Тема: Биохимия мочи. Занятие №1. Учебные и воспитательные цели: - Общая цель: привить знания о функциях почек, физико-химических свойствах и составе мочи в норме и при патологии; - Частные цели: уметь определять патологические компоненты в моче и интерпретировать полученные результаты. Входной контроль знаний 1. Тесты. 2. Устный опрос. Основные вопросы темы 1. Функции почек. 2. Физико-химические свойства мочи. 3. Органические вещества мочи. 4. Неорганические компоненты мочи 5. Патологические компоненты мочи. Лабораторно-практические работы 1. Определение относительной плотности мочи. 2. Качественные реакции для обнаружения глюкозы в моче. 3. Качественные реакции для обнаружения белка в моче. 4. Качественные реакции для обнаружения ацетона в моче. 5. Качественные реакции для обнаружения крови в моче. Выходной контроль. Ситуационные задачи. Литература. 1. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. М.:Медицина, 2004, с. 608-624. 2. Материал лекций. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОТНОСИТЕЛЬНОЙ ПЛОТНОСТИ МОЧИ: В небольшой цилиндр с исследуемой мочой погружают урометр. Производят отсчет, беря ту линию на шкале урометра, которая соответствует нижнему мениску жидкости. В случае большой относительной плотности мочи для исследования берут второй тип урометра (от 1,030 до 1,060). Все определения производят обычно при температуре 15°С, поскольку шкала урометра градуируется в соответствии с этой температурой. Если моча имеет другую температуру и привести ее к 15°С почему-либо трудно, то на каждые 3°С свыше этой температуры нужно прибавить, а на каждые 3°С ниже – убавить по 0,001 от показания шкалы урометра. В норме относительная плотность мочи у детей грудного возраста равна 1,009 – 1,012 , у взрослых – 1,010 – 1,025. КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ГЛЮКОЗЫ В МОЧЕ: РЕАКЦИЯ ТРОММЕРА: К 10 каплям исследуемой мочи прибавляют 5 капель 10% р-ра NaOH и 2 капли CuSO4, нагревают до кипения. Образование осадка желтого цвета Cu(OH)2 или кирпично-красного цвета Cu2O свидетельствует о наличии сахара в моче. РЕАКЦИЯ ФЕЛИНГА: К 10 каплям мочи прибавляют 5-10 капель реактива Фелинга, нагревают верхний слой жидкости. Образуется осадок кирпично-красного цвета. РЕАКЦИЯ НИЛАНДЕРА: К 10 каплям мочи прибавляют 5 капель реактива Ниландера и кипятят 1-2 мин. образуется осадок черного цвета (восстановление висмута) КАЧЕСТВЕННАЯ РЕАКЦИЯ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ АЦЕТОНА В МОЧЕ: К 10 каплям мочи на ацетон добавляют 2-3 капли 50% (NH4)2SO4 и 3-4 капли р-ра нитропруссида натрия, встряхивают, затем осторожно наслаивают 20% р-р NH4OH. На границе двух сред образуется сине-фиолетовое кольцо. КАЧЕСТВЕННАЯ РЕАКЦИЯ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ БЕЛКА В МОЧЕ: К 10 каплям мочи прибавляют 6-7 капель 20% раствора сульфосалициловой кислоты. Образуется осадок белого цвета. КАЧЕСТВЕННАЯ РЕАКЦИЯ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ КРОВИ В МОЧЕ: К 10 каплям мочи добавляют 4-5 капель Н2О2 и 4-5 капель уксуснокислого бензидина. В пробирке образуются соединения с различной окраской (бензидиновая проба).