1 ГОУ ВПО «Владивостокский Государственный медицинский университет Минздравсоцразвития РФ» Кафедра фармацевтической химии и фармакогнозии Комплект учебно-методических материалов к Учебно-методическому комплексу (фармакогнозия) Методические указания по подготовке к практическим занятиям по фармакогнозии специальности 060108 «Фармация» «ОСВОЕНИЕ ФАРМАКОПЕЙНЫХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОДЛИННОСТИ РАЗЛИЧНЫХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ГРУПП ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ» для студентов 3 курса фармацевтического факультета 5 семестр и 2 курса 3 семестр ВВ и ДО Утверждены на методическом совещании кафедры от______________2011г. Протокол № Владивосток 2011 г. 2 1. Тема: «ОСВОЕНИЕ ФАРМАКОПЕЙНЫХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОДЛИННОСТИ РАЗЛИЧНЫХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ГРУПП ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ» 2. Мотивация: В связи с возросшим ассортиментом медицинских и фармацевтических товаров сформировать профессиональные знания и умения по выбору и использованию необходимой нормативной документации и справочной литературы на медицинские и фармацевтические товары при проведении товароведческого анализа. 3. Цель обучения, воспитания и развития: Сформировать и закрепить у студентов профессиональные знания по основным понятиям и определениям классификаций медицинских и фармацевтических товаров, по структуре и основным разделам Государственных реестров, классификаторов и справочников. 4. Задачи обучения, воспитания и развития: Научить работать с Государственными реестрами, классификаторами, составлять торговую классификацию для отдельных классов, подклассов, групп, подгрупп, и видов товаров медицинского назначения. 5. Этапы проведения практического занятия № Название этапа Цель этапа Время п/п 1 2 3 I. Вводная часть занятия 1. Организация занятия Мобилизовать внимание студентов на данное занятие темы, Раскрыть практическую значимость цели, занятия в системе подготовки провизора, сформировать мотив и, как следствие, активизировать познавательную деятельность студентов 2. Определение мотивации, задач занятия 4 5-10% 15 мин. 3 II. Основная часть занятия 80-90% 150мин. 3. 4. 5. 6. 7. 9. 10. 6. Контроль исходных Проверка готовности студентов к ЗУН занятию, выявление исходного уровня ЗУН, обеспечение единого исходного уровня, написание входного тестового контроля, опрос по контрольным вопросам Общие и Дифференцированное ориентирование индивидуальные студентов к предстоящей задания на СДС в самостоятельной их деятельности – учебное время определение вариантов задач на изучаемый раздел Демонстрация Показать ориентировочную основу методики действия (ООД) и унифицировать методику. Решение задач по изучаемой теме Управляемая СДС в Овладение необходимыми учебное время профессиональными У и Н, решение студентами задач по индивидуальным вариантам Итоговый контроль Закрепление ЗУН, овладение алгоритмами, выявление индивидуальных и типичных ошибок и их корректировка, решение задач выходного контроля 5-10% III. Заключительная часть занятия 15 мин. Подведение итогов Оценка деятельности студентов, занятия определение достижения цели занятия Общие и Указание на самоподготовку индивидуальные студентов, ее содержание и характер задания на СДС во вне учебное время Ориентировочная основа действия (ООД) для проведения самостоятельной деятельности студентов (СДС) или курсантов (СДК) в учебное время. Продолжительность занятия: 4 часа (180 мин.). Учебная цель: 4 - освоить фармакопейные методы установления подлинности лекарственного растительного сырья; - освоить технику проведения микроскопического анализа по соответственной нормативной документации; - научиться определять подлинность сырья по совокупности микроскопических и гистохимических признаков; - научиться пользоваться ГФ и другой нормативной документацией (НД) на лекарственное сырье; - научиться анализировать необычные ситуации и находить способы решения возникших проблем. - освоить методики качественного химического анализа лекарственного растительного сырья, микрохимического анализа; - освоить и отработать технику приготовления временных микропрепаратов цельного растительного сырья; - освоить технику микроскопического исследования лекарственного сырья; - освоить технику гистохимического, микрохимического, химического исследования лекарственного растительного сырья. Самоподготовка. Требования к исходному уровню знаний На основании знаний по ботанике, органической и аналитической химии уметь определять подлинность сырья по совокупности анатомических признаков, выполнять качественные реакции на наличие биологически активных веществ в сырье согласно требованиям НТД. Вопросы для самоподготовки. 1. В чем состоит цель микроскопического анализа? 2. Опишите технику приготовления временных препаратов. 3. На основании знаний по ботанике назовите и дайте определение основным микроскопическим диагностическим признакам различных морфологических групп лекарственного растительного сырья (ЛРС): листьев, цветков, трав, плодов, семян, коры, корней, корневищ, клубней, луковиц. 4. Как сделать поперечный срез коры, корня? 5. Как сделать поперечный срез мелких семян? 6. Назовите индифферентные и просветляющие жидкости. 7. Назовите формы кристаллов кальция оксалата. 8. Назовите различные типы волосков, железок. 9. Как отличить при микроскопии корни растений от кор? 10. Назовите реактивы на слизь, крахмал, целлюлозу, одревесневшие элементы, инулин, на жирные и эфирные масла. 5 Необходимость в микроскопическом и микрохимическом исследовании возникает при анализе резаного, порошкованного, прессованного, гранулированного лекарственного растительного сырья, а также при необходимости отличить ЛРС от возможных примесей, внешний вид которых сходен с официнальным сырьем. Разделы «Микроскопия» в фармакопейных статьях ГФ XI содержат микроскопическую характеристику как цельного ЛРС, так и растительного порошка без указания степени измельчения. Микроскопический анализ не может быть окончательным критерием идентификации растительного сырья. Только в совокупности с другими методами анализа (макроскопическим, химическим, хроматографическим, люминесцентным) можно достоверно установить подлинность объекта исследования. Оборудование, материалы. Для проведения микроскопического анализа требуется ряд оптических приборов и вспомогательных инструментов. Основные из них: микроскоп, лупа, объективный и окулярный микрометры. Для приготовления срезов сырья используют набор ботанических инструментов. Чаще всего это бритва и в особых случаях, если требуется получить серию очень тонких срезов — микротом. Работа на занятии. Объекты для изучения основных микроскопических диагностических признаков: образцы цельного лекарственного растительного сырья различных морфологических групп листья ландыша, сенны, мяты перечной, крапивы, брусники; кора дуба, калины; цветки календулы, липы, ромашки аптечной; подземные органы — корневища с корнями валерианы, корни девясила, корни алтея, корневища аира; корневища змеевика; семена и плоды — семена льна, плоды тмина, плоды шиповника, плоды боярышника; трава спорыша, череды, пустырника; кора дуба, калины, крушины ломкой. Задание 1. Проведите микроскопический анализ цельного лекарственного растительного сырья «листья» по соответствующим частным статьям ГФ XI. Запишите в альбом: 1. Латинское и русское название сырья, производящего растения, семейства. 2. Название НД, по которой будете проводить анализ сырья. 6 3. Приготовьте препарат листа с поверхности (один или два объекта по указанию преподавателя). 4. Изучите под микроскопом вначале при малом увеличении (далее — м/у), а затем при большом увеличении (далее — б/у) микро- препараты листьев. 5. Последовательно в каждом препарате изучите эпидерму. Отметьте форму эпидермальных клеток, тип устьичного аппарата, характер трихом (волоски, железки), наличие и форму кристаллических включений, механических тканей, различных вместилищ, млечников, секреторных каналов и другие диагностические признаки, характерные для листьев. 6. Сравните выявленные диагностические признаки с описанием раздела «Микроскопия» в частной фармакопейной статье ГФ XI на определенный вид сырья. 7. Сделайте вывод о подлинности объекта исследования. 8. Зарисуйте в рабочем журнале и обозначьте найденные вами диагностические признаки. Методика приготовления микропрепаратов листьев, трав, цветков «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья», Государственная фармакопея, XI издание, с. 277-279) Растительный материал, отобранный для микроскопического изучения, помещают в пробирку и проводят его обработку для просветления: растительный материал заливают 2—3% раствором едкого натра и кипятят в течение 1—2 мин. После этого жидкость осторожно сливают, а материал тщательно промывают водой и помещают в чашку Петри. Кусочки сырья вынимают из воды с помощью скальпеля (или лопаточки) и препаровальной иглы и помещают на предметное стекло в каплю раствора глицерина или воды. На предметном стекле его кусочек 4 мм разделяют скальпелем или препаровальной иглой на две части; одну из них осторожно переворачивают, чтобы получить возможность наблюдать лист под микроскопом с верхней и нижней сторон. Стекла, используемые для приготовления микропрепаратов, должны быть чистыми и сухими. Препарат на предметном стекле накрывают покровным стеклом. При неосторожном накладывании покровного стекла в препарате часто образуются пузырьки воздуха, поэтому стекло следует класть наклонно, прикоснувшись сначала одним краем к жидкости, а затем, придерживая стекло иглой, положить полностью. Попавшие пузырьки воздуха можно удалить легким постукиванием по покровному стеклу тупым концом препаровальной иглы или слегка подогреть над пламенем горелки. После 7 охлаждения рассматривают под микроскопом, сначала при малом, затем при большом увеличении. Если включающая жидкость не заполняет всего пространства между предметным и покровным стеклом или она испарилась при нагревании препарата, то ее добавляют сбоку небольшими каплями. Если наоборот, покровное стекло свободно плавает вследствие избыточного количества жидкости, то ее следует отсосать при помощи полоски фильтровальной бумаги, подведенной сбоку. При приготовлении микропрепарата из толстых листьев предварительно раздавливают скальпелем толстые жилки, а с пластинки стараются снять эпидермис или, размяв лист, отделяют мезофилл от эпидермиса, чтобы препарат был более тонким. Задание 2. Проведите микроскопический анализ цельного лекарственного растительного сырья – кора по соответствующим частным статьям ГФ ХI. Запишите в альбом: 1. Латинское и русское название сырья, производящего растения, семейства. 2. Название НД, по которой будете проводить анализ сырья. 3. Приготовьте препарат поперечного среза коры. 4. Изучите под микроскопом вначале при м/у, а затем при б/у препарат поперечного среза коры. 5. Изучите основные диагностические признаки коры. 6. Обратите внимание на характер и соотношение первичной и вторичной коры, механические элементы, кристаллические включения кальция оксалата. 7. Сравните обнаруженные вами диагностические признаки с описанием раздела «Микроскопия» в частной фармакопейной статье ГФ XI. 8. Сделайте вывод о подлинности объекта исследования. 9. Зарисуйте в рабочем журнале строение коры и обозначьте выявленные вами диагностические признаки. Пробка (толщина, количество слоев и цвет) Основная паренхима (форма клеток, наличие включений) Сердцевинные лучи (однорядные, многорядные, воронковидные) Механические элементы: лубяные волокна, склериды (их расположение) Кристаллические включения (одиночные кристаллы, друзы, кристаллоносная обкладка) Методика приготовления микропрепарата цельной коры (выписка из общей фармакопейной статьи «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» Государственной фармакопеи, XI издание, с. 280—281) Готовят поперечные или продольные срезы коры. Кусочки коры размером 2—3 х 0,5—1 см кипятят в пробирке с водой в течение 5 мин. 8 Размягченные куски выравнивают скальпелем так, чтобы они имели строго поперечное или продольное сечение. Делают срезы и готовят микропрепараты в растворе глицерина. Одревесневшие (лигнифицированные) элементы. К срезу на предметное стекло прибавляют несколько капель раствора флороглюцина и 1 каплю 25% раствора серной кислоты. Через минуту жидкость отсасывают полоской фильтровальной бумаги, срез заключают в раствор глицерина и закрывают покровным стеклом (рассматривают без прогревания); одревесневшие механические элементы окрашиваются в малиново-красный цвет. Крахмал. Для обнаружения крахмала делают соскоб с сухой коры и рассматривают его в растворе Люголя. Крахмальные зерна окрашиваются в синий цвет. Задание 3. Проведите микроскопический анализ лекарственного растительного сырья из группы подземных органов: 1. Приготовьте препарат поперечного среза корня или корневища (по указанию преподавателя). Изучите микропрепарат подземных органов сначала при малом увеличении, затем – на большом, выявите диагностические признаки. 2. Последовательно в каждом препарате изучите строение (первичное или вторичное), наличие и характер покровной и механической ткани, проводящих пучков, наличие и форму кристаллических включений, секреторных структур (вместилища, млечники, секреторные клетки и др.) 3. Сравните обнаруженные вами диагностические признаки с описанием раздела «Микроскопия» в частной фармакопейной статье ГФ XI. 4. Сделайте вывод о подлинности объекта исследования. 5. Запишите русское и латинское названия анализируемого сырья. 6. Зарисуйте в рабочем журнале строение образца анализируемого сырья по указанию преподавателя и обозначьте выявленные вами диагностические признаки: Строение: первичное пучковое; вторичное пучковое; беспучковое, переходное Покровная ткань (эпидерма, пробка) Сердцевинные лучи (форма и структура) Основная паренхима (плотная, рыхлая, аэренхима и др.) Секреторные образования (вместилища, млечники, секреторные ходы) Кристаллические включения. Методика приготовления микропрепарата цельных подземных органов (выписка из общей фармакопейной статьи «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» Государственной фармакопеи, XI издание, с. 282) 9 Размоченные объекты выравнивают скальпелем так, чтобы они имели строго поперечное или продольное сечение. Делают срезы и готовят микропрепараты в растворе глицерина и рассматривают диагностические признаки сначала при малом, затем при большом увеличении. С соскобом сухих подземных органов или порошком проводят необходимые микрохимические реакции. Наличие одревесневших элементов, крахмала, слизи, жирного и эфирного масла определяют, как указано в разделах «Плоды и семена» и «Коры». Инулин. Для обнаружения инулина на предметное стекло помещают около 0,1 г порошка, 1—2 капли раствора α-нафтола (резорцина или тимола) и 1 каплю концентрированной серной кислоты; появляется красновато-фиолетовое окрашивание (от резорцина и тимола — оранжево-красное). О наличии инулина можно делать выводы только при отсутствии крахмала. При изучении корней и корневищ обращают внимание на тип строения (первичное или вторичное строение), характер расположения проводящей ткани (пучковый или беспучковый тип строения). При пучковом типе строения обращают внимание на строение проводящих пучков (открытые или закрытые, коллатеральные или концентрические), характер их расположения и т. д.; при беспучковом типе — на характер древесины, расположение в ней сосудов, на ширину сердцевинных лучей. Проводящие элементы луба обычно не играют никакой роли при определении корней, корневищ, клубней, так как их строение, как правило, не имеет каких-либо особенностей. Только в некоторых растениях ситовидные трубки с возрастом растения претерпевают изменения, подвергаются облитерации (теряют функцию проводящей ткани), превращаясь в бесформенную, сдавленную массу (солодка, барбарис и др.). В этом случае наличие деформированного (облитерированного) луба является характерным для данного вида сырья. В корнях и корневищах многих растений имеются механические элементы (волокна, реже каменистые клетки). Их форма и характер расположения играют большую роль при определении сырья. В некоторых корнях и корневищах имеются млечники (кендырь, одуванчик), в других — секреторные вместилища с эфирным маслом или смолой (девясил, женьшень, левзея); их строение, форма и расположение в тканях корня или корневища имеют важное диагностическое значение. В паренхиме корней, корневищ, клубней всегда имеется запасное питательное вещество. Чаще всего это крахмал, у растений семейства сложноцветных — инулин, у некоторых других растений (истоды, горечавка, синюха) — жирное масло. Характер запасного питательного вещества имеет большое значение при определении корней, корневищ, клубней. Особенно большую роль играет при этом крахмал, так как размеры и форма крах- 10 мальных зерен (простые — круглые, овальные, многоугольные и т. д.; сложные из 2—3 или нескольких зерен) являются характерными для каждого вида растения. Многие растения в подземных органах содержат кристаллы щавелевокислого кальция. Задание 4. Проведите микроскопический анализ лекарственного растительного сырья плодов и семян: 1) Приготовьте препарат поперечного среза семян льна и плодов тмина. 2) Изучите под микроскопом вначале при м/у, а затем при б/у микропрепараты поперечных срезов семян льна и плодов тмина. 3) В каждом препарате изучите строение околоплодника, характер эпидермы, форму клеток паренхимы, наличие и форму трихом, кристаллических включений, секреторных структур (вместилища, млечники, секреторные клетки и др.). 4) Сравните обнаруженные вами диагностические признаки с описанием раздела «Микроскопия» в частной фармакопейной статье ГФ XI, сделайте вывод о подлинности объекта исследования. 5) Запишите русское и латинское названия анализируемого сырья. 6) Зарисуйте в рабочем журнале строение одного из образцов анализируемого сырья и обозначьте выявленные вами диагностические признаки. Методика приготовления микропрепаратов цельных плодов и семян (выписка из общей фармакопейной статьи «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» Государственной фармакопеи, XI издание, с. 279—280) Готовят препараты кожуры семени и околоплодника с поверхности и поперечные срезы. Препараты кожуры семени и околоплодника с поверхности. 2—3 семени или плода кипятят в пробирке в растворе 5% едкого натра в течение 2—3 мин и тщательно промывают водой. Объект помещают на предметное стекло, препаровальными иглами отделяют кожуру семени или ткани околоплодника и рассматривают их в растворе глицерина. Срезы. Для приготовления срезов сухие плоды и семена предварительно размягчают, поместив их на сутки во влажную камеру (влажной камерой служит эксикатор с водой, в которую добавлено несколько капель хлороформа) или водяным паром в течение 15—30 мин или более в зависимости от твердости объекта. 11 Мелкие плоды и семена запаивают в парафиновый блок размером 0,5 х 0,5 х 1,5 см. Кончиком нагретой препаровальной иглы расплавляют парафин и в образовавшуюся ямку быстро погружают объект. Срезы объекта делают вместе с парафином; срезы выбирают из парафина препаровальной иглой, смоченной жидкостью, и готовят микропрепарат в растворе глицерина. В порошке плодов диагностическое значение имеют обычно механические элементы, обрывки эфирномасличных канальцев (для зонтичных), иногда расположенные на эпидермисе плода волоски. При изучении семян под микроскопом обычно обращают внимание на общее строение семени (характер кожуры, величину запасной питательной ткани — эндосперма, форму и расположение зародыша — корешка, семядолей, почечки зародыша). Более детально изучают кожуру семени, которая почти всегда состоит из нескольких слоев характерного строения. Наиболее важное диагностическое значение имеет механический слой кожуры, который состоит или из вытянутых элементов (типа волокон), или из округлых, изодиаметрических. Строение эндосперма и тканей зародыша, как правило, у всех растений мало чем отличается, поэтому не имеет диагностического значения. Лишь в некоторых случаях (у семян чилибухи, плодов зонтичных) эндосперм имеет очень характерное строение и может в числе других служить диагностическим признаком. Задание 5. Проведите гистохимические реакции обнаружения БАВ в ЛРС одним из методов. Объекты для проведения гистохимических реакций: корни алтея, семена льна, корни одуванчика, девясила, корневище аира, кора крушины, кора дуба или калины. Приготовьте препарат поперечного среза объекта. Изучите под микроскопом вначале при м/у, а затем при б/у микропрепараты поперечных срезов по ниже перечисленным методикам. Запишите результат реакции БАВ с реактивом. Определение подлинности растительного сырья Методика. 1. Поперечный срез или порошок сухого сырья помещают на предметное стекло, прибавляют один из реактивов и накрывают покровным стеклом. 2. Препарат помещают на предметное стекло, накрывают его покровным стеклом, а реактив капают рядом с покровным стеклом. 12 Затем подносят фильтровальную бумагу к противоположному углу стекла. При этом жидкость засасывается под стекло, а элементы клеток или клеточное содержимое вступает в химическое взаимодействие с реактивом. При использовании второго метода под микроскопом можно наблюдать за ходом реакции. Природу клеточной оболочки можно установить реакциями на целлюлозу и на лигнин (одревеснение). Целлюлоза (клетчатка). Поперечный срез или порошок (соскоб) сухого сырья помещают на предметное стекло и прибавляют один из следующих реактивов: а) хлор-цинк-йод — окрашивает клетчатку в сине-фиолетовый цвет; пробка и кутикула могут принимать окраску от желтой до коричневой; б) йод с кислотой серной — окрашивает целлюлозу в синий цвет; окраска интенсивнее, когда в клеточной оболочке больше целлюлозы и меньше других компонентов (лигнина, кутиноподобных веществ и др.); в) аммиачный раствор меди (II) оксида — под его влиянием клетчатка медленно разбухает и растворяется, кутикула остается нерастворенной; г) раствор Люголя (0,5 %-ный раствор йода в 1 %-ном растворе калия йодида) — окрашивает целлюлозу в желтый цвет. Одревесневшие или лигнифицированные стенки клеток . Срез корня алтея помещают на предметное стекло в 1 %-ный спиртовый раствор флороглюцина. Реактив удаляют фильтровальной бумагой, а на срез наносят каплю кислоты хлористоводородной концентрированной и через 1 минуту прибавляют каплю глицерина. Срез накрывают покровным стеклом и изучают под микроскопом при м/у. Одревесневшие оболочки клеток приобретают вишневое окрашивание. Крахмал. Поперечный срез корня алтея помещают на предметное стекло и добавляют 1—2 капли раствора Люголя. Крахмальные зерна окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Для определения формы, типа и размеров крахмальных зерен препарат готовят в воде или 30 %-ном растворе глицерина. Слизь. Поперечный срез корня алтея или порошок семян льна помещают на предметное стекло и прибавляют один из перечисленных ниже реактивов. Реакция с метиленовым синим. Срез помещают на несколько минут в спиртовый раствор метиленового синего (1:5000), затем переносят в глицерин. Слизь окрашивается в голубой цвет. С меди сульфатом и щелочью. Срез помещают на 5—10 мин в насыщенный раствор меди сульфата, промывают водой и переносят в 50 %ный раствор калия гидроксида. Слизь окрашивается в голубой цвет (растения сем. мальвовых) или в зеленый (растения сем. лилейных). Реакция с тушью. Порошок сырья помещают на предметное стекло в каплю свежеприготовленного раствора туши (1:10) и перемешивают иголкой. 13 На темно-сером фоне выделяются беловатые клетки со слизью, не окрашенные тушью (слизь препятствует проникновению туши). Инулин. Реакция Молиша является общей на углеводы, но ею пользуются для обнаружения инулина в отсутствие крахмала (в основном у растений семейства сложноцветных). Обработка микропрепарата спиртом усиливает формирование сферокристаллов инулина. Поперечный срез корня одуванчика или девясила помещают в 1—2 капли раствора α-нафтола (или тимола) и вводят 1 каплю кислоты серной концентрированной, появляется розово-фиолетовое окрашивание (α-нафтол) или карминово-красное (тимол). Крахмал вступает в указанные реакции, поэтому его присутствие надо исключить, проведя предварительно реакцию с йодом. Эфирное масло. Поперечный срез аира помещают на 2—3 мин в раствор Судана III, а затем просматривают в воде или 30 %-ном растворе глицерина. Клетки, содержащие эфирное масло, окрашиваются в зеленый цвет. Жирное масло. Срез семян льна помещают на 2—3 мин в раствор Судана III, затем реактив удаляют фильтровальной бумагой, а срез промывают 50 %-ным спиртом и переносят в глицерин. Капельки жирного масла окрашиваются в оранжево-красный цвет. Гидроксиантрахиноны. Поперечный срез коры крушины помещают на предметное стекло в каплю 5 %-ного раствора натрия гидроксида или аммония гидроксида, прибавляют каплю глицерина, накрывают покровным стеклом и наблюдают под микроскопом красное или фиолетово-красное окрашивание тканей, в которых локализуются антраценпроизводные. Дубильные вещества. Поперечный срез коры дуба или коры калины помещают в каплю 1 %-ного раствора железа (III) хлорида или 1 %-ного раствора железоаммониевых квасцов, реактив удаляют фильтровальной бумагой, на предметное стекло наносят каплю воды, глицерина или хлоралгидрата, накрывают покровным стеклом и наблюдают окрашивание препарата под микроскопом. Ткани, содержащие дубильные вещества, окрашиваются в черно-синий или черно-зеленый цвет. Практические навыки 1. Уметь определять подлинность сырья по совокупности внешних, анатомических, гистохимических признаков с использованием НТД. 2. Уметь выполнять качественные реакции по обнаружению в сырье биологически активных веществ согласно требованиям НТД. 3. Уметь готовить анатомические препараты из различных морфологических групп сырья. 14 Список литературы для подготовки к занятиям 1. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия. М.: Медицина, 2002. 2. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия. Учебное пособие. Под ред. Г.П.Яковлева и К.Ф.Блиновой. Санкт-Петербург, СпецЛит, 2004. 3. Государственная Фармакопея СССР, Х1 изд., том 1,2. – М.: Медицина, 1988,1990,( т.2, стр.252-265, 277-282 )