Иммунология №2 2013 IM-1302-068 Современные стратегии биомедицинской профилактики ВИЧинфекции/СПИДа Часть 2. Доконтактная профилактика и комбинированные стратегии Г.О. Гудима1, И.Г. Сидорович1, Э.В. Карамов2, Р.М. Хаитов1 1 ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России, г. Москва (115478, г. Москва, Каширское ш., д. 24, корп. 2); 2Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д.И. Ивановского Минздравсоцразвития, г. Москва В части 1 обзора были рассмотрены антиВИЧ/СПИДвакцины и подходы к применению антиретровирусной терапии для превенции передачи ВИЧ. Часть 2 обзора посвящена доконтактной (предэкспозиционной) профилактике передачи ВИЧ (PrEP), а также анализу сочетанного применения различных стратегий превенции ВИЧинфекции. Считаем обоснованным, что разработка новых эффективных биомедицинских стратегий превенции ВИЧинфекции и их оптимальное сочетание позволяет достичь контроля эпидемии. К л ю ч е в ы е с л о в а : ВИЧ-инфекция, СПИД, профилактика, биомедицина, доконтактная профилактика, микро-бициды, комбинированные стратегии IM-1302-072 ЭКСПРЕССИЯ CD8-АССОЦИИРОВАННЫХ ГЕНОВ В ЦИРКУЛИРУЮЩИХ CD4+ ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ ЛИМФОЦИТАХ У ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ Пащенков М.В., Пинегин Б.В. Лаборатория клинической иммунологии ФГБУ ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России, г. Москва (115478, Каширское ш., д. 24, корп. 2) Циркулирующие CD4+-цитотоксические Т-лимфоциты (CD4+-ЦТЛ) представляют собой атипичную субпопуляцию CD4+ Т-клеток, которая обладает некоторыми свойствами, присущими CD8+ Т-лимфоцитам (наличие литических гранул, цитотоксических белков и клеточной цитотоксичности). В настоящей работе показано, что в CD4+-ЦТЛ по сравнению с обычными CD4+ Т-клетками повышена экспрессия факторов транскрипции RUNX3 и эомезодермина, необходимых для дифференцировки и поддержания фенотипа CD8+ Т-лимфоцитов, а также снижена экспрессия фактора транскрипции ZBTB7B, играющего ключевую роль в дифференцировке и поддержании фенотипа CD4+ Т-лимфоцитов. Эти изменения в CD4+-ЦТЛ проявляются фенотипически в виде повышения экспрессии перфорина и гранзима B, снижения экспрессии CD4 и появления невысокой экспрессии CD8 на 20–30% CD4+-ЦТЛ. Таким образом, в основе дифференцировки CD4+ ЦТЛ из обычных CD4+ Т-клеток может лежать частичное переключение транскрипционной программы с CD4-типа на CD8-тип. Ключевые слова : CD4+-цитотоксические Т-лимфоциты, CD4, CD8, RUNX3, ZBTB7B, эомезодермин IM-1302-076 А.М. САВИЛОВА1, М.М. ЧУЛКИНА2, Л.П. АЛЕКСЕЕВ1 А.М. Савилова1, М.М. Чулкина2, Л.П. Алексеев1 1ФГБУ ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России, г. Москва (115478, Каширское ш., д. 24, корп. 2); 2ЗАО НПФ ДНК-Технология, г. Москва Классическим методом оценки функционального состояния лимфоцитов является реакция бластной трансформа- ции лимфоцитов (РБТЛ), в которой in vitro оценивают степень пролиферации мононуклеарных клеток периферической крови в ответ на стимулы. В качестве контроля в РБТЛ применяют неспецифические митогены: фитогемагглютинин ФГА и конканавалин А (КонА), которые вызывают в основном Т-клеточный ответ. В настоящее время имеются лишь отдельные разрозненные данные о том, как меняется профиль экспрессии ключевых генов, участвующих в реализации ответа лимфоцитов на неспецифические митогены. В нашей работе была поставлена цель получить целостную картину изменения количества мРНК генов интерлейкина (IL)-2 (IL-2) и рецептора IL-2α (IL-2rα) после стимуляции лимфоцитов ФГА и КонА при культивировании клеток в течение длительного времени, поскольку гены IL-2 и IL-2r являются одними из ключевых в ответе мононуклеарных клеток крови на стимуляцию неспецифическими митогенами. Экспрессию мРНК выбранных генов оценивали с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени, который отличается высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет работать в широком диапазоне концентраций мРНК. В ходе работы определены основные закономерности изменения содержания мРНК генов IL-2 и IL-2r при стимуляции митогенами. Полученные результаты позволяют сделать вывод о разном механизме действия ФГА и КонА на лимфоциты, а также о том, что возможны существенные индивидуальные отличия в ответе лимфоцитов на стимуляцию. Уровень мРНК гена IL-2 можно использовать в качестве маркера активации лимфоцитов под действием КонА в первые же часы после стимуляции, а под воздействием ФГА максимум содержания мРНК этого цитокина достигается лишь на 3–4-е сутки культивирования. К л ю ч е в ы е с л о в а : фитогемагглютинин, конканавалин А, экспрессия мРНК, интерлейкин-2, интерлейкин-2-рецептор, ПЦР в реальном времени IM-1302-084 ВЛИЯНИЕ АЛКИЛОКСИБЕНЗОЛОВ НА ПОГЛОТИТЕЛЬНУЮ И СЕКРЕТОРНУЮ ФУНКЦИИ НЕЙТРОФИЛОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА Т.Г. Свиридова1, С.В. Слободчикова2, Д.Г. Дерябин1, К.В. Шмагель2, В.А. Черешнев2 1ФГБУ ВПО Оренбургский государственный университет (460018, г. Оренбург, пр. Победы, 13); 2ФГБУ науки Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН (614081, г. Пермь, ул. Голева, 13) Установлено подавление поглотительной и секреторной активностей нейтрофильных фагоцитов после их предварительной обработки химическими аналогами алкилоксибензолов (АОБ) микробного и растительного происхождения. Показано, что подобное действие высоких концентраций АОБ сопряжено с цитотоксическим эффектом, наиболее выраженным у их мембранотропных длинноцепочечных гомологов. Снижение действующих концентраций АОБ до значений, соответствующих их присутствию в крови и тканях человека, отменяет цитотоксичность, но сохраняет значения активации нейтрофилов ниже референтных. Выявление подобной гипоактивации фагоцитирующих клеток рассматривается в контексте модуляции иммунной системы при образовании АОБ компонентами микробиоценоза или их поступлении с зерновыми продуктами питания. К л ю ч е в ы е с л о в а : нейтрофилы, фагоцитоз, поглощение, дегрануляция, алкилоксибензолы, иммуномодулирующий эффект IM-1302-088 ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ СИСТЕМА НЕЛИМФОИДНЫХ КЛЕТОК В ЭРИТРОЦИТАРНОМ КЛИРЕНСЕ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ИММУННЫХ КОМПЛЕКСОВ Д. И. Бельченко ГОУ ВПО Тверская государственная медицинская академия Росздрава (170642, г. Тверь, Советская ул., д. 4) Костномозговые макрофаги, нелимфоидные миелокариоциты и лейкоциты крови, фиксируя своими рецепторами фрагменты иммуноглобулинов и комплемента иммунных комплексов, образуют из транспортирующих их эритроцитов ауторозетки и костномозговые эритроклазические кластеры. Возникновение контактов с иммунными комплексами вызывает активацию нелимфоидных клеток, реализацию их цитолитического потенциала и последующий лизис иммунных комплексов и транспортирующих их эритроцитов. Следовательно, эритроцитарный клиренс циркулирующих иммунных комплексов осуществляется не только фиксированными моноцитамимакрофагами, но и нелимфоидными клетками периферической крови и костномозговыми макрофагами. Поэтому можно заключить, что нелимфоидные клетки крови, костномозговые макрофаги и фиксированные моноцитымакрофаги образуют функциональную систему эритроцитарного клиренса ЦИК. Ключевые слова : циркулирующие иммунные комплексы, клиренс, эритроциты IM-1302-091 ОЦЕНКА МУКОЗАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА У ПАЦИЕНТОВ С ДИСБАКТЕРИОЗОМ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ РТА ДО И ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ КОМПЛЕКСНОГО ЛЕЧЕНИЯ О.Ф. Рабинович2, И.М. Рабинович2, А.Д. Островский2, Е.С. Абрамова,1 А.С. Будихина2, С.С. Аршинова2 1ФГБУ «ЦНИИС и ЧЛХ» Минздрава России, 119991, Москва; 2ГНЦ «Институт иммунологии ФМБА России», 115478, Москва Проведено комплексное клиниколабораторное обследование и лечение 76 пациентов с дисбактериозом слизистой оболочки рта (СОР) различной степени тяжести. В настоящем исследовании определены показатели концентрации sIgA, IgA, IgG, кателицидина и уровень бактерицидной активности ротовой жидкости у всех пациентов с дисбактериозом СОР до и после проведенного комплексного лечения с применением отечественного иммуномодулятора – ликопида. По результатам нашего исследования включение ликопида в комплексное лечение больных с дисбактериозом СОР является патогенетически обоснованным и эффективным средством противовоспалительной терапии, проявляющимся в снижении уровня IgG и повышении показателей sIgA и IgA ротовой жидкости. Полученная положительная динамика уровня кателицидина и бактерицидной активности ротовой жидкости у больных с дисбактериозом СОР различной степени тяжести подтверждена данными микробиологического исследования, а также клиническим эффектом лечения ликопидом. Ключевые слова : антибактериальные протеины, пептиды, иммуноглобулины, бактерицидность ротовой жидкости, дисбактериоз слизистой оболочки рта IM-1302-095 Анализ реакции аутбредных мышей стока CFW на регулярные инъекции сублетальных доз хлорида ртути М. С. Красильщикова, В. Н. Манских*, А. С. Арефьева, О. В. Зацепина ФГБУН Институт биоорганической химии им. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН (г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 16/10), *ГОУ ВПО Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова (119991, г. Мо-сква, ГСП-1, Ленинские горы, д. 1) Одной из основных моделей системных аутоиммунных патологий человека является аутоиммунноподобный процесс, индуцируемый у мышей инбредных линий (например, линии SJL/J) регулярными воздействиями сублетальных доз хлорида ртути (HgCl2). Реакции, развиваемые животными в этих условиях, включают образование аутоантител к ядрышку, увеличение продукции суммарных иммуноглобулинов (прежде всего иммуноглобулинов подкласса IgG1) и отложение иммунных комплексов в почках . Однако вопрос об особой генетической предрасположенности инбредных мышей к воздействию HgCl2 до сих пор остается открытым. В настоящей работе мы проанализировали способность HgCl2 индуцировать проявление основных признаков аутоиммунных реакций у мышей аутбредного стока CFW. Полученные результаты показали, что после 6 нед подкожных инъекций HgCl2 в стандартной дозе 1,6 мг/кг у всех мышей отмечаются появление аутоантител к ядрышку в высоких титрах, отложение иммунных комплексов в почках и усиление продукции IgG1 и IgE. Полученные данные позволяют заключить, что аутбредные мыши стока CFW воспроизводят основные признаки аутоиммунноподобного процесса, индуцированного HgCl2 у мышей инбредных линий, и могут быть использованы в качестве их альтернативы. Ключевые слова : аутоиммунитет, антиядрышковые аутоантитела, хлорид ртути, аутбредные мыши IM-1302-101 ДЕЙСТВИЕ АНТИГЕНОВ IN VITRO И IN VIVO НА ЭФФЕКТИВНОСТЬ КЛОНИРОВАНИЯ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК-ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ И ЭКСПРЕССИЮ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ В ПЕРВИЧНЫХ КУЛЬТУРАХ КОСТНОГО МОЗГА И СЕЛЕЗЕНКИ МЫШЕЙ Ю.Ф. Горская, Т.А. Данилова, Е.Н. Семенова, М.В. Мезенцева, И.М. Шаповал, В.Г. Нестеренко Лаборатории регуляции иммунитета, микробиологии латентных инфекций, лаборатория интерфероногенеза НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи Минздравсоцразвития России (123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д. 18) Полученные данные свидетельствуют о тесных взаимоотношениях между стромальной тканью и иммунной системой. К л ю ч е в ы е с л о в а : стромальные клетки, иммунный ответ, мРНК цитокинов IM-1302-105 ХОРИОНИЧЕСКИЙ ГОНАДОТРОПИН – ФАКТОР ИНДУКЦИИ ИММУННОЙ ТОЛЕРАНТНОСТИ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ С.А. Заморина, С.В. Ширшев ФГБУН Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН, г. Пермь (614081, г. Пермь, Изучали роль хорионического гонадотропина (ХГ) в регуляции баланса между Трегуляторными (Treg) лимфоцитами и субпопуляцией интерлейкин (IL)-17продуцирующих (Th17) лимфоцитов у женщин. Установлено, что ХГ в исследуемых концентрациях, соответствующих таковым в I и II-III триместры беременности (10 и 100 МЕ/мл соответственно), увеличивал количество FoxP3+ и FoxP3+CTLA-4+-клеток в культуре CD4+-лимофцитов. В отношении Th17 показано, что ХГ снижал количество RORRt+-, ROR-t+IL-17А+- и IL-17А+CCR6+клеток в культуре СD4 +-лимфоцитов, одновременно снижая способность этих клеток секретировать IL-17А. В то же время ХГ в высокой концентрации, соответствующей таковой в I триместре беременности, повышал липополисахаридиндуцированную активность индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO) в моноцитах. Таким образом, ХГ является индуктором формирования иммунной толерантности на периферии, непосредственно контролируя баланс Treg/Th17 и активность IDO. К л ю ч е в ы е с л о в а : хорионический гонадотропин, моноциты, Treg, Th17, IL17A, индоламин-2,3-диоксигеназа IM-1302-108 СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ КЛЕЩЕЙ ДОМАШНЕЙ ПЫЛИ И ИХ АЛЛЕРГЕНОВ В ЖИЛЫХ ПОМЕЩЕНИЯХ Г. МОСКВЫ И. Г. Ахапкина, Т. М. Желтикова ФГБУ НИИВС им. И.И. Мечникова РАМН, Москва (105064, г. Москва, Малый Казенный пер., 5а) Создание гипоаллергенной среды для уменьшения активности аллергических реакций, как и общий экологический мониторинг аллергенной нагрузки помещений предполагает определение концентрации аллергенов (Ал) и их источников. Результаты акарологического анализа проб пыли продемонстрировали, что доминирующим видом в Московском регионе в настоящее время является Dermatophagoides farinae. Общая численность D. pteronyssinus колебалась от 545 до 0 экз. на 1 г пыли, составив в среднем 43,39 ± 59,1 экз. на 1 г пыли. Численность D. farinae равнялась 95,43 ± 90,71 экз. на 1 г пыли, при этом максимальное количество было 804 экз. на 1 г пыли, минимальное – 0 экз. на 1 г пыли. Показано, что для количественного определения содержания Ал клещей домашней пыли (семейство Pyroglyphidae) целесообразно применять непрямой (обратный) иммуноферментный анализ, основанный на использовании поликлональных кроличьих антисывороток, полученных против аллергенных экстрактов пироглифидных клещей. Средняя концентрация Ал D. pteronyssinus равнялась 71,65 ± 59,51 мкг/г на 1 г пыли, а D. farinae – 72,37 ± 50,72 мкг на 1 г пыли, при этом количество клещевых Ал изменялось от 2,22 до 184,44 и от 2,22 до 182,22 мкг на 1 г пыли соответственно для представленных видов клещей. Ключевые слова : Dermatophagoides farinae, D. pteronyssinus, поликлональные антисыворотки, численность популяции клещей, доминирующий вид, концентрация клещевых аллергенов IM-1302-111 МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ СИСТЕМНОГО ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ОТВЕТА В ПЕЧЕНИ И ЛЕГКИХ КРЫС ВИСТАР В РАЗНЫЕ ФАЗЫ ЭСТРАЛЬНОГО ЦИКЛА А. М. Косырева, М. Е. Диатроптов ФГБУ НИИ морфологии человека РАМН (г. Москва, ул. Цурюпы, д. 3) Циклические изменения содержания половых гормонов в течение менструального/эстрального цикла у особей женского пола могут оказывать влияние на устойчивость и восприимчивость к инфекционновоспалительным заболеваниям. Цель работы – морфологическая оценка проявлений системного воспалительного ответа в печени и легких крыс Вистар в разные фазы эстрального цикла. Исследования проведены на половозрелых самках крыс Вистар, которым с целью моделирования системного воспалительного ответа внутрибрюшинно вводили липополисахарид (ЛПС) E. coli (1,5 мг/кг) в фазу проэструса и диэструса. По сравнению с крысами Вистар в фазу проэструса у самок в фазу диэструса развитие системного воспалительного ответа характеризуется более выраженными альтеративными и воспалительными изменениями в печени и легких, увеличением активности ферментов печени АлАТ и АсАТ и уровня эндотоксина в крови. На 1-е сутки после введения ЛПС самкам в фазу диэструса реактивные изменения тимуса, характеризующиеся расширением коркового вещества и субкапсулярной зоны, менее выражены, чем у крыс в фазу проэструса. Развитие системного воспалительного ответа в фазу диэструса сопровождается активацией T- и B-зоны селезенки, а у крыс в фазу проэструса опустошается преимущественно T-зависимая ПАЛМзона. Полученные данные необходимо учитывать при выполнении экспериментальных работ на особях женского пола, а также при разработке подходов к прогнозированию тяжести течения и терапии инфекционновоспалительных заболеваний у женщин репродуктивного возраста. Ключевые слова : синдром системного воспалительного ответа, эстральный цикл, половые гормоны, липополи-сахарид, печень, легкие, иммунная система IM-1302-115 ПРОДУКЦИЯ IL-12Β МОНОНУКЛЕАРНЫМИ ЛЕЙКОЦИТАМИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СПЕКТРА ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ Р.Р. Хасанова, О.И. Уразова, О.В. Воронкова, В.В. Новицкий, З.К. Хаитова, И.Е. Есимова, Е.Г. Чурина, А.А. Кошкина Mycobacterium tuberculosis В работе представлены результаты исследования продукции интерлейкина (IL)12β мононуклеарными лейкоцитами крови у больных туберкулезом легких в зависимости от спектра лекарственной устойчивости инфицирующего штамма M. tuberculosis. Показано, что уровень спонтанной и стимулированной секреции IL12β зависит от спектра лекарственной бактериорезистентности. Так, у больных с монорезистентным лекарственноустойчивым туберкулезом легких (ЛУТЛ) зарегистрировано повышение базальной и угнетение индуцированной продукции цитокина, свидетельствующее об истощении функционального (IL-12βсекреторного) резерва клеток. При полии мультирезистентном ЛУТЛ уровень базальной секреции IL-12β снижен, однако в первом случае клетки проявляют IL12β-секреторный ответ на индукцию липидным микобактериальным антигеном, в то время как при туберкулезе легких с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) клетки не отвечают повышением цитокиновой секреции на действие как белкового, так и липидного антигенов, что, по мнению авторов, объясняет более выраженные нарушения Т-клеточного ответа при МЛУтуберкулезе. К л ю ч е в ы е с л о в а : туберкулез легких, IL-12β, лекарственная устойчивость M. tuberculosis IM-1302-119 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ПОДХОДЫ К РАЗРАБОТКЕ МУКОЗАЛЬНЫХ ВАКЦИН ПРИ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ, ПЕРЕДАЮЩИХСЯ ПОЛОВЫМ ПУТЕМ И. Ф. Баринский1, В. А.Ляшенко2, Л. М. Алимбарова1, А. А . Лазаренко1, О. В. Сергеев1 1 ФБГУ Институт вирусологии им.Д. И. Ивановского Минздравсоцразвития РФ, г. Москва; 2 ФБГУ НИИ вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова РАМН, г. Москва В обзоре освещаются экспериментальные подходы к разработке мукозальных вакцин при вирусных заболеваниях, передающихся половым путем. Отмечено, что, несмотря на значительные успехи в экспериментальных подходах к разработке мукозальных вакцин при вирусных заболеваниях, передающихся половым путем, а также успехи в ограниченных клинических испытаниях при герпетической болезни, дальнейшие исследования в этом направлении крайне желательны и своевременны. Ключевые слова : мукозальные вакцины, вирусные заболевания, инфекции, передающиеся половым путем, гер-петические болезни IM-1302-122 ИММУНОСУПРЕССИВНОЕ ДЕЙСТВИЕ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ (СТРОМАЛЬНЫХ) КЛЕТОК И. В. Маянская1, А. Ю. Гоганова1, Н. И. Толкачева1, В.И. Ашкинази1, А. Н. Маянский2 1ФГБУ Нижегородский научно-исследовательский институт детской гастроэнтерологии Минздравсоцразвития России (603950, г. Нижний Новгород, ул. Семашко, 22); 2Нижегородская государственная медицинская академия (603005, Нижний Новгород, пл. Минина, 10/1) Мезенхимальные стволовые (стромальные) клетки (МСК) обладают способностью подавлять пролиферацию и активность клеток врожденного и адаптивного иммунитета, оказывая толерогенное и противовоспалительное действие. Супрессорные свойства выражены примерно одинаково у стромальных клеток, полученных из разных источников. Они не зависят от степени дифференцировки МСК и проявляются в аллогенных и ксеногенных комбинациях. Для МСК типичны отсутствие поверхностных антигенпредставляющих молекул второго типа и костимулирующих лигандов, которые необходимы для антигензависимых реакций CD4-Т-лимфоцитов. Это обеспечивает гипоиммуногенность МСК, т.е. их низкую способность активировать аллогенные Т-клетки. Ингибиторные свойства МСК связаны с присутствием противовоспалительных цитокинов, которые секретируются при активации иммунных клеток, стимулируя (праймируя) толерогенные функции МСК. Блокирующее действие определяется межклеточными контактами между МСК и их мишенями, а также зависит от гуморальных медиаторов, которые выделяются стимулированными МСК. Супрессивные эффекты МСК поддерживают гомеостаз гемопоэтических клеток костного мозга, участвуют в периферической толерантности к собственным антигенам, определяют толерогенные контакты в иммунологической системе мать–плод. Гипоиммуногенность и блокирующее действие МСК играют существенную роль в современной цитотерапии, обеспечивая длительное присутствие вводимых МСК и их способность поддерживать регенерацию тканей. Ключевые слова : иммуносупрессия, мезенхимальные стволовые (стромальные) клетки, Т- и В-лимфоциты, естественные киллеры, дендритные клетки, макрофаги, нейтрофилы