Выявление в моче свободных легких цепей иммуноглобулинов в

реклама
ОПРЕДЕЛЕНИЕ В МОЧЕ СВОБОДНЫХ ЛЕГКИХ ЦЕПЕЙ
ИММУНОГЛОБУЛИНОВ В МОНОМЕРНОЙ И ДИМЕРНОЙ ФОРМАХ В ЦЕЛЯХ
РАННЕГО ВЫЯВЛЕНИЯ ПАРАПРОТЕИНУРИИ БЕНС ДЖОНСА
С.А. Саламатова, к.м.н., Т.Н. Томина
МЦ « ИММУНОТЕСТ»
В связи с тем, что катаболизм легких цепей иммуноглобулинов происходит в почках, их
моноклональная секреция с наибольшей частотой приводит к развитию нефропатии,
которая в таких случаях является показанием к началу химиотерапии. Однако, в
настоящее время известно, что нефротоксичность моноклональных легких цепей
связана преимущественно
с
их физико-химическими свойствами, а не с их
количественной характеристикой. Таким образом, для раннего выявления
моноклональных легких цепей, присутствующих в моче, и вызывающих различный
характер повреждений нефрона, в настоящее
время уже необходимы новые
представления об их свойствах, в частности, о способности к полимеризации. В
последнее время в литературе появляются данные о превалировании димеров легких
цепей иммуноглобулинов над мономерами при выраженной парапротеинурии Бенс
Джонса. Электрофоретическое
разделение
белков даже
с последующей
иммунофиксацией с использованием моноспецифических антисывороток против
легких цепей иммуноглобулинов не дает точного представления о
степени
полимеризации белков. Для решения этой задачи необходимо параллельно использовать
разделение белков не только по заряду, но и по молекулярной массе. В нашей работе для
параллельного исследования нативной и концентрированной в 100 раз суточной мочи
106-и пациентов с подозрением на наличие моноклональной секреции была
использована автоматическая система для электрофореза Hydrasys (Франция) и наборы
для дифференциации протеинурии и для определения белковых фракций Hydragel. В
результате были сформированы 3 группы: 1- с наличием белка Бенс Джонса в моче,
доказанным
присутствием
М-градиента,
иммунофиксацией
и
радиальной
иммунодиффузией (РИД) - 37 человек; 2- с подозрением на наличие белка Бенс Джонса
при отсутствии М-градиента в ЭФ, но выявленных легких цепях методом РИД - 23
человека; 3- без белка Бенс Джонса в моче - 46 человек. Во всех исследуемых образцах
методом электрофореза белков мочи
по величине
молекулярной массы были
идентифицированы полосы разной интенсивности, соответствующие молекулярной
массе 25 и 50 кD, что полностью совпадало с молекулярной массой белка Бенс Джонса,
выделенного препаративным электрофорезом из мочи больных с подтвержденным
диагнозом миеломной болезни. При этом в 1-ой группе распределение свободных
легких цепей в мономерной и димерной формах выглядело следующим образом: в 27%
случаев выявлялись свободные легкие цепи только в мономерной форме, в 3% случаев
– исключительно в димерной форме и в 70% случаев – в сочетанной форме. Во 2-ой
группе (с подозрением на наличие, но недоказанной иммунохимическими методами
парапротеинурией Бенс Джонса)
распределение выявленных мономеров и димеров
легких цепей выглядело сходным образом: в 30% случаев были обнаружены только
мономеры легких цепей, совсем не были выявлены димерные формы легких цепей, в 70%
случаев – обнаруживалось сочетание мономерной и димерной форм свободных легких
цепей. В третьей группе в 63% случаев свободные легкие цепи вообще не были
обнаружены, в 11% случаев были выявлены свободные легкие цепи в мономерной форме,
в 2% случаев – в димерной и в 24% случаев в сочетанной форме. Также, по нашим
данным, сочетание мономеров и димеров свободных легких цепей с превалированием
димерной фракции
сопровождается более высоким средним уровнем бета-2микроглобулина в моче, определяемым методом иммуноферментного анализа (ИФА): от
7,46 мкг/л до 8, 91 мкг/л, что почти в 300 раз выше нормы и соответствует серьезным
изменениям в канальцевом аппарате нефрона, более медленному восстановлению
канальцевых функций и худшему прогнозу. Таким образом, серьезной группой риска по
отсутствию выявления моноклональной секреции легких цепей иммуноглобулинов
является группа с не выявленным в электрофорезе М-градиентом, но с наличием
следовой протеинурии, обусловленной присутствием свободных легких цепей в
мономерной и димерной формах. Следовательно, скрининговые
исследования
уропротеинограммы (электрофорез по молекулярной массе) в сочетании с определением
уровня бета-2-микроглобулина в моче позволяют
в большей степени избежать
диагностических ошибок при подозрении на развитие парапротеинурии Бенс Джонса.
Скачать