СПОСОБ ОКРАШИВАНИЯ МАЗКОВ КРОВИ

СПОСОБ ОКРАШИВАНИЯ МАЗКОВ КРОВИ
Патент Российской Федерации
Суть изобретения:
Использование: в медицине, в частности в лабораторной диагностике.
Сущность изобретения: мазки крови термически фиксируют при 160-180°С, окрашивают 0,25-ным
водным раствором эозина 110-130 с, споласкивают водой, а затем окрашивают 0,2% -ным водным
раствором диазагемицианинового бензтиазолового 50-70 с.
Способ позволяет сократить время анализа, получить объемную картину ядер лейкоцитов и исключить
токсичность красителя.
Номер патента:
2044295
Класс(ы) патента:
G01N1/30
Номер заявки:
5033753/14
Дата подачи заявки:
26.03.1992
Дата публикации:
20.09.1995
Заявитель(и): Институт химической физики РАН
Автор(ы):
Роговин В.В.; Цикалов С.И.; Хан И.Г.; Титова С.П.
Патентообладатель(и): Роговин Всеволод Викторович; Цикалов Сергей Иванович; Хан Ир Гвон; Титова
Светлана Павловна
Описание изобретения: Изобретение относится к области медицины и может быть использовано при
анализе крови.
Известен способ окрашивания мазков крови, в котором фиксированные метиловым спиртом
мазки крови окрашивают по Романовскому смесью азура и эозина в течение 20 мин.
Наиболее близким является способ окрашивания мазков крови, при котором высушенные
на стенках мазки крови фиксируют термической обработкой при 160-180оС в течение
9-11 мин, а затем окрашивают по Романовскому азур-эозином в течение 20 мин.
Однако
производство
азура
токсично,
сам
он
токсичен
и
экологически
опасен.
Окраска азур-эозином никогда не дает "объемную" картину ядра леток крови, а только
плоскую, что считается единственно возможным. Готовый краситель: смесь азур-эозина по
Романовскому, растворенная в смеси глицерина и метилового спирта, огнеопасна. Кроме того
, окрашивание мазков крови по Романовскому требует довольно длительного времени (20 мин).
Целью изобретения является создание технологии окраски мазков крови с использованием
нетоксичных,
экологически
безопасных
и
пожаробезопасных
смесей
красителей
,
получение
объемной
картины
ядер
лейкоцитов
и
сокращение
времени
анализа.
Это
достигается
предлагаемым
способом
окрашивания
мазков
крови,
включающим
термическую фиксацию при 160-180оС и обработку красителями, мазки окрашивают 0,2%ным водным раствором эозина в течение110-130 с, споласкивают водой и затем окрашивают
0,2%-ным водным раствором диазагемицианинового бензтиазолового в течение 50-70 с.
Диазагемицианиновый бензтиазоловый является нетоксичным водорастворимым красителем, который
применяют в текстильной промышленности для окрашивания тканей из полиакриловых волокон.
П р и м е р 1. Мазок крови человека высушивают на воздухе, фиксируют высокой температурой
при 169оС в течение 9 мин. Остывшие мазки окрашивают 0,2%-ным водным раствором эозина 110
с, споласкивают водой, а затем окрашивают 0,2%-ным водным раствором диазагемицианинового
бензтиазолового 50 с. Эритроциты окрашиваются в красный цвет, ядра нейтрофилов в фиолетовый
, зернистость эозинофилов в оранжево-красный; ядра лимфоцитов и моноцитов окрашиваются в
светло-фиолетовый цвет, видна объемность ядра, цитоплазма лимфоцитов и моноцитов светло-синяя.
П р и м е р 2. Высушенные мазки крови выдерживают 11 мин при 171оС. Остывшие мазки окрашивают
70 с, 0,2%-ным водным раствором эозина, ополаскивают водой, затем окрашивают 130 с 0,2%-ным
водным раствором диазагемицианинового бензтиазолового. Эритроциты розовые, ядра нейтрофилов
фиолетовые, цитоплазма голубоватая, гранулы светло-вишневого цвета. Ядра моноцитов и
лимфоцитов светло-фиолетовые, объемные, цитоплазма сиреневая. Тромбоциты светло-синие.
Как видно из примеров, удается получить объемную картину ядер лейкоцитов, что может
дать дополнительную диагностическую информацию. Сокращается время окраски мазков
крови до 3 мин вместо 20 мин, что экономит время медперсонала. Удается отказаться от
применения красителя азура, производство которого токсично, а применение экологически
опасно.
Удается
избежать
добавления
в
краситель
токсичного
метилового
спирта.
Формула изобретения:
СПОСОБ ОКРАШИВАНИЯ МАЗКОВ КРОВИ, включающий термическую фиксацию при 160 180oС и обработку
красителями, отличающийся тем, что мазки окрашивают 0,2% -ным раствором эозина 110 130 с,
споласкивают водой, а затем окрашивают 0,2% -ным раствором диазагемицианинового бензтиазолового
50 70 с.
Автор: Роговин В.В.; Цикалов С.И.; Хан И.Г.; Титова С.П.