Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации Побочные продукты перекисного окисления липидов как предикторы неонатальной заболеваемости недоношенных детей Отдел системной биологии в репродукции Лаборатория протеомики и метаболомики репродукции человека Виталий Чаговец Использованные материалы Urinary Lipid Peroxidation Byproducts: Are They Relevant for Predicting Neonatal Morbidity in Preterm Infants? Kuligowski Julia, Aguar Marta, Rook Denise, Lliso Isabel, Torres-Cuevas Isabel, Escobar Javier, Quintás Guillermo, Brugada María, Sánchez-Illana Ángel, van Goudoever Johannes B., and Vento Máximo Antioxidants & Redox Signaling. July 2015, Vol. 23, No. 2: 178-184 Актуальность исследования paO2 = 25-30 мм.рт.ст. paO2 = 80-90 мм.рт.ст. Взрывная генерация активных форм кислорода Сигнальные молекулы, модулирующие биологические процессы и специфические метаболические пути, ведущие к созреванию органов доношенных детей Формирование агрессивных свободных радикалов, которые могут привести к окислительному стрессу Актуальность исследования Негативное действие свободных радикалов Липиды ~60% сухого веса Продукты-биомаркеры перекисного окисления липидов ассоциируют с повреждениями нейронов Актуальность исследования Особая опасность для новорожденных с крайне малым сроком гестации потребность в дополнительной подаче кислорода для послеродовой стабилизации состояния (проблема определения оптимального содержания кислорода, чтобы избежать гипоксемии и гипероксемии) незрелая антиоксидантная система недостаток сурфактанта o окислительный стресс o усиленный воспалительный ответ o отклонения, связанные с окислительным стрессом (хроническая болезнь легких, ретинопатия недоношенных, внутричерепное кровоизлияние) Потребность в методах неинвазивного контроля уровня окислительного стресса и его последствий Цель исследования Оценить содержание некоторых побочных продуктов перекисного окисления липидов в моче и изучить их корреляцию с неонатальными данными Объекты исследования Изопростаны Изофураны Нейропростаны Нейрофураны Методы Твердофазная экстракция для выделения и концентрирования исследуемых веществ ЖХ-МС для качественного и количественного анализа Клинические данные (253 недоношенных ребенка) Параметр Всего детей, n Из них девочек, n (%) Гестационный возраст, недель, медиана, (межквартильный интервал) Масса, г, медиана (межквартильный интервал) pH пуповинной крови, медиана (межквартильный интервал) Антенатальный курс стероидов Роды через естественные родовые пути / кесарево сечение, n Хориоамнионит, n (%) Низкое содержание кислорода (30%) Высокое содержание кислорода (60-65%) 133 120 69 (51.8%) 58 (48.3%) 28 (24, 32) 27 (23, 31) 944 (720, 1280) 1040 (755, 1368) 7.29 (7.25, 7.33) 7.28 (7.23, 7.31) 133 (100%) 120 (100%) 43/90 25 (18.8%) 44/76 22 (18.3%) Клинический исход, n (%) Смертность Бронхолегочная дисплазия Открытый артериальный проток Ретинопатия недоношенных (стадия ≥ 2) Некротический энтероколит (стадия ≥ 2) Интра- и перивентрикулярное кровоизлияние (стадии III/IV) Низкое содержание кислорода (30%) 10 (7.5%) Высокое содержание кислорода (60-65%) 17 (14.1%) 33 (24.8%) 20 (16.6%) 58 (43.6%) 43 (35.8%) 10 (7.5%) 6 (5.0%) 6 (4.5%) 4 (3.3%) 19 (14.3%) 18 (15.0%) В качестве контрольной группы рассматривались дети, у которых на момент выписки не были выявлены отклонения, связанные с окислительным стрессом Содержания исследуемых соединений в моче недоношенных детей (<32 недель гестации), у которых не было выявлено последствий, связанных со свободными радикалами (контроль) IsoPs IsoF 1000 800 600 400 200 0 1500 1000 500 0 0 5 10 15 20 25 0 30 5 10 15 День 20 25 30 День NeuroPs NeuroF 60 400 300 40 200 20 100 0 0 0 5 10 15 День 20 25 30 0 5 10 15 20 25 30 День Наблюдается повышенное содержание изопростанов и изофуранов в течение первой недели жизни. Это согласуется с литературными данными об увеличении концентрации изопростанов в плазме крови и возростании активности антиоксидантных ферментов сразу после рождения и их последующем снижении. Значительное выведение нейропростанов и нейрофуранов с мочой происходит позже. Сравнение содержания исследуемых соединений в моче недоношенных детей (<32 недель гестации) между контрольной группой и детьми, у которых развилась бронхолегочная дисплазия IsoPs 1500 Контроль Дисплазия 1000 1200 1000 800 600 500 * 1400 400 * IsoF Контроль Дисплазия * 200 0 1 3 4 6 7 14 21 28 0 1 День 3 4 Контроль 300 Дисплазия 200 100 0 1 3 4 6 7 14 21 28 День NeurPs 400 6 7 14 21 28 День * - статистически значимое различие. NeuroF Контроль 60 50 40 30 20 10 0 Дисплазия 1 3 4 6 7 День 14 21 28 Выводы - Обнаружение в моче повышенного содержания изофуранов в первые четыре дня жизни коррелирует с последующим развитием бронхолегочной дисплазии. - Изучение профиля зависимости содержания исследуемых веществ от времени позволило выявить промежуток, в течение которого может наблюдаться перекисное окисление липидов. - Дальнейшие работы позволят оценить степень влияния начального содержания кислорода при реанимации на вероятность развития бронхолегочной дисплазии и других отклонений. Исследования, проводимые в Отделе системной биологии в сотрудничестве с ОРИТН Сбор образцов мочи и конденсата выдыхаемого воздуха для комплексного исследования возможности использования данных о динамике изменения протеомного профиля для прогнозирования и ранней диагностики респираторных нарушений инфекционного и неинфекционного генеза Благодарности: Дегтярев Д.Н. ОРИТН: Ионов О.В., Рындин А.Ю., Крохина К.Н., Никитина И.В. Спасибо за внимание!