Методичка для студентов (1

МЕТОДИЧКА ДЛЯ СТУДЕНТОВ
к 1 занятию по клинической цитологии.
Тема занятия: Введение. Роль цитологических исследований в профилактической и
диагностической медицине. Техника безопасности при работе с цитологическим материалом
(регламентирующие документы).
1. Основные вопросы темы
1. Основные задачи применения цитологических исследований
2. Основные лабораторные методы цитологических исследования
3. Правила техники безопасности при работе в цитологической лаборатории
Цитология это наука, которая изучает клетки, их строение, функционирование,
процессы размножения, старения и смерти. А так же отдельные клеточные структуры, их
участие в общеклеточных физиологических процессах, пути регуляции этих процессов,
воспроизведение клеток и их компонентов, приспособление клеток к условиям среды,
реакции на действие различных факторов, патологические изменения клеток.
Клиническое
цитологическое
исследование
-
это
оценка
характеристик
морфологической структуры клеточных элементов в цитологическом препарате (мазке) для
установления
диагиоза
доброкачественной
или
злокачественной
трансформации
и
неопухолевых поражений. С помощью микроскопа оцениваются особенности строения
клеток, клеточного состава органов, тканей, жидкостей организма человека в норме и при
патологических процессах. Отличие цитологического исследования от гистологического
заключается в том, что изучаются не срезы тканей, а клетки; заключение основывается на
особенностях
изменения
образования структур
ядра,
цитоплазмы,
и комплексов клеток.
ядерно-цитоплазменного
соотношения,
В настоящее время цитологические
исследования широко применяются в клинической диагностике различных заболеваний.
Цитологический анализ используют при:

При массовых профилактических осмотрах;

Для установления или уточнения диагноза при каком-либо заболевании;

Для установления или уточнения диагноза во время оперативного вмешательства;

Для контроля над эффективностью лечения, как во время его проведения, так и после
его завершения;

Для своевременного выявления рецидивов (возобновления) каких-либо болезней.
1
Материалы для проведения исследования могут быть различными. Выбор способа их
получения зависит от характера поражения органов и тканей. Обычно под микроскопом
исследуют:

Мокроту;

Мочу;

Сок предстательной железы;

Цереброспинальную (полученную из спинномозгового канала) жидкость;

Амниотическую жидкость (околоплодные воды);

Соскобы с различных поверхностей (например, с шейки матки, с поверхности ран,
язв, некоторых опухолей);

Материал, который получен при проведении эндоскопического обследования
бронхов, желудка, кишечника;

Жидкости из полостей суставов или серозных полостей (брюшной, плевральной,
околосердечной);

Материал, полученный при пункции различных органов (например, молочной
железы, лимфатических узлов);

Отпечатки с поверхности разреза удаленных при операции органов.
На
правильность
конечных
результатов
цитологического
исследования
непосредственное влияние оказывает качество взятого на исследование материала,
соблюдение всех правил его обработки, вплоть до окраски цитологического препарата.
В нашей стране клиническая цитология является разделом лабораторной диагностики
в связи с тем, что традиционно исследование клеточного состава входит в комплекс
клинических лабораторных анализов - кровь, костный мозг, экссудаты, отделяемое
различных органов. Важная роль принадлежит цитологическим исследованиям при
массовых
профилактических
осмотрах,
особенно,
групп
с
повышенным
риском
злокачественных новообразований. Ранняя и своевременная диагностика опухолей при
скрининге организационно складывается из двух этапов:
1. Массовое обследование населения (скрининг всей популяции или только групп
повышенного риска) для выявления опухолей или признаков, не позволяющих исключить
опухоль.
2. Уточняющая диагностика в отобранных во время скрининга случаях, в
сравнительно небольших группах.
На 1-м этапе основным требованием к цитологическому исследованию как скринингтесту является высокая чувствительность (т.е. высокая частота обнаружения клеток опухоли
2
у больных со злокачественными новообразованиями и низкое число так называемых
«ложноотрицательных»
результатов)
при
однократном
исследовании
материала.
Цитологическое исследование мазков из шейки матки является высокоэффективным
скрининг-тестом по раку этой локализации, ибо примерно в 10 раз повышает выявляемость
опухолей по сравнению с визуальным обследованием; при этом значительно увеличивается
откосительная частота обнаружения рака в ранних и доклинических стадиях процесса.
На 2-м этапе ранней диагностики опухолей, наряду с необходимостью высокой
чувствительности,
к
цитологическому
методу
предъявляется
требование
вькокой
специфичности (т.е. низкое число так называемых «ложноположительных» диагнозов
злокачественного новообразования
Требования к обеспечению безопасности труда медицинского персонала при
цитологическом исследовании
Требования по безопасности труда при выполнении технологии соответствуют общим
правилам безопасности при работе в клинико-диагностической лаборатории согласно. ГОСТ
Должны соблюдаться правила биологической безопасности, правила сбора и удаления
отходов, правила работы с электроприборами и реактивами, пожарной безопасности.
Требования биологической безопасности.
Все образцы, содержащие биологический материал (аспират, мазки), являются
источниками
инфекции.
Для
соблюдения
биологической
безопасности
выполняют
следующие правила:
а) распаковка присланного в цитологическую лабораторию биологического материала
проводится в индивидуальных средствах защиты (халаты, резиновые перчатки);
б) мазки, поступающие в лабораторию, помещают на металлические или пластиковые
подносы;
г) не допускается оставлять на столах нефиксированные мазки;
д) после окончания работы сотрудники должны проводить дезинфекцию рабочих мест
и помещений лаборатории в резиновых перчатках.
Для обеззараживания используются
средства, обеспечивающие уничтожение вирусной и бактериальной флоры, рекомендуемые
для дезинфекции 2, 3.
Потенциально опасные отходы, загрязненные остатками биологического материала,
образующиеся в процессе выполнения технологии, дезинфицируют, затем
собирают в
герметическую одноразовую упаковку и удаляют из лаборатории в контейнерах,
установленных в определенных местах на территории учреждения.
3
Все
безопасности,
применяемым
сотрудники
изложенные
в
должны
выполнять
технических
инструкции
паспортах
к
и
правила
электрическим
техники
приборам,
при исследовании: электронным весам, микроскопу. Все сотрудники
лаборатории, работающие с химическими реактивами, должны быть обучены обращению с
ними, использовать средства персональной защиты, соблюдать правила личной гигиены.
Для
предупреждения
пожаров
необходимо
соблюдать
правила
пожарной
безопасности в соответствии с действующими нормативными документами.
Правила по технике безопасности
К работе в лаборатории допускаются студенты, прошедшие инструктаж по технике
безопасности.
Нужно работать в белом халате из хлопчатобумажной ткани и иметь личное
полотенце.
На каждом занятии назначается дежурный, который отвечает за чистоту и порядок.
За каждым студентом закрепляется рабочее место, которое необходимо содержать в
чистоте и порядке.
Запрещается держать в лаборатории пищевые продукты, принимать пищу, пить воду
из химической посуды.
Перед работой следует проверить исправность нагревательных приборов, вентиляции,
защитных средств. Ремонт оборудования может производить только инженер.
Запрещается работать с разбитой посудой, пользоваться реактивами из банок без
этикеток.
Необходимо переливать приготовленные растворы в склянки с надписями.
Нельзя оставлять без присмотра включенные приборы и электрооборудование.
Работать с летучими и ядовитыми веществами можно только под тягой.
Использовать для отмеривания кислот, щелочей и ядовитых реактивов нужно
цилиндры либо пипетки с резиновой грушей или ватным тампоном.
При работе с едкими веществами следует надевать предохранительные очки,
резиновые перчатки и фартуки.
Сливать кислые и щелочные реактивы в раковину можно только после их
нейтрализации.
Для нагревания горючих и летучих реактивов нужно пользоваться водяными банями.
Нельзя их нагревать на открытом огне или вблизи пламени.
При внезапном отключении тока необходимо выключить все электроприборы.
Тушить
огонь
при
загорании
легко
воспламеняющихся
углекислотным огнетушителем, песком или кошмой.
4
жидкостей
нужно
При загорании проводов следует немедленно их обесточить, тушить огонь
углекислотным огнетушителем или асбестовым покрывалом.
Работать с ртутными термометрами нужно очень осторожно.
После окончания работы привести в порядок рабочее место (убрать со стола реактивы
и оборудование, из ящиков стола мусор, стол вымыть, протереть сухой тряпкой) и сдать
дежурному.
Правила работы с микроскопом
Микроскоп необходимо содержать в чистоте и предохранять от повреждений. В
нерабочем состоянии микроскоп должен быть накрыт чехлом.
Особое внимание следует обращать на чистоту объективов и других оптических
деталей.
ВНИМАНИЕ! Нельзя касаться пальцами поверхностей линз. Для предохранения оптических деталей визуальной насадки от пыли следует оставлять
окуляры в тубусах или надевать на них колпачки.
Оптические поверхности окуляров, объективов и конденсора можно осторожно
протирать чистой ватой, навернутой на деревянную палочку и смоченной специальной
жидкостью для чистки оптических деталей.
При загрязнении внутренних поверхностей линз объектива необходимо объектив
отправить для чистки в оптическую мастерскую.
ВНИМАНИЕ! Запрещается самим разбирать объективы, окуляры, конденсор.
Рассмотрим важнейшие погрешности при работе с микроскопом, чтобы начинающие
исследователи не допускали их с самых первых шагов, добиваясь таким образом
максимального использования возможностей микроскопа.
К таким ошибочным действиям необходимо отнести следующие действия:
одновременное применение вогнутого зеркала и конденсора, что нарушает принцип
освещения препарата;
использование высокоапертурных конденсоров с NA = 1,2–1,4 с низкоапертурными
объективами с NA = 0,2–0,4, ухудшающих качество изображения. Для устранения этой
ошибки следует предварительно уменьшить нумерическую апертуру конденсора путем
снятия (отвинчивания) его верхней линзы;
произвольное опускание конденсора без учета толщины предметного стекла может
привести к появлению артефактов;
регулировка освещенности поля зрения микроскопа при помощи опускания и
поднятия конденсора поскольку это влияет на качество изображения;
5
произвольное изменение величины отверстия апертурной диафрагмы конденсора с
целью регулировки освещенности поля зрения микроскопа;
пренебрежение нейтральными светофильтрами и матовыми стеклами для регулировки
освещенности поля зрения микроскопа, что ухудшает восприятие препарата и может
оказывать отрицательное влияние на зрение исследователя;
применение толстых предметных стекол (толще 1, 2 мм), что препятствует
правильной установке освещения при высокоапертурных объективах,
поскольку при этом не удается сфокусировать конденсор на объекте;
применение покровных стекол несоответствующей толщины (толще или тоньше 0,17
мм);
пренебрежение созданием полной иммерсии при работе с объективами, имеющими
нумерическую апертуру более 1,2, что не позволяет полностью использовать нумерическую
апертуру объектива.
Меры безопасности при работе с микроскопом
При работе с микроскопом с осветителем следует соблюдать меры безопасности,
соответствующие мерам, принимаемым при эксплуатации электроустановок напряжением до
1000 В.
ВНИМАНИЕ! Замену лампы в осветителе микроскопа производить только при
отключении от электрической сети. Во избежание ожога кожи рук о колбу лампы или
контактные пластины патрона замену лампы следует производить через 15–20 мин после ее
перегорания.
Замену плавкой вставки (предохранителя) в микроскопе следует производить при
отключенном от сети микроскопе.
После работы на микроскопе с осветителем необходимо отключить его от сети.
Не рекомендуется оставлять без присмотра включенный в сеть микроскоп.
6