Ситуационные задачи для аспирантов специальности 03.02.03 Микробиология (биологические науки) 1) При микроскопическом исследовании культуры, выделенной из молока, обнаружили Грам (-) палочки. a) Какие бактерии, по Вашему мнению, могли быть выделены? b) Какие питательные среды потребуются для изучения сахаролитической активности выделенных бактерий? c) Являются ли эти микроорганизмы санитарно-показательными? 2) При обследовании санитарного состояния столовой в смывах с посуды были обнаружены Грам (-) палочки. a) На какие питательные среды следует сделать посев для дальнейшего изучения выделенных микроорганизмов? b) Какими биохимическими свойствами обладает данный вид микроорганизмов? c) Является ли нормой обнаружение данных бактерий на посуде предприятия общественного питания? 3) После употребления в пищу грибов домашнего консервирования в семье отмечено 2 случая отравления с неврологической симптоматикой. a) С помощью какого лабораторного исследования может быть выявлена причина данного заболевания? b) Какие микроорганизмы могли вызвать подобное отравление? c) Какую картину Вы увидите при микроскопическом исследовании патологического материала? 4) У группы рабочих, которые обедали в одной столовой, появились признаки острого пищевого отравления. a) Какими исследованиями можно выяснить источник и характер инфекции? b) Микроорганизмы каких групп могли быть причиной отравления? c) Какие меры будут приняты по отношению к данному предприятию питания? 5) В мазке при микроскопии обнаружены бактерии округлой формы, окрашивающиеся по Граму в фиолетовый цвет, располагающиеся цепочками. a) Ваши предположения относительно видовой принадлежности микроорганизмов? b) На какие среды следует сделать посев этих бактерий для изучения их свойств? 1 c) Являются ли эти микроорганизмы санитарно-показательными? 6) Из пресервов была выделена чистая культура, в мазке из которой при микроскопии были выявлены бактерии, располагающиеся в виде гроздьев винограда. a) Какие бактерии, по Вашему мнению, могли быть выделены? b) На каких средах лучше всего изучать свойства данных бактерий? c) Как выяснить источник инфекции? 7) В смывах с дверных ручек Вы предполагаете обнаружить кишечную палочку. a) Что Вы увидите в мазках при микроскопии? b) В какой цвет по методу Грама окрашиваются эти микроорганизмы? c) На какие среды можно сделать посев для выделения чистой культуры этих бактерий? 8) В процессе плановой экспертизы качества продуктов в продовольственном магазине было обнаружено, что часть картонных упаковок со сметаной отличаются от остальных: отмечено их «вспучивание», сок – мутный, с осадком. При микроскопии осадка обнаружена масса овальных полиморфных Грам (+) микроорганизмов, многие в стадии почкования. a) О каких микроорганизмах может идти речь? b) Можно ли допустить продажу такого товара? Почему? c) По какой причине могла произойти подобного рода порча продуктов питания? 9) В смывах с тарелок и чашек в студенческой столовой при контрольной проверке при посеве на питательные среды отметили обильный рост колоний, при микроскопии которых обнаружены мелкие палочки, окрашивающихся по Граму отрицательно. a) О чем говорят такие результаты? b) Какая причина обнаружения данных микроорганизмов на посуде? c) Какие исследования следует провести для уточнения вида бактерий? 10) В процессе контрольной закупки плавленых сырков при вскрытии упаковки на их поверхности были обнаружены зеленые и черные пушистые колонии. В мазках при микроскопии выявлены длинные волокнистые Грам (+) нити. a) Какое можно сделать заключение? b) По какой причине могла произойти порча продукта? c) Какие исследования необходимо провести, чтобы дать заключение о видовой принадлежности выделенных микроорганизмов? 11) При вскрытии коробки с рыбными консервами обнаружены 5 бомбажных банок. a) Укажите причины дефекта. 2 b) Какой микробиологический процесс лежит в основе скопления газа в консервированных продуктах? c) Какие микроорганизмы могли послужить причиной данного дефекта? 12) В столовой на доске для разделывания мяса обнаружена плесень и неприятный запах. a) Укажите причины данного дефекта. b) Какими санкциями это грозит дирекции столовой? c) Какие микроорганизмы можно обнаружить при бактериологическом исследовании материала, взятого с этой доски? 13) У сотрудницы кондитерского цеха обнаружено гнойничковое заболевание кожи рук. a) Ваша тактика? b) Какие меры предупреждения контаминации продуктов нужно предпринять? c) Какими бактериями могли бы быть обсеменены кондитерские изделия, изготовленные этой сотрудницей? 14) При микроскопическом исследовании крема кондитерских изделий было обнаружено большое число Грам (+) кокков, располагающихся в мазках в виде гроздьев винограда. a) Ваши предположения относительно видовой принадлежности этих микроорганизмов? b) На какие питательные среды необходимо сделать посев для дальнейшего изучения и установления вида этих бактерий? c) Какое заболевание могут вызвать данные микроорганизмы? 15) Среди поступившей партии консервированной рыбы обнаружены банки – бомбаж. a) Какие причины вздутия консервов Вы знаете? b) Укажите механизм образования газов? c) Какие микроорганизмы вызывают брожение? 16) У работников предприятия, производящего молочные продукты, были взяты мазки из носа. a) Какое микробиологическое исследование мазков Вы будете проводить? b) Как Вы приготовите фиксированный мазок, каким методом окрасите препарат и какой вид микроскопии будете использовать? c) Какие микроорганизмы предполагаете увидеть в мазке? 17) На мясокомбинате сотрудниками Санэпидстанции были взяты смывы с оборудования. a) Какое микробиологическое исследование смывов Вы будете проводить? 3 b) Как Вы приготовите фиксированные мазок, каким методом окрасите препарат и какой вид микроскопии будете использовать? c) Какие микроорганизмы Вы предполагаете увидеть в мазках из смывов? 18) Из пресервов была выделена чистая культура, в мазке из которой были выявлены Грам (+) кокки, располагающиеся в виде гроздьев винограда. a) На носительство каких бактерий Вы будете проверять работников предприятия, производящего данные пресервы? b) Как был приготовлен фиксированный мазок, каким способом окрашен и какой вид микроскопии был применен? c) Какой рост на плотных и жидких питательных средах характерен для данных микроорганизмов? 19) В мазке из кефира были выявлены Грам (+) кокки, располагающиеся в виде цепочек. a) Что это за микроорганизмы? b) Опишите этапы окраски мазка по методу Грама. c) Перечислите различия в строении клеточной стенки Грам (+) и Грам (-) бактерий. 20) Из эмульсии сыра была выделена чистая культура, в мазке из которой были выявлены Грам (-) палочки. a) Что это за микроорганизмы? b) Опишите этапы окраски мазка по методу Грама. c) Перечислите различия в строении клеточной стенки Грам (+) и Грам (-) бактерий. 21) При бактериологическом исследовании чистая культура кишечной палочки была высеяна на короткий «пестрый» ряд. a) Для определения каких свойств микроорганизмов используются «пестрые» ряды, на чем основывается действие этих сред? b) Изменится ли через 24 часа цвет «пестрых» рядов и на какой? c) Какие еще питательные среды, использующие для определения данных свойств, Вы знаете? 22) При бактериологическом исследовании чистая культура кишечной палочки была высеяна на мясопептонный бульон с индикаторными бумажками на наличие индола, сероводорода и аммиака. a) Для выявления каких ферментов используется данный метод? b) В какие цвета окрасятся индикаторные бумажки? c) Какие дополнительные методы определения протеолитической активности Вы знаете? 23) Покупатель вернул в магазин упаковку фруктового джема с явлениями бомбажа. Вся партия была отправлена на микробиологическое исследование. 4 a) В результате какого процесса отмечается вздутие банки? Укажите механизм. b) Какие микроорганизмы вызывают данный процесс? c) Имеет ли субстратное фосфорилирование практическое применение? 24) Из пивоваренного завода была отправлена партия пива на микробиологическое исследование. a) Какие микроорганизмы используются для производства пива? b) Какой процесс, вызываемый этими микроорганизмами, лежит в основе производства пива? c) Какой вид микробной деконтаминации используется для увеличения сроков хранения пива? 25) При вскрытии банки с клубничным вареньем вы обнаружили пену. a) В результате какого процесса варенье развилось газообразование в продукте? Укажите механизм. b) Какие микроорганизмы вызывают данный процесс? c) Имеет ли данный процесс практическое применение? 26) Из партии питьевого йогурта были отобраны пробы для микроскопического исследования. a) Какие микроорганизмы, используемые для производства молочных продуктов, Вы предполагаете обнаружить в йогурте? b) Как будут выглядеть эти микроорганизмы в мазке при окраске по Грамму? c) Какой процесс, вызываемый этими микроорганизмами, лежит в основе производства молочных продуктов? Укажите механизм. 27) В бактериологическую лабораторию поступила партия овощных консервов с явлениями бомбажа. a) Какие микроорганизмы вызывают данный вид порчи? b) Укажите пути контаминации продукта. c) Какой процесс, вызываемый этими микроорганизмами, лежит в основе бомбажа консервов? 28) У работников кондитерского цеха были взяты мазки из носа на носительство золотистого стафилококка. a) Какое микробиологическое исследование мазков из носа Вы будете проводить? b) Какие среды Вы будете использовать для посева исследуемого материала? c) Опишите характер роста золотистого стафилококка в жидких и плотных питательных средах? 29) В смывах с дверных ручек Вы предполагаете обнаружить кишечную палочку. 5 a) Какое микробиологическое исследование смывов Вы будете проводить? b) Что Вы увидите в мазках при микроскопии? c) Опишите характер роста кишечной палочки на жидких и плотных питательных средах. 30) При посеве свернувшегося молока на мясопептонный агар через 24 часа при 370С выросли среднего размера бесцветные колонии в S-форме. a) Какие микроорганизмы могут вызывать свертывание молока? b) Опишите S- и R-формы колоний. c) Какой рост в мясопептонном бульоне характерен для данных микроорганизмов? 31) Из чистой культуры бактерий приготовлен мазок и окрашен по методу Циля-Нильсена. При микроскопии мазка в поле зрения микроскопа можно было наблюдать палочки, окрашенные в красный цвет. a) Для чего используется метод Циля-Нильсена? b) Какой вывод можно сделать по результату окраски? c) Зарисуйте изменение цвета исследуемых бактерий на разных этапах окраски по методу Циля-Нильсена: 1-й этап – фиксированный неокрашенный мазок; 2-й этап – мазок после окраски фуксином Циля; 3-й этап – мазок после обработки 5% серной кислотой; 4-й этап – мазок, окрашенный метиленовым синим (конечный результат) 1 2 3 4 32) Из культуры бактерий рода Bacillus (центральное расположение спор в клетках) был приготовлен фиксированный мазок и окрашен по методу Грама. a) Как будет изменяться цвет вегетативных клеток и спор на разных этапах окраски: 1-й этап – фиксированный неокрашенный мазок; 2-й этап – мазок после обработки генциановым фиолетовым и раствором Люголя; 3-й этап – мазок после обработки этиловым спиртом; 4-й этап – мазок после окраски фуксином (конечный результат) Зарисовать. 6 1 2 3 4 33) Материал, взятый от больного с подозрением на сальмонеллез, был засеян на среду Левина. a) Рост каких колоний можно ожидать на среде Левина? b) Как будут выглядеть колонии кишечной палочки, выросшие рядом? c) С какой целью используется данная среда? 34) Из материала от больного с подозрением на дизентерию (возбудитель – шигеллы) выделена чистая бактериальная культура. После инкубации посевов этой культуры в жидких средах Гисса с глюкозой и лактозой их цвет (обеих) изменился с зеленого на желтый, поплавок всплыл на поверхность среды. a) О чем свидетельствуют полученные результаты? b) Являются ли они доказательством того, что выделенная культура может относится к шигеллам? 35) Материал, содержащий кишечную палочку, был посеян на среду Плоскирева. После термостатирования наблюдался очень скудный рост в виде единичных колоний. a) В чем причина скудного роста? 36) Из материала от больного с подозрением на кишечную инфекцию выделена чистая бактериальная культура. Сделан её посев на среды Ресселя и Олькеницкого. После инкубации посевов столбик обеих сред окрасился в желтый цвет, скос на среде Ресселя остался зеленым, на среде Олькеницкого – красным, наблюдалось поднятие и разрыв косяка, а на среде Олькеницкого – почернение среды по месту посева. a) О чем свидетельствует изменение цвета сред в столбике, разрыв косяка и почернение на среде Олькеницкого? b) Предположите, какой микроорганизм мог быть выделен (шигеллы, сальмонеллы, кишечная палочка)? 37) После инкубации бактериальной культуры, засеянной в МПБ с индикаторными бумажками, были получены следующие результаты: бумажки (лакмусовая, пропитанные ацетатом свинца и щавелевой кислотой) не изменили цвета, среда осталась прозрачной. a) С какой целью был выполнен посев? b) О чем свидетельствует полученный результат? 7 38) В ходе исследования изучаемую бактериальную культуру посеяли в молоко и на желатину. После термостатирования посевов было обнаружено свертывание молока и разжижение желатины. a) С какой целью выполнен посев и о чем свидетельствуют полученные результаты? 39) На заводе по производству кисломолочных продуктов для получения сметанной закваски использовалась культура молочнокислого стрептококка (Streptococcus lactis). При микроскопии мазка, приготовленного из данной культуры и окрашенного по методу Грама, наблюдалось следующее: цепочки кокков и грамотрицательные палочки. a) Можно ли использовать данную культуру для приготовления закваски? b) Какой биохимический процесс лежит в основе получения сметаны? 40) При производстве этилового спирта путем спиртового брожения, осуществляемого дрожжами, в качестве основного продукта в среде накапливался глицерин. a) Почему произошло преимущественное образование глицерина вместо этилового спирта? b) Какие условия необходимо создать для микроорганизмов, чтобы процесс пошел по пути образования этанола? 41) На предприятии по производству биоэтанола (спиртовым брожением) наблюдалось ингибирование процесса брожения, в результате чего существенно снизился выход целевого продукта. Условия, при которых осуществлялось брожение следующие: в качестве источника азота использовался нитрат калия, концентрация углеводов в среде составляла 25%, рН среды 7,5, температура 200С. a) Имеется ли в данном случае нарушение технологического процесса? b) Какие условия необходимо изменить? 42) Для получения витамина В12 микробиологическим способом использовалась культура пропионовокислых бактерий. Культивирование осуществлялось при следующих условиях: в состав среды входили углеводы, аминокислоты, минеральные соли; рН среды 5,0; температура культивирования 370С, анаэробные условия. Однако накопления целевого продукта не наблюдалось, в культуральной жидкости обнаруживалась масляная кислота, наблюдалось газообразование. При микроскопии мазка, приготовленного из культуральной жидкости, в нем были обнаружены преимущественно грамположительные спорообразующие бактерии, расположенные хаотично, а также небольшое количество грамотрицательных палочек и кокков. a) В чем причина отсутствия витамина В12 в культуральной жидкости? b) Какие меры необходимо предпринять для нормализации технологического процесса призводства витамина В12? 8 43) В продовольственном магазине покупателем были приобретены грецкие орехи. После открытия упаковки обнаружилось, что продукт имел прогорклый запах и вкус. a) С деятельностью каких микроорганизмов связана порча продукта? b) Чем обусловлены прогорклый запах и вкус орехов? 44) При приготовлении молочнокислого продукта на основе бифидобактерий в мазке (по Граму), приготовленном из закваски, обнаружилось большое количество дрожжей, грамположительных спорообразующих палочек с диаметром спор больше диаметра клетки, незначительное количество грамположительных неспороносных палочек, расположенных в виде латинских букв V и Y. a) Является ли закваска пригодной для приготовления кисломолочного продукта? b) Какие органические соединения могут образоваться в продукте, если использовать данную закваску? c) Каковы возможные причины присутствия в закваске посторонней микрофлоры? 45) При исследовании испражнений материал был засеян на среду Эндо. После термостатирования изучались культуральные свойства. На чашке с агаром выросли колонии бесцветные и окрашенные. a) Дайте определение понятию «культуральные свойства». b) Назовите состав, назначение и принцип работы на среде Эндо. c) Какого цвета окрашенные колонии? 46) При культивировании вирусов в культуре клеток использовалась среда 199. После термостатирования цвет среды поменялся. a) Как называется данная проба и с какой целью она используется? b) О чем свидетельствует изменение цвета среды? 47) Для определения индекса бактериофага использовался метод агаровых слоев по Грациа. Получены следующие результаты: 1 чашка – разведение 10-1 – роста нет 2 чашка – разведение 10-2 – роста нет 3 чашка – разведение 10-3 – роста нет 4 чашка – разведение 10-4 – роста нет 5 чашка – разведение 10-5 – 10 негативных колоний 6 чашка – разведение 10-6 – сплошной рост микроорганизмов 7 чашка – разведение 10-7 – сплошной рост микроорганизмов a) Опишите методику постановки опыта. b) Дайте определение понятию «индекс бактериофага». c) Определите индекс бактериофага. d) Что представляет собой негативная колония? 9 48) Кишечную палочку культивировали в жидкой среде (МПБ). Культуру не пересевали в течение месяца, после чего сделали посев на МПА. Рост на среде отсутствовал. a) Что произошло с культурой кишечной палочки и почему? b) Назовите фазы развития бактериальной популяции в жидкой среде. 49) Остатки продукта, вызвавшего пищевое отравление, были отправлены в бактериологическую лабораторию на исследование на аэробную и анаэробную микрофлору. a) В чём заключается отличие культивирования аэробов от анаэробов? b) Назовите методы создания анаэробиоза? 50) На молочных комбинатах молоко после пастеризации подвергается тестированию на наличие бактерий группы кишечной палочки. a) Дайте определение понятию «пастеризация». b) Для чего проводится определение БГКП в молоке после его пастеризации? c) На какие среды необходимо сделать посев для выявления БГКП в молоке и как интерпретировать результаты? d) Как выглядят БГКП в мазках, окрашенных по методу Грама. 10