Гепасорб

Гепасорб
ПРИГОТОВЛЕНИЕ
АНАЛИЗИРУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора сорбентов для
оценки гемостаза в гепаринизированной
плазме крови
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор Гепасорб предназначен для проведения сорбции
гепарина из плазмы крови больных, получающих этот антикоагулянт, с последующим определением в обработанной
плазме крови активированного парциального тромбопластинового времени (АПТВ/АЧТВ), протромбинового (ПВ) и тромбинового (ТВ) времени свертывания.
ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
Принцип метода. Принцип метода основан на способности сорбентов связывать в плазме крови гепарин путем
образования нерастворимого комплекса “сорбент-гепарин”,
который удаляется последующим центрифугированием.
Сорбент Гепасорб-1 используется для удаления гепарина
из плазмы крови только при определении ТВ. Сорбент Гепасорб-2 применяется для удаления гепарина из плазмы крови
только при оценке АПТВ и ПВ.
Состав набора:
1. Сорбент Гепасорб-1, 1,0 г - 1 фл.
2. Сорбент Гепасорб-2, 2,0 г - 1 фл.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ
ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Пригодность сорбентов, входящих в состав набора, оценивается по их способности связывать гепарин в концентрации
5,0 ед./мл в пулированной свежей или лиофилизированной
плазме крови с аттестованным значением в нормальной области по АПТВ, ПВ и ТВ.
Исследование крови на фоне лечения непрямыми антикоагулянтами, дезагрегантами и фибринолитиками не влияет
на приведенную выше способность сорбента связывать гепарин.
В плазме крови, содержащей гепарин (5,0 ед./мл), отмечается отсутствие свертывания по АПТВ в течение 300 с, по ПВ в течение 40 с и ТВ - в течение 120 с. В сорбированной свежей цитратной плазме крови определяются неизмененные, по
сравнению с аттестованными значениями, показатели свертывания по АПТВ, ПВ и ТВ. В сорбированной лиофилизированной плазме крови определяются показатели по АПТВ в
диапазоне 40-55 с, по ПВ - 14-20 с, по ТВ - 16-20 с.
МЕРЫ
ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Потенциальный риск применения реагента – класс 2 а
(ГОСТ Р 51609-2000).
Гепасорб используется только для применения in vitro.
При выполнении коагуляционных тестов следует надевать
одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как
образцы плазмы крови человека следует рассматривать как
потенциально инфицированные, способные длительное время
сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Реагент в используемых концентрациях не токсичен.
Все использованные материалы дезинфицировать в соответствии с требованиями МУ-287-113.
ОБОРУДОВАНИЕ,
МАТЕРИАЛЫ, РЕАГЕНТЫ
-
Центрифуга лабораторная;
секундомер;
весы торсионные;
пипетки вместимостью 1,0 мл;
пробирки стеклянные;
перчатки резиновые хирургические.
Каталожный номер набора:
091
Кровь для исследования забирают из локтевой вены в
пластиковую или силиконированную пробирку, содержащую
3,8 % раствор натрия лимоннокислого трехзамещенного (цитрата натрия), соотношение объемов крови и цитрата натрия 9:1. Кровь центрифугируют при 3000-4000 об/мин (1200 g) в
течение 15 мин. В результате получают бедную тромбоцитами
плазму, которую переносят в другую пробирку, где хранят до
проведения исследования.
Центрифугирование должно проводиться непосредственно
после взятия крови, а отбор плазмы на исследование - сразу
же после центрифугирования. Не допускается анализ плазмы,
имеющей сгустки, гемолиз, избыток цитрата натрия и полученной более 2 ч назад, а также замороженной плазмы крови.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ
И ПРОВЕДЕНИЕ СОРБЦИИ ГЕПАРИНА
В пробирку внести 10 мг сорбента Гепасорб-1 и 1,0 мл исследуемой плазмы крови. Постоянно встряхивая, перемешать
плазму с сорбентом при комнатной температуре (+18... +25 оС)
в течение 8 мин, исключая образование пены и осадка на дне
пробирки. Затем смесь центрифугировать при 1000-1500
об/мин (120 g) в течение 2 мин. Надосадочную жидкость осторожно перенести с помощью пипетки в другую пробирку.
Плазму крови после сорбции можно использовать для оценки
ТВ в течение 1 ч в условиях хранения при комнатной температуре.
Сорбцию гепарина из плазмы крови сорбентом Гепасорб-2
производить по вышеописанной методике. Расход сорбента 20 мг на 1,0 мл плазмы крови. Полученную плазму использовать при аналогичных условиях хранения для оценки АПТВ и
ПВ.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
И ПРИМЕНЕНИЯ
Набор рассчитан на проведение сорбции гепарина каждым
из сорбентов в 100 мл плазмы. Расход реагентов на 1 мл
плазмы: 10 мг реактива Гепасорб-1 или 20 мг реактива Гепасорб-2.
Хранение набора должно проводиться при температуре
+2… +8 оС в течение всего срока годности набора (24 мес).
Допускается хранение набора при температуре до +25 оС в
течение 10 сут. Замораживание не допускается.
Сорбенты Гепасорб-1 и Гепасорб-2 можно хранить после
начала их использования в течение 12 мес при температуре
+2… +8 оС при условии достаточной герметизации флаконов.
Дополнительные возможности при использовании сорбентов гепарина [3]
Применение сорбентов позволяет также определить базовые показатели концентрации фибриногена (по Рутберг) и
активности антитромбина III (по Abildgaard) в плазме крови
больных, получающих гепаринотерапию.
1) При оценке активности антитромбина III применить Гепасорб-1.
2) При определении концентрации фибриногена использовать Гепасорб-2.
Сорбцию гепарина из плазмы провести по методике, приведенной выше.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. - М.: "Ньюдиамед-АО",
2008. – 292 с.
2. Момот А.П. Патология гемостаза. Принципы и алгоритмы клинико-лабораторной диагностики. – СПб.: ФормаТ, 2006.
– 208 с.
3. Момот А.П., Соколов Э.А., Цеймах И.Я. Значение элиминации из плазмы гепарина для оценки коагулограммы и активности антитромбина III // Клин. лаб. диагностика. - 1995. N 5. - С. 31-34.