На правах рукописи Сотникова Елена Дмитриевна ИЗМЕНЕНИЯ ОСНОВНЫХ ФУНКЦИЙ ЖЕЛУДКА

На правах рукописи
Сотникова Елена Дмитриевна
ИЗМЕНЕНИЯ ОСНОВНЫХ ФУНКЦИЙ ЖЕЛУДКА
ПРИ СТРЕССАХ И ИХ КОРРЕКЦИЯ
БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫМИ ДОБАВКАМИ
03.00.13 – физиология
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Новосибирск - 2008
Работа выполнена на кафедре нормальной и патологической физиологии
животных Института ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Омский
государственный аграрный университет»
Научный руководитель:
доктор биологических наук,
профессор Пьянов Владимир
Дмитриевич
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук,
профессор Айзман Роман Иделевич
Новосибирский государственный
педагогический университет
кандидат
биологических
наук,
доцент Ефанова Нина Владимировна
Новосибирский
государственный
аграрный университет
Ведущая организация:
Новосибирский
государственный университет
Защита состоится «____» июня 2008 г. в ____ час ___ мин на заседании
диссертационного совета Д 220.048.04 при Новосибирском государственном
аграрном университете, по адресу: 630039, г. Новосибирск, ул. Добролюбова,
д. 160.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке
«Новосибирский государственный аграрный университет».
Автореферат разослан «___»
мая
Ученый секретарь
диссертационного совета:
ФГОУ ВПО
2008 г.
Князев С.П.
2
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Проблема стресса в настоящее время
приобрела одно из первостепенных значений. Согласно концепции Г. Селье
(1969), стресс-реакция, сформировавшаяся в ходе эволюции, является
важнейшим звеном приспособления организма к факторам окружающей
среды. Такое приспособление становится возможным при развитии
адекватных метаболических и морфофункциональных изменений в ответ на
действие стресса, приводящих к повышению неспецифической и
специфической резистентности организма, т. е. к его адаптации.
В случае чрезмерного интенсивного или неадекватно длительного
воздействия стресс-реакция может явиться источником тканевых и органных
повреждений (Ф.З. Меерсон, 1993). В настоящее время доказана роль
стрессов в качестве главного этиологического фактора в развитии многих
заболеваний, в том числе желудочно-кишечного тракта. Еще Г. Селье избрал
эту систему одним из индикаторов стресса, а желудок – одним из главных его
органов-мишеней.
Неспецифические реакции, свойственные для всех видов стрессов – это,
главным образом, реактивность гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной
системы и вегетативных функций, в частности сердечно-сосудистой системы
и кроветворения (П.Д. Горизонтов и соавт., 1983; Ю.Е. Москаленко, 1986;
С.Н Кузьмин, 1988; Б.М. Федоров, 1990; Г.Н. Крыжановский, 1997).
Специфические стресс-реакции со стороны пищеварительной системы
непосредственно связаны с кормовым стрессором и проявляются изменением
показателей ее основных функций: секреции, моторики, ферментативной
активности пищеварительных соков. Специфические реакции в проблеме
стресса и адаптации, являются наименее изученной стороной, так как, чаще
всего внимание уделяется неспецифическим реакциям организма.
Для населения городов большое значение приобретает содержание и
лечение домашних животных, в том числе собак. При некоторых
заболеваниях, хирургических операциях, особенно на органах пищеварения,
животным требуется голодная выдержка от нескольких часов до нескольких
дней.
Травмы,
хирургические
вмешательства,
ряд
заболеваний
сопровождаются болью, необходимостью применения иммобилизации, что
вызывает стресс-реакции у животных. В то же время, введением в организм
различных питательных добавок и препаратов адаптогенного характера,
можно снизить или устранить стрессовые реакции, тем самым поддержать
или даже повысить реактивность организма животного (О.И. Кириллов, 1973;
Л.Е. Панин, 1983; Т.К. Алимов, 1989; Т.А. Воронина, 1999; М.Ю. Бакуев, 2002;
Ю.Н. Федоров, 2005; А.В. Деева, 2006; С.Ю. Концевая, 2007 и др.).
Следует отметить, что при всех преимуществах известных растительных
стресс-протекторов, их производство и использование в повседневной
ветеринарной практике ограничено. В этой связи, перспективным является
изыскание и изучение влияния на организм животных новых адаптогенов –
стресс-корректоров.
Изучение проявления специфических и неспецифических стрессреакций при различных стадиях стресса у собак при голодании,
гиподинамии, болевых воздействиях и их коррекция требует комплексного
подхода и в настоящее время является актуальным вопросом.
3
Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научноисследовательских
работ,
проводимых
кафедрой
нормальной
и
патологической физиологии (№ Гос. регистрации 01.2001.03074).
Цель исследования. Изучить влияние различных доз биологически
активных добавок: адаптовита, лимфосана на моторную, секреторную
функции желудка в норме и при стрессовых воздействиях у собак.
Задачи исследования:
1. Изучить влияние стрессовых ситуаций на моторную, секреторную
функции желудка и гематологические показатели.
2. Изучить влияние различных доз БАД на моторную, секреторную
функции желудка.
3. Использовать оптимальные дозы БАД для коррекции кормового,
иммобилизационного и болевого стрессов.
Научная новизна. Установлена степень выраженности стресс-реакций
со стороны моторной, секреторной функций желудка и системы крови в
зависимости от вида стресс-фактора. Впервые изучено влияние биологически
активных добавок: адаптовита и лимфосана на моторную, секреторную и
ферментовыделительную функции желудка собак. Исследованы изменения
названных функций в зависимости от доз применяемых добавок. Изучены
адаптационные возможности пищеварительной системы на фоне действия
биологически активных веществ в условиях иммобилизационного, болевого
и кормового стрессов.
Теоретическая и практическая значимость. Данные, полученные нами в
результате проведенных экспериментов по изменению основных показателей
пищеварения в желудке, происходящие в результате действия стресс-факторов,
дополняют теоретические сведения, имеющиеся в литературе по данному
вопросу. Нами разработаны показания к применению адаптовита и лимфосана в
качестве стресс-корректоров в ветеринарной практике. Материалы исследований
могут быть использованы в учебном процессе при чтении лекций по физиологии,
фармакологии и по лечению расстройств пищеварительного тракта,
возникающих в результате действия стрессов.
Внедрение. Основные материалы диссертации используются в учебном
процессе на кафедрах нормальной и патологической физиологии ИВМ ОмГАУ
(Омск), НГАУ (Новосибирск), ДальГАУ (Благовещенск), КГСХА (Курганская
область), КГАВМ (Казань), БГАУ (Уфа), АГАУ (Барнаул), КГАУ (Красноярск),
ЧГСХА (Чебоксары), УГСХА (Ульяновская область), УГАВМ (Троицк).
Апробация работы. Материалы диссертации представлены на
ежегодных научно-практических конференциях ИВМ ОмГАУ 2005–2008 гг.; 1
Съезде физиологов СНГ (Сочи, Дагомыс, 2005); Четвертой международной
конференции, посвященной 100-летию академика Н.А. Шманенкова:
«Актуальные проблемы биологии в животноводстве» (Боровск, 2006); Х
Международной научной школе-конференции студентов и молодых ученых:
«Экология Южной Сибири и сопредельных территорий» (Абакан, 2006); Научнопрактической конференции: «Актуальные вопросы животноводства в свете
реализации национального проекта по развитию АПК» (Тюмень, 2007); II научнопрактической конференции: «Роль молодых ученых в развитии науки» (Великие
луки, 2007), II Международной научно-практической конференции: «Аграрная
наука – сельскому хозяйству» (Барнаул, 2007), Четвертой всероссийской
4
дистанционной научно-практической конференции студентов, аспирантов и
молодых
ученых:
«Современные
проблемы
устойчивого
развития
агропромышленного комплекса России» (Персиановский, 2007).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, в
том числе 1 статья в журнале из перечня ВАК.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Влияние иммобилизационного, болевого и кормового стрессоров на
моторную, секреторную функции желудка и гематологические показатели.
2. Коррекция стресс-реакций с использованием биологически активных
добавок: адаптовита и лимфосана.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 189 страницах,
состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов собственных
исследований, результатов исследований, обсуждения результатов и
заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы и
приложений. Список литературы включает 286 источников, в том числе 43
иностранных. Диссертация содержит 39 таблиц, 16 рисунков.
2. МАТЕРИАЛЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Объекты и методы исследования. Объектами исследований
являлись 10 беспородных собак – самцы, 2–3-летнего возраста, массой 10–15 кг с
желудочной фистулой по методу Басова.
Изучение моторной и секреторной функций желудка осуществляли
путем исследования изменения секреции, ферментного состава и
биоэлектрической активности слизистой оболочки желудка.
Для изучения электрической активности желудка в связи с его моторносекреторной деятельностью применялся метод регистрации биопотенциалов со
стороны слизистой желудка через фистулу. Регистрация потенциалов
осуществлялась на микроампермилливольтметре Н-373-1. Электрогастрограммы
анализировались по амплитуде и частоте медленных электроволн (МВ) и
электродвижущей силе (ЭДС).
Часовые порции желудочного сока (содержимого) до и после кормления
подвергались исследованию после очистки от примесей беззольными
фильтрами (рац. предл. Е.Д. Сотниковой: «Способ получения желудочного
сока у собак для лабораторных исследований», № 409 от 21.09.2006 г. ИВМ
ОмГАУ). Определение рН производилось электрометрическим методом на
рН-метре «РН-150». Общую кислотность, свободную и связанную соляную
кислоту (HCl) определяли методом титрования по Тепферу. Оределение
ферментативной активности пепсина проводили методом Н.П. Пятницкого.
В исследованиях изучали биологически активные добавки (БАД):
адаптовит и лимфосан. Адаптовит состоит из смеси растительных
адаптогенов: аралии, женьшеня, элеутерококка, лимонника, левзеи
(маральего корня), родиолы розовой (золотого корня). Лимфосан седативный
– препарат фитосорбционного и биостимулирующего действия, в его состав
входят: отруби пшеничные, толокно овсяное, корень и листья бадана,
красный корень, лист черники, брусники, смородины, шиповника, чабрец,
корень валерианы, душица обыкновенная, мята перечная.
Было проведено несколько серий опытов: 1 – в нормальном
физиологическом состоянии; 2 – при воздействии стрессорами; 3 – с
добавлением минимальной дозы БАД; 4 – с добавлением средней дозы БАД;
5
5 – с добавлением максимальной дозы БАД; 6 – при воздействии стрессорами
на фоне оптимальных доз БАД.
На каждой собаке проводились трехкратные опыты по всем
перечисленным дозировкам препаратов. Испытуемыми дозами для
адаптовита явились 0,003; 0,006; 0,009 мл/кг, для лимфосана – 0,1; 0,2 и 0,3 г/кг
массы тела. Перерыв между сериями опытов составлял 7 дней: 3 дня без
биодобавок и 4 дня с введением очередной дозы препарата. Трехдневный
период без введения биодобавки перед последующим введением
возрастающих доз исключал кумуляцию препарата в организме. После
выявления оптимальной дозы для каждой биодобавки следующий этап
исследований проводился по коррекции нежелательных стресс-реакций при
иммобилизационном, болевом и кормовом стрессах.
Эксперимент проводили в двух вариантах: в контрольном – исследовали
проявление стресс-реакций без введения биодобавок; в опытном – на фоне
введения оптимальной дозы биодобавки. На каждой собаке проводились
трехкратные опыты по всем видам стрессов.
Иммобилизационный стресс моделировали путем неподвижной фиксации
собак в спинном положении в течение 2 часов. Болевой стресс воспроизводили
путем зажатия закруткой лапы животного выше скакательного сустава на 15 мин.
Исследования проводили сразу после воздействия стрессорами в течение часа
натощак и после дачи пробного завтрака. В ходе изучения изменений
пищеварительного процесса на фоне кормового стресса при голодании
опыты проводили через 12-часовые промежутки времени (1, 12, 24, 36, 48, 60,
72-й час) на протяжении трех суток. Контролем служили исследуемые
физиологические показатели собак, полученные в ходе трехдневных
исследований накануне голодной выдержки.
Показателями
неспецифических
стресс-реакций
служили
гематологические изменения. Морфологический анализ крови включал
определение числа эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева, гемоглобина с
использованием гемометра Сали – ГС-3, вязкости крови при помощи
вискозиметра – ВК-4, цветового показателя – общепринятым методом,
дифференциальный подсчет отдельных видов лейкоцитов крови – лейкограмму
в мазках крови окрашенных по методу Романовского–Гимза. По лейкограмме
определяли морфофункциональные индексы, которые отражают стрессреактивность организма: лимфоцитарный индекс (ЛИ), лейкоцитарный индекс
интоксикации (ЛИИ) и индекс сдвига лейкоцитов крови (ИСЛК).
Биохимический анализ крови включил фотоэлектроколориметрическое
определение глюкозы глюкозооксидазным методом с использованием
стандартного набора реактивов «Новоглюк».
Всего было проведено 487 физиологических опытов и произведено
3368 гематологических исследований.
Статистическую обработку экспериментальных материалов по
результатам проведения хронических физиологических опытов на
прооперированных собаках при разных физиологических условиях
осуществляли по следующим показателям: М – средняя арифметическая; m –
средняя ошибка; Р – достоверность различий по t-критерию Стьюдента.
Различия считались достоверными при Р<0,05; Р<0,01; Р<0,001.
Общая схема исследований представлена на рисунке 1.
6
Биологически активные
добавки
Адаптовит
Лимфосан
Дозы:
Минимальная, средняя, максимальная
Физиологические показатели
Секреторная и
ферментовыделительная функция
желудка
Биоэлектрическая
активность желудка
(



 кол-во желудочного
сока (содержимого)
 общая кислотность
 свободная соляная кислота
 связанная соляная кислота
 рН
 пепсин
биопотенциалы)
амплитуда
частота
ЭДС слизистой
Гематологические
показатели








кол-во эритроцитов
кол-во лейкоцитов
гемоглобин
вязкость
цвет. показатель
лейкограмма
кол-во сахара
лейкоцитарные
индексы: ЛИ, ЛИН,
ИСЛК
Стресс-факторы
Иммобилизация, болевое воздействие, голод
БАД:
адаптовит, лимфосан
( оптимальные дозы)
Рисунок 1. Общая схема опытов
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Изменения моторной, секреторной функций желудка, а также
гематологических показателей, которые проявлялись в результате
воздействия иммобилизационного, болевого и кормового стресс-факторов
были неодназначны. Степень выраженности функциональных нарушений
зависела от вида стрессора. Тем не менее, выявлены общие закономерности в
развитии стрессов, что обусловлено активизацией симпатоадреналовой
системы и запуском комплекса неспецифических стресс-реакций.
3.1. Воздействие стресс-факторов на основные функции
желудка и гематологические показатели
Иммобилизационный стресс. Амплитуда MB (табл. 1) возрастала на 20,6%,
ЭДС - на 100,0%, частота МВ уменьшалась на 6,8% по сравнению с фоном.
Происходило резкое увеличение секреции на 117,8%, свободной соляной
кислоты – на 81,1%, связанной соляной кислоты – на 4,2%, активность
пепсина уменьшалась на 21,0%.
7
Таблица 1
Изменения основных функций желудка при иммобилизационном и болевом стрессах
Показатели
До стресса Иммобилиз. Разница
Болевой
Разница
(фон)
стресс
в%
стресс
в%
Частота MB, колеб./мин
11,8±0,1
11,0 ±0,1
–6,8***
12,9±0,1
+9,3***
Амплитуда MB, мВ
0,34±0,008 0,41±0,009
+20,6***
0,43±0,01
+ 26,5***
ЭДС, мВ
–2,5±0,15
–5,0±0,2
+100,0***
-3,2±0,1
+28,0**
Секреция, мл/час
9,0±0,5
19,6±1,8
+117,8***
7,1±0,3
–21,1**
Свободная НСl, ед.титра 27,5±1,2
49,8±2,5
+81,1***
21,7±1,0
–21,1**
Связанная НСl, ед.титра
26,3±0,2
27,4±0,2
+4,2**
20,3±0,5
–22,8***
Пепсин, усл. ед.
13,8±0,3
10,9±0,2
–21,0***
7,8±0,2
–43,5***
Примечание. Здесь и далее: Р – достоверность различий двух средних величин по критерию
Стьюдента: “*” – Р < 0,05; “**” – Р < 0,01; “***” – Р < 0,001.
В крови животных (табл. 2) увеличивалось количество лейкоцитов на 69,0%,
эритроцитов – на 20,7%, гемоглобина – на 3,5%. Однако, наблюдалось падение
цветового показателя на 8,5%, что говорит о недостаточной насыщенности
эритроцитов гемоглобином. Вязкость крови повысилась на 33,3%, уровень глюкозы
– на 37,5%, что является важным признаком начала развития стресс-реакций.
Таблица 2
Изменения показателей крови при иммобилизационном и болевом стрессах
Показатели
До стресса Иммобилизац. Разница
Болевой
Разница
(фон)
стресс
в %
стресс
в %
Лейкоциты, тыс./мкл
10,0±0,3
16,9±0,5
+69,0***
20,8±0,8
+108,0***
Эритроциты, млн/мкл
5,8±0,1
7,0±0,2
+ 20,7***
7,9±0,2
+36,2***
Гемоглобин, г/л
117,1±0,5
121,2±0,6
+3,5***
124,3±0,7
+6,1***
Вязкость, усл. ед.
4,8±0,1
6,4±0,2
+33,3***
7,0±0,2
+45,8***
Цвет. пок-ль, усл. ед.
0,94±0,01
0,86±0,01
–8,5***
0,75±0,01
–20,2***
Глюкоза, мкмоль/л
4,8±0,1
6,6±0,2
+37,5***
7,1±0,2
+47,9***
ЛИ, ед.
0,54±0,03
0,24±0,01
–55,6*** 0,18±0,02
–66,7***
ЛИИ, ед.
0,54±0,06
2,62±0,1
+385,2***
4,02±0,2
+644,4***
ИСЛК, ед.
1,86±0,1
3,89±0,2
+109,1***
5,16±0,2
+177,4***
Изменения лейкоцитарных индексов показывают степень выраженности
стресс-реакций (Л.Х. Гаркави, 1990). Так, ЛИИ возрос на 385,2%, что говорит
о высокой степени развития интоксикационных процессов в организме. ЛИ
снижался на 55,6%, ИСЛК увеличивался на 109,1%. Такое резкое изменение
реактивности организма является неблагоприятным признаком.
Болевой стресс. Частота МВ (табл. 1) возрастала на 9,3%, амплитуда – на
26,5%, ЭДС – на 28,0% по сравнению с фоном. Происходило снижение
секреции на 21,1%, свободной соляной кислоты – на 21,1%, связанной – на
22,8%, активности пепсина – на 43,5%. Болевой стрессор вызывал еще более
выраженные сдвиги в составе крови, чем иммобилизационный (табл. 2).
Кормовой стресс. В ходе голодной выдержки были выявлены изменения
показателей моторной, секреторной функций желудка (табл. 3) и
гематологических показателей.
К 12-му часу амплитуда МВ увеличивалась на 14,7% секреция - на
21,1%, ЭДС снижалась на 112,0%. Количество лейкоцитов уменьшалось на
13,0%, глюкозы – на 10,4%, увеличивалось число эритроцитов на 6,9%,
гемоглобин – на 6,8%, вязкость – на 4,2%, цветовой показатель – на 2,1%.
Данные изменения отражают процесс пищеварения, когда усиление
8
основных функций желудка после кормления, в дальнейшем, сменяется
периодом покоя.
Так, к 24-му часу частота МВ снижалась на 7,5%, амплитуда – на 7,7%
секреция - на 25,7%, активность пепсина – на 16,5%. ЭДС возрастала на
700,0% по сравнению с 12-м часом. Увеличивалось количество лейкоцитов на
36,8%, эритроцитов – на 12,9%, вязкости – на 22,0%, глюкозы – на 34,9%,
ЛИИ и ИСЛК - на 174,5% и 91,9%. Гемоглобин снижался на 3,8%, цветовой
показатель – на 7,3%, ЛИ - на 51,8%.
Таблица 3
Изменения основных функций желудка при кормовом стрессе
Показатели
Часы голодной выдержки
1
12
24
36
48
60
72
Частота МВ,
11,8
12,0
11,1±
12,5±
12,1±
12,3±
12,4±
колеб./мин
±0,1
±0,2
0,2*
0,3**
0,3
0,4
0,5
Амплитуда
0,34±
0,39±
0,36±
0,40±
0,36±
0,37±
0,39±
МВ, мВ
0,008
0,009**
0,008*
0,01*
0,01*
0,009
0,01
ЭДС, мВ
–2,5±0,15 +0,3±0,03*** –1,8±0,05*** –4,4±0,3*** –1,9±0,2*** –2,9±0,3* +2,2±0,3***
Секреция, мл
9,0±0,5 10,9±0,6*
8,1±0,4** 4,5±0,3***
12,6±0.6*** 2,5±0,3*** 10,8±0,5***
Свободн. НСl,
27,5±
22,3±
27,3±
24,1±
28,0±
20,1±
25,7±
ед. титра
1,2
0,9**
1,2**
0,7*
1,1*
0,8***
0,9**
Связан. НСl,
26,3±
24,9±
26,2±
22,6±
25,5±
20,2±
22.6±
ед. титра
0,2
0,4*
0,3*
0,4***
0,3***
0,3***
0,4***
Пепсин, усл. ед. 13,8±0,3 13,3±0,4 11,1±0,2*** 5,8±0,2*** 14,3±0,4*** 8,5±0,3*** 10,1±0,3**
К 36-му часу наблюдалось увеличение частоты МВ – на 12,6%,
амплитуды – на 11,1%, ЭДС – на 144,4% в сравнении с 24-м часом. Секреция
снизилась на 44,4%, активность пепсина – на 47,7%. Количество лейкоцитов
уменьшалось на 3,4%, гемоглобин - на 3,7%, цветовой показатель – на 14,6%.
Количество эритроцитов возросло на 7,1%, вязкость – на 6,6%, глюкоза – на
12,1%. Данные изменения на фоне голодания характеризуют наступление
первой стадии стресса – мобилизации.
К 48-му часу происходили изменения, соответствующие стадии адаптации,
когда все показатели постепенно приближались к норме. Так, амплитуда МВ
снизилась на 10,0%, ЭДС – на 56,8% по сравнению с 36-м часом. Значительно
увеличилась секреция на 180,0% и активность пепсина – на 146,6%. В крови
количество лейкоцитов снизилось на 6,1%, эритроцитов – на 12,0%, вязкость – на
24,6%, глюкоза – на 18,5%, ЛИИ и ИСЛК - на 59,3% и 22,8%. Концентрация
гемоглобина возросла на 9,0%, цветовой показатель – на 21,1%, ЛИ - на 36,7%.
К 60-му часу ЭДС увеличилась на 52,6%. Секреция снизилась на 80,2%,
активность пепсина – на 40,6%. Количество лейкоцитов уменьшилось на
13,3%, эритроцитов – на 9,1%, гемоглобин – на 8,2%, вязкость – на 8,2%,
цветовой показатель – на 4,3%, глюкоза – на 15,1%. К 72-му часу ЭДС
снизилась на 175,9%. Секреция резко возросла на 332,0%, активность пепсина –
на 18,8%. Несмотря на увеличение показателей желудочной секреции, они явно
отличаются от фона. Продолжается снижение гематологических показателей,
ЛИИ и ИСЛК - на 62,3% и 49,8%, ЛИ возрастал на 111,9%.
Изменения, отмечаемые за период 60-72-й час, характеризуют развитие
стадии неудовлетворительной адаптации и показывают неполноценность
данной реакции, нарушение гармоничности функционирования подсистем
организма.
9
3.2. Влияние биологически активных добавок на основные функции желудка
Для выявления оптимальных доз БАД, оказывающих стимулирующее
влияние на функции желудка, были проведены исследования трех доз для
каждой биодобавки. Для адаптовита испытуемыми дозами явились: 0,003 мл/кг,
0,006 мл/кг, 0,009 мл/кг, для лимфосана седативного – 0,1; 0,2 и 0,3 г/кг.
Контролем служили показатели до применения биодобавок.
Влияние адаптовита. На фоне действия минимальной дозы адаптовита
(0,003 мл/кг) (рис. 2) амплитуда МВ увеличивалась на 2,9% (Р<0,01),
секреция - на 18,9% (Р<0,01), свободная соляная кислота – на 16,4% (Р<0,05),
связанная – на 10,6% (Р<0,001), активность пепсина – на 8,7% (Р<0,05). ЭДС
желудка снижалась на 172,0% (Р<0,001), меняя заряд на положительный.
150
100
Фон
Мин.доза
Сред.доза
Пепсин
Связ.HCl
Своб.HCl
Секреция
ЧастотаМВ
0
Амплит.МВ
50
Макс.доза
Рисунок 2. Влияние различных доз адаптовита на основные функции желудка (%)
При использовании средней дозы адаптовита (0,006 мл/кг) частота MB
желудка на 6,8% была ниже контроля (Р<0,001), амплитуда – на 26,5% (Р<0,001),
ЭДС – на 60,0% (Р<0,001), сохраняя отрицательный заряд. Секреция была выше
на 10,0% (Р<0,05), другие показатели достоверно не изменялись.
После дачи максимальной дозы адаптовита (0,009 мл/кг) частота МВ
увеличивалась на 8,5% (Р<0,01), амплитуда – на 17,6% (Р<0,001), ЭДС
уменьшалась, сохраняя отрицательный заряд, на 16,0% (Р<0,05). Несмотря на
повышение секреции на 42,2% (Р<0,001), другие показатели были ниже
контрольного уровня: свободная соляная кислота – на 12,7% (Р<0,05),
связанная – на 19,8% (Р<0,001), активность пепсина – на 25,4% (Р<0,001).
Таким образом, на фоне действия адаптовита секреторная и
ферментативная активность увеличиваются уже при минимальной дозе.
Происходит сдвиг ЭДС в положительную сторону, что свидетельствует о его
стимулирующем влиянии на желудочную секрецию, при этом амплитуда МВ
немного возрастает. В дальнейшем, по мере увеличения доз препарата,
наблюдалась тенденция к снижению показателей. При применении
максимальной дозы некоторые показатели даже ниже фона. Следовательно,
более высокие показатели деятельности желудка получены при
использовании минимальной дозы препарата.
Влияние лимфосана. После дачи минимальной дозы лимфосана (0,1
г/кг) (рис. 3) амплитуда МВ увеличивалась на 17,6% (Р<0,001) в сравнении с
контролем, секреция - на 183,3% (Р<0,001), свободная соляная кислота – на
64,0% (Р<0,001), связанная – на 58,9% (Р<0,001), активность пепсина – на
21,7% (Р<0,001). ЭДС достигала более значительного изменения, снижаясь
на 144,0% (Р<0,001), меняя заряд на положительный.
10
Фон
Мин.доза
Сред.доза
Пепсин
Связ.HCl
Своб.HCl
Секреция
Амплит.МВ
300
250
200
150
100
50
0
ЧастотаМВ
На фоне средней дозы лимфосана (0,2 г/кг) ЭДС возрастала на 196,0%
(Р<0,001), секреция - на 15,6% (Р<0,05), свободная соляная кислота – на
46,2% (Р<0,001), связанная – на 33,5% (Р<0,001) по сравнению с контролем.
Остальные показатели не имели достоверных отличий.
Макс.доза
Рисунок 3. Влияние различных доз лимфосана на основные функции желудка (%)
Максимальная доза лимфосана (0,3 г/кг) вызывала повышение амплитуды
колебаний на 8,8% (Р<0,05), ЭДС - на 392,0% (Р<0,001), свободной соляной
кислоты - на 30,9% (Р<0,01), связанной – на 21,7% (Р<0,01). Остальные показатели
не имели достоверных отличий от контрольных цифр.
Итак, при применении минимальной дозы лимфосана наблюдалось падение
ЭДС, характерное для возбуждения секреторного аппарата, а также небольшое
увеличение амплитуды МВ. Средняя и максимальная дозы, напротив, вызывали
повышение ЭДС. Таким образом, все показатели секреторной функции желудка
превосходили контрольный уровень только при минимальной дозе лимфосана.
Увеличение первоначальной дозы в два и три раза вызывало снижение
показателей, которые приближались к исходным цифрам.
3.3. Коррекция стресс-реакций биологически активными добавками
Для
коррекции
нежелательных
стресс-реакций
использовались
минимальные исследуемые дозы: адаптовита – 0,003 мл/кг, лимфосана
седативного – 0,1 г/кг, оказавшихся наиболее эффективными в отношении
стимуляции деятельности желудка по сравнению с другими дозами.
Иммобилизационный стресс. Под влиянием БАД (адаптовита/лимфосана)
(рис. 4) частота MB увеличивалась на 5,5% по отношению к контролю,
амплитуда МВ уменьшалась на 12,2/14,6%, ЭДС - на 44,0/24,0%, секреция - на
37,2/15,3%, свободная соляная кислота – на 39,6/20,4%, связанная – на 1,8/3,6 %.
Активность пепсина увеличивалась на 33,0/28,4%, что свидетельствует о
стимулирующем влиянии БАД на выработку фермента даже на фоне стресса.
Итак, при обездвиживании животных на фоне БАД изменения показателей
желудочной секреции были явно менее выражены по сравнению контролем.
Концентрация гемоглобина и цветовой показатель увеличивались на 3,5/7,8% и
12,8/26,7%, что свидетельствует о стабильно высоком уровне гемопоэза у животных
при стрессе на фоне БАД и его можно охарактеризовать как адаптационный резерв
организма. Снижение числа эритроцитов составило 5,7/17,7%, лейкоцитов
31,4/34,6%, вязкости – 18,7/25,7%, глюкозы – 19,7/23,9%, что, в сравнение с
повышенным уровнем данных показателей в контроле, является положительным
признаком. По данным А.Г. Гущина (2000) увеличение вязкости и глюкозы
крови наблюдается при напряжении организма в стрессовой ситуации. ЛИ
возрастал на 45,8/77,8%, ЛИИ и ИСЛК снижались на 69,5/74,1% и 26,7/37,2%,
11
До стресса
Иммобил.стресс
Иммобил.стресс с адаптовитом
Пепсин
Связ.HCl
Своб.HCl
Секреция
Амлит.МВ
250
200
150
100
50
0
ЧастотаМВ
что указывает на развитие ответных реакций организма слабой интенсивности
(Л.Х. Гаркави, 1990).
Иммобил.стресс с лимфосаном
Рисунок 4. Изменения основных функций желудка при иммобилизационном стрессе
до и после применения БАД (%)
Болевой стресс. В сравнении с контролем при болевом стрессе на фоне БАД
(рис. 5) частота MB уменьшалась на 6,2/10,1%, амплитуда – на 16,3/23,3%, ЭДС на 15,6/28,1%. Желудочная секреция увеличивалась на 23,9/43,7%, свободная
соляная кислота - на 22,6/20,3%, связанная – на 23,6/19,7%, активность фермента
пепсина – на 79,5/83,3%. Изменение показателей деятельности желудка
свидетельствует о положительном влиянии БАД при болевом стрессе.
150
100
До стресса
Болевой стресс
Болевой стресс с адаптовитом
Пепсин
Связ.HCl
Своб.HCl
Секреция
Амплит.МВ
0
ЧастотаМВ
50
Болевой стресс с лимфосаном
Рисунок 5. Изменения основных функций желудка при болевом стрессе
до и после применения БАД (%)
Количество лейкоцитов снижалось на 43,3/34,6%, эритроцитов – на
8,9/17,7%, вязкости – на 24,3/25,7%, глюкозы - на 23,9/23,9%, ЛИИ и ИСЛК - на
79,9/74,1% и 45,7/37,2%,. Гемоглобин и цветовой показатель повышались на
3,2/7,8% и 28,026,7%, ЛИ - на 5,6/77,8%. Данные изменения характеризуют
снижение интенсивности ответной реакции организма в ответ на болевой стресс
при действии БАД.
Кормовой стресс. В первые 12 часов голодания на фоне БАД исследуемые
показатели постепенно снижались, но были выше контрольного уровня. В
дальнейшем,
наблюдался
подъем
показателей,
характеризующий
наступление стадии тревоги. Максимальное увеличение исследуемых
показателей было отмечено: на фоне адаптовита – к 48-му часу, лимфосана –
к 24-му часу. На протяжении последующих часов голодной выдержки на
фоне действия биологически активных добавок отмечалось плавное и
стабильное снижение активности изучаемых функций по сравнению с
контролем, показывающее переход в стадию адаптации. К 72-му часу
голодания исследуемые показатели приближались к исходному уровню.
Таким образом, при кормовом стрессе на фоне действия БАД, изменения
показателей были выражены в меньшей степени, чем в контрольных
исследованиях. Это может свидетельствовать о снижении затрат и большем
сохранении энергии в период голодания. Изменения в системе крови
отражают низкую интенсивность развития мобилизационных реакций и
12
достижение устойчивой адаптации организма на фоне действия биодобавок.
Незначительные изменения лейкоцитарных индексов свидетельствуют об
отсутствии интоксикационных процессов в организме к концу голодной
выдержки.
4. ВЫВОДЫ
1. Иммобилизационный, болевой и кормовой стресс-факторы вызывают
нарушения секреторно-ферментативной функции желудка и его моторной
деятельности, выраженной медленными волнами электрической активности.
● Болевой стрессор оказывает угнетающее действие на деятельность
желудка: секреция снижается на 21,1% (Р<0,01), активность фермента
пепсина – на 43,5% (Р<0,001). Иммобилизационный стресс, напротив,
проявляется гиперсекрецией - на 117,8% (Р<0,001), при этом активность
пепсина снижается на 21,0% (Р<0,001).
● В динамике развития стресс-реакций при кормовом стрессе в ходе
трехсуточного голодания выделено 3 стадии: мобилизации – с 24 по 36-й час;
адаптации – с 48 по 60-й час и стадия неудовлетворительной адаптации - с 60
по 72-й час, на грани последней стадии стресса – истощения.
● Стадия тревоги в отношении желудочного пищеварения как
специфическая стресс-реакция при кормовом стрессе проявляется для
каждого показателя неоднозначно: к 36-му часу голодания амплитуда и
частота MB максимально увеличивались, секреция желудочного сока и
активность пепсина, напротив, максимально снижались. К 24–36-му часу
увеличиваются показатели крови: количество лейкоцитов, эритроцитов,
глюкозы, вязкость, ЛИИ, ИСЛК и снижается цветовой показатель, ЛИ.
● В стадию адаптации к 48 часу наблюдалось увеличение показателей
желудочной секреции, ЛИ и снижение частоты, амплитуды биопотенциалов
желудка, основных гематологических показателей, ЛИИ и ИСЛК.
● В стадию неудовлетворительной адаптации с 60 по 72-й час наблюдалось
повторное увеличение частоты и амплитуды МВ, резкое угнетение секреторноферментативной функции желудка, а затем резкий ее подъем, а также снижение
основных гематологических показателей, ЛИИ, ИСЛК и увеличение ЛИ.
2. Установлены оптимальные дозы биологически активных добавок
оказывающие стимулирующее действие на основные функции желудка и
гематологические показатели: для адаптовита – 0,003 мл/кг, лимфосана
седативного – 0,1 г/кг. Все изменения находятся в пределах физиологической
нормы для собак.
3. Применение БАД в оптимальных дозах при стрессах нормализует
основные функции желудка, предотвращает резкое изменение секреции
желудочного сока и снижение активности фермента пепсина.
● Стресс-реакции на фоне БАД при иммобилизационном, болевом и
кормовом стрессах слабо выражены.
● Уровень секреторно-ферментативной активности желудочного сока на
фоне БАД в результате действия стрессоров был ближе к фоновому уровню,
по сравнению с контролем, не зависимо от вида стресс-фактора.
Гематологические показатели на фоне БАД не отражают наличие ярко
выраженных стресс-реакций в организме собак.
● При длительном иммобилизационном стрессе на фоне действия БАД
(адаптовит/лимфосан) – амплитуда МВ возрастает на 5,9/2,9% по сравнению с
фоном, а в контроле – на 20,6%, секреция желудочного сока - на 36,7/84,4%, в
13
контроле – 117,8%, активность пепсина – на 5,1/1,4%, тогда как в контроле
она была ниже на 21,0%.
● В результате кратковременного болевого воздействия на фоне БАД
амплитуда МВ – возрастает до 5,9%, в контроле – 26,5%; частота МВ – до
2,5%, в контроле – 9,3%. Желудочная секреция на фоне адаптовита
снижается на 2,2% и возрастает на фоне лимфосана на 13,3%, против
уменьшения на 21,1% в контроле; активность пепсина возрастает до 3,6%, а в
контроле уменьшается на 43,5%.
● При голодании на фоне БАД уровень большинства показателей
деятельности желудка более сглажен в различные часы голодания. Максимальное
изменение различных показателей в контроле приходится на 36-й час голодной
выдержки, в опыте с лимфосаном – на 24-й час, с адаптовитом на 48-й час, что
свидетельствует о различной скорости активизации мобилизационных процессов в
зависимости от вида биологически активной добавки.
● В конце 3-суточного голодания на фоне БАД изменения показателей
деятельности желудка менее выражены. Изменения показателей 1-го (фон) и
72-го часа составили: возрастание амплитуды МВ – до 5,9%, против 14,7%;
секреции – до 4,4% против 20,0%, увеличение активности пепсина до 1,4%
против 26,8% уменьшения в контроле.
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. С целью коррекции иммобилизационного, болевого и кормового
стрессов рекомендуем использовать адаптовит в дозе 0,003 мл/кг или лимфосан
седативный в дозе 0,1 г/кг один раз в сутки с кормом в течение 7 дней.
2. Для оценки стресс-реакций у собак рекомендуем использовать
показатели лейкограммы и лейкоцитарные индексы.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Вопросы изучения физиологии стресса и адаптации животных / В.Д. Пьянов,
Е.С. Шутенков, Г.В. Хонина, Е.Д. Перетятькина, С.В. Гаращенко // Науч. тр.
1 съезда физиологов СНГ (Сочи, Дагомыс, 19–23 сентября 2005); под. ред.
Р.И. Сепиашвили. – М.: Медицина – Здоровье, 2005. – Т. 2. – С. 234.
2. Перетятькина, Е.Д. Влияние кормового стресса на моторносекреторную функцию желудка собак / Е.Д. Перетятькина, Г.В. Хонина // Науч.
и практ. проблемы ветеринар. медицины, животноводства и перспективы их
решения: сб. науч. тр. – Омск: ФГОУ ВПО «ОмГАУ», 2006. – С. 149–154.
3. Пьянов, В.Д. Влияние биологически активной добавки «лимфосан» на
работу желудка при коррекции стресс-реакций. / В.Д. Пьянов, Е.Д. Перетятькина
// Науч. и практ. проблемы ветеринар. медицины, животноводства и перспективы их
решения: сб. науч. тр. – Омск: ФГОУ ВПО «ОмГАУ», 2006. – С. 174–178.
4. Применение биологически активных добавок в качестве корректоров
стресс-реакций / В.Д. Пьянов, Е.С. Шутенков, Г.В. Хонина, Е.Д. Сотникова,
Г.Г. Сидоренко // Актуальные проблемы биологии в животноводстве:
материалы четвертой международ. конф., посвящ. 100-летию со дня рожд.
акад. Н. А. Шманенкова (г. Боровск, 5-7 сентября 2006 г.). – Боровск: ВНИИ
физиологии, биохимии и питания с.-х. животных, 2006. – С. 192–194.
5. Сотникова, Е.Д. Влияние стрессов на основные функции желудка
/ Е.Д. Сотникова // Экология Южной Сибири и сопредельных территорий. –
Абакан: ХГУ, 2006. – Вып. 10. – Т. 11. – С. 129–130.
14
6. Сотникова, Е.Д. Использование биологически активной добавки
лимфосан при коррекции стресс-реакций / Е.Д. Сотникова // Роль молодых
ученых в развитии науки: материалы 11 научно-практич. конф. – Великие
Луки: ФГОУ ВПО «ВГСХА», 2007. – С. 26–27.
7. Сотникова, Е.Д. Влияние стрессов на основные функции желудка
/ Е.Д. Сотникова // Вестник Тюмен. гос. с.-х. академии.– 2007. – № 1 (2). – С. 169–170.
8. Пьянов, В.Д. Изменения моторной функции желудка при стрессах
и их коррекция биологически активной добавкой лимфосан / В.Д. Пьянов,
Е.Д. Сотникова // Аграр. наука – с.-х.: сб. статей 11 Международ. науч.практич. конф. – Барнаул: ФГОУ ВПО «АГАУ», 2007. – Кн. 2. – С. 439–441.
9. Сотникова, Е.Д. Влияние биологически активной добавки Адаптовит
на секреторную функцию желудка / Е.Д. Сотникова, В.Д. Пьянов, Г.В.
Хонина // Совр. проблемы устойч. развития агропром. комплекса России:
мат. четвертой Всерос. дистанц. науч.-практич. конф. студ., аспир. и молод.
ученых. – Персиановский: ФГОУ ВПО «ДонГАУ», 2007. – С. 114–116.
10. Сотникова, Е.Д. Влияние голодания на деятельность желудка
/ Е.Д. Сотникова, В.Д. Пьянов, Г.В. Хонина // Совр. проблемы устойч.
развития агропром. комплекса России: мат. четвертой Всерос. дистанц. науч.практич. конф. студ., аспир. и молод. ученых. – Персиановский: ФГОУ ВПО
«ДонГАУ», 2007. – С. 116–118.
11. Пьянов, В.Д. Влияние болевого и иммобилизационного стрессоров
на основные функции желудка / В.Д. Пьянов, Е.Д. Сотникова, Г.В. Хонина
// Проблемы ветеринар. и зоотехн. наук и пути их решения: сб. науч. тр. –
Омск: ФГОУ ВПО «ОмГАУ», 2007. – С. 165–170.
12. Сотникова, Е.Д. Изменение основных функций желудка при
кормовом стрессе и их коррекция биологически активной добавкой
«Адаптовит» / Е.Д. Сотникова // Ветеринария и кормление. – 2008. – № 2. – С. 28–29.
Печать оперативная. Бум. офсетная. Формат 6084 1/16.
Гарнитура «Times New Roman»
Усл.-печ. л. 0,93. Уч.-изд. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ 78.
______________________________________________________________
Отпечатано в копировально-множительном центре ИВМ ОмГАУ,
644122, г. Омск, ул. Октябрьская, 92
15
16