Красящий раствор для липопротеидов сыворотки крови SUDAN

ИНСТРУКЦИЯ
по использованию красящего раствора для липопротеидов сыворотки крови
SUDAN BLACK
Предназначен для выявления фракций липопротеидов сыворотки крови на ацетате
целлюлозы.
Красящий раствор для липопротеидов сыворотки крови SUDAN BLACK
Красящий раствор SUDAN BLACK поставляется в канистрах ёмкостью 3,75 л в наборе со
щелочью.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
1. Только для диагностики in vitro.
2. ВНИМАНИЕ! Не замораживайте сыворотку (плазму) крови.
Сбор и хранение образцов. Для исследования берут свежую, негемолизированную
сыворотку или ЭДТА-плазму, полученную из взятой натощак крови. Сыворотку хранят не
более 72 часов при температуре 2-8 С. Предварительно определяют содержание
холестерина и триглицеридов в исследуемых образцах.
Электрофоретическое разделение фракций ЛП при нормальном уровне ЛП не
имеет диагностического значения. Метод является полуколичественным и не может
заменить точное количественное определение альфа-холестерина.
Обурудование.
1. Устройство электрофореза белков сыворотки крови.
2. Денситометр: компьютерный или оптический.
Приготовление красителя и окрашивание.
1. За 20-30 минут до конца разгонки отмеряют и смешивают 40 мл красителя SUDAN
BLACK и 10 мл щелочи (упакованы вместе). Как правило, для окрашивания
достаточно 40-60 минут.
2. После окончания процедуры электрофореза мембрану осторожно переносят в заранее
приготовленный рабочий раствор красителя примерно на 40-60 минут (при
необходимости до 4-х часов).
3. По истечении времени окрашивания извлекают мембраны из красящего раствора,
аккуратно промывают их под струей чистой воды кончиками пальцев для удаления
остатков красителя. Красящий раствор готовят заново перед каждой процедурой
окрашивания.
4. Влажную мембрану укладывают в цветной планшетный сканер и обрабатывают с
помощью компьютерной программы «Анализ фракций сыворотки крови».
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ МЕТОДА
Фредриксон, Леви и Лисс
впервые ввели в 1967 г. классификацию
гиперлипидемий, дополненную впоследствии Всемирной организацией здравоохранения
(ВОЗ). Она описывает спектр липопротеидов при наиболее
распространенных
гиперлипидемиях, не разделяя причины нарушений на генетически предопределенные и
вторичные. Нужно отметить, что тип ГЛП у пациента может измениться с одного на
другой под влиянием диеты, изменения веса тела и лечения. Классификация также не
учитывает концентрацию холестерина
липопротеидов высокой плотности (альфахолестени), хотя эта величина существенно влияет на вероятность развития коронарной
болезни сердца у пациентов с ГЛП. Несмотря на несовершенство, система ВОЗ широко
используется клиницистами.
ТАБЛИЦА 1. Классификация ГЛП
ТАБЛИЦА 2. Оценка результатов.
Альфа:
Пре-бета:
Бета:
Хиломикроны:
23,1 – 54,5 %
10,1 – 35,0 %
30,6 – 53,9 %
0 – 1,9 %