный + Staphylococcus epidermidis (25923) Отсутствует или слабый – Bacillus subtilis (6633) Подавляется – Ссылки: 1. Hermann, Moore and Parsons, 1958, Am. J. Clin. Path., 29:181. 2. Elek, 1948, Brit. Med. J., 1:493. 3. King, Frobisher and Parsons, 1949, Am. J. Pub. Health, 39:1314. 4. MacFaddin J.F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria. Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore. Условия и сроки хранения: Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.