1 001970 2 Данное изобретение большей частью каса

1
Данное изобретение большей частью касается нового способа получения замещённой
изоксазолин-5-илуксусной кислоты высокой
оптической чистоты из стереоизомерной смеси
этерифицированного замещённого изоксазолин5-илацетата. Продукты полезны в синтезе соединений для фармацевтических препаратов, в
основном для лечения тромболитических осложнений, и продукции сельскохозяйственного
назначения.
Ферментативное расщепление прохиральных и рацемических соединений стало важным
и широко распространённым методом, (С.Н.
Wong, G.M. Whitesides, Enzymes in Synthetic
Organic Chemistry, 1994, Pergamon Press, New
York). Существует целый ряд способов, пригодных для разделения рацемических или диастереомерных смесей молекул, включающих этерификацию, деэтерификацию, ацилирование,
деацилирование, гидролиз и восстановление.
Либо целевой, либо не целевой изомер может
быть подвергнут химическому превращению,
при условии, что реакция является достаточно
селективной в отношении этого изомера. Обычно получение хиральной молекулы может состоять в превращении одного из энантиомеров
или диастереомеров смеси под воздействием
подходящего фермента. Однако простое ферментативное расщепление сводится к получению максимум 50% выхода оптически чистого
продукта по отношению к рацемическому исходному веществу. Ненужный изомер либо
должен быть тотчас же удалён, либо он рацемизируется обратно до смеси, подобной исходной.
Рацемизированная смесь может теперь быть
вновь переведена в условия ферментативного
расщепления, как и прежде. Задавая степень
конверсии и регенерацию равными 100%, исходную смесь можно превратить в заданный
хиральный изомер требующим много времени и
повторов способом, при этом на каждой стадии
преобразуется 50% рацемического, исходного
для данной стадии, вещества. Общий выход
может асимптотически приблизиться к 100%,
если процесс продолжать бесконечно. Однако
на практике это редко возможно из-за длительности повторных операций и потерь во время
выделения.
Изоксазолины являются важными компонентами в фармацевтически активных соединениях и активных соединениях сельскохозяйственного назначения. Опубликованные примеры
активных соединений изоксазолина или способов получения соединений изоксазолина включают в себя, не ограничиваясь ими, следующие:
патент США № 4 970 297 (ингибиторы трансглутаминазы), патент США № 5 489 562 (гербициды), патент США № 4 256 898 (противоопухолевые и противомикробные средства), патент
США № 4 933 464, патент США № 4 952 700,
международную публикацию РСТ WO 95/14681
(противовоспалительные средства), междуна-
001970
2
родную публикацию РСТ WO 95/14680 (противовоспалительные средства) и международную
публикацию РСТ WO 95/24398 (ингибиторы
высвобождения TNF).
Соединение (X) является полезным антагонистом комплекса тромбоцит-гликопротеид
IIb/IIIа-фибриноген-рецептор.
Как таковое соединение (X) пригодно для
ингибирования агрегации тромбоцитов, в качестве тромболитика и/или для лечения тромболитических осложнений. Получение соединения
(X) описано в следующей литературе: в патенте
США № 5 446 056, упомянутом здесь в качестве
ссылки, международной публикации РСТ WO
95/14683, международной публикации РСТ WO
95/38426 и Zhang et. al., Tetrahedron Lett. 1996,
37, 4455-4458. В этих документах описана ключевая роль, занимаемая соединением (R)-(IIa), в
качестве промежуточного продукта в общем
синтезе соединения (X).
Обычный подход к синтезу соединения
(R)-(IIa) состоит в ферментативном расщеплении сложных изоксазолин-изобутиловых оксоэфиров. Негидролизованный сложный эфир затем рацемизируют на второй отдельной стадии
и вновь переводят в условия гидролиза. Несколько повторов этих независимых реакций, в
конечном счете, обеспечивает высокие конверсии соединения (R)-(IIa), но требует неудобно
большого числа выделений и отдельных реакций (схема А).
Схема А
Стадия 1
Стадия 2
В данном изобретении вышеуказанные
двухстадийные превращения успешно выполняются в одну стадию. Гидролиз и рацемизация
происходят одновременно при применении
сложного тиоэфира вместо сложного оксоэфира
и модификации условий реакции, что позволяет
осуществлять выделение соединения (R)-(IIa) в
одну стадию при эквивалентной чистоте и более
высоком выходе по сравнению с первоначальным способом получения.
D.G. Drueckhammer, et. al., J. Am. Chem.
Soc., 1995, 117, 9093-9094, успешно выполнили
одновременные гидролиз и рацемизацию, где
хиральным центром является альфа-углерод на
3
сложном тиоэфире. В этой работе кислотность
альфа-протонов повышается за счёт наличия
альфа-фенилтиогруппы в дополнение к сложному тиоэфиру. Это даёт возможность рацемизации и гидролизу протекать с одинаковыми
скоростями, что является причиной >99% конверсии до целевого продукта (R)-2, (схема В).
D.G. Drueckhammer и др. подтвердили, что
тиоэфир субстрата, имеющий только насыщенные алкильные заместители на альфа-углероде,
является недостаточно кислым для того, чтобы
позволить рацемизацию при используемых в
этой работе условиях.
Схема В
Данное изобретение
касается
бетауглерода, кислотность протонов которого
меньше, чем протонов альфа-углерода. Поэтому
предполагается, что рацемизация на бетауглероде, усиленном сложным тиоэфиром, протекает при щелочном рН по механизму раскрытия изоксалинового кольца по связи углеродкислород.
Схема С
Изобретение объединяет два процесса: рацемизацию хирального центра на бета-углероде
до сложного тиоэфира и ферментативный гидролиз сложного тиоэфира. Это соединение в
способе динамического расщепления составляет
ценность изобретения. Данное изобретение описывает способ расщепления карбоновых кислот,
замещённых в бета-положении изоксазолиновым циклом. Преимущественно данное изобретение выявляет лучший способ получения соединения (R)-(IIa), важного промежуточного
продукта в реакционной последовательности
при получении соединения (X).
Возможность проводить ферментативные
расщепления рацемических молекул и получать
конверсию до оптически чистого соединения с
выходом выше, чем 51%, без необходимости
проведения отдельной стадии рацемизации,
имеет огромное потенциальное значение. Этот
способ экономит время и деньги, поскольку
сводит к минимуму число реакций, которые
должны быть проведены для получения хирального продукта. Этот способ сокращает время
получения, снижает стоимость продукта путём
минимизации числа манипуляций и используемых реагентов/растворителей и увеличивает
выход.
Данное изобретение даёт новые способы
разложения стереоизомерных смесей, состоящих из замещённой изоксазолин-5-илуксусной
кислоты, в защищённой форме сложного тиоэфира, обладающей хиральным центром по бе-
001970
4
та-положению карбоновой кислоты, как частью
изоксазолинового цикла. Данное изобретение
выявляет лучший способ получения соединений
формулы (II), где ферментативный гидролиз
стереоизомерной смеси соединений формулы (I)
сочетается с рацемизацией (I) по бета-углероду
до сложного тиоэфира, таким образом разрешая
более чем 80% конверсию смеси хиральных
изомеров, таких как соединения (I), в продукт
(II) с оптической чистотой выше, чем 90%. Более конкретно, данное изобретение выявляет
лучший способ получения соединения (R)-(IIа),
важного промежуточного продукта в синтетическом получении соединения (X), где ферментативный гидролиз энантиомерной смеси соединения (Iа) сочетается с рацемизацией (Iа), таким
образом разрешая более чем 85% конверсию
смеси хиральных изомеров соединения (Iа) в
продукт (R)-(IIa) с оптической чистотой выше,
чем 90%.
Данное изобретение даёт способы получения замещённых соединений изоксазолин-5-илуксусной кислоты формулы (R)-(II) или (S)-(II) с
высокой оптической чистотой из стереоизомерной смеси сложного тиоэфира замещённого
изоксазолин-5-илацетата. Такие соединения полезны в синтезе соединений для фармацевтических препаратов, особенно соединения (X) и
соединений для лечения тромболитических осложнений, и продукции сельскохозяйственного
назначения.
[1] В данном изобретении представлен
способ получения оптически активных соединений формулы (R)-(II) или (S)-(II):
или их соли, где
R2 означает -Н, галоген, -СF3, -CN, -NO2,
-ОН, C1-C8-алкокси, C1-C10-алкилкарбонил,
-N(R12)R13, -CHO, -CO2H, -C(=O)R5a, -CONR5R5a,
-С(=NH)NR5R5a, -SR5a, -SO2R5a, -SO2NR5R5a,
C1-C8-алкил, замещённый 0-3 R4,
C2-C8-алкенил, замещённый 0-3 R4,
C2-C8-алкинил, замещённый 0-2 R4,
C3-C10-циклоалкил, замещённый 0-3 R4,
C6-C10-арил, замещённый 0-3 R4,
5-10-членный гетероцикл, содержащий 1-4
гетероатома N, О или S, где указанный гетероцикл может быть насыщенным, частично насыщенным или полностью ненасыщенным, указанный гетероцикл замещён 0-2 R4,
аминокислоту или
пептид;
R3 означает водород, C1-C4-алкил, замещённый 0-3 R4 или фенил, замещённый 0-3 R4;
R4 выбирают из Н, C1-C10-алкила, -ОН, C1C10-алкокси,
-NO2,
C1-C10-алкилкарбонила,
-N(R12)R13, -CN, галогена, -CF3, -CHO, -CO2H,
-C(=O)R5a,
-CONR5R5a,
-C(=NH)NR5R5a,
5a
5a
-OC(=O)R ,
-OR ,
-OC(=O)NR5R5a,
5
-OCH2CO2H, -СO2СН2СO2Н, -NR5aC(=O)R5a,
-NR5aC(=O)NR5R5a,
-NR5aC(=O)OH,
5a
5 5a
5a
5
-NR SO2NR R , -NR SO2R , -SR5a, -SO2R5a,
-SO2NR5R5a, C2-C6-алкенила, C3-C11-циклоалкила, C4-C11-циклоалкилметила или
C6-C10-арила, возможно замещённого 1-3
группами, которые выбирают из галогена, C1C4-алкокси, C1-C4-алкила, -СF3, -S(O)2Me или
-NМе2;
R5 выбирают из Н, C1-C8-алкила, C2-C6алкенила, C3-C11-циклоалкила, C4-C11-циклоалкилметила, C6-C10-арила, C7-C11-арилалкила или
C1-C10-алкила, замещённого 0-2 R6;
R5a выбирают из Н, C1-C8-алкила, С2-С6алкенила, С3-С11-циклоалкила, C4-C11-циклоалкилметила, C6-C10-арила, С7-С11-арилалкила
или C1-C10-алкила, замещенного 0-2 R6,
или же, R5 и R5a могут быть выбраны так,
что вместе образуют 3-азабициклононил, 1пиперидинил, 1-морфолинил или 1-пиперазинил, каждый из которых возможно замещён C1C6-алкилом, C6-C10-арилом, С7-С11-арилалкилом,
C1-C6-алкилкарбонилом, С3-С7-циклоалкилкарбонилом, C1-C6-алкилсульфонилом или C6-C10арилсульфонилом;
R6 выбирают из Н, C1-C10-алкила, гидрокси, C1-C10-алкокси, нитро, C1-C10-алкилкарбонила или -N(R12)R13;
R12 и R13 независимо выбирают из Н, метила или этила;
указанный способ включает в себя контактирование, в пригодном растворителе, стереоизомерной смеси соединения формулы (I)
в которой Y означает S;
R1 означает -C(R10)2(R10a),
-C(R10)2-C(R10b)2(R10c),
-С(R10)2-C(R10b)2-C(R10c)3,
-C(R10)2-C(R10b)=C(R10c)2,
-C(R10)2-C≡C(R10c),
-C(R10)=C(R10b)(R10c),
-C(R10)=C(R10b)-C(R10c)3,
-C≡C(R10c),
-C≡C-C(R10c)3, R10 означает Н или F;
R10a выбирают из Н, F, Сl, Вr, -СН3,
-СН2СН3, -СН2-СН2СН3, -СF3, -СF2СF3, -ОСН3,
-ОСН2СН3, -ОСН2СН2СН3, -SСН3, -SСН2СН3,
-SСН2СН2СН3 и циклопропила;
R10b означает Н, F, Cl или Вr;
R10c в каждом случае независимо выбирают из Н, галогена, C1-С3-галоалкила, -ОН, C1-C4алкокси, -СF3, -SСН3, -SСН2СН3, -SСН2СН2СН3,
-CN, -NO2, -S(О)2Ме, -NMe2,
C1-C6-алкила, замещённого 0-3 R11,
C2-C6-алкенила, замещённого 0-3 R11,
C2-C6-алкинила, замещённого 0-2 R11,
C3-C6-циклоалкила, замещённого 0-3 R11,
C6-C10-арила, замещённого 0-3 R11 или
C4-C10-гетероцикла, замещённого 0-3 R11; a
001970
6
R11 выбирают из Н, галогена, C1-C4-алкила,
C1-C3-галоалкила, C1-C4-алкокси, фенила, -ОН,
-NO2, -CN, -СF3, -S(O)2Ме и -NMe2;
с соответствующей липазой в присутствии
агента рацемизации, при поддерживании подходящего щелочного рН путём добавления основания или кислоты, что даёт соединение формулы (R)-(II) или формулы (S)-(II) с выходом
больше, чем 51%, и оптической чистотой выше
80%.
[2] В предпочтительном варианте выполнения данное изобретение представляет способ
получения соединений формулы (R)-(II)
или их соли, где
R2 означает фенил, замещённый 0-3 R4,
R3 означает водород;
R4 выбирают из Н, C1-C10-алкила, -ОН, C1C10-алкокси,
-NO2,
C1-C10-алкилкарбонила,
-N(R12)R13, -CN, галогена, -СF3, -СНО, -СO2Н,
-C(=O)R5a,
-CONR5R5a,
-C(=NH)NR5R5a,
5a
5a
-OR ,
-OC(=O)NR5R5a,
-OC(=O)R ,
-OCH2CO2H, -СO2СН2СO2Н, -NR5aC(=O)R5a,
-NR5aC(=O)ОН,
-NR5aC(=O)NR5R5a,
5a
5 5a
5a
-NR SO2NR R ,
-NR SO2R5,
-SO2R5a,
5 5a
-SO2NR R ,
C2-С6-алкенила,
C3-C11циклоалкила, C4-C11-циклоалкилметила или
C6-C10-арила, возможно замещенного 1-3
группами, которые выбирают из галогена, C1C4-алкокси, С1-С4-алкила, -СF3, -S(O)2Me или
-NMe2;
R5 выбирают из Н, C1-C8-алкила, C2-C6алкенила, С3-С11-циклоалкила, С4-С11-циклоалкилметила, C6-C10-арила, С7-С11-арилалкила
или C1-С10-алкила, замещённого 0-2 R6;
R5a выбирают из Н, C1-C8-алкила, C2-C6алкенила, C3-C11-циклоалкила, С4-С11-циклоалкилметила, С6-С10-арила, C7-C11-арилалкила
или C1-C10-алкила, замещенного 0-2 R;
альтернативно, R5 и R5a могут быть выбраны так, что вместе образуют 3-азабициклононил, 1-пиперидинил, 1-морфолинил или 1пиперазинил, каждый из которых возможно замещен C1-C6-алкилом, C6-C10-арилом, C7-C11арилалкилом, C1-C6-алкилкарбонилом, C3-C7циклоалкилкарбонилом, C1-C6-алкилсульфонилом или C6-C10-арилсульфонилом;
R6 выбирают из Н, C1-C10-алкила, гидрокси, C1-C10-алкокси, нитро, C1-C10-алкилкарбонила или -N(R12)R13;
R12 и R13 независимо выбирают из Н, метила или этила; указанный способ включает в себя
контактирование, в пригодном растворителе,
стереоизомерной смеси соединения формулы (I)
в котором Y означает S;
R1 означает -С(R10)2(R10a),
7
-C(R10)2-C(R10b)2(R10c),
-С(R10)2-C(R10b)2-C(R10c)3,
-С(R10)2-С(R10b)=C(R10c)2,
-С(R10)2-C≡C(R10c), -C(R10)=C(R10b)(R10c),
-С(R10)=C(R10b)-С(R10c)3,
-C≡C(R10c),
-C≡C-C(R10c)3, R10 означает Н или F;
R10a выбирают из Н, F, Cl, Вr, -СН3,
-СН2СН3, -СН2-СН2СН3, -СF3, -СF2СF3, -ОСН3,
-ОСН2СН3, -ОСН2СН2СН3, -SСН3, -SСН2СН3,
-SСН2СН2СН3 и циклопропила;
R10b означает Н, F, Cl или Вr;
R10c в каждом случае независимо выбирают из Н, галогена, C1-С3-галоалкила, -ОН, C1-C4алкокси, -СF3, -SСН3, -SСН2СН3, -SСН2СН2СН3,
-CN, -NO2, -S(O)2Me, -NМе2,
C1-C6-алкила, замещённого 0-3 R11,
C2-C6-алкенила, замещённого 0-3 R11,
C2-C6-алкинила, замещённого 0-2 R11,
C3-C6-циклоалкила, замещённого 0-3 R11,
C6-C10-арила, замещённого 0-3 R11 или
C4-C10-гетероцикла, замещённого 0-3 R11; a
R11 выбирают из Н, галогена, C1-C4-алкила,
C1-C3-галоалкила, С1-С4-алкокси, фенила, -ОН,
-NO2, -CN, -СF3, -S(O)2Ме и -NMe2;
с соответствующей липазой в присутствии
агента рацемизации, при поддерживании подходящего щелочного рН путём добавления основания или кислоты, что даёт соединение формулы (R)-(II) с выходом больше, чем 51%, и оптической чистотой выше 80%.
[3] В более желательном варианте выполнения данное изобретение представляет способ
получения соединения формулы (R)-(IIa):
001970
8
с соответствующей липазой в присутствии
агента рацемизации, при поддерживании подходящего щелочного рН путём добавления основания или кислоты, что даёт соединение формулы (R)-(IIa) с выходом больше, чем 51%, и оптической чистотой выше 80%.
[23] В ещё более желательном варианте
выполнения данное изобретение представляет
способ получения соединения формулы (R)-(IIa)
или их соли, включающий себя контактирование, в воде, стереоизомерной смеси соединения
формулы (Iа)
или их соли, включающий в себя
контактирование, в пригодном растворителе, стереоизомерной смеси соединения формулы (Iа)
где R1 означает этил, н-пропил или н-бутил,
с липазой Amano PS30 в присутствии агента рацемизации, триметиламина, при поддерживании подходящего рН в интервале приблизительно от 8,0 до 10,0 путём добавления основания или кислоты, что даёт соединение формулы
(R)-(IIa) с выходом больше, чем 51%, и оптической чистотой выше 80%.
[8] Во втором варианте выполнения настоящее изобретение даёт способ получения
соединения формулы (R)-(IIa), подобный описанному в первом варианте воплощения, дополнительно включающий в себя пригодный буфер,
добавленный к пригодному растворителю и помогающий поддерживать подходящее значение
рН путём добавления основания.
[13] В более желательном втором варианте
выполнения данное изобретение представляет
собой способ получения соединения формулы
(R)-(IIa) или его соли, где указанный способ
включает в себя контактирование, в воде, в которой растворён пригодный буфер, стереоизомерной смеси соединения формулы (Iа)
в которой R1 означает -CH2(R10a),
-CH2-CH2(R10c),
-CH2-CH2-C(R10c)3,
-CH2-CH=C(R10c)2,
-CH2-C≡C(R10c),
R10a выбирают из Н, -СН3, -СН2СН3 и
-СН2СН2СН3;
R10c в каждом случае независимо выбирают из Н, -ОН, C1-C4-алкокси, -NMe2,
C1-C6-алкила, замещённого 0-3 R11,
С2-С6-алкенила, замещённого 0-3 R11,
С2-С6-алкинила, замещённого 0-2 R11, или
С3-С6-циклоалкила, замещённого 0-3 R11, a
R11 выбирают из Н, галогена, С1-С4-алкила,
C1-C3-галоалкила, C1-C4-алкокси, фенила, -ОН,
-NO2, -CN, -СF3, -S(O)2Me и -NMe2;
где R1 означает н-пропил;
с липазой Аmаnо PS30 в присутствии агента рацемизации, триметиламина, при поддерживании подходящего рН в интервале приблизительно от 3,0 до 10,0 путём добавления основания или кислоты, что даёт соединение формулы
(R)-(IIa) с выходом больше, чем 51%, и оптической чистотой выше 80%.
[14] В третьем варианте выполнения настоящее изобретение даёт способ получения
соединения формулы (R)-(IIa), подобный описанному в первом варианте воплощения, дополнительно включающий в себя добавленный к
соответствующему растворителю пригодный
неионный, катионный или анионный сурфактант.
9
[20] В более желательном третьем варианте выполнения данное изобретение представляет собой способ получения соединения формулы (R)-(IIa) или его соли, включающий в себя
контактирование, в воде, в которой растворён
пригодный неионный, катионный или анионный
сурфактант, стереоизомерной смеси соединения
формулы (Iа)
в которой
R1 означает н-пропил;
с липазой Amano PS30 в присутствии агента рацемизации, триметиламина, при поддерживании подходящего рН в интервале приблизительно от 8,0 до 10,0 путём добавления основания или кислоты, что даёт соединение формулы
(R)-(IIa) с выходом больше, чем 51%, и оптической чистотой выше 80%.
[24] В четвёртом варианте выполнения настоящее изобретение даёт способ получения
соединения (R)-(IIa), подобный описанному в
первом варианте воплощения, дополнительно
включающий в себя пригодный буфер, добавленный к соответствующему растворителю и
помогающий поддерживать подходящее значение рН путём добавления основания, и пригодный неионный, катионный или анионный сурфактант, добавленный к пригодному растворителю.
[25] В более желательном четвёртом варианте выполнения данное изобретение представляет способ получения соединения формулы
(R)-(IIa) или его соли, включающий в себя контактирование, в воде, в которой растворены
пригодный буфер и пригодный неионный, катионный или анионный сурфактант, стереоизомерной смеси соединения формулы (Iа):
где R1 означает н-пропил,
с липазой Amano PS30 в присутствии агента рацемизации, триметиламина, при поддерживании подходящего рН в интервале приблизительно от 8,0 до 10,0 путём добавления основания, что даёт соединение формулы (R)-(IIa) с
выходом больше, чем 51%, и оптической чистотой выше 80%.
Описанные здесь соединения могут иметь
асимметрические центры. Если не указано особо, все хиральные, диастереомерные и рацемические формы входят в состав данного изобретения. Многие геометрические изомеры олефинов, C=N-двойных связей и т.п. могут также
входить в описанные здесь соединения, и все
такие стабильные изомеры рассматриваются
данным изобретением. Описанные здесь соединения амидина могут также существовать в таутомерных формах, и все такие стабильные тау-
001970
10
томеры включаются в настоящее изобретение.
Следует учитывать, что соединения по данному
изобретению могут содержать в дополнение к
бета-хиральному центру для сложных тиоэфиров в соединениях формулы (I) асимметрически
замещённые углеродные атомы и могут быть
выделены в оптически активных и рацемических формах. Имеются в виду все хиральные,
диастереомерные, рацемические формы и все
геометрические изомерные формы структуры,
если специфическая стереохимия или изомерная
форма не указана особо.
Подразумевается, что термин "стереоизомерная смесь", как он использован здесь, означает смесь оптически активных соединений,
указанные оптически активные соединения могут иметь один или более хиральныx центров, к
примеру, энантиомеры или диастереомеры. Однако термин "стереоизомерная смесь" означает
смесь оптически активных соединений, имеющую равные (рацемическая) или неравные количества оптически активных соединений в отношении хирального центра на бета-углероде
сложного тиоэфирзамещённого изоксазолин-5илацетата, как изображено в соединениях формулы (I).
Когда любая переменная встречается более
одного раза в любом компоненте или в любой
формуле, ее определение в каждом случае не
зависит от ее определения в каждом другом
случае.
Комбинации заместителей и/или переменных допустимы, только если такие комбинации
приводят к стабильным соединениям. Под "стабильным соединением" или "стабильной структурой" здесь подразумевается соединение, которое является достаточно устойчивым для того,
чтобы продолжать существовать изолированно
от реакционной смеси практически чистым и
быть сформулированным в эффективное терапевтическое средство.
Термин "замещенный", как он использован
здесь, означает что один или большее число
водородов на указанном атоме замещены группой, выбранной из указанных групп, при условии, что не нарушается указанная нормальная
валентность атома, и что замещение приводит к
стабильному соединению. Когда заместитель
является кетогруппой (т.е. =O), то на атоме замещаются 2 водорода.
Подразумевается, что "алкил", как использован здесь, включает в себя как разветвленные,
так и линейные насыщенные алифатические
углеводородные группы, содержащие точно
указанное число углеродных атомов; к примеру,
"C1-C8" означает алкил с 1-8 углеродными атомами, т.е. метил, этил, н-пропил, изопропил, нбутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, гексил,
септил (гептил), октил и их разветвлённые изомеры. Подразумевается, что "галоалкил" включает как разветвленные, так и линейные насыщенные алифатические углеводородные груп-
11
пы, содержащие точно указанное число углеродных атомов, замещенные 1 или более галогеном (к примеру, -CvFw, где v=1-3 и w=1(2v+l)); "алкокси" означает алкильную группу с
точно указанным числом углеродных атомов,
присоединенную через кислородный мостик.
Имеется в виду, что "алкилкарбонил" включает
в себя алкильную группу с точно указанным
числом углеродных атомов, присоединённую
через карбонильную группу к остатку соединения (радикалу) в указанном месте. Подразумевается, что "алкилсульфонил" включает в себя
алкильную группу с точно указанным числом
углеродных атомов, присоединенную через
сульфонилгруппу (-SO2-) к остатку соединения
в указанном месте.
Подразумевается, что "циклоалкил" включает в себя насыщенные циклические группы,
включающие в себя системы моно-, би- или полициклических колец, такие как циклопропил,
циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил и адамантил, и подразумевается, что "бициклоалкил" включает в себя
насыщенные бициклические кольцевые группы,
[3.3.0]бициклооктан,
[4.3.0]бициклононан,
[4.4.0]бициклодекан (декалин), [2.2.2] бициклооктан и т.д. Термин "циклоалкилалкил" означает
циклоалкильную группу, присоединённую через
алкильный мостик; к примеру, циклопропилметил, циклопропилэтил, циклобутилметил, циклопентилметил, циклогексилметил и т.д. Имеется в виду, что "циклоалкилкарбонил" включает
в себя циклоалкильную группу с точно указанным числом углеродных атомов, присоединенную через карбонильную группу к остатку соединения в указанном месте.
Подразумевается, что "алкенил" включает
в себя углеводородные цепи либо линейной,
либо разветвлённой конфигурации и одну или
более ненасыщенных углерод-углеродных связей, которые могут находиться в любом стабильном положении вдоль цепи, такие как этенил, пропенил и т.п.; имеется в виду, что "алкинил" включает в себя углеводородные цепи либо линейной, либо разветвлённой конфигурации
и одну или более тройных углерод-углеродных
связей, которые могут находиться в любом стабильном положении вдоль цепи, такие как этинил, пропинил и т.п.
"Галоид" или "галоген", как использовано
здесь, означает фтор, хлор, бром или иод; а
"противоион" используется для обозначения
небольших отрицательно заряженных частиц,
таких как хлорид, бромид, гидроксид, ацетат,
сульфат и т.п.
Подразумевается, что термины "арил" или
"ароматический остаток", как использованы
здесь, обозначают фенил или нафтил; термин
"арилалкил" обозначает арильную группу, присоединённую через алкильный мостик; к примеру, бензил, фенилэтил и фенилпропил. Имеется
в виду, что "арилкарбонил" включает в себя
001970
12
арильную группу с точно указанным числом
углеродных атомов, присоединённую через карбонильную группу к остатку соединения в указанном месте. Подразумевается, что "арилсульфонил" включает в себя арильную группу с точно указанным числом углеродных атомов, присоединённую через сульфонил-группу (-SO2-) к
остатку соединения в указанном месте.
Подразумевается, что "карбоцикл" или
"карбоциклический остаток", как использован
здесь, обозначает любой стабильное 3-7членное моноциклическое или бициклическое
или 7-14-членное бициклическое или трициклическое, или до 26-членного, полициклическое
углеродное кольцо, любое из которых может
быть насыщенным, частично насыщенным или
схематическим. Примеры таких карбоциклов
включают, не ограничиваясь ими, циклопропил,
циклопентил, циклогексил, фенил, дифенил,
нафтил, инданил, адамантил или тетрагидронафтил (тетралин).
Подразумевается, что термин "гетероцикл"
или "гетероциклический", как использован
здесь, обозначает стабильное 5-7-членное моноциклическое или бициклическое, или 7-10членное бициклическое гетероциклическое
кольцо, являющееся либо насыщенным, либо
ненасыщенным, и состоящее из углеродных
атомов и 1-4 гетероатомов, которые независимо
выбирают из группы, включающей в себя N, О и
S, и где гетероатомы азота и серы, возможно,
могут быть окисленными, а азот, возможно, может быть кватернизован (переведен в четвертичное основание), и включающее в себя любую
бициклическую группу, в которой любое из
вышеуказанных гетероциклических колец конденсировано с бензольным кольцом. К гетероциклическому кольцу может быть прикреплена
боковая группа по любому гетероатому или углеродному атому, что приводит к стабильной
структуре. Указанные здесь гетероциклические
кольца могут быть замещены по атому углерода
или азота, если образующиеся соединения стабильны. Примеры таких гетероциклов включают в себя, не ограничиваясь ими, 1H-индазол, 2пирролидонил,
2Н,6Н-1,5,2-дитиазинил-2Нпирролил, 3Н-индолил, 4-пиперидонил, 4аНкарбазол, 4Н-хинолизинил, 6Н-1,2,5-тиадиазинил, акридинил, азоцинил, бензофуранил, бензотиофенил, карбазол, хроманил, хроменил,
циннолинил, декагидрохинолинил, фуранил,
фуразанил, имидазолидинил, имидазолинил,
имидазолил, индолинил, индолизинил, индолил,
изобензофуранил, изохроманил, изоиндолинил,
изоиндолил, изохинолинил (бензимидазолил),
изотиазолил, изоксазолил, морфилинил, нафтипиридинил, октагидроизохинолинил, оксазолидинил, оксазолил, фенантридинил, фенантролинил, фенарсазинил, феназинил, фенотиазинил,
феноксатиинил, феноксазинил, фталазинил, пиперазинил, пиперидинил, птеридинил, пуринил,
пиранил, пиразинил, пиразолидинил, пиразоли-
13
нил, пиразолил, пиридазинил, пиридинил, пиридил, пиримидинил, пирролидинил, пирролинил, пирролил, хиназолинил, хинолинил, хиноксалинил, хинуклидинил, карболинил, тетрагидрофуранил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидрохинолинил, тетразолил, тиантренил, тиазолил,
тиенил, тиофенил, триазинил, ксантенил.
Реакции заявленных здесь способов синтеза предпочтительно проводят в присутствии
пригодного основания, указанным пригодным
основанием является любое из множества оснований, наличие которого в реакционной среде
облегчает синтез заданного продукта. Подходящее основание может быть подобрано специалистом в области органического синтеза. Пригодные основания включают в себя, не ограничиваясь ими, неорганические основания, такие
как гидроокиси, алкоголяты, фосфаты и карбонаты щелочного металла, щелочноземельного
металла, таллия и аммония, такие как гидроокись натрия, гидроокись калия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, гидроокись таллия, карбонат таллия, карбонат тетран-бутиламмония и гидроокись аммония. Пригодные основания также включают в себя органические основания, включающие, но не в порядке ограничения, алифатические амины, такие
как триалкиламины, диалкиламины и моноалкиламины, N,N-диизопропилэтиламин, N,Nдиэтилциклогексиламин,
N,N-диметилциклогексиламин, N,N,N'-триэтилендиамин, N,Nдиметилоктиламин, 1,5-диазабицикло[4.3.0]нон5-ен (DBN), 1,4-диазабицикло[2.2.2] октан (DABCO), 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундек-7-ен (DBU)
и тетраметилэтилендиамин (TMEDA); и ароматические амины, такие как пиридин и замещённые
пиридины,
такие
как
N,Nдиметиламинопиридин (DMAP), 4-пирролидинопиридин, 4-пиперидинопиридин.
Предполагается, что термин "агент рацемизации", как он использован здесь, означает
любое основание, достаточно сильное для того,
чтобы сделать скорость рацемизации хирального центра, указанного как бета-углерод в соединениях формулы (I), равной или превышающей
скорость ферментативного гидролиза. Примеры
агентов рацемизации включают в себя, но не в
порядке ограничения, триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, трибутиламин, триоктиламин, N,N-диизопропилэтиламин, N,N-диэтилциклогексиламин,
N,N-диметилциклогексиламин, N,N,N'-триэтилендиамин, N,N-диметилоктиламин, 1,5-диазабицикло[4.3.0] нон-5-ен
(DBN), 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (DABCO),
1,8-диазабицикло[5.4.0]ундек-7-ен (DBU); тетраметилэтилендиамин (TMEDA); пиридин и
замещенные пиридины, такие как N,Nдиметиламинопиридин (DMAP), 4-пирролидинопиридин и 4-пиперидинопиридин.
Реакции заявленных здесь способов синтеза могут быть проведены при добавлении пригодной кислоты с целью установления или со-
001970
14
хранения подходящего щелочного рН, особенно
в отсутствие буфера, указанной пригодной кислотой является любая из множества кислот,
наличие которой в реакционной среде облегчает
синтез заданного продукта. Пригодные кислоты
могут быть подобраны специалистом в области
органического синтеза. Пригодные кислоты
включают в себя, но не в порядке ограничения,
органические кислоты, такие как уксусная кислота, и неорганические кислоты, такие как НСl,
НВr и Н3РO4.
Имеется в виду, что термин "гидролаза"
или "липаза", как он использован здесь, обозначает любой фермент, способствующий гидролизу соединений формулы (I), включающей в себя
сложные тиоэфиры замещённого изоксазолин-5ил-ацетата, до их соответствующих замещенных
изоксазолин-5-ил-карбоновых кислот. Кроме
того, "гидролаза" или "липаза" селективны в
отношении соединений, содержащих хиральные
бета-центры на сложных тиоэфирах, как изображено в соединениях формулы (I). Предполагается, что, являясь селективной для одного хирального центра стереоизомерной смеси, липаза
может отобрать либо (R)-, либо (S)-бетаэнантиомер для сложного тиоэфира, как описано в соединениях формулы (I). Кроме того, гидролаза или липаза может быть гомогенной в
растворе с субстратами соединений формулы (I)
или она может быть гетерогенной в растворе, к
примеру, иммобилизованной (фиксированной)
на инертном нерастворимом веществе. Гидролаза или липаза может быть в лиофилизованной,
распылительно-высушенной или высушенной
при нагреве форме, равно как в суспендированной или иммобилизованной форме.
Примеры ферментов, способных гидролизовать соединения формулы (I) по изобретению,
могут включать в себя микробную или бактериальную гидролазы или липазы родов: Candida,
Pseudomonas, Mucor, Rhizopus, Aspergillus, Bacillus, Streptomyces, Geotrichum и Chromobacterium, равно как ферменты, полученные из ткани
животных.
Примеры промышленно выпускаемых
гидролиз или липаз, пригодных для применения
по данному изобретению, включают в себя, не в
порядке ограничения, Amano АК (Pseudomonas
sp.), Amano PS30 (Candida cylindracea), Amano L
(Candida lipolytica), Amano AP12 (Aspergillus
niger], Amano-протеазу N (Bacillus subtilis), химотрипсин, субтилизин, термитазу (Thermoactinimyces vulgaris), ацетилхолин-эстеразу электрического угря, эстеразу свиной печени, холестерин-эстеразу, панкреатическую липазу свиньи, эстеразу печени кролика, и гидролазы, полученные из Geotrichum Candidum, Rhizopus
nigricans, Rhizopus oryzae, Aspergillus oryzae,
Streptomyces griseus, Aspergillus saitoi, Aspergillus niger, Mucor miehei и Chromobacterium viscosum.
15
Имеется в виду, что термин "динамическое
расщепление", как он здесь использован, означает процесс в условиях, где стереоизомер стереоизомерной смеси выбирается энзимом и гидролизуется, преимущественно, избыточный его
оптический изомер, в то время как оптический
изомер одновременно рацемизируется в избираемый ферментом стереоизомер. Выполнение
реакции расщепления в таких условиях позволяет получить более чем 51% конверсию исходного вещества стереоизомерной смеси в один
стереоизомерный продукт с оптической чистотой выше 80%. К примеру, стереоизомерная
смесь рацематов приведет к (R)-изомерному
продукту с выходом более чем 51%, с оптической чистотой выше 80%, при этом (S)изомерный реагент рацемизируется в (R)изомерный реагент. По существу, рацeмизация
сочетается с ферментативным расщеплением.
Подразумевается, что термин "оптическая
чистота" или "энантиомерная чистота", как он
используется здесь, относится только к хиральному центру, который разделяют по данному
изобретению и оценивают, как мольный процент изомерного (R) или (S) продукта относительно общего числа молей изомерного (R) или
(S) продукта. К примеру, и не в порядке ограничения, оптическая чистота 30% для соединения
формулы (R)-(II) означает, что получен (R)-(II)изомер с выходом 80% при 20% выходе (S)-(II)изомера.
Реакции заявленных здесь способов синтеза проводят в пригодных растворителях, которые могут быть легко подобраны специалистом
в области органического синтеза, указанные
пригодные растворители представляют собой
обычно любой растворитель, по существу не
реагирующий с исходными веществами (реагентами), промежуточными соединениями или
продуктами при тех температурах, при которых
проводят реакции, т.е. при температурах, которые могут быть в пределах от температуры замерзания растворителя до температуры кипения
растворителя. Данная реакция может быть проведена в одном растворителе или в смеси из
более, чем одного растворителя. В зависимости
от данной реакционной стадии, могут быть подобраны пригодные растворители для отдельной реакционной стадии. Данная реакция может
также быть проведена в двухфазной системе,
где происходит рацемизация субстратов объекта.
Пригодные галоидированные растворители
включают четыреххлористый углерод, бромдихлорметан, дибромхлорметан, бромоформ, хлороформ, бромхлорметан, дибромметан, бутилхлорид, дихлорметан, тетрахлорэтилен, трихлорэтилен,
1,1,1-трихлорэтан,
1,1,2-трихлорэтан, 1,1-дихлорэтан, 2-хлорпропан, гексафторбензол, 1,2,4-трихлорбензол, о-дихлорбензол, хлорбензол, фторбензол, фтортрихлорметан, хлортрифторметан, бромтрифторметан,
001970
16
четырёхфтористый углерод, дихлорфторметан,
хлордифторметан, трифторметан, 1,2-дихлортетрафторэтан и гексафторэтан.
Пригодные простые эфирные растворители
включают в себя диметоксиметан, тетрагидрофуран, 1,3-диоксан, 1,4-диоксан, фуран, простой
диэтиловый эфир, диметиловый эфир этиленгликоля, диэтиловый эфир этиленгликоля, диметиловый эфир диэтиленгликоля, диэтиловый
эфир диэтиленгликоля, диметиловый эфир триэтиленгликоля или трет-бутилметиловый эфир.
Пригодные протонные растворители могут
включать в себя в качестве примера, но не ограничения, воду, метанол, этанол, 2-нитроэтанол,
2-фторэтанол, 2,2,2-трифторэтанол, этиленгликоль, 1-пропанол, 2-пропанол, 2-метоксиэтанол,
1-бутанол, 2-бутанол, изобутиловый спирт,
трет-бутиловый спирт, 2-этоксиэтанол, диэтиленгликоль, 1-,2- или 3-пентанол, неопентиловый спирт, трет-пентиловый спирт, монометиловый эфир диэтиленгликоля, моноэтиловый
эфир диэтиленгликоля, циклогексанол, анизол,
бензиловый спирт, фенол или глицерин.
Пригодные апротонные растворители могут включать в себя в качестве примера, но не
ограничения, тетрагидрофуран (THF), диметилформамид (DMF), диметилацетамид (DMAC),
1,3-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2(1Н)-пиримидинон (DMPU), 1,3-диметил-2-имидазолидинон
(DMI), N-метилпирролидинон (NMP), формамид, N-метилацетамид, N-метилформамид, ацетонитрил, диметилсульфоксид, пропионитрил,
этилформиат, метилацетат, гексахлорацетон,
ацетон, этилметилкетон, этилацетат, сульфолан,
N,N-диметилпропионамид, тетраметилмочевина, нитрометан, нитробензол или гексаметилфосфорамид.
Пригодные основные растворители включают 2-, 3- или 4-пиколин, пиррол, пирролидин,
морфолин, пиридин или пиперидин.
Пригодные углеводородные растворители
включают в себя бензол, циклогексан, пентан,
гексан, толуол, циклогептан, метилциклогексан,
гептан, этилбензол, м-, о- или п-ксилол, октан,
индан, нонан или нафталин.
Имеется в виду, что термин "пригодный
растворитель", как он использован здесь, включает в себя воду и смеси воды с органическим
растворителем, где органический растворитель
может быть пригодным галоидированным растворителем, пригодным простым эфирным растворителем, пригодным протонным растворителем, пригодным апротонным растворителем,
пригодным основным растворителем или пригодным углеводородным растворителем. Когда
используют смеси воды и органического растворителя, органическим растворителем предпочтительно является ацетонитрил, толуол, ксилол, простой диэтиловый эфир или спирт, такой
как метанол, этанол, н-пропанол или изопропанол, н-бутанол, втор-бутанол, трет-бутанол. Когда используют органические растворители,
17
общий состав органических растворителей в
смеси может варьироваться в пределах 0-50%
для спиртов и 0-95% для неспиртов. Смесь растворителей может быть двухфазной, чтобы облегчать реакцию соединений формулы (I).
Подразумевается, что термин "буфер", как
используется здесь, включает в себя попарносопряженные кислоту/основание, которые, когда растворены в пригодном растворителе, участвуют в противодействии изменениям в рН
пригодного растворителя при добавлении кислот или оснований, или при разбавлении. Сопряжённые пары кислоты/основания, способные
работать как пригодные буферы в интервале рН
приблизительно от 8 до 11, могут быть получены специалистом в соответствующей области из
соединений, которые включают в себя, но не в
порядке ограничения, карбонатные соли, такие
как Na2CO3, К2СО3, NaHCO3 и КНСО3; фосфатные соли, такие как Nа3РO4, Na2HPO4, NaH2PO4,
К3РO4, К2НРO4 и KH2PO4; боратные соли, натрий-5,5-диэтилбарбитурат, глицилглицин, этаноламин, диэтаноламин, 2, 5-диметилимидазол,
пирофосфорная кислота, трис(гидроксиметил)
аминометан,
N-((трисгидроксиметил)метил)
глицин, 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинпропансульфоновая кислота, 2-амино-2-метил-1,3пропандиол, 2-амино-2-этил-1,3-пропандиол, 2амино-2-метил-1-пропанол, N,N-(бис-2-гидроксиметил)глицин, глицин, 2-(цикло-гексиламино)этансульфоновая кислота, гриметиламин и
этилендиамин.
Подразумевается, что термин "сурфактант", как он использован здесь, включает в себя
ионные, катионные и неионные поверхностноактивные вещества. Примеры пригодных сурфактантов включают в себя, но не в порядке
ограничения, соли желчных кислот, диоктилнатрийсульфосукцинат, диозгенин (diosgenin),
саркозил, натрийдодецилсульфат, цетилпиридинийхлорид, цетилтриметиламмонийбромид, 3[(3-холамидопропил)диметиламмонио]-1-пропансульфонат, N,N-диметилдодециламино-Nоксид, октилглюкозид, спирты полиоксиэтилена
(PEG), такие как PEG(23)-лауриловый спирт,
PEG(10)-цетиловый спирт, PEG(20)-цетиловый
спирт, PEG(9-10)лаурилмиристиловый спирт и
PEG(17)цетилстеариловый спирт; и соединения,
общеизвестные как средства обращения фаз,
такие как бензилтриметиламмонийхлорид и
трикаприлилметиламмонийхлорид.
Дополнительные примеры пригодных сурфактантов
включают в себя, но не в порядке ограничения,
соединения полиоксиэтилена (PEG), такие как
производные PEG-п-трет-октилфенола, такие
как Тритон Х-45 (Triton® Х-45) (PEG(5)п-третоктилфенол), Тритон Х-114 (Triton® X-114)
(PEG(7-8)п-трет-октилфенол), Тритон Х-110
(Triton® Х-100) (PEG(9-10)п-трет-октилфенол),
Тритон Х-165 (Triton® Х-165) (PEG(16)п-третоктилфенол), Тритон Х-305 (Triton® X-305)
(PEG(30)п-трет-октилфенол) и (PEG(9)п-трет-
001970
18
октилфенол); PEG (9-10)нонилфенол, известный
как Тритон N-101 (Triton® N-101); сложные
эфиры PEG-сорбитола, Твин 20 (Tween® 20),
Твин 40 (Tween® 40), Твин 60 (Tween® 60) и
Твин 80 (Tween® 80); полиоксипропилен-PEGсложные эфиры, известные как Плюроник L62
(Pluronic® L62), Плюроник L64 (Pluronic® L64)
и Плюроник L68 (Pluronic® L68) и Тритон А 20
(Triton® A 20).
Термин "аминокислоты", как использован
здесь, означает органическое соединение, содержащее как основную аминогруппу, так и
кислотную карбоксильную группу. В этот термин включены природные аминокислоты, модифицированные и нетипичные аминокислоты,
равно как аминокислоты, которые известны как
биологически распространённые в свободной
или связанной форме, но не встречающиеся в
белках. Включены в этот термин модифицированные и нетипичные аминокислоты, такие как
аминокислоты, описанные, к примеру, в Robers
and Vellaccio (1983) The Peptides, 5: 342-429,
открытие которых упоминается здесь в качестве
ссылки. Модифицированные и нетипичные
аминокислоты, которые могут быть использованы при практическом применении изобретения,
включают в себя, но не в порядке ограничения,
D-аминокислоты,
гидроксилизин,
4гидроксипролин, N-Cbz-защищенную аминокислоту, орнитин, 2,4-диаминомасляную кислоту, гомоаргинин, норлейцин, N-метиламиномасляную кислоту, нафтилаланин, фенилглицин, βфенилпролин, трет-лейцин, 4-аминоциклогексилаланин, N-метилнорлейцин, 3,4-дегидропролин, N,N-диметиламиноглицин, N-метиламиноглицин, 4-аминопиперидин-4-карбоновая
кислота, 6-аминокапроновая кислота, транс-4(аминометил)циклогексанкарбоновая кислота,
2-, 3- и 4-(аминометил)бензойная кислота, 1аминоциклопентанкарбоновая кислота, 1-аминоциклопропанкарбоновая кислота и 2-бензиламинопентановая кислота.
Термин "аминокислотный остаток", как он
использован здесь, означает ту часть аминокислоты (как указано здесь), которая присутствует
в пептиде.
Термин "пептид", как он использован
здесь, означает соединение, которое состоит из
двух и более аминокислот (как указано здесь),
соединённых посредством пептидной связи.
Термин "пептид" включает в себя также соединения, содержащие как пептидные, так и не
пептидные компоненты, такие как псевдопептидные или пептидмиметические остатки или
другие не аминокислотные компоненты. Такое
соединение, содержащее как пептидный, так и
не пептидный компоненты, может также быть
упомянуто как "пептидный аналог".
Термин "пептидная связь" означает ковалентную амидную связь, образованную между
карбоксильной группой одной аминокислоты и
19
аминогруппой второй аминокислоты в результате потери молекулы воды.
Данное изобретение, из практических соображений, сопровождается расчетами в масштабе, по меньшей мере, нескольких граммов,
килограмма, нескольких килограммов или в
промышленном масштабе. Масштаб в несколько
граммов, как он здесь используется, является
предпочтительным масштабом, когда, по меньшей мере, одно исходное соединение присутствует в количестве 10 г или больше, более предпочтительно, по меньшей мере, 50 г или больше, еще более желательно, по меньшей мере, в
количестве 100 г или больше. Предполагается,
что масштаб в несколько килограммов, как он
здесь используется, означает масштаб, при котором используется более, чем один килограмм,
по крайней мере, одного исходного вещества.
Имеется в виду, что промышленный масштаб,
как он здесь используется, означает масштаб,
являющийся иным, чем лабораторный масштаб,
и который достаточен для получения продукта в
количестве, достаточном как для клинических
испытаний, так и для распространения потребителям.
Синтез
Цель данного изобретения состоит в разработке способа динамического расщепления
стереоизомерных смесей замещенных изоксазолинов, которые полезны в синтезе фармацевтических препаратов, таких как соединение (X).
Способы по данному изобретению в качестве
примера, а не в порядке ограничения, могут
стать более понятны при обращении к схеме 1.
Схема 1 детально описывает общий, осуществляемый в одном резервуаре, способ динамического расщепления сложного тиоэфира замещённого изоксазолин-5-ил-ацетата, где Y означает серу, а хиральным центром, по которому
идет превращение, является бета-углерoд из
карбонильной группы сложного тиоэфира. Хотя
в качестве продукта схемы 1 приведен (R)стереоизомер, в качестве альтернативы равновероятно получить (S)-стереоизомер в зависимости от выбора липазы или гидролазы, используемых в способе. (R)-Стереоизомер описан
выше, как соединения формулы (S)-(II).
Схема 1
Схема 1 включает в себя ферментативное
расщепление стереоизомерной смеси соединений формулы (I) до соединений формулы (R)(II) или их солей. Расщепление соединений
формулы (I), т.е. одновременные рацемизацию и
гидролиз, проводят в одном резервуаре путем
контактирования соединений формулы (I) с
пригодной липазой или гидролазой и агентом
рацемизации в условиях щелочного рН. Кроме
того, осуществляемый в одном резервуаре спо-
001970
20
соб может включать в себя буфер, помогающий
поддерживать щелочное значение рН, и/или
сурфактант.
Эту стадию проводят, осуществляя реакцию стереоизомерной смеси соединения формулы (I) в пригодном растворителе, в котором может быть, либо может не быть, растворен пригодный буфер и/или пригодный сурфактант, с
соответствующей липазой или гидролазой и
агентом рацемизации, с последующим добавлением пригодного основания или кислоты для
поддерживания рН. Порядок добавления не
имеет решающего значения, кроме того, что для
протекания рацемизации следует поддерживать
рН добавлением основания. В качестве общего
руководства, способ осуществляют: а) загрузкой
раствора с пригодным буфером, пригодным
агентом рацемизации, пригодным сурфактантом
и основанием или кислотой; b) загрузкой раствора со cтереоизомерной смесью соединения
формулы (I); с) загрузкой раствора с пригодной
липазой или гидролазой; d) поддерживанием рН
в пределах приблизительно от 8,0 до 11,0; и е)
контролем протекания реакции в течение достаточно длительного времени, до завершения
процесса расщепления. Соединения формулы
(R)-(II) могут быть выделены из раствора стандартными способами обработки; пример которых приведен в примере 18. Согласно общей
методике, конечный раствор фильтруют для
удаления гетерогенных твёрдых веществ, если
они присутствуют, но не продукта, с последующим подкисливанием фильтрата до рН порядка
от 1,0 до 4,0 для осаждения соединений формулы (R)-(II). Гетерогенные твердые вещества
присутствуют, если исходные соединения недостаточно растворимы в растворителе, если
липаза или гидролаза иммобилизованы на
инертном нерастворимом веществе, или если по
ходу обработки добавляются другие нерастворимые фильтрующие вещества, известные любому специалисту в соответствующей области.
Обычно предпочтительно, чтобы полученные
соединения (R)-(II) оставались в растворителе в
форме солей карбоксилатов, до подкисливания
по ходу обработки. Согласно общей методике,
поддерживание рН в интервале порядка 8,0-11,0
может выполняться любым способом, известным каждому специалисту в области химического синтеза. Такие способы включают, но не в
порядке ограничения, добавление основания с
помощью автоматических титраторов, механическим добавлением или добавлением вручную.
Предпочтительными пригодными растворителями являются вода и смеси воды с органическим растворителем. Когда используют смеси
воды и органического растворителя, органическим растворителем может быть ацетонитрил,
толуол, ксилол, простой эфир или спирт, такой
как метанол, этанол, н-пропанол и изопропанол.
Когда используют органические растворители,
преимущественно, общее содержание органиче-
21
ских растворителей в смеси может изменяться в
пределах 0-95%, за исключением случая, когда
органический растворитель является спиртом,
где содержание растворителя может изменяться
в пределах 0-50%. Когда используют органические растворители, процесс может осуществляться в двухфазном растворе.
Круг известных специалисту в соответствующей области сложных тиоэфирных групп,
которые должны действовать эффективно при
получении соединения (R)-(IIa), является разнообразным. В широком смысле, приемлема любая тиоэфирная группа, обладающая достаточной электроноакцепторной способностью для
того, чтобы разрешить разумную скорость рацемизации на бета-углероде.
В способе схемы 1 химический выход соединений формулы (R)-(II) может меняться в
пределах 51-100%, где предпочтительный выход
составляет 75-100% и более желательный выход
составляет приблизительно от 80 до 100%. Вдобавок к химическому выходу оптическая чистота соединении формулы (R)-(II) может изменяться в пределах 30-100%, более предпочтительно оптическая чистота составляет приблизительно от 90 до 100%, и наиболее желательно
оптическая чистота составляет приблизительно
от 95 до 100%.
Настоящее изобретение в порядке примера, а не ограничения, может быть дополнительно иллюстрировано примером по получению
соединения (R)-(IIa) или его соли, согласно схеме 2.
Схема 2
Эту стадию проводят, осуществляя реакцию смеси энантиомеров соединения формулы
(Iа) в пригодном растворителе, в котором может
быть, либо может не быть, растворен пригодный
буфер и/или пригодный сурфактант, с соответствующей липазой или гидролазой и агентом
рацемизации, с последующим добавлением пригодного основания или кислоты для поддерживания рН. Порядок добавления не имеет решающего значения, кроме того, что для протекания рацемизации следует поддерживать рН
добавлением основания. К примеру, липаза или
гидролаза может быть добавлена к реакционной
смеси перед соединением (Iа) или агентом рацемизации, поскольку все вышеуказанные реагенты контактируют друг с другом, прежде добавляют дополнительное количество основания
для сохранения щелочного рН процесса. Буфер
или сурфактант, если добавляются, могут быть
добавлены в любое время.
Процесс проводят в аэробной или анаэробной атмосфере, к примеру, в открытом реакторе, в атмосфере азота или аргона.
001970
22
В качестве общего руководства, способ
осуществляют: а) загрузкой раствора с пригодным буфером, пригодным агентом рацемизации,
пригодным сурфактантом и основанием или
кислотой; b) загрузкой раствора со стереоизомерной смесью соединения формулы (I); с) загрузкой раствора с пригодной липазой; d) поддерживанием рН в пределах приблизительно от
8,0 до 11,0; и е) контролем протекания реакции
в течение достаточно длительного времени, до
завершения процесса расщепления. Соединение
формулы (R)-(IIa) может быть выделено из раствора стандартными способами обработки;
пример которых приведен в примере 18. Согласно общей методике, конечный раствор
фильтруют для удаления гетерогенных твердых
веществ, с последующим подкисливанием
фильтрата до рН порядка от 1,0 до 4,0 для осаждения соединения (R)-(IIa).
Предпочтительными пригодными растворителями являются вода и смеси воды с ацетонитрилом, толуолом, ксилолом, простым эфиром, метанолом, этанолом, н-пропанолом или
изопропанолом. Когда используют органические растворители, преимущественно, общее
содержание органических растворителей в смеси может изменяться в пределах 0-50% для
спиртов и 0-95% для неспиртов. Наиболее желательным пригодным растворителем является
вода.
Предпочтительный интервал рН для этого
способа составляет приблизительно от 3,0 до
11,0. Более предпочтителен интервал рН приблизительно от 8,5 до 10,0. Наиболее желателен
интервал рН приблизительно от 3,5 до 9,5.
Буфер может присутствовать или отсутствовать, и когда он присутствует, то легко подбирается специалистом в соответствующей области. Предпочтительными пригодными соединениями для получения буфера по данному способу являются первичный кислый ортофосфат
натрия или калия.
Предпочтительным пригодным сурфактантом является Тритон X-100 (Triton® X-100),
известный в качестве (PEG(9-10) п-третоктилфенол), в пределах приблизительно от 0 г
до 1 г Тритон®'а X-100 на каждые 5 г соединений формулы (I).
Предпочтительными пригодными липазами или гидролазами для этого способа являются
промышленно выпускаемые ферменты, приобретаемые у коммерческого поставщика и используемые без дополнительной очистки, примерами их являются Аmanо PS30 и Amano АК.
Наиболее предпочтителен Amano PS30.
Предпочтительными пригодными агентами рацемизации по данному способу являются
триметиламин и триэтиламин. Наиболее предпочтительный является триметиламин. Предпочтительный интервал концентраций пригодных агентов рацемизации составляет приблизительно от 0,5 эквивалентов до 10 эквивалентов
23
агента рацемизации на эквивалент субстрата;
более предпочтительно - 2 эквивалента агента
рацемизации на эквивалент субстрата.
Предпочтительными основаниями для этого способа являются гидроокись натрия и гидроокись калия.
Предпочтительный интервал температур
по этому способу составляет приблизительно от
30 до 60°С. Более предпочтительным является
приблизительно от 35 до 50°С. Наиболее предпочтительный - порядка 38-43°С.
Соотношение весовых концентраций выпускаемого промышленностью фермента и субстрата может изменяться приблизительно от 1:1
до 1:500. Предпочтительное соотношение весовых концентраций выпускаемого промышленностью фермента и субстрата равно приблизительно 1:100, более предпочтительное 1:20,
наиболее желательное 1:10. Это соотношение
зависит от процента активного фермента, содержащегося в промышленном препарате.
Предпочтительное время реакции является
параметром, зависящим от концентрации реагентов, температуры, рН и требуемого выхода.
Обычно требуемое время реакции составляет от
10 до 150 ч, при этом предпочтительно порядка
30-40 ч.
В способе схемы 2 химический выход соединения (R-(IIa) может варьироваться в пределах 51-100%, где предпочтительный выход составляет 75-100%, а более желателен выход
приблизительно от 80 до 100%. Вдобавок к химическому выходу, оптическая чистота соединения (R)-(IIa) может изменяться в пределах 51100%, где предпочтительная оптическая чистота
составляет 30-100%, более предпочтительно
оптическая чистота составляет приблизительно
от 90 до 100%, и наиболее желательная оптическая чистота - приблизительно от 95 до 100%.
Предпочтительной атмосферой для этого
способа является азот.
Примеры способов приведения реакционной смеси в движение при этом процессе могут
включать в себя, но не в порядке ограничения,
физическое или механическое перемешивание,
замешивание, продувку нереагирующим газом
или вращение реакционного сосуда. Предпочтительным способом является перемешивание.
Соединения по данному изобретению могут
быть получены рядом способов, хорошо известных специалисту в соответствующей области
органического синтеза. Соединения по данному
изобретению могут быть синтезированы с применением описанных ниже способов, наряду со
способами синтеза, известными в области синтетической органической химии, или варьированием их согласно оценке специалистов в соответствующей области. Предпочтительные
способы включают в себя, но не в порядке ограничения, те, что указаны ниже.
001970
24
Вся цитируемая в качестве источников
справочная литература упоминается здесь в виде подробных ссылок.
В настоящем описании приняты следующие обозначения:
DMF: N,N-диметилформамид (ДМФ),
DBU: 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундек-7-ен,
EtOH: этиловый спирт,
NaOTMS: триметилсиланолат натрия,
NCS: N-хлорсукцинимид,
руr: пиримидин,
TEA: триэтиламин и
THF: тетрагидрофуран (ТГФ).
Синтез соединений по данному изобретению основан на биполярном циклоприсоединении нитрилоксидов к соответствующему биполярофилу как ключевой стадии (для обзора химии 1,3-биполярного циклоприсоединения см.
1,3-Dipolar Cycloaddition Chemistry (Padwa, ed.),
Wiley, New York, 1984; Kanemasa and Tsuge,
Heterocycles 1990, 30, 719). Схема 3 описывает
одну последовательность синтеза соединения
(Iа) и пригодную для соединений формулы (I)
по данному изобретению. Соответственно замещенный гидроксиламин обрабатывают NCS в
ДМФ по способу Liu'a, et. al. (J. Org. Chem. 19
80, 45, 3916). Затем полученный гидроксиминоилхлорид дегидрогалоидируют in situ (на месте),
используя триэтиламин, что дает нитрилоксид,
который подвергают 1,3-биполярному циклоприсоединению к соответственно замещённому
алкену для получения изоксазолина. Или же,
оксим может быть оксидативно хлорирован,
дегидрохлорирован и полученный нитрилоксид
улавливается пригодным алкеном в условиях
обращения фаз по способу Lee (Synthesis 1982,
508). Промежуточные продукты, содержащие
чувствительные к щелочам функциональные
группы, такие как нитрил, могут быть деэтерифицированы с высокой хемоселективностью
использованием триметилсиланолата натрия по
способу Laganis'a и Ehenard'a (Tetrahedron Lett.
1984, 25, 5831).
Схема 3
Либо биполярное циклоприсоединение
промежуточного гидроксиминоилхлорида из
схемы 3 может быть выполнено по реакции со
сложными алкиловыми эфирами соответственно
замещенных алкенов (схема 3а). Сложные оксоэфиры 3-бутеновых кислот могут быть получены путём первоначального превращения в хлористый ацил по способу Marson'a et. al. (J. Org.
Chem. 1994, 59, 291) с последующей конденсацией с требуемым спиртом. Затем этот продукт
приводят к вышеуказанным условиям циклиза-
25
ции изоксазолина для получения цикла и потом
превращают в сложный тиоэфир путем реакции
сложного оксоэфира с (алкилтио)триметилсиланом, полученным по способу Aizpurua et. al.
(Can. J. Chem. 1984, 62, 336), и треххлористым
алюминием в тетрагидрофуране по способу Mukaiyama et. al. (Chem. Lett. 1974, 187).
Схема 3а
Другой способ получения сложного тиоэфира относится к конденсации хлористого
ацила оксазолин-замещенной карбоновой кислоты, (полученного по схеме 3 или путем циклоприсоединения промежуточного гидроксииминоилхлорида из схемы 3 к 3-бутеновой кислоте) либо с солью меди требуемого тиола,
(соль получают по способу Adams'a et. al. (Org.
Syn. 1962, 42, 22)) по способу Reissig'a и Scherer'a (Tetrahedron Lett. 1980, 21, 4259), либо к
конденсации с тиолом при катализе хлоридом
кобальта (II) по способу Ahmad'a и Iqbal'a (Tetrahedron Lett. 1986, 27, 3791), (схема 3b).
Схема 3b
Циклоконденсация может также быть выполнена со сложным тиоэфиром бутеновой кислоты, как в схеме 3с, с использованием химических превращений, подобных указанным выше.
Схема 3с
Установлено, что специалист в соответствующей области может получить замещённые
соединения изоксазолина формулы (I) из исходных соединений, содержащих альдегид согласно
способам, аналогичным описанным в схеме 3 и
в приведенных выше иллюстрирующих примерах, или одним из многочисленных способов,
опубликованных в литературе. Опубликованные
примеры соединений изоксазолина или способов получения соединений изоксазолина включают, но не в порядке ограничения, патент
США № 4 970 297, патент США № 5 489 562,
патент США № 4 256 898, патент США № 4 933
464, патент США № 4 952 700, международную
публикацию РСТ WO 95/14681, патент США №
4 952 700; международную публикацию РСТ
WO 95/14680 и международную публикацию
РСТ WO 95/24398. Дополнительные опубликованные примеры соединений изоксазолина или
001970
26
способов получения соединений изоксазолина
могут быть найдены в Comprehensive Organic
Synthesis (Trost ed.) Pergamon Press, New York,
4, 1991 и The Chemistry of Heterocyclic Compounds: Five and Six-Membered Compounds with
Nitrogen and Oxygen (Wiley ed.) Interscience
Publishers, J. Wiley & Sons, New York, 1962.
Имеется в виду, что последующие примеры являются иллюстративными для данного
изобретения. Эти примеры приведены для пояснения изобретения и не должны истолковываться как ограничивающие рамки объёма изобретения и приложенных пунктов.
В приведенных ниже спектрах ЯМР приняты следующие обозначения:
m мультиплет (м),
s синглет (с),
t триплет (т),
d дублет (д),
q квартет (кв),
dd двойной дублет (дд),
h гептет (г).
Условия А для ВЭЖХ (высокоэффективной
жидкостной хроматографии)
Колонка 25 см х 4,6 мм Zorax® RXC8,
температура 40°С (Rockland Technology Inc.);
280 нм; система растворителей: А является 0,1%
трифторуксусной кислотой в воде, В является
20% трифторуксусной кислотой в ацетонитриле,
соотношение А/В составляет 80/20 при Т = 0
мин, 25/75 при Т = 10 мин, 80/20 при Т = 20
мин; 1,0 мл/мин: 2,0 мкл инжекция ~ 1 мг/1,0 мл
раствора.
Условия В для ВЭЖХ
Колонка 25 см х 4,6 мм Bakerbond
Chiralcel® OJ 10 мкм (Daicel Chemical Industry
Limited); температура 38°С; 280 нм; система
растворителей: этанол/гексан/трифторуксусная
кислота (20/85/0,25); 2,0 мкл инжекция ~1 мг/1,0
мл раствора.
Условия С для ВЭЖХ
Условия, аналогичные условиям В для высокоэффективной жидкостной хроматографии,
за исключением того, что соотношение растворителей: этанол/гексан/трифторуксусная кислота (60/40/0,25) и скорость потока 0,50 мл/мин.
Условия D для ВЭЖХ
Bakerbond Chiralcel® AS (250 х 4,6 мм;
частицы 10 микрон), температура 25°С; 280 нм;
система растворителей: 85% двуокиси углерода,
15% этанола, содержащего 1% (об/об) трифторуксусной кислоты; давление: 200 атм; скорость
потока 1,0 мл/мин; 5 мкл инжекция ~ 1 мг/1 мл
раствора. Время удерживания: (R)-(IIa) (11,6
мин), (S)-(IIa) (14,0 мин), (S)-(IV) (7,4 мин), (R)(IV) (6,7 мин).
Пример 1. Получение соединения Ia, где R1
означает н-пропил
27
К раствору 1-пропантиола (93,0 г, 1,29
моль) и ТГФ (850 мл) при 4°С добавляют 2,6 М
раствор гексиллития в гексане (500 мл, 1,30
моль) поддерживая температуру < 15°С. Температуру снижают до 4°С и добавляют хлортриметилсилан (175 мл, 1,38 моль), поддерживая температуру <15°С. Суспензию нагревают до температуры окружающей среды, фильтруют и
твердые
продукты
промывают
смесью
ТГФ/гексан (1:1) (100 мл). Фильтрат охлаждают
до 10°С и в систему загружают хлористый алюминий (120 г, 0,70 моль), поддерживая температуру < 21°С. После нагрузки (IV) (200,0 г, 0,70
моль) суспензию напревают до температуры
кипения с обратным холодильником свыше 20
мин и выдерживают при температуре кипения
до тех пор, пока ВЭЖХ (условия А) покажет
завершение реакции, через 50 мин. Реакционную смесь охлаждают до 16°С. Загружают воду
(850 мл) при <30°С, после чего - толуол (525
мл). Слои разделяют и потом водный слой экстрагируют толуолом (100 мл). Объединенные
органические слои промывают водой (3 х 400
мл), фильтруют и нагревают до 40°С. Добавляют гептан (1300 мл) при 38-40°С для кристаллизации сложного тиоэфира. Суспензию охлаждают до 4°С за 3 ч, фильтруют и твердые продукты промывают гептаном. Кристаллы сушат,
получая (Iа-3) (189 г, 94%) в виде светложелтого гранулированного твёрдого вещества.
Аналитический образец получают перекристаллизацией из этилацетат/гептана, т.пл. 67,168,2°С;
1
H-ЯМР (CDCl3, 300 МГц): 1,00 (т, 3Н),
1,50-1,70 (м, 2Н), 2,80-2,95 (м, 3Н), 3,05-3,10 (м,
2Н), 3,50-3,60 (дд, 1Н), 5,05-5,15 (м, 1Н), 7,607,80 (м, 4Н).
Анал.
рассчитано
для
C15H16N2O2S
(288,33): С 62,48; Н 5,59; N 9,71; S 11,11. Найдено: С, 62,38; Н, 5,58; N, 9,67; S, 11,03. HRMS
(NН3-Сl) m/z 289,101399 (М+Н), рассчит. для
C15H16N2O2S 289,101075.
Пример 2. Получение соединения Ia, где R1
означает н-бутил
Используя тот же способ, что в примере 1,
(IV) (11,5 г, 40,0 ммоль) обрабатывают АlСl3
(6,8 г, 52 ммоль) и н-бутилтиотриметилсиланом
(полученным способом, аналогичным описанному в примере 1, из 1-бутантиола), получая
сложный н-бутилтиоэфир (Iа-4) (10,6 г, 88%) в
виде белого твердого вещества. Аналитический
образец получают перекристаллизацией из
этилацетат/гептана, т.пл. 68,1-69,0°С;
1
H-ЯМР (СDСl3, 300 МГц): 7,73 (кв, 4Н),
5,3-5,1 (м, 1Н), 3,52 (дд, 1Н), 3,3-3,0 (м, 2Н), 3,02,8 (м, 3Н), 1,55 (кв, 2Н), 1,38 (г, 2Н), 0,92 (т,
3Н).
001970
28
Анал.
рассчитано
для
C16H18N2O2S
(302,34): С 63,55; Н 6,00; N 9,26; S 10,60. Найдено: С 63,62; Н 5,89; N 9,20; S 10,63.
HRHS (NН3-Cl) m/z 303,116758 (М+Н),
рассчит. для C16H18N2O2S 303,116725.
Пример 3. Получение ±(IIa) из (IV)
Раствор (IV) (5,64 г, 19,70 ммоль), моногидрата гидроокиси лития (0,92 г, 21,93 ммоль),
метанола (10 мл), ТГФ (30 мл) и вoды (10 мл)
при 0°С перемешивают в течение 130 мин, пока
ВЭЖХ (условия А) не укажет на завершение
гидролиза. Смесь подкисливают 1 н. НСl до рН
7. Летучие продукты удаляют в вакууме и остаток дополнительно подкисливают до рН 1 с помощью конц. НСl, общий объем ~30 мл. Твёрдые продукты собирают фильтрацией, промывают водой и сушат, получая ±(IIа) (4,42 г, 97%)
в виде светло-желтого порошка. Чистота и нехиральные спектральные характеристики такие
же, как зарегистрированы для (R)-(Ila).
Пример 4. Получение сложного метилового эфира из ±(IIа)
Суспензию ±(IIа) (4,00 г, 17,4 ммоль) в метаноле (100 мл, при 0°С перемешивают с тионилхлоридом (2,0 г, 16,8 ммоль) и дают нагреться до температуры окружающей среды. Через 28
ч летучие продукты удаляют в вакууме, после
чего остается сложный метиловый эфир (V)
(4,25 г, 100%) в виде жёлтого порошка.
Пример 5. Получение сложного нпропилтиоэфира (Iа-3) из ±(IIа)
Раствор ±(IIа) (8,0 г, 34,9 ммоль), тионилхлорида (9,6 г, 81 ммоль) и ацетонитрила (100
мл) перемешивают при 50°С в течение 0,5 ч в
атмосфере N2. Растворитель и избыток тионилхлорида удаляют в вакууме и остаток вновь растворяют в 100 мл ацетонитрила. Раствор обрабатывают CuSCH2CH2CH3 (6,2 г, 45,3 ммоль),
полученным способом, аналогичным описанному ранее для бутилового аналога (R. Adams et.
al., Org. Synth. 42, 22), при 50°С в течение 2 ч в
атмосфере N2. Смесь упаривают в вакууме досуха. Растворители удаляют в вакууме, полученный желто-коричневый твёрдый продукт
смешивают с этилацетатом (100 мл) и смесь
фильтруют. Фильтрат промывают 0,1н. НСl (2 х
100 мл). Органическую часть сушат над MgSO4,
фильтруют и упаривают досуха. Полученный
твердый продукт сушат в вакууме, что даёт (Iа3) (7,2 г, 72%) в виде желтого твердого вещества.
29
Пример 6. Получение сложного этилтиоэфира (Iа-2)
Используя тот же способ, что в примере
16, ±(IIa) (4,0 г, 17,4 ммоль) подвергают реакции
с тионилхлоридом (5,2 г, 44 ммоль) с последующим добавлением СuSСН2СН2СН3 (3,2 г, 26
ммоль), получая сложный этилтиоэфир (Iа-2)
(3,1 г, 65%) в виде желтоватого твердого вещества. Аналитический образец получают перекристаллизацией из этилацетат/гептана, т.пл.
92,0-93,1°С;
1
Н-ЯМР (СDСl3, 300 МГц) 1,20-1,30 (т,
3Н), 2,80-3,0 (м, 3Н), 3,10-3,22 (м, 3Н), 3,50-3,60
(дд, 1Н), 5,05-5,15 (м, 1Н), 7,70-7,80 (дд, 4Н).
Анал.
рассчитано
для
С14Н14N2О2S
(274,32): С 61,29; Н 5,14; N 10,21; S 11,68. Найдено: С 61,45; Н 5,23; N 10,15; S 11,96.
HRMS (NН3-Сl) m/z 275,085274 (М+Н)
рассчит. для C14H14N2O2S 275,085425.
Пример 7. Получение сложного метилового эфира (V) из (IV)
Суспензию (IV) (1,00 г, 3,49 ммоль) в метаноле (10 мл) при 0°С перемешивают с тионилxлоридом (0,31 мл, 4,25 ммоль) и дают нагреться до температуры окружающей среды.
Через 3 дня летучие продукты удаляют в вакууме, после чего остаётся сложный метиловый
эфир (V) (0,88 г, 100%) в виде желтого порошка.
Пример 8. Конверсия сложного метилового эфира (V) до сложного этилтиоэфира (Iа-2).
Превращение может быть выполнено тем
же способом, что и конверсия (IV) до (Iа-3), в
примере 1, с выходом 98%. Чистота и спектральные характеристики такие же, как у сложного этилового тиоэфира, полученного в примере 6.
Пример 9. Получение сложного нпропилтиоэфира винилуксусной кислоты.
Раствор тионилхлорида (8,4 г, 71 ммоль) и
винилуксусной кислоты (5,0 г, 58 ммоль) перемешивают при комнатной температуре в течение 10 мин и затем нагревают до 50°С в течение
4 ч. Полученный раствор обрабатывают безводным CoCl2 (0,20 г, 1,7 ммоль) и 1-пропантиолом
(4,8 г, 63 ммоль). Смесь перемешивают при
комнатной температуре в течение ночи в атмосфере азота. Смесь выливают в смесь вода/этилацетат (1:1) (200 мл). Органический слой
отделяют и водный слой экстрагируют 15 мл
этилацетата. Объединённые органические фазы
промывают 0,5М раствором К2НРO4 (3 х 50 мл)
и затем 50 мл воды. Растворитель удаляют в
вакууме и остаток хроматографируют на силикагеле гексаном, получая сложный н-
001970
30
пропилтиоэфир винилуксусной кислоты (4,8 г,
57%) в виде бесцветного масла.
1
H-ЯМР (CDCl3, 300 МГц): 0,9-1,0 (т, 3Н),
1,5-1,7 (м, 2Н), 2,8-2,9 (т, 2Н), 3,15 (д, 2Н), 5,085,15 (м, 2Н), 5,8-6,0 (м, 1Н).
Анал. рассчитано для C7H12OS (144,23): С
58,29; Н 8,38. Найдено: С 57,93; Н 8,03.
Пример 10. Циклоприсоединение сложного н-пропилтиоэфира винилуксусной кислоты к
п-цианобензальдегиду с образованием (Iа-3).
Смесь хлороксима п-цианобензальдегида
(2,10 г, 11,63 ммоль), сложного пропилтиоэфира
винилуксусной кислоты (2,01 г, 12,00 ммоль) и
ДМФ (20 мл) при 0°С обрабатывают триэтиламином (1,24 г, 12,25 ммоль) в 4 мл ДМФ в течение 145 мин. Смеси дают нагреться до температуры окружающей среды и перемешивают дополнительно 1,5 ч. Соли удаляют фильтрацией и
промывают 5 мл ДМФ.
Фильтрат добавляют по каплям к 160 мл
разбавленной НСl для осаждения твердых продуктов, охлаждают до 4°С и собирают фильтрацией. Твердые продукты сушат в вакууме, получая (Iа-3) (1,95 г, 59%) в виде светло-желтого
гранулированного твёрдого вещества. Чистота и
спектральные характеристики аналогичны соответствующим характеристикам продукта, полученного из (IV).
Пример 11. Получение сложного метилового эфира (V) посредством циклоприсоединения.
Циклоприсоединение проводят способом,
подобным описанному в примере 10, за тем исключением, что в качестве производного винилуксусной кислоты используют метил-3бутеноат (0,93 г, 9,29 ммоль) для получения
сложного метилового эфира (V) (1,39 г, 54%
выход в расчете на 76% чистоту продукта по
ВЭЖХ, условия А). Аналитический образец
получают перекристаллизацией из этилацетат/гептана, т.пл. 121,0-123,3°С;
1
H-ЯМР (CDCl3, 300 МГц): 7,65 (кв, 4Н),
5,3-5,1 (м, 1Н), 3,69 (с, 3Н), 3,52 (дд, 1Н), 3,11
(дд, 1H), 2,86 (дд, 1Н), 2,65 (дд, 1Н).
Анал.
рассчитано
для
C13H12N2O3S
(244,25): С, 63,93; Н, 4,95; N, 11,47; найдено С
63,92; Н 5,04; N 11,43.
HRMS (NН3-Cl) m/z 245,092772 (M+H),
рассчит. для C13H12N2O3S 245,092617.
Пример 12. Проверка липазы.
Липазу проверяют на эффективность к
гидролизу сложного тиоэфира, загружая пробирку на 2 драхма смесями приблизительно
следующего состава:
30 мг сложного тиоэфира соединения (IIа);
20 мг липазы 30 мл фосфатного буфера рН
8;
5 мкл агента рацемизации, органического
амина;
4 капли Triton® Х-100.
Эту смесь перемешивают небольшой мешалкой-стержнем с тефлоновым (Teflon®) по-
31
крытием на масляной бане при 40-45°С и контролируют путем ВЭЖХ (условия А, В или С).
Пример 13.
Гидролиз (Iа-2) до (R)-(IIa) с помощью
Amano-липазы АК. Используют методику проверки липазы примера 12 (агентом рацемизации
является DBU), ВЭЖХ (условия С) показывает,
что 90-95% (R)-сложного эфира гидролизуется
до (R)-(IIa), (хвост R-пика слишком мал, чтобы
его интегрировать).
Пример 14. Гидролиз (Iа), где Y-R1 означает S-изобутил, до (R)-(IIa) с помощью Аmanолипазы AY30.
Используют методику проверки липазы
примера 12 (агентом рацемизации является
DBU). ВЭЖХ (условия D) показывает ее% (в
пределах ошибки эксперимента) 63% для (R)(IIa).
Пример 15. Гидролиз (Iа), где Y-R1 означает S-изобутил до (R)-(IIa) с помощью Amanoлипазы АК.
Используют методику проверки липазы
примера 12 (агентом рацемизации является
DBU). ВЭЖХ (условия D) показывает ее% 85%
для (R)-(IIa).
Пример 16. Гидролиз (Ia-4) до (R)-(IIa) с
помощью Amano-липазы АК.
Используют методику проверки липазы
примера 12 (агентом рацемизации является
DBU). ВЭЖХ (условия D) показывает ее% 95%
для (R)-(IIa).
Пример 17. Гидролиз (Iа-4) до (R)-(IIa) с
помощью Amano-липазы PS30.
Используют методику проверки липазы
примера 12 (агентом рацемизации является
DBU). ВЭЖХ (условия D) показывает ее% 87%
для (R)-(IIa).
Пример 18. Динамическое расщепление
(Iа-3) до (R)-(IIa).
Раствор воды (2,7 л), NaH2PO4 (275 г, 2,29
моль) и 25% водного триметиламина (330 мл,
1,27 моль) доводят до рН 8,35 с помощью 6н.
NaOH (80 мл). В полученный раствор загружают (Iа-3) (183,0 г, 0,635 моль), Triton® X100 (15
г) и липазу PS30 (18,3 г). Эту суспензию перемешивают при 40-42°С и рН поддерживают между 9,0-9,5, изредка добавляя 6н. раствор NaOH.
Реакцию контролируют ВЭЖХ (условия С) в
течение 2 дней, пока не произойдет полное превращение (> 99,5% по площади) (Iа-3) в (R)(IIа). Смесь охлаждают до температуры окружающей среды и твердые вещества (липазу)
удаляют фильтрацией. (R)-(IIa) осаждают, добавляя 50% Н3РО4 (450 мл) до достижения рН 3.
Твердые продукты собирают фильтрацией и
промывают дважды 200 мл воды. Твердые продукты сушат в вакууме, получая 143,0 г (98,3
%ее, В условия ВЭЖХ) желтоватого твердого
вещества. Вещество растворяют в 2 л этанола и
перекристаллизовывают, охлаждая до 3°С. Кристаллы собирают фильтрацией, промывают эта-
001970
32
нолом (200 мл) и сушат в вакууме до (R)-(IIa)
(129,4 г, 89%), в виде блестящего порошка.
Т.пл. 198-200°С; 99,7% ее (D условия
ВЭЖХ).
1
H-ЯМР (DMSO-d6, 300 МГц) 12,46 (с, 1Н),
7,89 (кв, 4Н), 5,15-4,95 (м, 1Н), 3,63 (дд, 1Н),
3,20 (дд, 1Н), 2,70 (н, 2Н).
Анал. рассчитано для C12H10N2O4 (230,22)
С 62,61; Н 4,38; N 12,17. Найдено: С 62,39; Н
4,49; N 11,98.
Пример 19.
Динамическое расщепление (Ia-2) до (R)(IIa).
Используя те же условия, что описаны в
примере 13, 1,0 г (3,48 ммоль) сложного этилтиоэфира (Ia-2) гидролизуют до (R)-(IIa) (0,63 г,
75%) в виде не совсем белых кристаллов (97,3%
ее, D условия ВЭЖХ).
Пример 20. Динамическое расщепление
(Iа-4) до (R)-(IIa).
Используя те же условия, что описаны в
примере 18, 5,0 г (15,8 ммоль) сложного нбутилтиоэфира (Iа-4) гидролизуют до (R)-(IIа)
(3,38 г, 91,4%) в виде бесцветных игольчатых
кристаллов (99,4% ее, D условия ВЭЖХ).
Пример 21. Динамическое расщепление
(Ia-2) с использованием в качестве агента рацемизации этиламина вместо триметиламина.
Используя условия, аналогичные описанным в примере 18, 2,0 г (7,3 ммоль) сложного
этилтиоэфира (Ia-2) гидролизуют в присутствии
70% водного этиламина (0,33 г, 5,12 ммоль) до
(R)-(IIа) (0,78 г, 45%) в виде белых кристаллов
(92,4% ее, D условия ВЭЖХ).
Пример 22. Динамическое расщепление
(Iа-3) в отсутствие буфера.
(Iа-3) (0,90 г, 3,12 ммоль) гидролизуют
способом, аналогичным способу примера 18, за
тем исключением, что буфер не нагружают, а
1н. НСl добавляют после добавления триметиламина с целью снижения рН до 9,5. Следуя
стандартной обработке, (R)-(IIа) (0,42 г, 58%)
выделяют в виде белого твердого вещества
(98,8% ее, В условия ВЭЖХ).
Пример 23. Динамическое расщепление
(Ia-3) до (R)-(IIa) в отсутствие сурфактанта.
(Ia-3) (10,0 г, 34,9 ммоль) гидролизуют
способом, аналогичным способу примера 18, за
тем исключением, что сурфактант не загружают. Следуя стандартной обработке, (R)-(IIa) (7,4
г, 92%) выделяют в виде белого твердого вещества (98,2% ее, В условия ВЭЖХ).
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Способ получения оптически активных
соединений формулы (R)-(II) или формулы (S)(II):
или их соли, в которых
33
R2 означает -Н, галоген, -СF3, -CN, -NO2,
-ОН, C1-C8-алкокси, C1-C10-алкилкарбонил,
-N(R12)R13, -СНО, -СО2Н, -С(=O)R5a, -CONR5R5a,
-C(=NH)NR5R5a, -SR5a, -SO2R5a, -SO2NR5R5a,
C1-C8-алкил, замещённый 0-3 R4,
C2-C8-алкенил, замещённый 0-3 R4,
C2-C8-алкинил, замещённый 0-2 R4,
C3-C10-циклоалкил, замещённый 0-3 R4,
C6-C10-арил, замещённый 0-3 R4,
5-10-членный гетероцикл, содержащий 1-4
гетероатома N, О или S, где указанный гетероцикл может быть насыщенным, частично насыщенным или полностью ненасыщенным, указанный гетероцикл замещён 0-2 R4,
аминокислоту или
пептид;
R3 означает водород, С1-С4-алкил, замещённый 0-3 R4 или фенил, замещённый 0-3 R4;
R4 выбирают из Н, C1-C10-алкила, -ОН, C1-NO2,
C1-C10-алкилкарбонила,
C10-алкокси,
-N(R12)R13, -CN, галогена, -СF3, -СНО, -СO2Н,
-C(=O)R5a,
-CONR5R5a,
-C(=NH)NR5R5a,
5a
5a
-OC(=O)R ,
-OR ,
-OC(=O)NR5R5a,
-ОСН2СO2Н, -СO2СН2СO2Н, -NR5aC(=O)R5a,
-NR5aC(=O)NR5R5a,
-NR5aC(=O)ОН,
5a
5 5a
5a
5
-NR SO2NR R , -NR SO2R , -SR5a, -SO2R5a,
-SO2NR5R5a,
C2-C6-алкенила,
C3-C11циклоалкила, C4-C11-циклоалкилметила или
C6-C10-арила, возможно замещённого 1-3
группами, которые выбирают из галогена, C1C4-алкокси, C1-C4-алкила, -СF3, -S(O)2Me или
-NMe2;
R5 выбирают из Н, C1-C8-алкила, C2-C6алкенила, C3-C11-циклоалкила, C4-C11-циклоалкилметила, C6-C10-арила, C7-C11-арилалкила или
C1-C10-алкила, замещенного 0-2 R6;
R5а выбирают из Н, C1-C8-алкила, C2-C6алкенила, C3-C11-циклоалкила, С4-С11-циклоалкилметила, C6-C10-арила, С7-С11-арилалкила или
C1-C10-алкила, замещенного 0-2 R6,
альтернативно R5 и R5a могут быть выбраны так, что вместе образуют 3-азабициклононил, 1-пиперидинил, 1-морфолинил или 1пиперазинил, каждый из которых возможно замещён C1-C6-алкилом, C6-C10-арилом, C7-C11арилалкилом, C1-C6-алкилкарбонилом, С3-С7циклоалкилкарбонилом, C1-C6-алкилсульфонилом или C6-C10-арилсульфонилом;
R6 выбирают из Н, C1-C10-алкила, гидрокси, C1-C10-алкокси, нитро, C1-C10-алкилкарбонила или -N(R12)R13;
R12 и R13 независимо выбирают из Н, метила или этила;
включающий контактирование в пригодном растворителе стереоизомерной смеси соединения формулы (I)
в которой Y означает S;
R1 означает -С(R10)2(R10a),
001970
34
-C(R10)2-C(R10b)2(R10c),
-С(R10)2-С(R10b)2-С(R10c)3,
-C(R10)2-C(R10b)=C(R10c)2,
-C(R10)2-C≡C(R10c),
-C(R10)=C(R10b)(R10c),
-C(R10)=C(R10b)-C(R10c)3,
-C≡C(R10c),
-C≡C-C(R10c)3,
R10 означает Н или F;
R10a выбирают из Н, F, Сl, Вr, -СН3,
-СН2СН3, -СН2-СН2СН3, -СF3, -СF2СF3, -ОСН3,
-ОСН2СН3, -ОСН2СН2СН3, -SСН3, -SСН2СН2,
-SСН2СН2СН3 и циклопропила;
R10b означает Н, F, Cl или Вr;
R10c в каждом случае независимо выбирают из Н, галогена, C1-C3-галоалкила, -ОН, С1-С4алкокси, -СF3, -SСН3, -SСН2СН3, -SСН2СН2СН3,
-CN, -NО2, -S(O)2Ме, -NMe2,
C1-C6-алкил, замещённый 0-3 R11,
C2-C6-алкенил, замещённый 0-3 R11,
С2-С6-алкинил, замещённый 0-2 R11,
С3-С6-циклоалкил, замещённый 0-3 R11,
C6-C10-арил, замещённый 0-3 R11 или
C4-C10-гетероцикл, замещённый 0-3 R11; a
R11 выбирают из Н, галогена, С1-С4-алкила,
C1-C3-галоалкила, C1-C4-алкокси, фенила, -ОН, NO2, -CN, -СF3, -S(O)2Ме и -NMe2;
с соответствующей липазой в присутствии
агента рацемизации, при поддерживании подходящего щелочного рН путём добавления основания или кислоты, чтобы получить соединение
формулы (R)-(II) или формулы (S)-(II) с выходом больше чем 51% и oптической чистотой
выше 80%.
2. Способ по п.1 получения оптически активного соединения формулы (R)-(II)
или его соли, в которой
R2 означает фенил, замещённый 0-3 R4,
R3 означает водород;
R4 выбирают из Н, C1-C10-алкила, -ОН, C1C10-алкокси,
-NO2,
C1-C10-алкилкарбонила,
-N(R12)R13, -CN, галогена, -СF3, -СНО, -СO2Н,
-CONR5R5a,
-C(=NH)NR5R5a,
-C(=O)R5a,
5a
5a
-OC(=O)R ,
-OR ,
-OC(=O)NR5R5a,
-ОСН2СO2Н, -СO2СН2СO2Н, -NR5aC(=O)R5a,
-NR5aC(=O)ОН,
-NR5aC(=O)NR5R5a,
5a
5 5a
5a
-NR SO2NR R ,
-NR SO2R5,
-SO2R5a,
5 5a
-SO2NR R ,
C2-С6-алкенила,
C3-C11циклоалкила, С4-С11-циклоалкилметила или
C6-C10-арил, возможно замещенный 1-3
группами, которые выбирают из галогена, C1C4-алкокси, С1-С4-алкила, -СF3, -S(O)2Me или
-NMe2;
R5 выбирают из Н, C1-C8-алкила, С2-С6C4-C11алкенила,
С3-С11-циклоалкила,
циклоалкилметила,
C6-C10-арила,
C7-C11арилалкила или C1-C10-алкила, замещённого 0-2
R6;
35
R5a выбирают из Н, C1-C8-алкила, С2-С6C4-C11алкенила,
C3-C11-циклоалкила,
циклоалкилметила,
C6-C10-арила,
С7-С11арилалкила или C1-C10-алкила, замещенного 0-2
R;
альтернативно R5 и R5a могут быть выбраны так, что вместе образуют 3-азабициклононил, 1-пиперидинил, 1-морфолинил или 1пиперазинил, каждый из которых возможно замещен C1-C6-алкилом, C6-C10-арилом, C7-C11арилалкилом, C1-C6-алкилкарбонилом, C3-C7циклоалкилкарбонилом, C1-C6-алкилсульфонилом или C6-C10-арилсульфонилом;
R6 выбирают из Н, C1-C10-алкила, гидрокси, C1-C10-алкокси, нитро, C1-C10-алкилкарбонила или -N(R12)R13;
R12 и R13 независимо выбирают из Н, метила или этила;
включающий контактирование, в пригодном растворителе, стереоизомерной смеси соединения формулы (I)
в которой Y означает S;
R1 означает -C(R10)2(R10a),
-C(R10)2-C(R10b)2(R10c),
-C(R10)2-C(R10b)2-C(R10c)3,
-C(R10)2-C(R10b)=C(R10c)2,
-C(R10)2-C≡C(R10c),
-C(R10)=C(R10b)(R10c),
-C(R10)=C(R10b)-C(R10c)3,
-C≡C(R10c),
-C≡C-C(R10c)3,
R10 означает Н или F;
R10a выбирают из Н, F, Cl, Br, -СН3,
-СН2СН3, -СН2-СН2СН3, -СF3, -СF2СF3, -ОСН3,
-ОСН2СН3, -ОСН2СН2СН3, -SСН3, -SСН2СН3,
-SСН2СН2СН3 и циклопропила;
R10b означает Н, F, Cl или Br;
R10c в каждом случае независимо выбирают из Н, галогена, C1-С3-галоалкила, -ОН, С1-С4алкокси, -СF3, -SСН3, -SСН2СН3, -SСН2СН2СН3,
-NMe2,
C1-C6-алкил, замещённый 0-3 R11,
С2-С6-алкенил, замещённый 0-3 R11,
С2-С6-алкинил, замещённый 0-2 R11,
С3-С6-циклоалкил, замещённый 0-3 R11,
С6-С10-арил, замещённый 0-3 R11 или
С4-С10-гетероцикл, замещённый 0-3 R11; а
R11 выбирают из Н, галогена, С1-С4-алкила,
C1-C3-галоалкила, С1-С4-алкокси, фенила, -ОН,
-NO2, -CN, -CF3, -S(O)2Me и -NMe2;
с соответствующей липазой в присутствии
агента рацемизации, при поддерживании подходящего щелочного рН путём добавления основания или кислоты для получения соединения
формулы (R)-(II) с выходом больше чем 51% и
оптической чистотой выше 80%.
3. Способ по п.2 получения оптически активного соединения формулы (R)-(IIa)
001970
36
или его соли, включающий контактирование, в
пригодном растворителе, стереоизомерной смеси соединения формулы (Iа)
в которой R1 означает -СН2(R10a),
-CH2-CH2(R10c),
-CH2-CH2-C(R10c)3,
-CH2-CH=C(R10C)2,
-CH2-C≡C(R10c),
R10a выбирают из Н, -СН3, -СН2СН3 и
-СН2СН2СН3;
R10c в каждом случае независимо выбирают из Н, -ОН, C1-C4-алкокси, -NMe2,
C1-C6-алкил, замещённый 0-3 R11,
C2-C6-алкенил, замещённый 0-3 R11,
С2-С6-алкинил, замещённый 0-2 R11, или
С3-С6-циклоалкил, замещённый 0-3 R11, a
R11 выбирают из Н, галогена, C1-C4-алкила,
C1-C3-галоалкила, С1-С4-алкокси, фенила, -ОН,
-NO2, -CN, -СF3, -S(O)2Me и -NMe2;
с соответствующей липазой в присутствии агента рацемизации, при поддерживании подходящего щелочного рН путём добавления основания или кислоты для получения соединения
формулы (R)-(IIa) с выходом больше чем 51% и
оптической чистотой выше 80%.
4. Способ по п.3, в котором пригодной липазой является Amano PS30 или Amano АК.
5. Способ по п.3, в котором агент рацемизации выбирают из триметиламина, триэтиламина, трипропиламина и трибутиламина.
6. Способ по п.3, в котором пригодным
растворителем является либо вода, либо смесь
воды и органического растворителя, где органический растворитель выбирают из метанола,
этанола, пропанола, изопропанола, ацетонитрила, толуола, ксилола и простого эфира.
7. Способ по п.3, в котором пригодное значение рН заключено приблизительно в пределах
от 8,0 до 11,0.
8. Способ по п.3, дополнительно включающий в себя пригодный буфер, добавленный
к пригодному растворителю и помогающий
поддерживать пригодное значение рН путём
добавления основания.
9. Способ по п.8, в котором пригодной липазой является Amano PS30 или Amano АК.
10. Способ по п.8, в котором агент рацемизации выбирают из триметиламина, триэтиламина, трипропиламина и трибутиламина.
11. Способ по п.8, в котором пригодным
растворителем является либо вода, либо смесь
воды и органического растворителя, где органический растворитель выбирают из метанола,
этанола, пропанола, изопропанола, ацетонитрила, толуола ксилола и простого эфира.
37
12. Способ по п.8, в котором пригодное
значение рН заключено приблизительно в пределах от 8,0 до 11,0.
13. Способ по п.8 получения оптически активного соединения формулы (R)-(IIа)
или его соли, включающий контактирование в
воде, в которой растворён пригодный буфер,
стереоизомерной смеси соединения формулы
(Iа)
где R1 означает н-пропил;
с липазой Amano PS30 в присутствии агента
рацемизации, триметиламина, при поддерживании подходящего рН в интервале приблизительно от 8,0 до 10,0 путем добавления основания или кислоты для получения соединения
формулы (R)-(IIa) с выходом больше чем 51% и
оптической чистотой выше 80%.
14. Способ по п.3, дополнительно включающий в себя пригодный неионный, катионный или анионный сурфактант, добавленный к
пригодному растворителю.
15. Способ по п.13, в котором пригодной
липазой является Amano PS30 или Amano АК.
16. Способ по п.13, в котором агент рацемизации выбирают из триметиламина, триэтиламина, трипропиламина и трибутиламина.
17. Способ по п.13, в котором пригодным
растворителем является либо вода, либо смесь
воды и органического растворителя, где органический растворитель выбирают из метанола,
этанола, пропанола, изопропанола, ацетонитрила, толуола, ксилола и простого эфира.
18. Способ по п.13, в котором пригодное
значение рН находится приблизительно в пределах от 8,0 до 11,0.
19. Способ по п.13, где пригодным неионным, катионным или анионным сурфактантом
является РЕG(9-10)п-трет-октилфенол.
20. Способ по п.13 получения оптически
активного соединения формулы (R)-(IIa)
или его соли, включающий в себя
контактирование в воде, в которой растворён пригодный неионный, катионный или анионный сурфактант, стереоизомерной смеси соединения формулы (Iа)
где R1 означает н-пропил;
с липазой Amano PS30 в присутствии агента рацемизации, триметиламина, при поддерживании подходящего рН в интервале приблизительно от 8,0 до 10,0 путём добавления основа-
001970
38
ния или кислоты, для получения соединения
формулы (R)-(IIa) с выходом больше чем 51% и
оптической чистотой выше 80%.
21. Способ по п.3, в котором
R1 означает -CH2(R10a),
-СН2-СН2(R10c),
-CH2-CH2-C(R10c)3,
R10a выбирают из Н, -СН3, -СН2СН3 и
-СН2СH2СН3;
R10c в каждом случае независимо выбирают из Н, -ОН, C1-C4-алкокси, -NMe2,
C1-C6-алкила, замещённого 0-3 R11,
C3-C6-циклоалкила, замещённого 0-3 R11, a
R11 выбирают из Н, галогена, С1-С4-алкила,
C1-C3-галоалкила, С1-С4-алкокси, -ОН, -NO2,
-CN, -СF3, -S(O)2Ме и -NМе2.
22. Способ по п.3, в котором
R1 означает -CH2(R10a) или -СН2-СН2(R10c),
R10a выбирают из Н, -СН3, -СН2СН3 и
-СН2СН2СН3;
R10c выбирают из Н, -ОН, C1-C4-алкокси,
-NMe2, циклопропила и C1-C3-алкила, замещённого 0-3 R11,
R11 выбирают из Н, С1-С4-алкила, C1-C4алкокси, -ОН, -NO2, -CN, -СF3, -S(O)2Me и
-NMe2;
пригодной липазой является Amano PS30
или Amano АК;
агент рацемизации выбирают из триметиламина, триэтиламина, трипропиламина и трибутиламина;
пригодным растворителем является либо
вода, либо смесь воды и органического растворителя, где органический растворитель выбирают из метанола, этанола, пропанола, изопропанола, ацетонитрила, толуола, ксилола и простого эфира;
пригодное значение рН заключено приблизительно в пределах от 8,0 до 11,0.
23. Способ по п.3 получения оптически активного соединения формулы (R)-(IIa)
или его соли, включающий в себя
контактирование в воде cтереоизомерной
смеси соединения формулы (Iа)
в которой R1 означает этил, н-пропил или нбутил, с липазой Аmano PS30 в присутствии
агента рацемизации, триметиламина, при поддерживании подходящего рН в интервале приблизительно от 8,0 до 10,0 путём добавления
основания или кислоты для получения соединения формулы (R)-(IIa) с выходом больше чем
51% и оптической чистотой выше 80%.
24. Способ по п.8, дополнительно включающий в себя пригодный неионный, катионный или анионный сурфактант, добавленный к
пригодному растворителю.
39
001970
40
25. Способ по п.24 получения оптически
активного соединения формулы (R)-(IIa)
или его соли, включающий в себя
контактирование в воде, в которой растворены пригодный буфер и пригодный неионный,
катионный или анионный сурфактант, стереоизомерной смеси соединения формулы (Iа)
в которой R1 означает н-пропил,
с липазой Amano PS30 в присутствии агента рацемизации, триметиламина, при поддерживании подходящего рН в интервале приблизительно от 8,0 до 10,0 путём добавления основания для получения соединения формулы (R)(IIa) с выходом больше чем 51% и оптической
чистотой выше 80%.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, ГСП-9 101999, Москва, Центр, М. Черкасский пер., 2/6