Белорусский государственный университет УТВЕРЖДАЮ Ректор Белорусского государственного университета ________________ С.В. Абламейко « 08 » ноября 2010 г. Регистрационный № УД- 3600 /уч. Учебная практика по направлению специальности Учебная программа для специальности: 1-31 01 01 Биология (по направлениям), направления 1-31 01 01-03 Биотехнология 2010 г. СОСТАВИТЕЛИ: Галина Григорьевна Филипцова, доцент кафедры физиологии и биохимии растений Белорусского государственного университета, кандидат биологических наук, доцент; Татьяна Ивановна Дитченко, доцент кафедры физиологии и биохимии растений Белорусского государственного университета, кандидат биологических наук, доцент РЕЦЕНЗЕНТЫ: Елена Владимировна Спиридович, заведующая сектором прикладной биохимии Государственного научного учреждения «Центральный ботанический сад Национальной академии наук Беларуси» кандидат биологических наук; Игорь Викторович Семак, заведующий кафедрой биохимии Белорусского государственного университета, кандидат биологических наук, доцент РЕКОМЕНДОВАНА К УТВЕРЖДЕНИЮ В КАЧЕСТВЕ УЧЕБНОЙ: Кафедрой физиологии и биохимии растений Белорусского государственного университета (протокол № 7 от 21 октября 2010 г.) Учебно-методической комиссией биологического факультета Белорусского государственного университета (протокол № 4 от 27 октября 2010 г.) Научно-методическим советом Белорусского государственного университета (протокол № 1 от 03 ноября 2010 г.) Ответственный за редакцию: Галина Григорьевна Филипцова Ответственный за выпуск: Галина Григорьевна Филипцова ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА Учебная практика по биотехнологии является неотъемлемой частью учебного процесса и направлена формирование у студентов целостной системы знаний по биотехнологии растений. При прохождении учебной практики студенты знакомятся с главными принципами современных биотехнологических и молекулярных методов исследования растений, осваивают методические приемы выращивания растений в замкнутых системах, в асептических условиях, получают каллусную и суспензионную культуру клеток растений, получают навыки использования биохимических и физиологических методов для исследования растений на разных уровнях организации. Таким образом, учебная практика по биотехнологии является важной частью подготовки высококвалифицированных специалистов – биотехнологов. Цель учебной практики – закрепление и углубление теоретических знаний, полученных студентами в процессе обучения, освоение методов получения протопластов, каллусных и суспензионных культур, изолированных ферментов и их практическое использование в биотехнологических процессах, приобретение опыта и навыков самостоятельной научноисследовательской работы. Задачи практики: - приобретение навыков планирования и проведения научноисследовательских экспериментов; - освоение правил пользования специальными приборами и оборудованием, необходимым для биотехнологических методов работы с растительными объектами; - освоение приемов работы с растительными объектами в асептических условиях (ламинар-боксе). - освоение методов получения и выращивания объекта исследования (культура клеток и тканей растений, протопласты и т.п.); - реферирование научной литературы; - знакомство с новейшие достижения в области биотехнологии растений в Республике Беларусь и за рубежом; - освоение компьютерных программ для статистической обработки и представления полученных данных; В результате прохождения учебной практики по специализации «Физиология растений» направление «Биотехнология» студент должен: знать: - правила работы в научно-исследовательской лаборатории и правила пользования специальным оборудованием; - основные требования проведения научно-исследовательского эксперимента (наличие контроля, воспроизводимость, статистическая обработка); - основные принципы получения и методы биохимического анализа биологически активных веществ растений; - новейшие достижения в области биотехнологии растений и перспективы их использования в различных областях народного хозяйства, медицины, фармации; уметь: - приготовить питательные, буферные и другие растворы различных концентраций; - планировать и проводить научно-исследовательский эксперимент; - проводить работы с растительными объектами в асептических условиях (ламинар-боксе); - выделять отдельные группы биологически активных веществ из нативных растений и каллусных клеток; - использовать компьютерные программы «Microsoft Word», «Microsoft Exсel» и другие для статистической обработки и представления полученных данных в виде таблиц, графиков, диаграмм и т.д.; - работать с научной и учебно-методической литературой. В период прохождения практики студенты обязаны: 1. Соблюдать действующие правила внутреннего распорядка предприятия или лаборатории; 2. Соблюдать правила эксплуатации оборудования, технику безопасности и охраны труда; 3. Выполнять задания, предусмотренные программой практики; 4. Нести ответственность за выполняемую работу и ее результаты. Основными базами учебной практики по биотехнологии являются: - кафедра физиологии и биохимии растений; - научно-исследовательская лаборатория «Физиологии растительной клетки» при кафедре физиологии и биохимии растений; - лаборатория биохимии и биотехнологии растений Центрального ботанического сада НАН Беларуси; - лаборатории Института биофизики и клеточной инженерии НАН Беларуси; - лаборатории Института экспериментальной ботаники НАН Беларуси. ОРГАНИЗАЦИЯ ПРАКТИКИ В соответствии с учебным планом продолжительность учебной практики по биотехнологии для студентов 3 курса составляет 5 недель (162 часа) при 6-часовом рабочем дне. Учебная практика состоит из двух разделов: работа группы студентов по общей программе (1 неделя) и самостоятельная работа студентов по индивидуальным программам (4 недели). Занятия и контроль за выполнением программы практики проводит руководитель практики от Белгосуниверситета. В течение первой недели практики (6 дней) студенты знакомятся с правилами работы в научно-исследовательской лаборатории; сдают технический минимум по технике безопасности; приобретают навыки приготовления различных растворов; осваивают методы получения, определения жизнеспособности и выращивания объекта исследований; знакомятся с устройством и правилами работы на специальном оборудовании. Оставшееся время студенты самостоятельно работают по индивидуальным планам, предусматривающим выполнение конкретной научноисследовательской задачи. Выполнение работы осуществляется на базе предприятия. СОДЕРЖАНИЕ ОБЩЕЙ ЧАСТИ ПРАКТИКИ Практика начинается с ознакомления студентов с задачами, формой проведения, распорядком рабочего дня, правилами ведения дневников и рабочих журналов. За студентами закрепляются рабочие места, выдается необходимая посуда и материалы, проводится инструктаж по правилам работы в научноисследовательских лабораториях, технике безопасности и охране труда. Примерный тематический план занятий студентов по общей программе: 1. Подготовка и использование химической посуды. 2. Подбор реактивов и приготовление питательных растворов, буферных смесей. 3. Определение рН растворов и питательных сред. 4. Освоение способов стерилизации посуды, растворов, растительных объектов. 5. Работа с растительными объектами в асептических условиях (ламинар-боксе). 6. Освоение оборудования, необходимого для физиологобиохимического анализа: химические и аналитические весы, центрифуги, спектрофотометры, иономеры и т.д. СОДЕРЖАНИЕ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЧАСТИ ПРАКТИКИ Со второй недели учебной практики студент работает по индивидуальному плану, который составляется научным руководителем и предусматривает работу студента над конкретной научной тематикой. Студенты, специализирующиеся на кафедре, осваивают и выполняют работы по следующим научным направлениям биотехнологии растений: культура клеток и тканей растений, суспензионные каллусные культуры, физиология протопластов, вторичные метаболиты растений, иммобилизованные клетки и ферменты. Помимо освоения конкретных методик исследования, студенты приобретают навыки работы со специальной литературой, знакомятся с новейшими достижениями в данной области науки в Республике Беларусь и за рубежом. На заключительной неделе практики студенты знакомятся со способами обработки полученных результатов, осваивают компьютерные программы «Microsoft Exсel», «Statistica» и др. для статистической обработки экспериментальных данных, получают навыки построения таблиц, графиков, диа- грамм и т.д. Данные, полученные в ходе практики, являются в дальнейшем основой для написания курсовой работы. Примерная тематика индивидуальных заданий студентов: Получение каллусных культур из эксплантов различных типов и определение эффективности каллусогенеза. Получение суспензионных культур и анализ степени их агрегированности. Определение показателей роста каллусных и суспензионных культур и построение кривых их роста Гормональная регуляция ростовых процессов каллусных культур. Получение изолированных протопластов из различных растительных тканей. Выделение растительных ферментов и определение их активности. Иммобилизация растительных клеток и ферментов в различных носителях и исследование их физиолого-биохимических характеристик. Создание биосенсоров на основе иммобилизованных растительных клеток и ферментов и освоение принципов их работы. Выращивание растений на искусственных субстратах (ионообменные смолы). Клональное микроразмножение растений. Освоение методов биологического тестирования воды и почвы. Определение активности ключевых ферментов биосинтеза вторичных метаболитов растений. Выделение и определение содержания флавоноидов в нативных растениях и культуре клеток. Определение качественного и количественного состава алкалоидов в растительных объектах. Выделение эфирных масел растений и исследование их биологической активности. Электрофоретический анализ белков листьев растений. Определение активности низкомолекулярных антиоксидантов в растениях. Экстракция биологически активных соединений из лекарственных растений. ЛЕКЦИИ И ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ЗАНЯТИЯ Лекции и семинары по современным направлениям биотехнологии растений проводятся ведущими специалистами-биологами, сотрудниками НИИ системы НАН Беларуси. ЭКСКУРСИИ ВО ВРЕМЯ ПРАКТИКИ В целях ознакомления студентов с оборудованием, современными биотехнологическими и физиолого-биохимическими методами исследований растений в ходе практики предусмотрено проведение экскурсий в Институты НАН Беларуси соответствующего профиля: Институт биофизики и клеточной инженерии, Центральный ботанический сад, НИИ защиты растений, Институт экспериментальной ботаники. ТРЕБОВАНИЯ ПО СОСТАВЛЕНИЮ ОТЧЕТА Во время прохождения практики студенты обязаны вести дневник установленного образца и рабочий журнал, где ежедневно записываются содержание и результаты работы. Письменный отчет оформляется по установленному на кафедре образцу и должен содержать следующие разделы: тему, время и место прохождения практики; цели и задачи практики; введение; описание объекта и методов исследования; результаты, представленные в виде таблиц и графиков с их описанием; выводы или заключение; список проработанной по теме литературы. ПОДВЕДЕНИЕ ИТОГОВ ПРАКТИКИ Текущий контроль за ходом выполнения программы практики осуществляется руководителем практики ежедневно. В конце учебной практики составляется письменный отчет по всем видам работы. Отчет студента и дневник с заключением научного руководителя учебной практики представляется на кафедру. Результаты прохождения практики докладываются студентом на заседании кафедры до 15 сентября нового учебного года. По результатам доклада с учетом характеристики научного руководителя студенту выставляется оценка по десятибалльной системе. ЛИТЕРАТУРА 1. 2. 3. 4. Основная Бутенко Р. Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе / Р.Г. Бутенко. – М.: ФБК-ПРЕСС, 1999. Иммобилизованные клетки и ферменты. Методы. Под ред. Дж. Вудворда. М.: Мир, 1988. Калинин Ф.Л.. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений / Ф.Л. Калинин, В.В. Сарнацкая, В.Е. Полищук. Киев: Наукова думка, 1980. Кузьмина Н. А. Основы биотехнологии: учебное пособие / Н.А. Кузьмина. Омск, 2006. 5. Лабораторно-практические занятия по сельскохозяйственной биотехнологии. Методические указания / Под. ред. В.С. Шевелухи. М.: Изд-во МСХА. 1996. 6. Методы биохимического исследования растений / Под ред. А.И. Ермакова. Л.: «Агропромиздат», 1987. 7. Першина Л.А. Методы культивирования in vitro в биотехнологии растений / Л.А. Першина. Новосибирск: НГУ, 2000. 8. Сорокина И.К. Основы биотехнологии растений. Культура клеток и тканей: учебное пособие / И.К. Сорокина, Н.И. Старичкова, Т.Б. Решетникова, Н.А. Гринь. Саратов: СГУ, 2002. Дополнительная 1. Бабикова А.В. Растение как объект биотехнологии / А.В. Бабикова, Т.Ю. Горпеченко, Ю.Н. Журавлев // Комаровские чтения. – 2007. – Вып. LV. – С. 184-211. 2. Валиханова Г.Ж. Биотехнология растений / Г.Ж. Валиханова. Алматы: «Конжык», 1996. 3. Дитченко Т.И. Культура клеток, тканей и органов растений. Методические рекомендации к лабораторным занятиям / Т.И. Дитченко. Минск: БГУ, 2007. 4. Камман К. Работа с ионселективными электродами / К. Камман. М.: Мир, 1980. 5. Медведев С.С. Электрофизиология растений. Учебное пособие / С.С. Медведев. С-Пб: С.-Петербургский университет, 1998. 6. Практикум по физиологии растений. Учебное пособие / Под ред. В.Б. Иванова. М.: «Академия», 2001. 7. Руководство к практическим занятиям по биохимии / Под ред. Северина. М.: «Медицина», 2000. 8. Филипцова Г.Г. Биохимия растений. Методические рекомендации к лабораторным занятиям / Г.Г. Филипцова, И.И. Смолич. Минск: БГУ, 2004. 9. Цыренов В.Ж. Основы биотехнологии: культивирование изолированных клеток и тканей растений. Учебно-методическое пособие / В.Ж. Цыренов. Улан-Удэ: ВСГТУ, 2003. 10.Юрин В.М. Учебно-методическое пособие “Иммобилизованные клетки” и “Биосенсорные системы” / В.М. Юрин, А.П. Кудряшов. Минск: БГУ. 1999. 11.Юрин В.М. Метод биотестирования по данным электрической реакции клеток харовых водорослей / В.М. Юрин, А.В. Плакс, А.П. Кудряшов // В сб.: Методы биотестирования вод. Черноголовка, 1988.