Современные подходы к лабораторной диагностике

СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ
ТОКСОПЛАЗМОЗА
И.П. Трякина, доцент кафедры инфекционных болезней РМАПО
Токсоплазмоз вызывается условно-патогенным внутриклеточным паразитом
токсоплазмой (toxoplasmae gondii), которая относится к типу простейших и поражает
ядерные клетки.
Известно, что клинические проявления заболевания различны у иммунных пациентов
и больных с дефектами иммунной системы. Поэтому токсоплазмоз следует с рассматривать в
аспектах: токсоплазмоз у иммунных пациентов, тоасоплазмоз у больных ВИЧ-инфекцией,
токсоплазмоз у беременных, врожденный токсоплазмоз.
Так, на фоне нормального иммунитета токсоплазмоз протекает в большинстве случаев
бессимптомно, имеет благоприятный исход. Однако, иногда заражение токсоплазмами
приводит к развитию патологических синдромов, таких как лимфаденопатия,
субфебриллитет. Чаще всего при токсоплазмозе увеличиваются шейные лимфатические
узлы, реже наблюдается генерализованная лимфаденопатия. Причём, при гистологическом
изучении ткани увеличенных лимфоузлов каких-либо специфических изменений не
обнаруживается, а имеет место «неспецифическая гиперплазия лимфоидной ткани».
Синдром лимфаденопатии служит поводом проведения сложного дифференциального
диагноза с рядом заболеваний с аналогичными проявлениями, что, в свою очередь, приводит
к большим временным затратам. Таким образом, поставить диагноз острого
токсоплазмозного лимфаденита без применения лабораторных методов диагностики
практически невозможно.
На фоне иммунной супрессии, в частности, у больных СПИДом, токсоплазма
реализует свои патогенные свойства, и у больных развивается токсоплазмозный очаговый
или диффузный энцефалит, инфильтративная пневмония, миокардит, гепатит, поражения
других органов, наблюдается паразитемия.
По статистике токсоплазмозный энцефалит занимает третье место как причина смерти
больных СПИДом. При росте числа ВИЧ-инфицированных и больных СПИДом
увеличивается количество пациентов с токсоплазмозным энцефалитом и другими органными
поражениями. Ранняя диагностика и лечение токсоплазмоза увеличивают выживаемость
иммунодефицитных больных.
При бессимптомном течение острого токсоплазмоза у беременных, когда имеет место
генерализация процесса и реализуется цитопатическое действие возбудителя, может
развиться внутриутробная инфекция – врождённый токсоплазмоз, что проявляется
поражением органов зрения, нервной системы, внутренних органов. Вероятность
заболевания плода и новорожденных инициирует проведение скринингового лабораторного
обследования беременных, осуществление программ профилактики врождённого
токсоплазмоза.
Таким образом, диагностическая проблема может рассматриваться в трёх аспектах:
диагностика острого манифестного токсоплазмоза у иммунных пациентов, диагностика
токсоплазмоза у больных СПИДом и выявление острой бессимптомной инфекции у
беременных.
В настоящее время лабораторная диагностика токстоплазмоза основывается на
выявлении специфических антител класса «М» и «G» в серологических тестах – реакции
непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ), иммуно-ферментном анализе (ИФА), изучении
их динамики.
Известно, что скорость появления, нарастания до максимальных значений, снижения
в последующем уровней антител очень индивидуальна и зависит от многих причин:
состояния иммунной системы, иммуногенности возбудителя и др.
При остром токсоплазмозе с манифестными симптомами или без них уровни
специфических «М», «G»-антител имеют высокие значения в РНИФ и ИФА. Поэтому
выявление высоких показателей «М» и «G»-антител с большей долей вероятности
свидетельствует об остром токсоплазмозе. Однако, известно, что высокие уровни антител
могут сохраняться много месяцев и даже лет. Так, показано, что специфические
иммуноглобулины не только «G»-класса, но и класса «М» циркулируют у пациентов свыше
шести месяцев в 15% случаев, от года до трёх лет и более в 5%, уже после завершения
генерализации и образования цист паразита в тканях органов. Такая особенность иммунного
ответа затрудняет правильную оценку высоких значений антител и может привести к
ошибочному диагнозу острого токсоплазмоза.
У больных СПИДом при развитии токсоплазмозного энцефалита или других
органных поражений выявляются специфические антитела в большинстве случаев, однако, у
некоторых пациентов из-за истощения иммунной системы АТ могут не определяться
(данные G. Remington), что затрудняет диагностику токсоплазмоза у больных СПИДом.
Метод ПЦР позволяет выявлять специфические нуклеотидные последовательности
ДНК токсоплазм. Материалом для ПЦР может служить биопсийная ткань лимфатического
узла, ликвор, амниотическая жидкость, промывные воды бронхов. Сложность в получении
материала для проведения метода ПЦР ограничивает его применение в практической работе.
За рубежом ПЦР иногда используют как мониторинг при лечении токсоплазмозного
энцефалита у больных СПИДом. Кроме того метод ПЦР применяется в ветеринарной
практике для диагностики токсоплазмоза у сельскохозяйственных животных. Материалом в
этом случае служат ткани внутренних органов умерших животных, плацента, оболочки
плода. Таким образом, постановка диагноза токсоплазмоза зависит от правильной
интерпритации уровней антител класса «М» и «G», что не всегда представляется
возможным. За рубежом, с учетом сложности интерпритации показателей антител,
предлагают организовывать в трудных клинических случаях «Коллегиальный совет».
В настоящее время выделены оболочечные и внутренние белки токсоплазм –
антигены Р 14, Р 27, Р 30, Р 33, Р 43 килодальтон и ферменты, напоминающие ферменты
растений.
Поверхностный белок оболочки Р 30, его называют «ранним белком», циркулирует в
крови на первых этапах инфекционного процесса, инициирует образование «ранних»
антител. Методом иммунного блота можно выявить антиген Р 30 и антитела к нему.
Определение белка Р 30 и антител позволяет подтвердить острых манифестный
токсоплазмоз, протекающий с лимфаденопатией, выявить бессимптомную инфекцию у
беременных. Также у больных СПИДом выявление Р 30 может служить диагностическим
критерием генерализованного процесса, что будет определять лечебную тактику и
проведение профилактических мероприятий.
Внедрение метода иммунного блота с определением антигена Р 30 и антител к нему –
перспективная задача для улучшения диагностики токсоплазмоза.