Клиническая лабораторная диагностика 3 курс. Наименование тем, их содержание, объём в часах лекционных занятий (6 семестр) 2.2.1. Тема лекции: Клинический анализ крови 1 1. Понятие «общий анализ крови». Порядок подготовки пациента, взятия, хранения и обработки материала для клинического анализа крови. 2. Общие принципы ручных и автоматических унифицированных методов определения показателей общего анализа крови. Референтные значения. 3. Физиологические изменения показателей общего анализа крови в различных возрастных группах. Особенности показателей общего анализа крови у беременных. 4. Патофизиологические механизмы изменения показателей общего анализа крови. Эритроцитопения. Эритроцитоз (относительный, абсолютный, первичный, вторичный). 5. Определение уровня гемоглобина и его изменение при патологических состояниях. 6. Расчет цветового показателя, клинико-диагностическое значение. 7. Патологические и физиологические отклонения количества лейкоцитов в периферической крови. 8. Факторы, влияющие на СОЭ, клиническое значение. 2.2.2. Тема лекции: Клинический анализ крови (продолжение) 2 1. Общие требования к гематологическому мазку. Правила приготовления, фиксации и окраски мазков для исследования морфологии клеток. 2.Лейкоцитарная формула. Морфологические особенности лейкоцитов. Сдвиг формулы «вправо» и «влево». Дегенеративные изменения лейкоцитов. 3. Исследование морфологии эритроцитов в мазке крови: изменение размеров, формы, окраски, включения в эритроцитах. 4. Контроль качества гематологических исследований. 2.2.3. Тема лекции: Антигены клеток крови 1.Антигены системы АВ0. Формирование в онтогенезе, антигенность, разновидности. Антитела системы АВ0. Иммунные антитела против антигенов АВ0 и причины появления. Клиническое значение системы АВ0. 2. Принципы определения антигенов системы АВ0. 3. Система антигенов резус, формирование, антигенность, иммуногенность, разновидности. Патофизиологические механизмы формирования конфликта по резус-антигенам. Профилактика резус-конфликта. 4. Принципы определения резус-принадлежности крови. Трактовка результатов. 5. Система антигенов Kel, формирование, антигенность, иммуногенность, разновидности. Антитела анти-KEL, роль в патологии. 6. Антигены гистосовместимости I и II классов. Биохимические свойства. Экспрессия на клетках. Наследование. Биологическое значение антигенов гистосовместимости. Роль HLA в посттрансфузионных реакциях. 2.2.4. Тема лекции: Клинический анализ мочи 5 1. Понятие «общий анализ мочи». Правила подготовки пациента, сбора и хранения мочи для общего анализа. 2. Подходы к проведению общего анализа мочи. Тест-системы. 3. Физиологические и патологические факторы, влияющие на физические свойства мочи: количество, цвет, относительная плотность, прозрачность, РН. 4. Химические свойства мочи. Причины протеинурии. Классификация протеинурий (преренальная, ренальная, постренальная, органическая, функциональная). 5. Патофизиологические механизмы глюкозурии. Почечный порог. Первичные и вторичные глюкозурии. 6. Кетоновые тела в моче. 7. Уробилиноиды и желчные пигменты в моче. 8. Микроскопическое исследование мочи. 2.2.5. Тема лекции: Общеклинический анализ спинномозговой 6 жидкости 1. Механизмы образования ликвора. Физиологические и патологические факторы, влияющие на состав спинномозговой жидкости. 2. Показания к исследованию спинномозговой жидкости. 3. Методы забора спинномозговой жидкости, особенности доставки, хранения материала. 4. Общие принципы проведения исследований ликвора. Референтные значения. 5. Изменение цереброспинальной жидкости при патологических состояниях: менингитах (гнойных, серозных), черепно-мозговой травме, инсультах и опухолях. 2.2.6. Тема лекции: Клинический анализ жидкостей серозных 7 полостей и кист. Клинический анализ мокроты и бронхо-альвеолярной жидкости 1. Механизмы образования и накопления жидкости в серозных полостях. 2. Общеклиническое исследование жидкости из плевральной полости. Показания к исследованию, особенности получения, доставки, хранения материала. 3. Общие принципы проведения исследований выпотных жидкостей. Лабораторные признаки экссудатов и транссудатов. Виды экссудатов. 4. Общеклиническое исследование жидкости из брюшной полости. Основные элементы в норме и при патологии, клинико-диагностическое значение. 5. Общеклиническое исследование жидкости из сустава, основные элементы в норме и патологии, клинико-диагностическое значение. 6. Общеклиническое исследование пунктатов кист (эхинококковых пузырей, кисты почки, яичника, головного мозга, поджелудочной железы). 7. Механизмы образования и накопления мокроты. Показания к исследованию, цели исследования. Особенности преаналитического этапа. 8. Общие принципы проведения исследований мокроты в лаборатории. 9. Особенности состава мокроты при различных патологических состояниях. 10. Бактериоскопическое исследование мокроты. 11. Показания к исследованию бронхоальвеолярной жидкости. 12. Правила получения бронхиального и бронхо-альвеолярного смыва. 13. Основные элементы бронхиального смыва и бронхо-альвеолярного смыва в норме и патологии. Клинико-диагностическое значение. 2.2.7. Тема лекции: Клинический анализ отделяемого мочеполовых 8 органов 1. Исследование отделяемого женских половых органов и уретры. 2. Цели исследования, особенности преданалитического этапа. 3. Микроскопическое и бактериоскопическое исследование. Клиникодиагностическое значение. 4. Исследование выделений мужских половых органов: сок простаты, отделяемое уретры. Клинико-диагностическое значение. 5. Спермограмма: показания к исследованию, аналитическая процедура, референтные значения, использование для оценки репродуктивной функции. Итого в часах: КЛД 3 курс 2.3.1 Наименование тем, их содержание, объём в часах практических занятий (5 семестр) № п/п 2.3.1.1. 2.3.1.2. 2.3.1.3. 2.3.1.4. Наименование тем, содержание практического занятия Устройство лаборатории, организация работы в лаборатории 1.Основные документы, регламентирующие работу в лаборатории. 2.Требования к помещениям КДЛ различных типов. Расположение здания и помещений лабораторий. Размеры площадей. Перечень помещений. Общее и локальное освещение. 3.Материально-техническое оснащение КДЛ различных типов. Виды лабораторного оборудования, аппаратов, приборов и устройств. Лабораторная мебель и требования, предъявляемые к ней. 4.Штаты КДЛ. 5.Централизация клинических лабораторных исследований. 6.Организация специализированных лабораторных исследований (иммунологических, цитологических, цитогенетических, бактериологических, вирусологических и др.). Принципы налаживания клинических лабораторных исследований 1. Организация преаналитического этапа лабораторных исследований. Правила забора, хранения и доставки биоматериала. 2. Выбор метода и режима лабораторных исследований. 3. Аналитический этап лабораторных исследований, ошибки, пути их устранения. 4. Представление результатов лабораторных исследований. 5. Единицы системы «СИ» в лабораторных исследованиях. Понятие норма, референтный интервал, референтная величина. Охрана труда и техника безопасности в клинико-диагностической лаборатории 1.Санитарно-противоэпидемический режим в клинико-диагностической лаборатории. Средства индивидуальной защиты в КДЛ. Профилактика внутрибольничного заражения ВИЧ-инфекцией. 2.Мероприятия при ранениях и контакте с биоматериалом. Содержание аптечки для экстренной медицинской помощи. 3.Правила обеззараживания использованного материала. 4.Первая помощь пострадавшим в лаборатории. 5.Правила безопасной работы с едкими веществами (кислоты, щелочи). 6.Противопожарная безопасность в КДЛ. 7.Способы и средства дезинфекции различных объектов КДЛ. 8.Предстерилизационная очистка, правила проведения. Контроль качества стерилизации, методы. Контроль качества клинических лабораторных исследований 1.Понятие «контроль качества» лабораторных исследований. Основные статистические понятия, используемые в контроле качества. 2.Меры обеспечения контроля качества на преаналитическом этапе. Источники возможных ошибок и пути их устранения. 3.Внешний и внутренний контроль качества на аналитическом этапе. 4.Виды контрольных материалов. Основные требования к контрольным материалам. 5.Внутренний контроль правильности и воспроизводимости лабораторных исследований. 6.Построение контрольных карт. Систематические и случайные ошибки. 7.Обеспечение и оценка качества лабораторных исследований на постаналитическом этапе. 2.3.1.5. 2.3.1.6. 2.3.1.7. 2.3.1.8. Лабораторная посуда и инструментарий. Средства пробоподготовки в лаборатории 1.Классификация посуды, используемой в КДЛ. Правила ухода за лабораторной посудой. 3.Фильтровальная и индикаторная бумага. 3.Лабораторная посуда и инструментарий. 4.Дозирующие устройства, используемые в КДЛ, виды дозирования. 5.Центрифугирование, принцип метода. Основные типы центрифугирования (осаждение, препаративное, аналитическое), их характеристика. Классификация центрифуг. 6.Перемешивающие устройства, термостатирующие устройства классификация, принципы работы. 7.Электронагревательные устройства. Меры безопасности. 8.Весоизмерительная техника в КДЛ. Лабораторные реагенты 1.Химические реактивы, определение, классификация по степени чистоты. 2.Общие правила работы с реактивами. Правила хранения химических реактивов. Особенности организации учета движения и размещения реактивов в лаборатории. Правила оформления этикеток на реактивах. 3.Готовые аналитические формы реактивов. 4.Определение рН растворов, требования к точности определения для различных реакций. 5.Определение плотности растворов. 6.Фильтрование, определение, виды фильтрующих материалов, применение в КДЛ. 7. Питательные среды для культивирования клеток человека. Основные требования к составу, готовые питательные среды. Способы контроля рН питательных сред. 8.Измерение температуры, виды термометров, особенности работы с ними. Характеристика термометров, используемых для измерения максимальных и минимальных температур, принципы действия манометрических и электрических термометров. Оптические методы оценки результатов лабораторных исследований. Абсорбционная фотометрия 1.Классификация оптических методов количественного анализа. 2.Абсорбционная фотометрия, принципы, основные методы. 3.Спектрофотометрия, нефелометрия, атомно-абсорбционная фотометрия, принципы методов, применение в КДЛ. Правила эксплуатации фотометрической аппаратуры. 4.Основные условия измерения при работе с фотометрической аппаратурой. Источники ошибок и подходы к их предупреждению. 5.Расчет результатов исследований (по калибровочной кривой, градуировочной кривой, стандартным растворам, в условных единицах). 6.Построение калибровочной кривой для определения концентрации различных веществ в различном биоматериале. Люминесцентные методы оптического анализа. Эмиссионная фотометрия. Потенциометрия 1. Люминесцентный анализ. Приборы, классификация, преимущества и недостатки, применение люминесцентного анализа в КДЛ. 2. Флюоресценция, виды, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. 3. Хемилюминесценция, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. 4. Эмиссионная фотометрия. Правила проведения, способы измерений, расчета и представления результатов. Применение методов эмиссионной фотометрии в КДЛ. 5. Пламенная фотометрия, аналитическая процедура, интерпретация, 2.3.1.9. 2.3.1.10. 2.3.1.11. 2.3.1.12. чувствительность, ошибки. Приборы, классификация и основные типы, правила эксплуатации. 6. Атомно-эмиссионный спектральный анализ, принцип и применение в КДЛ. 7. Потенциометрия (определение рН и ионоселективные электроды), принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки, применение в КДЛ. 2 Иммунохимические методы анализа в клинической лаборатории 1.Общая характеристика методов. 2.Методы агглютинации (гемагглютинация, латексная агглютинация). Принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. 3.РСК, принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. 4.Реакция преципитации в жидкой фазе (турбидиметрия, нефелометрия). Принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. 3.Иммуноэлектрофорез, принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. 5.Ракетный иммуноэлектрофорез. Принцип, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Иммуноферментный и радиоиммунный анализ 1.Иммуноферментный анализ. Приборы для ИФА. Измерительное и вспомогательное оборудование для проведения ИФА. 2.Классификация методов ИФА. Принцип проведения, преимущества, недостатки, аналитические характеристики, применение в КДЛ. 3.Основные этапы ИФА. Возможные ошибки при проведении ИФА. Оценка результатов ИФА. 4.Радионуклидный анализ. Принцип метода. Этапы исследования, преимущества и недостатки. Расчет результатов. 5.Реагенты и наборы для радионуклидного анализа. Приборы для радионуклидного анализа, основные типы, преимущества, недостатки, техника безопасности. 6.Иммунофлуоресцентный и иммунохемилюминесцентный анализ. Принцип проведения, преимущества, недостатки, применение в КДЛ. 7.Иммуноблотинг, принцип, интерпретация результатов, применение в КДЛ. Электрофорез. Хроматография 1.Классификация методов, основанных на явлениях электрофореза. 2.Принцип метода электрофореза. Правила подготовки материала для исследований. Учет результатов. 3.Варианты электрофореза. Применение методов электрофореза в КДЛ. 4.Денситометры, принципы функционирования, применение в КДЛ. 5.Понятие о хроматографии, основные термины. 6.Принципы классификации хроматографических методов, общая схема хроматографического исследования. Оптимизация условий хроматографического разделения. Автоматизация процесса разделения. 7.Правила подготовки материала для исследований. Учет и представление результатов. 8.Основные виды хроматографии: адсорбционная, ионообменная, гель-фильтрация, аффинная. Принцип проведения, преимущества, недостатки, аналитические характеристики, применение в КДЛ. 9.Тонкослойная хроматография. Колоночная жидкостная хроматография. Принцип проведения, преимущества, недостатки, аналитические характеристики, применение в КДЛ. Молекулярно-биологические методы исследования 1.Основные положения и принципы методов. 2.Организация ПЦР-лаборатории. 2.3.1.13. 3.Особенности преаналитического этапа молекулярно-биологических методов исследований. 4.Полимеразная цепная реакция. Принцип проведения, преимущества, недостатки, аналитические характеристики, применение в КДЛ. 5.Модификации метода ПЦР: гнездовая ПЦР, ПЦР в реальном времени, ПЦР in situ. Принцип проведения, преимущества, недостатки, аналитические характеристики, применение в КДЛ. 6. Методы выявления продуктов реакции амплификации. Тема: Микроскопические методы лабораторного анализа. 1. Виды световых микроскопов. Принцип работы. Комплектация. Дополнительные принадлежности для расширения функциональных возможностей. Уход за микроскопом. 2. Классификация объективов. Работа на малом и большом увеличении. Виды иммерсии. Правила настройки и работы. 3. Классификация объектов микроскопии. Микроскопия нативных и окрашенных препаратов. Представление результатов. 4. Счетные камеры для микроскопии клеток: камера Горяева, камера ФуксаРозенталя. Расчет результатов. 5. Методы контрастирования (метод темного поля, метод фазового контраста). 6. Инвертированный биологический микроскоп, использование в КДЛ. 7. Стереоскопический микроскоп, использование в КДЛ. 8. Люминесцентная микроскопия. 2.3.1.14. Тема: Цитохимические и цитогенетические методы исследования в клинической лаборатории 1.Общие принципы цитохимических методов исследования, преимущества и недостатки. Особенности аналитической процедуры и выражение результатов 2.Цитохимические методы исследования клеток периферической крови. Клиникодиагностическое значение. 3.Цитогенетические методы исследования и их применение в КДЛ. 2.3.1.16 Итоговое занятие