Характеристика вакцин как тест

Презентация подготовлена при поддержке гранта BII-GAP-20606 по программе
БиоПромышленная Инициатива (BII) Государственного Департамента США
Характеристика вакцин
как тест-материала
неклинического исследования
безопасности
Оксана Николаевна Хохлова
Лаборатория биологических испытаний
Филиал института биоорганической химии имени
академиков М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
1
Лицензированный биологический
продукт должен быть:
• Безопасным: относительно свободным от
опасных/нежелательных эффектов
• Чистым: свободным от посторонних примесей
• Активным: оказывать желаемый эффект
• Единообразным: произведенным в соответствии с
GMP (Good Manufacturing Practices)
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
2
Характеристика каждого лота
‹ Стерильность (бактериальная/грибковая контаминация)
‹ Общая токсичность (непредвиденная токсичность на
морских свинках и мышах)
‹ Идентичность (SDS-PAGE, Western blot, immunologic assay or
amino acid analysis)
‹ Чистота (влажность, SDS-PAGE, HPLC, эндотоксины)
‹ Активность (in vivo и in vitro тесты на иммуногенность,
содержание антигенов, химический состав)
‹ Тесты на отсутствие возможной контаминации в
производственном процессе
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
3
1
Активность вакцин
‹ Выбор адекватной модели
‹ Тесты часто не отражают механизмы защиты у
человека
‹ Проверка соответствия производственного
процесса (фармакопейные статьи)
‹ При отсутствии адекватной животной модели измерение иммунологического ответа in vitro
(серология)
‹ Физико-химические характеристики (уровень
антигена, размер антигена и др.)
‹ Зависит от типа вакцины
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
4
Характеристика каждого лота
Стабильность
‹ Определить срок хранения (1 – 2 года)
‹ Программа определения стабильности
через установленное время
• Активность
• Влажность
• Стерильность
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
5
Good Manufacturing Process:
обеспечение качества вакцин
Обеспечение безопасности
‹ Характеристика происхождения/источника
‹ Качество используемых материалов
‹ Стабильность/Активность
‹ Тестирование/Квалификация процессов
‹ Очистка от включений, контаминантов
‹ Контроль процессов (особенно,
обеспечивающих безопасность)
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
6
2
Good Manufacturing Process:
обеспечение качества вакцин
Совершенствование продукта и
производственного процесса
‹ Стабильность/Активность
‹ Совершенствование формы
‹ Исходный материал/ Характеристика
компонентов
‹ Совершенствование методик анализа/
Валидация
‹ Спецификация
‹ Контроль производства и валидация
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
7
Good Manufacturing Process:
обеспечение качества вакцин
Элементы GMP
‹ Персонал
‹ Контроль качества
‹ Помещения и оборудования
‹ Лабораторный контроль
‹ Контроль компонентов
‹ Контроль производства
‹ Документация
‹ Маркировка
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
8
Характеристика вакцин
Субстанция препарата
- иммуногенный компонент будущего препарата
вакцины
Препарат вакцины
- готовая лекарственная форма вакцины для введения
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
9
3
Характеристика субстанции
препарата
Описание
‹ Название (биологическое, химическое)
‹ Происхождение клеток
‹ Идентификация активного компонента/выделенного
антигена
‹ Физико-химическое описание синтетического
антигена
‹ Описание химических модификаций/конъюгаций
‹ Перечень возможных неактивных компонентов
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
10
Характеристика субстанции препарата
Описание аналитических процедур для
установления идентичности, стабильности,
чистоты, активности
‹ Физико-химические методы
• Спектрометрия
• Аминокислотный анализ
• Картирование пептидов
• Определение дисульфидных связей
• Хроматографические методы
• SDS-PAGE
• ЯМР спектроскопия
• Др. методы по определению производных
субстанции и производственных примесей
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
11
Характеристика субстанции препарата
Описание аналитических процедур для
установления идентичности, стабильности,
чистоты, активности
‹ Биологическая активность
• Специфичные тесты на идентичность (Western blot,
ELYSA)
• Цитометрия
• Тест на нейровирулентность
• Серотипирование
• Электрофоретическое типирование
• Инактивация
• Методы нейтрализации
• Описание всех результатов in vitro и in vivo
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
12
4
Производитель субстанции препарата
‹ Идентификация производителей
• Имена, адреса каждого участника производства
субстанции
• Ответственность каждого участника
‹ Схема производственных помещений
• Путь/перемещение субстанции в процессе
производства
• Идентификация смежных операций, способных
влиять на субстанцию
‹ Перечень других веществ в производственных и
смежных помещениях, деконтаминация общего
оборудования
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
13
Производитель субстанции препарата
‹ Предотвращение контаминации
• Воздушная система (кондиционирование):
состояние, проверка
• Краткое описание процедур и дизайна помещений
для контроля контаминации и перекрестной
контаминации
• Общий дизайн оборудования (закрытые/открытые
системы, обеспечение стерильности)
• Обеспечение стерильности и обнаружение
контаминации
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
14
Метод производства субстанции препарата
‹ Первичные материалы
• Список всех материалов (культуральные
среды, буферы, носители для пептидного
синтеза, реагенты) со спецификациями
• Сертификаты анализа/качества от поставщика
• Качество воды, газов, используемых в
производстве
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
15
5
Метод производства субстанции препарата
‹ Схема получения/синтеза субстанции
• Пошаговая диаграмма получения
• Оборудование, материалы, помещения,
условия
• Цикл синтеза, специфические фазы
(расщепление, конденсация)
• Перенос/транспортировка промежуточных и
готовых субстанций
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
16
Метод производства субстанции препарата
‹ Детальное описание получения субстанции
‹ Животные
• Вид, возраст животных
• Микробиологический статус
• Результаты контроля статуса
• Условия содержания животных
• Процедуры ветеринарного и лабораторного
контроля состояния животных
• Описание инокуляции животных
• Выделение продукта из тканей
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
17
Метод производства субстанции препарата
‹ Детальное описание получения субстанции
‹ Вирусы
• Источник
• Данные об исходном лоте штамма
• История пассажей
• Культуральная технология поддержания
исходного штамма
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
18
6
Метод производства субстанции препарата
‹ Детальное описание получения субстанции:
‹ Микробные клетки
• Источник/происхождение
• Вид, штамм, серотип
• Биохимические характеристики (ферментативный
профиль)
• Генетические характеристики (маркеры, вставки,
делеции)
• Плазмиды
• Генетическая стабильность
• Вирулентность (метод инактивации)
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
19
Метод производства субстанции препарата
‹ Детальное описание получения субстанции:
клетки
‹ Животные клетки первичные
• Источник: вид, возраст животных, ткани
• Микробиологический статус животного
• Условия содержания животных
• Ветеринарный и лабораторный контроль
• Выделение клеток
• Контроль контаминации
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
20
Метод производства субстанции препарата
‹ Детальное описание получения субстанции:
клетки
‹ Клеточные линии
• Человеческие
Материалы и методы, ткань/орган,
этническое/географическое происхождение, возраст,
пол, физиологическое состояние, медицинская
история
• Животные
Вид, линия, условия разведения и содержания,
географическое происхождение линии, орган/ткань,
физиологическое состояние, контроль
нежелательных агентов
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
21
7
Метод производства субстанции препарата
‹ Детальное описание получения субстанции
‹ Генетические конструкции и рекомбинантные
клеточные линии
• Хозяйские клетки
Источник, фенотип, генотип, маркеры
• Ген
Ген, происхождение, методы получения, нуклеотидная и АК
последовательности, полученные характеристики
• Вектор
Происхождение и функции компонентов, рестриктазы,
генетические маркеры
• Финальная генная конструкция
Описание клонирования, рестриктазы
• Получение рекомбинантной клеточной линии
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
22
Метод производства субстанции препарата
‹ Детальное описание получения субстанции
‹ Клеточный банк
• Система
• Размеры
• Контейнер/Закрытая система
• Методы, реагенты, среды
• Условия криоконсервации и хранения
• Контроль процессов
• Контроль контаминации
• Защита от «катастроф»
• Master Cell Bank, Working Cell Bank
• Контроль продуктивности
• Контроль контаминации продукта
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
23
Метод производства субстанции препарата
‹ Детальное описание получения субстанции
‹ Рост клеток и выделение
• Размножение/рост (условия, контролируемые
параметры, материалы и среды)
• Выделение (методы, контроль стерильности)
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
24
8
Метод производства субстанции препарата
‹ Детальное описание получения субстанции
‹ Очистка
• Инактивация (методы/агенты, стадия, контроль)
• Очистка (методы, оборудование, реагенты,
критерии разделения на партии, тестирование в
процессе, контроль контаминации)
• Проверка идентичности, стабильности, уровня;
стадии проверки во время очистки
• Критерии приемлемости
• Улучшение стабильности (консерванты,
лиофилизация, абсорбция), проверка в условиях
• Детоксификация
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
25
Метод производства субстанции препарата
‹ Детальное описание получения субстанции
‹ Синтетические субстанции
• Синтетические пептиды (синтез, очистка)
• Конъюгаты и модифицированные субстанции
(исходные материалы, условия реакций,
контроль, тест идентичности и активности,
стабилизация)
• Спецификация
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
26
Контроль производства субстанции
препарата
‹ Валидация процессов:
‹ Роста клеток
‹ Выделения
‹ Инактивации
‹ Очистки
‹ Микробиологических процедур
‹ Контроль загрязнения и контаминации
‹ Стабильность производственных процессов
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
27
9
Субстанция препарата
‹ Описание спецификации
‹
‹
‹
‹
‹
Идентичность
Стабильность
Активность
Физико-химические методы
Валидация, приемлемые критерии
‹ Включения, вспомогательные компоненты
‹ Связанные с продуктом
‹ Производственные
‹ Контейнер
‹ Поставщик, совместимость, материал, стерильность
‹ Тесты на токсичность, контаминацию, сохранение
стерильности продукта
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
28
Вакцина: лекарственная форма
‹ Состав и характеристики
‹ Перечень всех субстанций препарата (активных
веществ)
‹ Перечень всех вспомогательных веществ и
включений (сертификаты анализа, идентичность)
¾ растворители, разбавители, абсорбенты, стабилизаторы
‹ Адьюванты (перечень, количество)
‹ Консерванты (перечень, обоснование – результаты)
‹ Спецификация и методы определения состава
‹ Для всех дополнительных веществ
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
29
Вакцина: лекарственная форма
‹ Производство
‹ Перечень производителей и ответственность
‹ Методы производства
‹ Стабильность производственных процессов
(проверка лотов)
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
30
10
Вакцина: лекарственная форма
‹ Спецификация готового продукта
‹ Перечень всех методов (стабильность, идентичность,
активность, чистота)
‹ Сертификаты анализов
‹ Данные процесса валидации
‹ Контейнер/Упаковка
‹ Контроль стерильности, валидация методов
‹ Лиофилизация
‹ Стабильность
‹ Срок хранения, условия хранения
‹ Данные стабильности для разных возможных условий
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
31
Вакцина: промежуточная форма для
исследования
‹ Отличие от готовой коммерческой
лекарственной формы
‹ Состав
‹ Процесс производства, производители
‹ Данные сравнения, биоэквивалентность
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
32
Производство вакцин: специальные
процедуры и системы
‹Вода и водоснабжение
‹Система вентиляции
‹Компьютерные системы
‹Система стерильности, контроль
контаминации
ТЭМП
GLP: Основы доклинических исследований
33
11