Определение цитотоксического и генотоксического эффектов на

УДК 537.322.2
Пантюх К.С.
Институт коллоидной химии имени А.В. Думанского НАН Украины, Киев (Украина)
Определение цитотоксического и генотоксического эффектов на модели хлорфенолов
на модели культивированных фибробластов кожи человека
В последнее время в токсикологической практике, наряду с традиционными
экспериментами, на лабораторных животных значительного распространения приобрело
использование альтернативных объектов и методов исследований, например – культур
клеток человека [1]. Использование таких объектов имеет ряд значительных преимуществ
[1,2].
Особый интерес вызывают именно нетрансформированные культуры клеток
человека, такие как фибробласты кожи человека [3], что вместе с набором методов
изучения цитотоксичности и генотоксичности позволяет комплексно оценить токсичность
соединений с возможной экстраполяцией полученных результатов на организм человека.
Используемая методика замораживания первичных культур нетрансформированных
клеток и модификация методики окрашивания гель-микрослайдов серебром при
проведении кометного электрофореза позволили значительно ускорить и упростить
решение поставленной задачи [4].
Одним из самых распространенных токсиканотов, загрязняющих окружающую среду
является хлорфенолы. Не смотря на то, что токсическое действие хлорфенолов подробно
изучается [2,4], остается нерешенной проблема экстраполяции полученных данных на
организм человека при помощи общепринятых методик [5]. Поэтому разработка и
применение новых методов подходов является крайне важной. Целью нашей работы было
оценить перспективность использования нетрансформированных первичных культур
клеток человека, как объекта исследований наряду с комплексом методик оценки
цитотоксичности и генотоксичности.
В результате проведенной работы было показано, что соединения ряда хлорфенолов
проявляют выраженный цитотоксический эффект на культивированные фибробласты
кожи человека. Кроме того, пентахлорфенол, в отличие от других моно-, ди- и
трихлорфенолов, вызывает морфологические изменения в культуре клеток фибробластов
кожи человека и проявляет наиболее выраженные цитотоксический и генотоксический
эффекты.
Рис. 1. Микрофотография культуры клеток человека при действии моно- (А),
ди- (В), три- (С) та пентахлорфенолов (D) в концентрации 0,1 мМ. (окр. по МайГрюнвальд-Гимза Ок.х15, Об.х20).
Максимальный выявленный цитотоксический эффект зависит от количества молекул
хлора в бензольном кольце.
Рис. 2 Генотоксический эффект действия хлорфенолов.
Кратковременная
инкубация
с
хлорфенолами
приводит
к
выраженному
геннотоксическому эффекту. Монохлорфенолы проявляют наименьшее генотоксическое
влияние, пентахлорфенолы – наибольшее, дихлорфенолы и трихлорфенолы проявляют
промежуточные значения эффекта воздействия.
Литература
1. Barnard N.D., Kaufman S.R. Animal research is wasteful and misleading // Scientific
American. – 1997. – N 2. – P. 80-82.
2. Cohen M.J., Kaufman S.R., Ruttenberg R., Fano A. A critical look at animal experimentation.
// Medical Research Modernization Committee. – 1998. – P. 1-15.
3. McKenzie R., Fried M.W., Sallie R. et al. Hepatic failure and lactic acidosis due to fialuridine
(FIAU), an investigational nucleoside analogue for chronic hepatitis B. // New England
Journal of Medicine. – 1995. – V. 333. – P. 1099-1105.
4. Lash J.W., Saxen L. O-Phenylphenol and its Sodium and Potassium // Nature. – 1971. – N 9. –
P. 634-635.
5. Mann R.D. Modern Drug Use // Enquiry on Historical Principles. – 1998. – N 5. P. 146-147.