124 ÏÐÀÊÒÈ×ÅÑÊÀß ÌÅÄÈÖÈÍÀ ‘3-1 (50) май 2011 г. ТРИФОНОВА Э.В., САЙФУТДИНОВ Р.Г. Казанская государственная медицинская академия, г. Казань МСЧ ОАО «Татнефть», г. Альметьевск, Россия УДК 615.03: 004.354.5 Èçó÷åíèå ýìáðèîòîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ ÌÒÁÝ íà áåëûõ êðûñaõ Цель: Изучить эмбриотоксическое действие метил-тертбутилового эфира (МТБЭ) на белых крыс. Материалы и методы: Исследование было проведено в 2 этапа. На первом оценивалось действие МТБЭ в пренатальный период, на втором — постнатальные его проявления. Использовали нелинейных белых крыс — самки весом 180-200 г, находящиеся на стандартном рационе. Спаривание виргинных самок осуществлялось с интактными самцами. Первым днем беременности считался день обнаружения сперматозоидов во влагалищных мазках. На протяжении всего эксперимента производилось ежедневное наблюдение за состоянием животных: осмотр, взвешивание, регистрация среднего потребления воды и пищи. На первом этапе исследования МТБЭ вводился перорально через атравматичный зонд. Первая группа самок получала МТБЭ в дозе 70 мг/кг, вторая — 700 мг/кг. Введение эфира осуществлялось с 1-го по 19-й день беременности. Животным контрольной группы в те же сроки вводили перорально дистиллированную воду. В каждой экспериментальной группе было по 20 животных. Вскрытие самок осуществлялось на 20-й день беременности, при этом определяли количество желтых тел в яичниках, подсчитывали число мест имплантации, резорбции и живых плодов. Каждый плод подвергался внешнему осмотру и взвешиванию. Одну треть плодов из каждого помета фиксировали в смеси Буэна для последующего изучения внутренних органов, остальные животные из каждого помета фиксировались в 96%-ном спирте для изучения в дальнейшем состояния костного скелета. Внутренние органы исследовались по методу Вильсона в модификации ОЭ НИИЭМ РАМН. Костная ткань изучалась по методу Даусона в модификации ОЭ НИИЭМ АМН СССР. На втором этапе МТБЭ вводился перорально с 1-го по 21-й день беременности в тех же дозах — 70 и 700 мг/кг. Контрольным животным давали дистиллированную воду. В каждой группе было получено потомство от 15 самок. После родов в каждом помете оставляли не более 8 крысят для дальнейшего изучения физического развития потомства, скорости созревания сенсорно-двигательных рефлексов в период вскармливания, исследования эмоционально-двигательного поведения крысят после окончания периода вскармливания. При изучении физического развития потомства регистрировали размер помета, число живых и мертвых новорожденных, число особей разного пола, массу тела крысят на 4-й, 7-й, 14-й и 21-й дни после рождения, а также сроки отлипания ушной раковины, появление первичного волосяного покрова, прорезывание резцов, открытие глаз, опускания семенников и открытия влагалища. Скорость созревания сенсорно-двигательных рефлексов в период вскармливания изучали переворачиванием на плоскости (2–4-й дни), отрицательным геотаксисом (5–6-й дни), избеганием обрыва (4–6-й дни). Опыты проводили 1 раз в день ТЕРАПИЯ в одно и то же время до полного формирования рефлексов по указанным тестам. При исследовании физического развития и скорости созревания сенсорно-двигательных рефлексов в период вскармливания статистическая обработка проводилась с использованием критериев t Стъюдента и U Уилкоксона — Манна — Уитни. За единицу наблюдения при статистической обработке принимали помет. В возрасте 30 дней у потомства изучали эмоциональнодвигательное поведение с использованием теста «открытое поле». Тестированию подверглись 10 пометов из каждой группы. Исследование проводили при стандартном рассеянном освещении в одно и то же время суток. Животное помещали в центр «открытого поля» и в течение 3 минут регистрировали число пересеченных квадратов (двигательно-исследовательская активность), число стоек (ориентировочная активность), число заглядываний в отверстия (исследовательская активность), число актов дефекации и уринации (эмоциональность), время отсутствия активности. Переход квадрата учитывали, если крысенок пересекал границу всеми 4-мя лапами, число дефекаций оценивали по числу дефекационных шариков. Статистическая обработка по тесту «открытое поле» проводилась по критерию Уилкоксона — Манна — Уитни, при этом за единицу наблюдения принимали одного крысенка. Результаты: Данные исследований на первом этапе свидетельствуют о том, что гибели или других признаков токсикоза у крыс-самок не отмечалось ни в опытных, ни в контрольной группах. Достоверных различий в темпах прироста массы тела беременных самок опытных и контрольной групп также не отмечалось. Введение в течение всей беременности МТБЭ в дозе 700 мг/кг (превышающую максимальную терапевтическую в 10 раз) не вызвало достоверного увеличения по сравнению с контролем, пред- и постимплантационной смертностью. При внешнем осмотре плодов, изучении состояния внутренних органов и скелета не выявлено каких-либо аномалий и отставания в росте и развитии плодов всех исследуемых групп. Отмеченные во всех группах случаи кровоизлияний в брюшную полость имеют нормальные частоты. По результатам второго этапа исследования гибели самок не было ни в одной из опытных, ни в контрольной группах. Темпы прироста массы тела беременных крыс достоверно не отличались в изучаемых группах. Отклонений в протекании беременности, родов, заботе о потомстве в подопытных группах также не наблюдалось. Среднее количество плодов на одну самку и соотношение крысят по полу достоверно не отличалось в подопытных и контрольной группах. Сроки отлипания ушной раковины, появления первичного волосяного покрова, прорезывания резцов, опускания семенников и открытия влагалища достоверно не различались в изучаемых группах. У потомства самок, получавших МТБЭ, открытие глаз произошло на 19.3 день, в контрольной группе — на 18.0 день (Р<0,001). Масса ‘3-1 (50) май 2011 г. тела крысят, подвергшихся пренатальному воздействию МТБЭ, на 14-й и 21-й дни после родов была достоверно (р<0,01) ниже, чем в контрольной группе. Изучение скорости созревания сенсорно-двигательных рефлексов в период вскармливания не выявило различий среды потомства подопытной и контрольной групп. Эмоционально-двигательное поведение 30-дневного потомства в тесте «открытое поле». Длительность латентного периода, число пересеченных квадратов, количество подъемов на задние лапы и заглядываний в отверстия, число актов труминга, эмоциональный фон не различались в экспериментальных группах. ÏÐÀÊÒÈ×ÅÑÊÀß ÌÅÄÈÖÈÍÀ 125 Выводы: Проведенные исследования показали, что пероральное введение самкам крыс МТБЭ в дозах 70 и 700 мг/кг с 1-го по 19-й день беременности не оказывает эмбриотоксического действия: показатели эмбрионального развития в обеих опытных группах не имеют статистически значимых отклонений от показателей в группе контроля; физическое развитие, скорость развития сенсорно-двигательных функций и эмоционально-двигательная активность потомства опытных и получавших МТБЭ крыс также не показывают наличия отклонений. УДК 615.03: 004.354.5 ТРИФОНОВА Э.В., САЙФУТДИНОВ Р.Г. Казанская государственная медицинская академия, г. Казань МСЧ ОАО «Татнефть», г. Альметьевск, Россия Èññëåäîâàíèå âëèÿíèÿ ÌÒÁÝ íà ðåïðîäóêòèâíóþ ôóíêöèþ áåëûõ êðûñ Цель: Изучить влияние метил-терт-бутилового эфира (МТБЭ) на репродуктивную функцию белых крыс. Материалы и методы: Исследование влияния МТБЭ на репродуктивную функцию было проведено на нелинейных белых крысах массой 180-200 г. Весь экспериментальный период животные содержались на стандартном рационе. Наблюдение и оценку состояния животных проводили ежедневно: осмотр регистрация среднего потребления воды и пищи, один раз в неделю животных взвешивали. Введение МТБЭ производилось в/ж в максимальной дозе 700 мг/кг. Контрольным животным вводили перорально дистиллированную воду. В каждой группе было по 20 самцов и 40 самок. Введение МТБЭ или воды осуществлялось самцам в течение 60 дней до спаривания с интактными самками. Самкам введение МТБЭ или дистиллированной воды производилось в течение 15 дней до спаривания с интактными самцами. В эксперименте использовано 4 группы животных: группа 1 — 20 самцов, вода 60 дней; группа 2 — 20 самцов, МТБЭ 60 дней, 700 мг/кг; группа 3 — 40 самок, вода 15 дней; группа 4 — 40 самок, МТБЭ 15 дней, 700 мг/кг. После окончания введения самки подсаживались к соответствующей группе самцов в соотношении 2:1 сроком на 2 эстральных цикла (10 дней). Половину самок вскрывали на 18–21-й дни беременности, подсчитывали количество желтых тел, мест имплантации, количество живых и погибших плодов. Вторую половину самок оставляли до родов и проводили наблюдение за течением родов и физическим развитием потомства в период вскармливания. Индекс беременности рассчитывали по следующей формуле: Число беременных самок Индекс беременности = –––-----------------------------– х 100% Число самок, посаженных к самцам За единицу наблюдения при статистической обработке полученных результатов принимали одну самку или один помет. Статистическая обработка результатов производилась с использованием критерия t Стъюдента и критерия U Уилкоксона — Манна — Уитни. Результаты: В период введения МТБЭ снижения темпов прироста массы тела, изменений в поведении, гибели животных не отмечалось ни в одной из изучаемых групп самцов или самок. Индекс беременности достоверно не отличался в изучаемых группах. При вскрытии самок не было выявлено повышения уровней пред- и постимплпнтационной смертности в подопытных группах по сравнению с соответствующими контрольными группами. У оставленных рожать самок каких-либо особенностей в протекании родов и заботе о потомстве не отмечено. Уровни гибели новорожденных крысят, соотношение самцов и самок в помете не различались в изучаемых группах. Сроки отлипания ушной раковины, появления первичного волосяного покрова, прорезывания резцов были синхронны в пометах подопытной и контрольной групп. Открытие глаз у потомства самцов и самок, получавших МТБЭ, произошло практически в те же сроки, что и в контрольной группе. Опускание семенников и открытие влагалища по срокам также не отличались в изучаемых группах. Выводы: Пероральное введение МТБЭ в дозе 700 мг/кг не оказывает воздействия на репродуктивную функцию самцов и самок крыс. В экспериментах не было выявлено негативного влияния на плодовитость опытных животных, на пре- и постнатальное развитие потомства. ТЕРАПИЯ