Лаборатория 19 февраля 2001 года “Белки и нуклеиновые

Лаборатория 19 февраля 2001 года “Белки и нуклеиновые кислоты”
Время проведения: 11-00 – 19-00
Место проведения: лаборатория биохимической генетики каф. генетики и селекции СПбГУ
Адрес: ст.м. Василеостровская, Средний проспект В.О. д. 41 (Межфакультетский учебный центр), каб.
208.
При себе иметь паспорт или документ, удостоверяющий личность, и сменную обувь (без нее не
пустим в помещение) или бахилы из толстого полиэтилена, чтобы не пронашивались.
Для облегчения понимания методов рекомендуем почитать литературу или освежить память по
следующим темам:
1. Строение и свойства белков
2. Строение и свойства нуклеиновых кислот.
3. Ферменты генной-инженерии (рестриктазы, лигазы, полимеразы и др.)
4. Электрофорез. Иммуноблоттинг.
.
Примерная программа занятия (основные методы в теории и практике).
Лаборатория “Белки”
1. Работа в лаборатории, реактивы, ламинары, тяги, лабораторное оборудование и т.д.
2. Методы разрушения клеток
3. Дифференциальное центрифугирование
4. Осаждение белков
5. Фильтрация и ультрафильтрация
6. Хроматографические методы. Основы хроматографии
7. Гель-фильтрация
8. Теория ионообменной, гидрофобной и адсорбционной хроматографии
9. Теория электрофореза
10. Электрофорез белков в полиакриламидном геле
11. Теория иммуноблоттинга
12. Определение концентрации белков
Лаборатория “ДНК”
1. Культуральные среды, работа с культурами клеток микроорганизмов.
2. Агарозный гель-электрофорез
3. Выделение ДНК из геля
4. Выделение плазмидной ДНК из клеток методом щелочного лизиса
5. Выделение плазмидной ДНК из клеток с помощью дифференциального центрифугирования в
градиенте хлористого цезия
6. Выделение хромосомной ДНК
7. Лигирование
8. Электропорация и химическая трансформация бактериальных клеток
9. Клонирование
10. Определение концентрации ДНК
!!! В ходе лабораторного занятия не будет четкого разделения по времени на лабораторию ДНК и
лабораторию БЕЛКА. Методы будем чередовать. Строгого регламента не будет, и быть не может, т.к.
нужно успеть многое сделать за короткий для лабораторной практики промежуток времени.
Обязательно будет время, чтобы попить чай и перекусить (может и не один раз).
По результатам лаборатории необходимо будет написать 2 отчета. Поэтому просьба относиться
ко всей получаемой информации внимательно и серьезно.