На правах рукописи Шваб Андрей Александрович ПОКАЗАТЕЛИ ЕСТЕСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ПЕРЕПЕЛОВ

На правах рукописи
Шваб Андрей Александрович
ПОКАЗАТЕЛИ ЕСТЕСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ПЕРЕПЕЛОВ
В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ И ПРИ ВВЕДЕНИИ В РАЦИОН
КОНЦЕНТРАТА МОЛОЧНОЙ СЫВОРОТКИ
03.03.01 – физиология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
НОВОСИБИРСК
2010
2
Работа
выполнена
на
кафедре
нормальной
и
патологической
физиологии животных Института ветеринарной медицины Федерального
государственного образовательного учреждения высшего профессионального
образования «Омский государственный аграрный университет».
Научный руководитель:
доктор биологических наук, профессор,
заслуженный деятель науки РФ,
Рябиков Анатолий Яковлевич
Официальные оппоненты:
Ведущая организация:
Защита диссертации состоится «___» ____________ 2010 г. в
«___» часов на заседании диссертационного совета Д 220.048.04
при ФГОУ ВПО «Новосибирский государственный аграрный
университет» по адресу 630039, Новосибирск -39, ул.
Добролюбова, 160.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ
ВПО «Новосибирский государственный аграрный университет».
Автореферат разослан «__» ___________________20 10 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета
С.П. Князев
2
3
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Перепеловодство – сравнительно молодая, но
перспективная
и
интенсивно
развивающаяся
отрасль
птицеводства
(Афанасьев Г.Д., 1991; Гущин В.В. и др., 2003; Кочетова З.И., 1991; Кроик Л.
и др., 1992; Ольшанская Г.П., 2004; Пигарева М.Д. и др., 1989; Федорова Е.А.
и др., 2001).
Необходимо отметить, что перепела имеют ряд существенных
продуктивно–хозяйственных преимуществ перед другими видами птицы.
Так, у перепелов в пять раз выше скорость роста, чем у кур, у них более
ранняя яйценоскость (5-6 недельный возраст). В перепелиных яйцах по
сравнению с куриными в несколько раз больше содержание витаминов А, Р,
К, В1, В2, железа, кобальта и др. микроэлементов, а также биологически
активных веществ, в частности лизоцима (Нанос В.Р., 1995).
Вместе с тем, при промышленном разведении перепелов с целью
увеличения продуктивности и профилактики инфекционных и незаразных
болезней, требуется постоянный контроль за уровнем естественной
резистентности птицы. Кроме того, исследование уровня клеточных и
гуморальных
факторов
высокопродуктивную
защиты
птицу,
позволяет
при
обладающую
селекции
отбирать
одновременно
высокой
резистентностью при нормальных функциях физиологических систем
(Гущин В.В. и др., 2003; Паникар И., 1992).
В доступной литературе имеются довольно обширные сведения об
особенностях формирования естественной резистентности у кур, уток и
гусей, тогда как данные о состоянии клеточного и гуморального факторов
защиты у перепелов встречаются в единичных работах зарубежных авторов
(Atwal O.S. et al., 1964; Lucas A.M. et al., 1961).
Необходимо отметить, что в настоящее время в птицеводстве
предложено
и
применяется
иммуномодулирующих,
большое
пробиотических
3
разнообразие
и
других
ферментных,
препаратов
для
4
повышения
уровня
неспецифической
резистентности
организма
кур
(Алексеева С. А. и др., 2004; Бессарабов Б. и др., 1996; Гущин П.Я. и др.,
1999; Румянцева Э.Р., 1999; Смердова М.Д. и др., 2000; Хаустов В.Н., 2001,
2002).
Вместе с тем, исследования, касающиеся изучения влияния тех или
иных биологически активных веществ на основные звенья клеточного и
гуморального иммунитета и продуктивность у перепелов, отсутствуют.
Поэтому, исходя из вышеизложенного, изучение иммунологического
статуса перепелов в норме и при использовании в их рационе биологически
активных добавок представляется актуальным и имеет определенный
научный и практический интерес.
Целью исследований явилось изучение закономерностей динамики
естественной резистентности организма
перепелов в постнатальном
онтогенезе и при введении в рацион концентрата молочной сыворотки
(КМС).
Задачи исследования:
1. Дать оценку состояния основных звеньев клеточного и гуморального
иммунитета у перепелов в сравнении с курами и голубями.
2.
Изучить
возрастные
и
половые
особенности
становления
естественной резистентности у перепелов в постнатальном онтогенезе.
3. Исследовать влияние различных доз концентрата молочной
сыворотки в рационе на гематологические, биохимические показатели и
иммунобиологическую реактивность перепелов.
4. Установить влияние концентрата молочной сыворотки при введении
его в основной рацион на продуктивные показатели перепелов.
Научная
характеристика
новизна.
основных
В
работе
впервые
показателей
представлена
естественной
видовая
резистентности
организма перепелов
в сравнении с курами и голубями. При этом
установлено,
перепелов
что
у
параметры
основных
характеристик
резистентности выше по сравнению с указанными видами птиц. Изучено
4
5
состояние клеточного и гуморального звеньев иммунокомпетентной системы
у перепелов в половозрастном аспекте постнатального онтогенеза. Дана
комплексная оценка состояния естественной резистентности организма
перепелов, в рационе которых использованы оптимальные дозы концентрата
молочной сыворотки, а также определено его влияние на рост, развитие,
сохранность и продуктивные качества птиц.
Научно – практическая ценность работы. Совокупность полученных
новых
сведений
о
половозрастной
динамике
гематологических,
биохимических и иммунобиологических показателей является основой для
создания
подходов
в
организации
профилактических
и
лечебных
мероприятий для перепелов в условиях птицефабрик. Кроме того,
применение в кормовых рационах оптимальных доз концентрата молочной
сыворотки является одним из перспективных направлений повышения
продуктивности перепелов. Установлено, что ввод в рацион концентрата
молочной сыворотки увеличивает сохранность на 4,5%, обеспечивает
прирост живой массы на 7,6%, снижает затраты корма на прирост живой
массы. Результаты проведенных исследований используются в ЗАО
«Иртышское» Омской области, а также в учебном процессе ИВМ ОмГАУ
при подготовке ветеринарных врачей и зооинженеров в курсах физиологии
сельскохозяйственных животных.
Апробация работы. Основные материалы исследований доложены и
одобрены
на
научно-практических
конференциях
профессорско-
преподавательского состава и аспирантов ИВМ ОмГАУ (1998, 1999, 2000,
2001,
2006),
«Проблемы
на
межрегиональной
нейрогуморальной
научно-практической
регуляции
конференции
физиологических
функций
висцеральных систем» (Омск, 2000).
Публикации. По теме исследований опубликовано 6 печатных работ.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 121
странице компьютерной верстки, включает разделы и главы: введение, обзор
литературы, материалы и методы исследования, собственные исследования,
5
6
обсуждение результатов исследования, выводы, практические предложения
производству,
список
использованной
литературы,
включающий
204
источника, в том числе 52 иностранных. Работа иллюстрирована 50
таблицами, 14 рисунками.
На защиту выносятся следующие положения:
1.
Гематологические,
биохимические
и
иммунобиологические
показатели перепелов в сравнительно-видовом аспекте;
2.
Динамика
состояние
гематологических,
естественной
биохимических
резистентности
организма
показателей
и
перепелов
в
постнатальном онтогенезе;
3. Влияние введения различных доз концентрата молочной сыворотки
в рацион на основные иммунологические и продуктивные показатели
организма перепелов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Исследование проводили в 1998-2005 годах в лаборатории кафедры
нормальной
и
патологической
физиологии
Института
ветеринарной
медицины ОмГАУ и в ЗАО «Иртышское» Омской области, где наряду с
курами выращивают перепелов, от которых получают яйцо и мясо.
Объектом исследования являлись одомашненные японские перепела
(Coturnix coturnix japonica).
В условиях лаборатории кафедры проводили две серии научных
опытов. В первой серии опытов было сформировано три группы птиц 12-ти
месячного возраста с одинаковыми условиями содержания и кормления.
Первая группа – по двадцать самцов и самок перепелов, вторая группа – по
пять кур и петухов породы леггорн, третья группа – по пять самцов и самок
голубей.
Для второй серии опытов сформировано две группы перепелов,
состоящих из 15 самцов и 30 самок, в возрасте трое суток с одинаковыми
условиями содержания и кормления. У перепелов обеих групп через каждый
6
7
месяц
проводили
взятие
крови
для
определения
динамики
ряда
гематологических, биохимических и иммунобиологических показателей.
Для третьей серии опытов было сформировано три группы перепелов
по 100 голов в каждой в условиях ЗАО «Иртышское» Омской области.
Первая группа – контрольная, получала комбикорм согласно нормам,
принятым в ЗАО «Иртышское» для перепелов.
Вторая группа – опытная, получала комбикорм с содержанием 5%
концентрата молочной сыворотки, изготовленной Сибирским филиалом
ВНИИМП (г.Омск), согласно ТУ 9222-024-00951203-99, СанПиН 2.3.2, 56096.
Третья группа - опытная, получала комбикорм с содержанием 10%
концентрата молочной сыворотки (КМС). Обогащение кормосмесей КМС и
кормление осуществляли вручную. В обеих опытных группах влажность
КМС составляла 26%.
Птицу содержали в типовом птичнике с автономными системами
приточно-вытяжной вентиляции и уборкой помета.
При проведении исследований определяли:
- количество гемоглобина, содержание эритроцитов, лейкоцитов крови
и лейкограмму общепринятыми методами (Болотников И.И. и др., 1980);
-
фагоцитарную
активность
лейкоцитов,
фагоцитарное
число,
фагоцитарный индекс (Митюшников В.М., 1985);
-
бактерицидную
и
лизоцимную
активность
сыворотки
крови
(Смирнова О.В. и др., 1966);
- общий белок и его фракции, глюкозу, гематокрит, общие липиды общепринятыми методами.
Кроме того, учитывали:
- живую массу перепелов – ежедневно, методом индивидуального
взвешивания особей;
- среднесуточный прирост живой массы - за весь период выращивания;
- сохранность поголовья – ежедневным учетом падежа и выбраковки;
7
8
- потребление кормов – путем ежедневного учета поступления кормов
и их остатков по группам;
- продуктивность - путем учета массы, а также контрольный убой и
полная анатомическая разделка тушек перепелов в конце опыта.
Полученный первичный цифровой материал был обработан на
персональном компьютере с помощью программного обеспечения «Microsoft
Excel».
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Гематологические показателей перепелов
в сравнительно-видовом аспекте
Из трех исследованных видов птиц наибольшая концентрация
эритроцитов зарегистрирована у самцов голубей (3,52±0,181012/л), а
наименьшая у самок кур (2,50±0,031012/л). У перепелов концентрация
эритроцитов у самок и самцов не имеет достоверных различий (Р>0,05).
Полученные результаты совпадают с данными Shellenberger T. et al. (1963) о
том, что у голубей, активных летунов, в сравнении с менее активными в этом
отношении птицами, количество эритроцитов больше.
В результате проведенных исследований крови птиц установлено, что
наибольшее количество гемоглобина содержится в крови самцов перепелов
(126±5,3 г/л), наименьшее у петухов (95±1,8 г/л).
Результаты общего анализа клеток периферической крови перепелов,
кур и голубей свидетельствуют о том, что наибольший уровень лейкоцитов
содержится в крови самцов перепелов – 46,66±1,10109/л. Далее следуют
самки перепелов (39,33±0,96109/л), а наименьшее количество лейкоцитов
установлено у самок кур (23,2±1,03109/л). В то же время установлено, что
наибольшее процентное содержание лимфоцитов зарегистрировано у кур –
71,3±4,12%, наименьшее у самок перепелов 53,0±0,90%.
Известно, что специфические реакции иммунитета обеспечивают два
основных типа клеток – лимфоциты и макрофаги (Бакшеев А.Ф. и др., 1999).
При сравнительно-видовом исследовании гематологических показателей
8
9
установлено, что у перепелов в лейкограмме крови содержится наибольшее
количество псевдоэозинофилов (43,80±0,51%), у кур этот показатель
составляет
24,3±1,02%.
Необходимо
отметить,
что
у
перепелов
регистрируется наименьшее содержание в лейкограмме моноцитов и
эозинофилов по сравнению с курами и голубями, в то же время наименьший
уровень базофилов – 0,10±0,03% - установлен у самок голубей.
Биохимические показатели сыворотки крови перепелов
в сравнительно-видовом аспекте
В результате проведенных биохимических исследований сыворотки
крови у перепелов нами обнаружено наибольшее, в сравнении с курами и
голубями,
содержание
глюкозы
(100,1±0,74
мг%),
β-глобулинов
(17,75±1,25%), γ–глобулинов (43,3±0,66%) и общих липидов (9732±30,1 г/л).
В то же время, наибольшее количество общего белка (46±3,2 г/л) и αглобулинов (16,30±0,16%) содержалось в сыворотке крови кур (табл. 1).
Таблица 1. Биохимические показатели крови кур, голубей и перепелов
Показатели
глюкоза, мг%
куры
Голуби
самцы
самки
самцы
83,4±1,20 #
83,0±1,02 #
86,3±1,18 ##
перепела
самки
85,3±1,42
самцы
##
100,1±0,74# ##
самки
99,8±0,22# ##
общий белок, г/л
46±3,2 #
43±2,8 #
40±6,5
41±8,3
36±1,2 #
34±1 #
альбумины, %
32,1±0,52
32,2±0,61
31,3±0,91
31,6±0,86
32,5±0,61
31,5±0,95
α–глобулины, %
16,3±0,16 ** #
16,0±0,18 ** #
12,1±0,42 ** ##
12,6±0,54 ** ##
8,0±0,57 * # ##
10,0±0,40* # ##
β-глобулины, %
12,0±0,62 #
12,5±0,32 #
12,8±0,68 ##
12,9±0,92 ##
16,16±0,75 # ##
17,75±1,2# ##
γ– глобулины, %
36,3±0,93 #
35,1±0,63 ** #
38,1±0,82 ##
38,6±0,92 **
43,3±0,66 # ##
41,5±1,19 #
общие липиды, г/л
8321±40,3 ** #
8410±51,2 **
8623±61,2 ** ##
8713±64,8 **
9732±301# ##
9037±337
Условные обозначения: - * - достоверные различия между самками и самцами
одного вида (Р<0,01), ** - достоверные различия между однополыми особями кур и
голубей (Р<0,05), # - достоверные различия между однополыми особями кур и
перепелов (Р<0,01), ## - достоверные различия между однополыми особями
перепелов и голубей (Р<0,01).
Некоторые показатели естественной резистентности
перепелов в сравнительно-видовом аспекте
Анализ результатов иммунобиологических исследований показал, что у
перепелов по сравнению с курами установлены достоверно более высокие
лизоцимная активность – 19,7±0,51% лизиса, бактерицидная активность
9
10
сыворотки крови – 69,5±1,02%, фагоцитарный индекс – 6,58±0,20 и
фагоцитарное число – 3,12±0,18.
Таким образом, проведенные сравнительные гематологические и
иммунобиологические исследования показали, что у перепелов по сравнению
с голубями и курами содержится наибольшее количество гемоглобина,
лейкоцитов, псевдоэозинофилов; выше уровень
гематокрита, глюкозы в
сыворотке крови, ß-глобулинов, общих липидов. Также отмечаются наиболее
высокая
лизоцимная
активность,
общая
бактерицидная
активность,
фагоцитарный индекс и фагоцитарное число. Следовательно, полученные
результаты позволяют заключить, что факторы естественной резистентности
у перепелов по сравнению с курами и голубями находятся на более высоком
уровне.
Половозрастные особенности гематологических
показателей крови перепелов
Установлено, что в трехсуточном возрасте у перепелов наблюдалась
относительно низкая концентрация в крови эритроцитов (1,34±0,011012/л) и
гемоглобина, что согласуется с данными авторов, изучавших другие виды
птиц (Болотников И.А. и др., 1980; Мелехин Г.П. и др., 1997;
Митюшниковым В.М. и др., 1985; Молчанов С.Т., 1955; Domm L.V., 1946;
Maughan G.N., 1935; Newell G.W. et al., 1950; Olson C., 1937; Riddle O. et al.,
1934). Необходимо отметить, что к 30-ти суточному возрасту количество
эритроцитов в крови как самцов, так и самок перепелов продолжает
оставаться на низком уровне. В дальнейшем, начиная с двухмесячного
возраста и до конца наблюдения (возраст 12 месяцев), содержание
эритроцитов и гемоглобина в крови у перепелов увеличивается. Установлен
достоверно более высокий уровень гематокрита у самцов по сравнению с
самками перепелов во все изучаемые возраста, кроме 6-ти и 7-ми месяцев .
Возрастные изменения белой крови у перепелов изучены сравнительно
мало, данные неоднородны, а порой и противоречивы (Atwal O.S. et al., 1964;
Nazifi S. et al., 2001). Полученные нами результаты свидетельствуют о том,
10
11
что концентрация лейкоцитов в ходе онтогенеза перепелов изменяется. Так,
наибольший уровень лейкоцитов у самцов установлен в трехсуточном и
тридцатисуточном возрасте. У самок максимальное количество лейкоцитов
отмечено в трех возрастах: трехсуточном, тридцатисуточном
и 14-ти
месяцев. В динамике содержания лейкоцитов у самцов наблюдаются три
периода. Первый период – с трехсуточного до семимесячного возраста, когда
происходит уменьшение содержания лейкоцитов; второй – с восьми до
двенадцати месяцев, в котором регистрируется увеличение количества
лейкоцитов; третий – с тринадцати до четырнадцати месяцев, когда
установлено уменьшение содержания указанных форменных элементов
крови.
Нами отмечено два возрастных периода, когда происходят изменения в
содержании количества лейкоцитов у самок перепелов. Первый период с
трехсуточного до семимесячного возраста, когда наблюдается уменьшение
содержания количества лейкоцитов, и второй период - с восьмимесячного до
четырнадцатимесячного возраста, когда регистрируется два пика увеличения
содержания количества лейкоцитов, в 8 месяцев (26,63±1,46109/л) и 14
месяцев (27,50±2,20109/л).
У самок наблюдается 2 возрастных периода в отношении процентного
содержания лимфоцитов. Первый период с 3-х суточного до 8-ми месячного
возраста, когда происходит достоверное увеличение количества лимфоцитов.
Второй период с 8-ми до 12-ти месяцев, когда происходит достоверное
уменьшение количества лимфоцитов. В дальнейшем, к 14-ти месяцам
процентное содержание лимфоцитов вновь увеличивается.
Возрастная динамика эозинофилов в крови перепелов характеризуется
относительно низким содержанием этих клеток. Биометрический анализ
полученных данных показал, что в 2-х возрастах, в три и в шесть месяцев,
наблюдаются достоверные различия в процентном содержании эозинофилов
у самцов и самок. Причем в три месяца этот показатель был больше у самок,
а в шесть месяцев у самцов.
11
12
Особенностью возрастной динамики базофилов в крови перепелов
является повышение их количества к шестимесячному возрасту у самцов и к
семимесячному у самок. Затем происходит их незначительное уменьшение
как у самцов, так и у самок. Необходимо отметить, что полученные нами
данные в основном совпадают с результатами исследований других видов
птиц рядом авторов, в частности Молчановым С.Г. (1955), который указывал,
что у индеек также к полугодовалому возрасту увеличивается количество
базофилов и эозинофилов.
Относительное количество моноцитов в крови перепелов невелико и
несколько увеличивается до семимесячного возраста у самцов и
до
восьмимесячного - у самок.
Анализ лейкограммы крови перепелов показал, что у самцов и самок
наибольшее
процентное
содержание
псевдоэозинофилов
в
крови
наблюдается в трехсуточном возрасте. Затем, в процессе онтогенеза,
наблюдается колебание их уровня с общей тенденцией снижения к возрасту
14 месяцев.
Половозрастные особенности биохимических
показателей крови перепелов
Проведенными биохимическими исследованиями установлено, что
возрастная динамика содержания общего белка у перепелов обнаруживает
черты сходства и некоторые отличия. Общим для самок и самцов перепелов
является тенденция увеличения концентрации белка в течение наблюдаемого
периода (до 14 месяцев). Такую же закономерность у млекопитающих и
некоторых птиц отмечает ряд исследователей (Вершигора А.Е., 1975;
Мелихин Г.П. и др., 1997; Митюшников В.М., 1985; Никольский В.В., 1968;
Хаустов В.Н., 2001; 2002). Необходимо отметить, что относительно низкое
содержание белка в сыворотке крови как самцов, так и самок перепелов на
ранних этапах постнатального онтогенеза является, по нашему мнению,
следствием интенсивного расходования его на рост тканей, а также
недостаточной физиологической зрелостью механизмов протеиногенеза. В то
12
13
же время, у самок перепелов во все наблюдаемые возрастные периоды, кроме
8-ми месячного возраста, количество белка было достоверно больше по
сравнению с самцами.
Обращает на себя внимание тот факт, что концентрация -глобулинов
в сыворотки крови самцов перепелов с трех суток до двухмесячного возраста
достоверно снижается (Р<0,05), затем к 14-ти месяцам возрастает. Указанная
закономерность
наблюдается
и
у
самок
перепелов.
Установленное
повышение γ -глобулинов в сыворотке перепелов, начиная с трехмесячного
возраста,
указывает
на
становление
иммунобиологической
зрелости
организма.
Необходимо отметить, что в возрасте два, шесть и семь месяцев
наблюдаются достоверные различия в показателях концентрации γглобулинов у самцов и самок (Р<0,05), что в основном совпадает с
результатами других исследователей, в частности Nazifi S. (2001). Кроме
того, результаты биохимических исследований показали, что в процессе
постнатального онтогенеза как у самцов, так и у самок перепелов происходит
увеличение содержания глюкозы. Содержание общих липидов в крови
самцов перепелов увеличивается с трех суток до тринадцатимесячного
возраста на 22,3%; затем отмечается незначительное (Р>0,05) снижение
содержания общих липидов. У самок указанная тенденция проявляется с
двухмесячного до тринадцатимесячного возраста. Достоверные различия
между концентрацией общих липидов наблюдаются у самок и самцов с 30-ти
суток до 14-ти месяцев (Р<0,05).
Половозрастные особенности показателей
естественной резистентности перепелов
В
полученном
экспериментальном
материале
нами
детально
рассмотрена возрастная динамика основных показателей неспецифического
иммунитета. Анализ данных по бактерицидной активности сыворотки крови
(БАСК) и лизоцимной активности сыворотки крови (ЛАСК)
позволяет
отметить отсутствие каких-либо принципиальных, связанных с полом,
13
14
различий в характере и существенных отличий в уровне активности
изучаемых факторов. Результаты проведенных нами исследований показали,
что уже к трехсуточному возрасту у перепелов уровень БАСК и ЛАСК
высок. В процессе онтогенеза наблюдается уменьшение уровня БАСК и
ЛАСК в возрасте 30 суток и 3 месяца, в дальнейшем уровень БАСК
увеличивается
до
возраста
12
месяцев,
уровень
ЛАСК
–
до
тринадцатимесячного возраста. Подобный характер возрастной динамики
может быть обусловлен рядом факторов. Известно, что
БАСК и ЛАСК
принадлежит значительная роль в защите организма от инфекций
(Болотников И.А. и др., 1998, 1987; Бухарин О.В. и др., 1974; Герган В.Н.,
1991; Колабская Л.С. и др., 1991; Митюшников В.М., 1992; Петров Ю.Ф.,
1988; Пол Н., 1987). Учитывая вышесказанное, можно предположить, что
высокая активность БАСК и ЛАСК в сыворотке крови перепелов начиная с
трехсуточного возраста является генетически обусловленной и направлена на
поддержание
устойчивости
перепелят
к
неблагоприятным
факторам
окружающей среды. Вместе с тем, высокую активность указанных
субстанций в первые дни жизни можно объяснить и особенностями
физиологии организма раннего возраста как млекопитающих, так и птиц
(Бухарин О.В. и др., 1974; Митюшников В.М., 1985; Никольский В., 1968;
Олейник Е.К., 1982; Петров Ю.Ф., 1988). В этот постнатальный период
возможна максимальная напряженность активности ферментов за счет
усиленной секреции энзимов клетками или даже распада и выхода лизоцима
в кровь в период интенсивного роста и развития организма.
Проведенные
нами
исследования
показали,
что
фагоцитарная
активность псевдоэозинофилов крови перепелов изменяется в процессе
постнатального онтогенеза. Общим для самок и самцов перепелов является
довольно выраженная уже на первых этапах постэмбриогенеза фагоцитарная
деятельность псевдоэозинофилов, которая усиливается с возрастом особей.
14
15
Динамика гематологических показателей перепелов при
введении в рацион концентрата молочной сыворотки
Проведенными нами исследованиями установлено, что у перепелов
опытных групп, которым в рацион вводили 5% и 10%-ный концентрат
молочной сыворотки, во всех возрастных группах достоверных различий по
содержанию в крови эритроцитов по сравнению с контролем не обнаружено.
Вместе с тем, результаты биометрического анализа показали, что у перепелов
опытных групп коэффициент вариации (СV) этого показателя меньше по
сравнению с контролем. Так, у месячных перепелов, получавших с основным
рационом 5% КМС, СV меньше на 7,6%, а у птиц, получавших 10% КМС,
CV меньше на 10,9% по сравнению с птицами контрольной группы.
Указанная тенденция наблюдается и в остальные возрастные периоды.
Как видно из таблицы 2, с двухмесячного возраста на фоне применения
концентрата молочной сыворотки у перепелов в опытных группах
наблюдается увеличение в крови общего числа лейкоцитов. Однако, с учетом
среднегрупповых
данных,
эти
различия
оказались
статистически
недостоверными. Кроме того, установлено, что у перепелов, получавших с
основным
рационом
концентрат
молочной
сыворотки,
наблюдается
снижение коэффициента вариации содержания лейкоцитов.
Анализ статистической обработки экспериментального материала
показал, что концентрация лимфоцитов у перепелов контрольной и опытных
групп не имеет достоверных различий. В то же время, у перепелов опытных
групп во все возрастные периоды, кроме трех месяцев, установлено меньшее
значение показателя коэффициента вариации.
15
16
Таблица 2. Динамика лейкоцитов в крови перепелов при введении в рацион
концентрата молочной сыворотки
Возраст
основной рацион
основной рацион с Основной рацион с
5% КМС
М±m
СV, %
(109/л)
М±m
10% КМС
СV, %
(109/л)
М±m
СV, %
(109/л)
1 мес.
29,03±2,53
34,2
28,83±1,06
26,6
28,90±1,02
23,3
2 мес.
28,12±2,19
32,6
29,01±1,02
27,4
30,12±1,04
28,4
3 мес.
29,78±1,38
30,2
30,03±1,49
30,9
31,16±1,12
29,8
4 мес.
29,18±1,44
31,3
33,40±1,22
30,1
35,2±1,44
31,2
5 мес.
28,16±2,29
33,4
30,16±1,48
30,6
29,18±1,20
28,4
СV – коэффициент вариации, КМС – концентрат молочной сыворотки
Начиная с двухмесячного возраста, у перепелов в опытных группах
отмечается тенденция к увеличению содержания моноцитов в крови.
Нами не установлено достоверных различий в содержании базофилов у
перепелов в контрольной и опытных группах.
Проведенные
гематологические
исследования
показали,
что
у
перепелов в опытных группах по сравнению с контрольной количество
эозинофилов и псевдоэозинофилов имело тенденцию к незначительному
повышению.
Проведенные нами исследования крови показали, что уровень
гемоглобина у перепелов опытной группы имел достоверную тенденцию
роста по сравнению с контрольной с возраста два месяца (табл. 3). Так, к
концу опыта (возраст 5 месяцев) гемоглобин повысился у птиц опытной
группы (с добавлением 5% КМС) на 21,9%, а в опытной группе с 10% КМС на 22,6% по сравнению с контролем. Кроме того, у перепелов в опытных
группах на всем протяжении эксперимента коэффициент вариации был
значительно меньше, чем в контроле. Полученные данные, по нашему
16
17
мнению,
свидетельствуют
о
повышении
насыщенности
эритроцитов
гемоглобином у перепелов в опытных группах по сравнению с контролем.
Таблица 3. Количество гемоглобина (г/л) в сыворотке крови перепелов
при введении в рацион концентрата молочной сыворотки (КМС)
Возраст
основной рацион
Основной
рацион Основной
+5% КМС
М±m
СV, %
М±m
рацион
+10% КМС
СV, %
М±m
СV, %
1 мес.
127±3,2
21,2
128±1,2
20,3
128±1,4
19,6
2 мес.
128±4,2
22,4
158±4,3
18,6
156±5,3
15,2
3 мес.
138±6,1
29,3
167±3,2
17,2
169±4,2
18,4
4 мес.
145±7,8
30,1
170,2±1,8
15,5
170,6±3,1
17,5
5 мес.
146±3,8
22,4
178±2,1
16,8
179±3,1
19,8
Динамика биохимических показателей сыворотки крови перепелов при
введении в рацион концентрата молочной сыворотки
Введение в рацион перепелам КМС в концентрациях 5% и 10% вызывает
увеличение уровня общего белка в сыворотке крови к концу опыта на 63% в
первой группе (5% КМС) и на 62,3% во второй (10% КМС).
Установлено, что коэффициент вариации в опытных группах меньше к
окончанию наблюдаемого периода на 15,3% в первой группе и на 13,8% во
второй. Кроме того, необходимо отметить, что у птиц в опытных группах
изменения содержания белка по срокам опытов протекают на более высоком
базовом уровне.
Введение в основной рацион перепелов КМС способствовало
достоверному увеличению содержания α–глобулинов в крови птиц к концу
эксперимента на 40,2% в первой опытной группе и на 26,7% во второй.
Анализ экспериментального материала показал, что у опытных групп
перепелов не происходило достоверных изменений в содержании γглобулинов в белковой фракции сыворотки крови.
17
18
Установлено, что в опытных группах к пятимесячному возрасту
достоверно уменьшается среднегрупповое содержание альбуминов (на 10,1%
в первой группе и на 7,8% во второй).
Биометрический анализ экспериментального материала показал, что
влияние концентрата молочной сыворотки на уровень ß-глобулиновой
белковой фракции крови не установлено.
У перепелов в опытных группах, получавших с основным рационом
концентрат молочной сыворотки, в крови отмечался достоверно больший
уровень глюкозы (Р<0,05) по сравнению с контрольной группой.
Динамика основных показателей естественной резистентности
перепелов при введении в рацион концентрата молочной сыворотки
Проведенные иммунобиологические исследования показали, что у
перепелов, получавших с основным рационом концентрат молочной
сыворотки,
достоверно
увеличивалась
по
сравнению
с
контролем
бактерицидная активность сыворотки крови.
Кроме того, полученные результаты свидетельствуют о том, что с
увеличением возраста у перепелов как в опытных группах, так и в
контрольной, повышается уровень бактерицидной активности сыворотки
крови. Так, у перепелов контрольной группы к двухмесячному возрасту
БАСК была выше на 81%, а в двух опытных группах соответственно на 118%
и 109%, по сравнению с началом эксперимента (возраст один месяц).
К концу опыта наблюдается дальнейшее повышение исследуемого
показателя по сравнению с двухмесячным возрастом: в контрольной группе
на 28,1%, в опытных - на 32,8% и 36% соответственно. При этом, в опытных
группах у перепелов к концу периода наблюдения бактерицидная активность
сыворотки крови была больше в первой опытной группе на 15,1%, а во
второй на 14,6%.
Несколько другая динамика выявлена при изучении лизоцимной
активности сыворотки крови перепелов. К двухмесячному возрасту ЛАСК по
18
19
сравнению с первоначальными показателями (в один месяц) снизилась у
птицы как в контрольной, так и в опытных группах. При этом в контроле она
уменьшилась на 14,2%, в первой опытной группе на 18,6%, во второй - на
13,5%. К концу опыта (в возрасте пять месяцев) произошло повышение
показателя лизоцимной активности сыворотки крови: в контрольной группе
на 18,3%, в первой опытной группе на 45,2%, во второй на 56,3%, по
сравнению с началом эксперимента.
Результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что
фагоцитарная
активность псевдоэозинофилов имела стабильно более
высокие значения у перепелов в опытных группах по сравнению с
контрольной.
Необходимо отметить, что данный показатель как у контрольной, так и
у опытных групп перепелов имел возрастную динамику. Так, у птицы
контрольной группы к концу опыта фагоцитарная активность была на 14,9%
выше по сравнению с началом исследования. Указанная тенденция, на более
высоком уровне, наблюдается также и у перепелов в опытных группах. У
птицы первой группы (опыт) наблюдается повышение уровня фагоцитарной
активности к концу периода (5 месяцев) на 41,6%, а у перепелов второй
группы (опыт) - на 39,3% по сравнению с одномесячными особями.
К концу опыта в первой опытной группе перепелов фагоцитарная
активность псевдоэозинофилов составила 59,9%, во второй группе – 59,6%,
и была достоверно выше (Р<0,05), чем в контрольной группе, где она
равнялась 46,4%.
Установлено, что в первой и второй опытных группах фагоцитарный
индекс был выше (5,69), в отличие от контрольной группы, где данный
показатель составил 3,01.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что
введение в рацион перепелов концентрата молочной сыворотки (5% и 10% от
состава кормосмеси) стимулирует резистентность птиц и на высоком
19
20
функциональном уровне стабилизирует гематологические, биохимические и
иммунобиологические показатели крови в целом.
Показатели роста, развития и сохранности перепелов при включении в
рацион концентрата молочной сыворотки
Известно, что одним из главных критериев оценки влияния тех или
иных компонентов корма на рост и развитие перепелов является динамика
прироста их живой массы.
Проведенными
исследованиями
установлено,
что
живая
масса
перепелов всех трех групп в суточном возрасте была практически
одинаковой – от 8,03 г до 8,05 г (Р>0,05). В дальнейшем, как самки, так и
самцы опытных групп, получавших КМС, при выращивании имели более
высокую скорость роста по сравнению с птицами контрольной группы.
Необходимо
отметить,
что
к
концу
четвертой
недели
(28
суток)
выращивания, живая масса самок была больше в опытных группах, по
сравнению с контрольной на 5,84% в первой и 7,68% - во второй, самцов –
на 7,33% в первой опытной группе и на 8,4% во второй группе (Р<0,05). К 42
суткам выращивания превосходство в массе перепелов обеих опытных групп
по сравнению с контролем составило в среднем 8,2% при Р<0,05.
К концу периода выращивания (56 суток) живая масса перепелов двух
опытных групп была больше на 6,87% и 7,68% соответственно по сравнению
с контролем.
Необходимо отметить, что во всех экспериментальных группах самки
по скорости роста превосходили самцов; за период выращивания их
среднесуточный прирост живой массы был больше на 15,2%, 15,0%, 14,7%
соответственно.
Анализ полученных результатов показывает, что в целом за
технологический цикл сохранность перепелов составила: в первой опытной
группе 96,0%, во второй – 95,0%, тогда как в контроле этот показатель
составил 91,0%.
20
21
Установлено, что наиболее низкий отход молодняка перепелов
наблюдался в пятую и шестую недели опыта. При этом в первой опытной
группе отход был меньше на 5%, а во второй - на 4%, по сравнению с
контролем. Необходимо отметить, что среднесуточный прирост был также
больше в опытных группах на 0,19 г и на 0,21 г соответственно по сравнению
с контролем.
Таким образом, анализ проведенных исследований показывает, что
скармливание
перепелам
концентрата
молочной
сыворотки
в
представленных концентрациях (5% и 10% от состава кормосмеси)
положительно влияет на скорость их роста, развитие и сохранность. В то же
время, учитывая, что введение в рацион 10% от массы кормосмеси
концентрата молочной сыворотки увеличивает затраты корма на один кг
прироста и соответственно увеличивает себестоимость готовой продукции по
сравнению с 5% концентрацией, считаем, что оптимальной дозой является
5%-ное содержание КМС от массы кормосмеси.
ВЫВОДЫ
1.
Сравнительно-видовая оценка гематологических, биохимических
и иммунобиологических показателей периферической крови перепелов, кур и
голубей показала более высокую иммунологическую реактивность у
перепелов. Так, у перепелов установлено достоверно большее содержание в
крови лейкоцитов, лимфоцитов, псевдоэозинофилов, гемоглобина, глюкозы,
ß-глобулинов,
отмечены
высокая
активность
лизоцима
и
общая
бактерицидная активность сыворотки крови, а также более высокий
фагоцитарный индекс.
2.
Установлены
возрастные
особенности
гематологических
и
биохимических показателей у перепелов. Так, наибольшее количество
эритроцитов отмечается в четырехмесячном возрасте – (2,98±0,041012/л),
лейкоцитов в тридцатисуточном возрасте – (29,87±0,82109/л), лимфоцитов в
восемь месяцев (73,33±1,29%), моноцитов в шесть месяцев – (4,00±0,21%).
21
22
Концентрация
гемоглобина
наивысшего
уровня
достигала
к
двенадцатимесячному возрасту – 178±3,5 г/л, общего белка к 3-м месяцам –
56,0±1,6 г/л, гематокрита к 8-ми месяцам – 43,8±0,98%, а глюкозы к 14-ти
месяцам – 100,8±1,02 мг%.
3. В постнатальном онтогенезе у перепелов наблюдаются фазовые
изменения в становлении их иммунной системы. В двухмесячном возрасте
перепела
характеризуются
относительно
высокой
бактерицидной
и
лизоцимной активностью сыворотки крови – 42,7±1,12% и 12,9±0,72%
соответственно, которые к трем месяцам достоверно снижаются до
38,4±0,83% и 10,9±0,61% соответственно. В дальнейшем эти показатели
увеличиваются и достигают максимального значения по бактерицидной
активности к 12-ти месяцам, по лизоцимной к 13-ти месяцам.
4. Включение в основной рацион концентрата молочной сыворотки в дозе
5% или 10% от массы рациона стабилизирует основные гематологические и
биохимические параметры периферической крови, о чем свидетельствуют
достоверно меньшие
(Р<0,05) показатели
вариации среднегрупповых
показателей. Вместе с тем, концентрат молочной сыворотки стимулирует
становление гуморального и клеточного иммунитета, что выражается в
усилении бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови и
фагоцитарной активности эозинофилов.
5. Концентрат молочной сыворотки, вводимый в рацион перепелов,
стимулирует рост и развитие птицы, при этом в результате усиления
метаболических процессов молодняк опытных групп по сравнению с
контролем имел к концу выращивания живую массу больше на 7,4% (самки)
и 7,2% (самцы). Среднесуточный прирост за период выращивания был выше
на 7,6%, а сохранность была больше на 4 и 5% в опытных группах по
сравнению с контролем.
22
23
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1.
Установленные количественные параметры гуморального и
клеточного неспецифического иммунитета перепелов в постнатальном
онтогенезе рекомендуется применять в качестве нормативных тестов при
оценке иммунобиологического статуса перепелов и выявления у них
иммунодефицитных состояний.
2. С целью улучшения роста, сохранности и увеличения уровня
естественной резистентности перепелов рекомендуем в основной рацион
птицы добавлять концентрат молочной сыворотки (в дозе 5%) .
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Рябиков А.Я. Половозрастные особенности некоторых показателей
естественной резистентности японских перепелов / А.Я. Рябиков, А.А.
Шваб, А.А. Плехов // Проблемы нейрогуморальной регуляции
физиологических функций висцеральных систем: Сб. статей научнопрактической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения
Д.Я. Криницина. – Омск: ИВМ ОмГАУ, 2000. – С. 75-76.
2. Рябиков А.Я. Биохимические показатели крови перепелов в период
полового созревания / А.Я. Рябиков, А.А. Плехов, А.А. Шваб //
Проблемы нейрогуморальной регуляции физиологических функций
висцеральных систем: Сб. статей научно-практической конференции,
посвященной 100-летию со дня рождения Д.Я. Криницина. – Омск:
ИВМ ОмГАУ, 2000. – С. 77-78.
3. Рябиков А.Я. Морфологические показатели крови перепелов в период
полового созревания / А.Я. Рябиков, А.А. Плехов, А.А. Шваб //
Проблемы нейрогуморальной регуляции физиологических функций
висцеральных систем: Сб. статей научно-практической конференции,
посвященной 100-летию со дня рождения Д.Я. Криницина. – Омск:
ИВМ ОмГАУ, 2000. – С. 78-79.
23
24
4. Рябиков А.Я. Сравнительная характеристика фагоцитарной реакции
псевдоэозинофилов некоторых видов птиц / А.Я. Рябиков, А.А. Шваб,
А.А.
Плехов
//
Проблемы
нейрогуморальной
регуляции
физиологических функций висцеральных систем: Сб. статей научнопрактической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения
Д.Я. Криницина. – Омск: ИВМ ОмГАУ, 2000. – С. 73-74.
5. Рябиков А.Я. Возрастные колебания концентрации общего белка в
сыворотке крови кур, уток и перепелов / А.Я. Рябиков, А.Л. Выставной,
М.Г. Лидер, А.А. Шваб, А.А. Плехов, М.В. Харитонов // Тезисы
докладов XVIII съезда физиологического общества имени И.П.
Павлова. – Казань: КазГМУ, 2001. – С.419.
6. Шваб
А.А.
Особенности
гематологических
и
биохимических
показателей самцов и самок японских перепелов в период полового
созревания / А.А. Шваб // Научные и практические проблемы
ветеринарной медицины, животноводства и перспективы их решения:
сборник научных трудов ИВМ ОмГАУ. – Омск: ФГОУ ВПО ОмГАУ,
2006. – С. 220-221.
7. Рябиков А.Я. Влияние концентрата молочной сыворотки на показатели
естественной резистентности и роста японских перепелов / А.Я.
Рябиков, А.А. Шваб // Сибирский вестник сельскохозяйственной
науки. –– 2009, №11. С. 56-61.
24