Аннотация Разработан метод подтверждающего химико-токсикологического исследования на наличие наркотических и психоактивных веществ в биологических жидкостях (моче,) и волосах человека методом газовой хроматографии с масс-селективным детектированием. Метод предназначен для врачей клинической лабораторной диагностики химико-токсикологических лабораторий наркологических диспансеров. Организация разработчик: ФБГУ ННЦ Наркологии Минздрава России совместно с ЦХТЛ 1-го МГМУ им.И.М.Сеченова. Авторы:, д.х.н. Савчук С.А., д.х.н., профессор Б.Н.Изотов Составители и авторы библиотек масс-спектров: Григорьев А. М.(г.Белгород, СХО), Катаев С. С. (г.Пермь, СХО), Васильев А. Б. (г.Чебоксары, РНД), Мелентьев А. Б. г.(Челябинск, СХО), Лабутин А. В. (г.Томск, КДЛ), Неверо А. С. (г.Минск, ГКСЭ), Печников А. Л. (г.Салехард, СХО), Шитов Л. Н. (г.Ярославль, ХТЛ), Шевырин В. А.(г.Екатеринбург, БЭКО УФСКН), Гофенберг М. А. (г.Екатеринбург, КДЛ), Мелкозеров В. П. (г.Екатеринбург, ЭКЦ МВД), Снятков А. В. (г.Владимир, СХО), Колосова М. В. (г.Красноярск, КДЛ), Скребкова К.А. (г.Курган), Самышкина Н. В. (г.Новый Уренгой, КДЛ), Малышкина А. П. (г.Ноябрьск, КДЛ), Ризванова Л. Н. (г.Нижневартовск, КДЛ), Подоленко Е. В. (г.Сургут, КДЛ), Джурко Ю. А. (г.Ярославль, СХО), Савчук С.А. (Москва, ННЦ Наркологии). Версия 1.1. Введение Метод хромато-масс-спектрометрии (ХМС, ГХ/МС) основан на сочетании двух аналитических методов: капиллярной газовой хроматографии и массспектрометрии. Метод предназначен для получения объективных данных о наличии наркотических, психоактивных веществ и их метаболитов которые указываются в диагностических заключениях, результатах медицинского освидетельствования, экспертных заключениях, результатах химикотоксикологического контроля и мониторинга. 2 Описание метода Метод хромато-масс-спектрометрии (ХМС, ГХ-МС) основан на сочетании двух аналитических методов: капиллярной газовой хроматографии - метода наиболее селективного по возможности разделения веществ и метода массспектрометрии – метода наиболее селективного и чувствительного по детектированию и структурной идентификации компонентов. Наиболее информативные и надежные результаты получают в режиме полного сканирования с регистрацией масс-спектра. Использование режима мониторинга выбранных ионов позволяет повысить чувствительность определения (на порядок величины), но снижает надежность идентификации. Методика ГХ-МС анализа основана на идентификации определяемых веществ, выделенных из образцов мочи жидкость/жидкостной или твердофазной экстракцией с последующей дериватизацией и хромато-массспектрометрическим . Определяемые вещества идентифицируют в автоматическом режиме по двум аналитическим параметрам: времени хроматографического удерживания и масс-спектру. Идентифицированное вещество определяют количественно на основании градуировочной характеристики, которую получают на основании результатов анализа СО. Показания и противопоказания к использованию новой метода ПОКАЗАНИЯ: - диагностика факта употребления наркотических и психоактивных веществ. ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ: отсутствуют. Материально-техническое обеспечение метода Для выполнения методики используют газовые хроматографы Agilent 6890N (США) или Agilent 6850 или Agilent 7820 – Maestro (США-Россия) с автоинжектором Agilent 7683, масс-селективными детекторами Agilent 5973N, 5975 (США), Agilent 5975-Maestro (США-Россия), колонкой (Agilent НР-5MS номер по каталогу 19091S-433) длиной 30м, внутренним диаметром 0.25мм, с толщиной пленки фазы 0.25мкм. Для идентификации веществ используют библиотеки масс-спектров (Приложение 1). Перечень общелабораторного оборудования и реактивы дан в Приложении 2. Допускается использовать оборудование, материалы и реактивы с техническими характеристиками аналогичными указанным. 3 Описание метода Метод включает 3 аналитические процедуры подготовки пробы и анализа. При необходимости определения низких концентраций анализируют пробы после кислотного или ферментного гидролиза. При определении метаболитов героина анализируют пробы без гидролиза. Выявление фактов потребления употребления героина выполняют по наличию в пробе 6-моноацетил морфина (6-МАМ). Процедура 1: кислотный гидролиз экстрация при рН 9, дериватизация трифторуксусным ангидридом (ТФАА). Определяют индивидуальные вещества следующих химических групп: • Опиаты, метаболиты, сопутствующие компоненты • Амфетамины и их метаболиты • Барбитураты и их метаболиты • Бензодиазепины и продукты их гидролиза • Синтетические наркотические вещества и их метаболиты • Стимуляторы синтетического происхождения и их метаболиты Процедура 2: щелочной гидролиз экстрация при рН 3, дериватизация пентафторпропионовым ангидридом с пентафторпропанолом (ПФПА и ПФПОН) Определяемое вещество детектируют в виде пентафторпроизводного (ПФП): 11- нор –дельта- 9-карбокситетрагидроканнабиноловая кислота • ПФП производные веществ, определяемых по процедуре 1 Процедура 3: кислотный гидролиз экстрация при рН 9, дериватизация BSTFA. Определяют индивидуальные вещества следующих химических групп в виде триметилсилильных производных (TMS) • Псилоцин, псилоцибин ТМС • Бензоилэкгонин ТМС • Метаболиты JWH-018, 073, 250 ТМС • TMS производные веществ, определяемых по процедуре 1. Процедуры 1 и 2 выполняют на одном приборе. Для процедуры 3 используют отдельный прибор. Определение в моче веществ неполярной и слабополярной природы по процедуре 1 По процедуре 1 определяются вещества входящие в состав наркотических средств, психотропных и сильнодействующих веществ с неполярными и м слаболярными свойствами (см. приложении 3). Для выявления веществ данной группы выполняются следующие процедуры. Приготовление стандартных растворов. Стандартные растворы готовят из чистых (не менее 99% основного вещества) химических веществ. Можно использовать готовые стандартные образцы состава в виде растворов в метаноле или приготовленные на биологической матрице (моче). Приготовление раствора внутреннего стандарта дифениламина. Приготовление раствора «А». В мерную пробирку вместимостью 10 мл 4 вносят 10 мг дифениламина (ДФА), добавляют 10 мл метанола до метки. Концентрация ДФА в растворе «А» составляет 1 мг/мл. Приготовление раствора «Б». В мерный цилиндр вместимостью 100 мл автоматическим дозатором вносят 2 мл раствора А и добавляют метанол до метки 100 мл. Концентрация ДФА в растворе «Б» составляет 20 мкг/мл. Приготовление градуировочных растворов из чистых веществ. Для приготовления стандартных растворов используют вещества чистотой 99%. Ниже дан пример приготовления стандартных растворов на примере морфина. Приготовление раствора исходного стандартного раствора морфина 1000 мкг/мл. В мерную пробирку с притертой пробкой вместимостью 10 мл вносят 10 мг морфина (в виде основания) и добавляют метанол до метки 10 мл. Концентрация морфина (в виде основания) в исходном стандартный растворе составляет 1000 мкг/мл. Из исходного стандартного раствора готовят базовые и калибровочные растворы. Базовый стандартный раствор «А» морфина (10 мкг/мл) в метаноле. К 5 мл метанола добавить автоматическим дозатором 50 мкл исходного раствора морфина (1000 мкг/мл). Предварительно от 5 мл метанола отобрать и отбросить 50 мкл метанола. Базовый стандартный раствор «Б» морфина (0,1 мкг/мл). Раствор К 10 мл метанола добавить 100 мкл раствора «А» (10 мкг/мл). Предварительно от 10 мл метанола отобрать и отбросить 100 мкл метанола. Приготовление калибровочных растворов морфина на биологической матрице (моче). Калибровочные растворы морфина 6, 15, 50, 100, 150 нг/мл готовят последовательным разбавлением из базового стандартного раствора «Б». Калибровочный раствор морфина концентрацией 6 нг/мл. Внести 9.4 мл мочи в 10-мл стеклянную мерную колбу, добавить 600 мкл базового стандартного раствора морфина «Б» (0,1 мкг/мл). Калибровочный раствор морфина концентрацией 15 нг/мл. Внести 8.5 мл мочи в10-мл стеклянную мерную колбу, добавить 1500 мкл базового стандартного раствора «Б» (0,1 мкг/мл), довести объем до метки (10 мл) мочой. Калибровочный раствор морфина концентрацией 50 нг/мл. Внести 10 мл мочи в 10-мл стеклянную мерную колбу. Отобрать и отбросить автоматическим дозатором 50 мкл мочи, добавить 50 мкл базового стандартного раствора «А» (10 мкг/мл). Калибровочный раствор морфина концентрацией 100 нг/мл. Внести 10 мл мочи в 10-мл стеклянную мерную колбу. Отобрать и отбросить автоматическим дозатором 100 мкл мочи, добавить 100 мкл базового стандартного раствора «А» (10 мкг/мл. Калибровочный раствор морфина концентрацией 150 нг/мл. Внести 10 мл мочи в 10-мл стеклянную мерную колбу. Отобрать и отбросить автоматическим дозатором 150 мкл мочи, добавить 150 мкл базового стандартного раствора «А» (10 мкг/мл). Приготовление смеси органических растворителей. Для экстракции готовят смесь растворителей: 5 1. изопропиловый спирт 10% 2. дихлорметан 35% 3. 1,2-дихлорэтан 23% 4. гептан 32% В мерный цилиндр на 100 мл вносят 10 мл изопропилового спирта, 35 мл дихлорметана, 23 мл 1,2-дихлорэтана и 32 мл гептана. Смесь перемешивают и хранят в герметично закрытой стеклянной емкости. Можно использовать смесь метиленхлорид : гептан : изопропанол = 7:2:1 Приготовление твердого буфера. Взвешивают 100 г гидрокарбоната натрия и 50 г карбоната натрия, перемешивают и перетирают в ступке. Подготовка пробы для анализа. Методика подготовки пробы включает стадии гидролиза, экстракции и дериватизации. Кислотный гидролиз. В пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 9 мл вносят 3 мл анализируемой мочи, добавляют 300 мкл концентрированной HCl, и выдерживают 1 час при 900С. Гидролизат охлаждают до комнатной температуры. К гидролизату добавляют 300 мкл аммиака 10% - ного водного и экстрагируют, как описано ниже. Выделение веществ, определяемых по процедуре 1, жидкость/жидкостной экстракцией. В чистую, сухую пробирку объемом 10 мл внести 3 г хлорида натрия, твердый буфер на кончике шпателя 40-50 мг и 3 мл экстракционной смеси. В пробирку вносят 3 мл мочи или гидролизата мочи. Добавляют 30 мкл внутреннего стандарта дифениламина (раствор «Б» концентрацией 20 мкг/мл), концентрация ВС в пробе 200 нг/мл. Экстрагируют 10 мин на орбитальном шейкере Центрифугируют при 3000 об/мин 5 мин. Отделяют органический слой, переносят его в пробирку объемом 4 мл или в металлический колпачок TOX-LAB для упаривания и упаривают в токе горячего воздуха (экстракт не пересушивать, прекращать упаривание сразу после исчезновения жидкой фазы). К упаренному экстракту добавляют 70 мкл трифторуксусного ангидрида, укупоривают крышкой с тефлонированной мембраной, встряхивают реакционную смесь на вибромиксере 2-3 сек, выдерживают 30 мин при 550С, после чего удаляют остаток дериватизующего агента упариванием в токе горячего воздуха. К сухому остатку добавляют 70 мкл этилацетата, встряхивают на вибромиксере 2-3 сек, 1 мкл пробы вводят в хроматограф. Хромато-масс-спектрометрический анализ. Хроматограф и массспектрометрический детектор включают и настраивают в соответствии с инструкцией по эксплуатации и устанавливают параметры хроматографирования и масс-спектрометрического детектирования. Градуировку приборов для проведения количественного анализа и выполняют по методу внутреннего стандарта согласно инструкции к прибору. Хроматографический шприц перед анализом и после авнализа промывают 6 двумя растворителями (толуолом и ацетоном), по 5 раз каждым растворителем. Условия ГХ-МС анализа. Метод 1 ―SCREEN‖. Температурная программа термостата колонок: начальная температура 100оС с изотермической выдержкой в течение 1мин, с последующим температурным градиентом 35оС/мин до 300оС с изотермической выдержкой 15 мин. Анализ в режиме постоянного давления газа- носителя (Constant Pressure). В качестве газа носителя используют гелий марки «А». Температура испарителя хроматографа составляет 270оС, аналитического интерфейса (хроматограф/масс-спектрометр) 280оС. Пробу вводят в режиме с делением потока (split) 1/10. Времена удерживания определяемых соединений (см. приложение 4) получают по методу фиксации времен удерживания (Retention Time Locking, RTL). Настройку метода RTL осуществляют по дифениламину, меняя давление в узле ввода таким образом, чтобы время удерживания дифениламина в выбранных условиях хроматографирования составило 5.50±0.03 мин. Метод 2 ―DOAS‖. Температурная программа термостата колонок: начальная температура 50оС с изотермической выдержкой в течение 0.5мин, с о о последующим температурным градиентом 99 С/мин до 100 С с изотермической выдержкой 1 мин, с последующим температурным градиентом 15оС/мин до 280оС с изотермической выдержкой 30 мин. Анализ в режиме постоянного давления газа- носителя (Constant Pressure). В качестве газа носителя используют гелий марки «А». Температура испарителя хроматографа составляет 270оС, аналитического интерфейса (хроматограф/масс-спектрометр) 280оС. Пробу вводят в режиме с делением потока (split) 1/10. Настройку метода RTL осуществляют по дифениламину, меняя давление в узле ввода таким образом, чтобы время удерживания дифениламина в выбранных условиях хроматографирования составило 9.26±0.03 мин. Условия масс-спектрометрического детектирования. Для многокомпонентной идентификации веществ по процедуре 1 используют режим сканирования по полному ионному току (SCAN), при количественном анализе также используют режим сканирования по полному ионному току, а в случае необходимости определения с пределом обнаружения ниже 50 нг/мл используют режим мониторинга по выбранным ионам (SIM). Анализ в режиме сканирования по полному ионному току. ―Задержка на растворитель‖ время включения катодов и анализатора после прохождения по колонке фронта растворителя - через 3 мин после ввода пробы. Температура источника ионов 230оС Температура анализатора 150оС Диапазон масс m/z 41-650 а.е.м. Напряжение на умножителе: результат, полученный при автоматической настройке по перфторбутиламину в режиме ATUNE. Анализ в режиме мониторинга по выбранным ионам (SIM). Детектирование в режиме SIM выполняют в случаях, когда концентрация определяемых веществ ниже 25-50 нг/мл, при этом идентификационная значимость полученных результатов будет существенно ниже, поскольку полный спектр не фиксируется. В качестве характеристичных ионов могут быть 7 выбраны: базовый ион масс-спектра, молекулярный ион определяемого соединения или фрагментный ион наибольшей интенсивности. Выбранные ионы должны быть специфичны для определяемого соединения и не содержаться в фоне. Наиболее специфичный (целевой, taget) ион используют для количественного определения, два других иона используют для подтверждения правильности идентификации. Последовательность выполнения измерений, контроль ложноположительных и ложноотрицательных результатов Последовательность выполнения измерений по процедурам 1, 2, 3 на хроматографе с масс-селективным детектором при анализе экстрактов биологических проб (мочи): 1. Контроль фона прибора. Перед началом работы анализ растворителя (этилацетата) по методу SCREEN для контроля фона прибора по определяемым веществам. 2. Положительный контроль. Анализ контрольной мочи (QC) содержащей известные введенные содержания определяемых веществ на уровне 100 нг/мл по методу DOAS. 3. Отрицательный контроль. Анализ контрольной мочи (BLANK) не содержащей определяемых веществ по методу DOAS. 4. Контроль фона прибора между пробами. Между пробами выполняют анализ растворителя (этилацетата) по методу SCREEN для контроля фона прибора по определяемым веществам. 5. Последовательность применения библиотек масс-спектров для обработки результатов дана в табл 1 . Для автоматической идентификации в первую очередь применяют AMDIS библиотеки, имеющие времена удерживания определяемых соединений. При отрицательном результате идентификации используют более подробные AMDIS библиотеки не содержащие времен удерживания. В этом случае при положительном результате идентификации необходимо подтвердить правильность идентификации анализом стандартного образца. При использовании библиотек в PBM формате для «ручной» идентификации правильность идентификации подтверждают анализом стандартного образца. При отсутствии стандартных образцов состава для положительного контроля могут быть использованы пробы мочи положительные по определяемым веществам. Уровень концентраций в этих пробах оценивают относительно внутреннего стандарта – дифениламина. Возможные осложнения и способы их устранения Способы оценки состояния прибора, основные факторы, влияющие на образование ложноположительных и ложноотрицательных результатов и приемы устранения наиболее распространенных проблем даны в таблице 1. 8 Таблица 1. Оценка состояния хромато-масс-спектрометра и выявление наиболее распространенных неисправностей и проблем. Проверка параметров Метод Типичные проблемы Способ контроля при отрицательном устранения результате проверки Проверка параметров массСтандартная Загрязнение Чистка спектрометрического процедура источника источника детектора настройки ионов, ионов детектора неисправность (atune детектора MSD) Проверка параметров массАнализ Потеря Подрезка спектрометрической системы стандартной эффективности начального (хроматографа и детектора) смеси хроматографической участка колонки, колонки или неисправность замена хроматографа колонки Таблица 2. Факторы, влияющие на образование ложноположительных и ложноотрицательных результатов. Факторы Проблема Причина Метод Способ контроля устранения рН пробы Анализ Заменить Ложноотрицательные Снижение результаты Погрешности выхода вне положительн реактивы, Экстракции экстракции диапазона, ых посуду, после контрольных повторить кислотного проб мочи экстракцию гидролиза (QC,). Интенсивнос ть пика ВС не менее 70000 ед. Погрешности упаривания Потери Слишком То же Снизить амфетаминов высокая длительность и веществ, температур упаривания. близких им по а и Температура летучести длительнос упаривания ть не выше 750 упаривания С, (пересушив прекращать ание упаривание экстракта) сразу после исчезновения 9 Погрешности дериватизации Ложноположительные результаты Наличие определяемых веществ в пробе BLANK Наличие определяемых веществ в пробе BLANK Наличие определяемых веществ в пробе BLANK Наличие определяемых веществ в пробе BLANK Неполная Наличие дериватизация влаги в экстракте жидкой фракции Высушить экстракт, заменить дериватизиру ющий агент то же, полноту дериватиза ции оценивают по внутреннему стандарту (не менее 75%) Химическая Загрязнени Анализ Промыть или память я остатками отрицатель заменить шприца предыдущи ных шприц х проб контрольных проб мочи BLANK). Интенсивнос ть пика ВС не менее 70000 ед. Химическая Загрязнени То же Заменить память узла я остатками лайнер и ввода прибора предыдущи полимерную х проб мембрану в узле ввода (септу) Загрязнения Некачестве То же Вымыть химической нная мойка посуду водой посуды посуды с ПАВ, крышки промыть этанолом Загрязнения Попадание То же Заменить реактивов и следов реактивы и растворителей определяем растворители ых веществ в реактивы Эффективность использования медицинской технологии Согласно сложившейся мировой практике методы хромато-масс-спектрометрии являются наиболее селективными и специфичными при подтверждающем исследовании биологических объектов на наличие наркотических, сильнодейст10 вующих и психоактивных веществ. Однако, существуют методические проблемы мешающие надежному определению и приводящие к появлению ложнонтрицательных результатов. Описание проблем и пути их решения даны ниже. Проблема 1.При использовании программы AMDIS основными источниками ошибок идентификации являются плохая форма хроматографического пика и наличие высоких концентраций фоновых веществ, коэлюирующихся с целевыми компонентами. Для устранения этих мешающих влияний анализ выполняли по 4-м хроматографическим методам. Для этого нативные и дериватизированные экстракты в виде ТМС или ТФА производных анализировали по двум хроматографическим программам SCREEN и DOAS в режимах с делением и без деления потока (всего 4 процедуры) [3]. Главной задачей анализа по нескольким процедурам – получить определяемое соединение в том месте хроматограммы, которое свободно от фоновых соэкстрактивных компонентов. Поскольку в реальных может варьироваться состав эндогенных и целевых компонентов параметры меняют последовательно. Для этого аликвоты пробы с гидролизом, без гидролиза, Из них готовят нативные и дериватизованные ТФА и ТМС экстракты, которые затем анализируют по 4 –м хроматографическим методам. Полную схему используют при анализе на неизвестное вещество или при контрольном анализе. Рисунок 2. Применение методов ГХ/МС анализа с последовательно изменяемыми условиями. 11 Изменяемые ГХ условия для программы автоматической массспектрометрической деконволюции и идентификации (AMDIS) AMDIS идентификация невозможна ГХ-МС определение клофелина в моче «Плавная программа» 50оС (0,5мин), 99оС/мин 100оС (1мин), 15оС/мин, 280оС (30 мин) Abundanc e Клофелин 2TMS Abundance I o n 3 3 8 . 0 0 (3 3 7 . 7 0 t o 3 3 8 . 7 0 ): c lo f 1 3 5 9 a . D \ d a t a . m s I o n 3 7 3 . 0 0 (3 7 2 . 7 0 t o 3 7 3 . 7 0 ): c lo f 1 3 5 9 a . D \ d a t a . m s I o n 3 2 5 . 0 0 (3 2 4 . 7 0 t o 3 2 5 . 7 0 ): c lo f 1 3 5 9 a . D \ d a t a . m s I o n 3 7 9 . 0 0 (3 7 8 . 7 0 t o 3 7 9 . 7 0 ): c lo f 1 3 5 9 a . D \ d a t a . m s 1 2 .8 5 1 450000 400000 S c a n 2 9 2 (6 . 4 9 6 m in ): c lo f 1 3 5 9 s . D \ d a t a . m s (-2 9 1 ) (-) 338 360000 340000 350000 320000 300000 S LO W G C P R O G R A M 250000 300000 200000 280000 150000 C L O N ID IN E 2 T M S 260000 100000 C L O N ID IN E 240000 2T M S 50000 220000 1 2 .8 5 1 1 2 .9 1 8 1 2 .9 9 9 1 2 .7 7 1 1 2 .4 6 2 0 1 2 .5 0 1 2 .5 5 1 2 .6 0 1 2 .6 5 1 2 .7 0 1 2 .7 5 1 2 .8 0 1 2 .8 5 1 2 .9 0 1 2 .9 5 1 3 .0 0 1 3 .0 5 1 3 .1 0 200000 T im e --> 180000 160000 «Быстрая программа» 140000 100оС (1мин), 35оС/мин, 300оС (15 мин) 120000 100000 A bundanc e 3500000 60000 40000 3000000 S U B S T . m /z 325 F A S T 2500000 373 80000 I o n 3 3 8 . 0 0 ( 3 3 7 . 7 0 t o 3 3 8 . 7 0 ) : c lo f 1 3 5 9 s . D \ d a t a . m s I o n 3 7 3 . 0 0 ( 3 7 2 . 7 0 t o 3 7 3 . 7 0 ) : c lo f 1 3 5 9 s . D \ d a t a . m s I o n 3 2 5 . 0 0 (3 2 4 . 7 0 6 t o. 435265 . 7 0 ) : c lo f 1 3 5 9 s . D \ d a t a . m s G C 20000 P R O G R A M 116 44 89 0 2000000 50 m / z --> 1500000 1000000 C L O N ID IN E 6 .4 9 6 100 228 170 200 150 200 252 250 281 307 300 400426 462 490 350 400 450 500 584 550 58 ng/ml, PURITY 34, NET 93 6 .6 8 5 2T M S 500000 6 .1 6 1 0 6 .4 9 6 6 .3 2 2 6 .2 0 6 .2 5 6 .3 0 6 .3 5 6 .4 0 6 .4 5 6 .5 0 6 .7 2 5 6 .5 5 6 .6 0 6 .6 5 6 .7 0 6 .8 0 5 6 .7 5 T im e - - > Рисунок 3. Хроматограммы (SCAN) пробы мочи содержащей клофелин. При использовании «плавной» хроматографической программы наблюдали наложение на клофелин 2TMS соэкстрактивного компонента, мешающего AMDIS идентификации. Применение «быстрой» программы позволило разделить пики мешающего компонента и клофелина 2TMS. Применение 4-х процедур позволило получить надежные результаты идентификации в наиболее сложных случаях хроматографических наложений, например, при определении клофелина в моче в виде ТМС. Контроль качества выполнения измерений Таблица 3. Воспроизводимость фиксированных времен удерживания на колонках HP-5MS. Вещество Лаб.1* Лаб.2 Лаб.3 Лаб.4 Лаб.5 среднее Станд. откл. Никотин Котинин Кофеин Димедрол Карбамазепин Метамфетамин ТФА Трамадол Морфин 2ТФА 6.76 10.08 11.10 11.38 14.65 7.33 12.07 14.10 7.40 14.18 6.75 10.06 11.13 11.37 14.72 7.31 14.13 6.77 10.06 11.11 11.37 7.33 12.08 14.15 6.87 10.00 11.06 11.37 6.79 10.05 11.10 11.37 14.69 7.34 0,06 0,03 0,03 0,01 0,05 0,04 12.08 14.09 14.13 0,01 0,04 12 Буторфанол 2ТФА Кодеин ТФА Папаверин 16.76 14.49 19.71 16.81 19.58 14.53 19.70 14. 48 16.79 0,04 14.50 19.66 0,03 0,07 Таблица 4. Метрологические параметры методики определения веществ по процедурам 1, 2, 3 (см. раздел Описание новой медицинской технологии). Нижний предел обнаружения веществ в режиме 70 нг/мл (морфин, амфетамногокомпонентного анализа полного сканиро- мин, диазепам) вания с AMDIS идентификацией Нижний предел обнаружения веществ в режи- 10 нг/мл (морфин, тетрагидме мониторинга выбранных ионов SIM при ко- роканнабиноловая кислота) личественном определении Воспроизводимость фиксированных времен удерживания при их переносе с прибора на прибор +/- 0.05 мин Акты внедрения Эффективность методики подтверждена актами внедрения от следующих организаций: 1. Химико-токсикологическая лаборатория Ярославской областной клинической наркологической больницы. 2. Химико-токсикологическая лаборатория Наркологического диспансера Псковской области. 3. Химико-токсикологическая лаборатория Саратовской областной психиатрической больницы Святой Софии. 4. Химико-токсикологическая лаборатория ОГУЗ «Орловский наркологический диспансер». 5. Судебно-химическая лаборатория ОГУЗ «Бюро судебно-медицинской экспертизы» г. Белгорода 6. Судебно-химическая лаборатория Республиканского бюро судебномедицинской экспертизы, Республика Татарстан, г.Казань 7. Судебно-химическая лаборатория ГУЗ «Калужское областное бюро судебно-медицинской экспертизы» г. Калуга 8. Химико-токсикологическая лаборатория Сургутского клинического психоневрологического диспансера. г. Сургут, Ханты–Мансийский автономный округ. 9. Химико-токсикологическая лаборатория ФУ «1080 Центральный военный госпиталь» 12 ГУ МО РФ, г.Сергиев-Посад Московской области. 10.Судебно-химическая лаборатория ГУ Бюро судебно-медицинской экспертизы, Республика Саха (Якутия) г. Якутск. 11.ФГУП «Антидопинговый центр» г. Москва. 13 Список литературы 1. Савчук С.А.Система удаленной идентификации и распознавания объектов сложного состава . Патент на изобретение (19)RU(11) 77474 (13) (51) МПК G06K 17/00 (2006.01). Дата начала срока действия патента 15.07.2008. Опубликовано 20.10.2008 Бюл. №29. 2. Савчук С.А., Чибисова М.В., Апполонова С.А. Анохин Л.А.,Способ выявления неизвестных веществ в биологических жидкостях пациентов, принимавших наркотические или психоактивные вещества. Положительное решение от 05 мая 2010 г. по заявке 2009109664/28(013081) от 18.03.2009. 3. Савчук С.А., Апполонова С.А.Способ идентификации наркотических и психоактивных веществ в биологических жидкостях Патент на изобретение RU 2390771 С1 МПК GO1N 30/86 (2006 01) приоритет от 05февраля 2009 г. Опубликовано27.05.2010 бюлл. 15. 4. ―Reconstructed Mass Spectra, A Novel Approach for the Utilization of Gas Chromatograph—Mass Spectrometer Data‖, Biller, J.E.; Biemann, K. Anal. Lett. 1974 7 515-528. 5. ―Spectral Deconvolution for Overlapping GC/MS Components‖ Colby, B. N. J. Amer. Soc. Mass Spectrom. 1992 3 558-562. 6. ―Software-Based Mass Spectral Enhancement to Remove Interferences from Spectra of Unknowns‖, Herron, N.R.; Donnelly, J.R.; Sovocool, G.W. J. Amer. Soc. Mass Spectrom. 1996 7 598-604. 7. ―Automated Extraction of Pure Mass Spectra from Gas Chromatographic / Mass Spectrometric Data‖, Pool, W.G.; Leeuw, J.W.; van de Graaf, B. J. Mass Spectrom. 1997 32 438-443. 8. ―Extraction of Mass Spectra Free of Background and Neighboring Component Contributions from Gas Chromatography/Mass Spectrometry Data‖ Dromey, R.G; Stefik, M.J.; Rindfleisch, T.C; Duffield, A.M. Anal. Chem. 1976 48 (9) 1368-1375. 9. ―An Evaluation of Automated Spectrum Matching for Survey Identification of Wastewater Components by Gas Chromatography-Mass Spectrometry‖ Shackelford, W.M.; Cline, D.M.; Faas, L; Kurth, G. Analytica Chim. Acta 1983 146 25-27. 10. ―Improvement of Algorithm for Peak Detection in Automatic Gas Chromatography-Mass Spectrometry Data Processing‖ Hargrove, W.F.; Rosenthal, D.; Cooley, P.C. Anal. Chem. 1981 53 538-539. 11. ―Optimization and Testing of Mass Spectral Library Search Algorithms for Compound Identification‖ Stein, S.E.; Scott, D.R. J. Amer. Soc. Mass Spectrom. 1994 5 859-866. 12.Б.А. Руденко, С.А.Савчук, Е.С.Бродский. Хроматографическое определение обезболивающих наркотических средств (Обзор) Журнал Аналитической Химии 1996 Т51. N2. 182-201 13.Н.В.Веселовская, С.А.Савчук, Б.Н.Изотов, Свойства и анализ 14 опиоидного анальгетика Трамадола (Обзор) Вопросы наркологии 1998, №2 С. 41-53 14.С.А.Савчук, Н.В.Веселовская, Е.С.Бродский, А.А.Формановский, В.В.Чистяков, Б.Н. Изотов, Применение хроматографии и хроматомассспектрометрии для изучения фармакокинетики и метаболизма пропофола, клофелина, фенциклидина и трамадола (Обзор) Хим.-Фарм. Журнал 1999, №10, с. 29-52. 15.Н.В.Веселовская, С.А.Савчук, Б.Н.Изотов Хроматографический анализ фенциклидина, его метаболитов и аналогов в биологических жидкостях (обзор) //Судебно медицинская экспертиза 1999 г., №2 с.20-25. 16.С.А.Савчук, А.Н.Веденин Применение программы фиксации времен удерживания при хромато-масс-спектрометрическом определении анализируемых веществ Российский химический журнал(Ж.Рос.хим.обва им. Д.И.Менделеева), 2003, т.XLVII, №1, с.141. 17.С.А.Савчук, Е.А.Симонов, В.И.Сорокин, О.Б.Дорогокупец, А.Н.Веденин. Применение метода фиксации времен удерживания при хромато-массспектрометрическом и хроматографическом определении наркотических средств// Журнал Аналитической Химии , 2004, Т.59, №10, с.1059-1069. 18.С.А.Савчук, Б.А.Руденко, Н.А.Давыдова, Е.С.Бродский, Т.Ф.Боровкова Определение анестезирующего препарата Кетамин в крови методом капиллярной газовой хроматографии с применением термоионного детектирования и хромато-масс-спектрометрии Журнал Аналитической Химии 1995 Т50. N12. С. 1324-1329 19.С.А.Савчук, Е.С.Бродский, Б.А.Руденко, А.А.Формановский, И.В.Михура, Н.А.Давыдова //Хромато-масс-спектрометрическое определение продуктов биотрансформации анестезирующего препарата Кетамин Журнал Аналитической Химии 1997 Т52. N12. С. 1299-1311 20.С.А.Савчук, Е.С.Бродский, А.А.Формановский, В.В.Ерофеев, Е.В.Бабанова, В.В. Чистяков, М.Л. Рабинович, О.А.Долина, Б.А.Руденко. Применение газовой хроматографии с селективным детектированием и хромато-масс-спектрометрии для идентификации метаболитов Кетамина и исследования процессов конъюгации Кетамина и его метаболитов в организмах человека и крыс //Журнал Аналитической Химии 1998 Т53. N.6. С. 663-670 21.С.А.Савчук, Е.С.Бродский, А.А.Формановский, Е.В.Бабанова, Н.В.Веселовская, Б.Н.Изотов, Г.М. Родченков, В.В.Ерофеев, Б.А.Руденко Артефакты при хромато-масс-спектрометрическом определении препаратов для внутривенного наркоза (I). Трамадол, связь между структурой метаболитов и примесных веществ (II) Журнал Аналитической Химии 2000, Т.55, № 4, с.430-442. 22.ЛазаревВ,В., Галибин И.Е., Cавчук С.А., Изотов Б.Н., Веденин А.Н., Р.П.Васина. Фармакокинетика и метаболизм кетамина на фоне болюсного введения рентгеноконтрастных средств при рентгеноэндоваскулярных вмещательствах у детей //Ж. Анестезиологии и реаниматологии. 2001 №1 с.38-43. 15 23.Лазарев В.В., Поляев Ю.А., Cавчук С.А., Изотов Б.Н. Влияние болюсного введения рентгеноконтрастных средств на фармакокинетику кетамина и течение анестезии при рентгенохирургических вмешательствах у детей Научно-практический журнал ―Детская больница‖. 2001 №2 с.12-17. 24.Симонов Е.А., Савчук С.А., Сорокин В.И. Кислун Ю.В. Клюев Е.А. //Оксибутират, его прекурсоры и метаболиты Наркология 2002 №3 с.1219. 25.С.А.Савчук, А.Н.Веденин, А.В.Смирнов, Е.А.Симонов, О.Б.Дорогокупец, В.И.Сорокин, Ю.В.Кислун Исследование влияния продуктов и лекарственных препаратов на правильность определения опиатов и некоторых других наркотических средств в биологических объектах (моче). Лабораторный журнал 2002 №2 (2) декабрь 18-23. 26.А.М.Григорьев, С.А.Савчук Обзорные библиотеки удерживания (ГЖХ). Опыт согласования значений. Полученных для разных пневматических режимов Тезисы докладов Всероссийской конференции «Теория и практика хроматографии. Хроматография и нанотехнологии Самара 69июля 2009 г. с. 96. 27.Савчук С.А., Родченков Г.М., Щербакова Т.Г., Кирюшин А.Н. Сравнительное ГХ-МС исследование метаболизма обезболивающих наркотических средств и способ идентификации новых метаболитов. Тезисы докладов Всероссийской конференции «Теория и практика хроматографии. Хроматография и нанотехнологии Самара 6-9июля 2009 г. с. 186. 28.Савчук С.А., Родченков Г.М., Апполонова С.А., Никитина Н.М. Опыт практического применения новых ГХ-МС методик в системе химикотоксикологических лабораторий и спортивном тестировании Тезисы докладов Всероссийской конференции «Теория и практика хроматографии. Хроматография и нанотехнологии Самара 6-9июля 2009 г. с. 58 16 Приложение 1. Перечень библиотек масс-спектров, используемых для идентификации веществ, относящихся к наркотическим средствам, психотропным и сильнодействующим веществам Название библиотеки SAV_27R SAV_stim02 pub_sav50_sudmed_464 _amdislib_20141027 Формат AMDIS формат, 350 веществ с временами удерживания AMDIS формат, 464 веществ с временами удерживания SAV_TMS pub_SAV_TMSr4_sudmed_156 AMDIS _amdislib_20141027 формат, 156 веществ SUDMED_1465 AMDIS, ChemStation РВМ, NIST, 1465 спектров PMW_TOX3 AMDIS формат, 6360 спектров NIST 08 РВМ формат, 175 000 спектров PMW_TOX3, 2007 РВМ формат, 6360 спектров Wiley 7n РВМ формат, 392086 спектров Для какой Последовательность процедуры использования использовать AMDIS библиотек при автоматической идентификации 1, 2 1 1, 2 1,2 2 1 3 3 1 1 3 2 1,2,3 2 1,2,3 1,2,3 1,2,3 Только для «ручной» идентификации Только для «ручной» идентификации Только для «ручной» идентификации 17 Приложение 2. Оборудование общелабораторного назначения и реактивы № п/п 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. Тип оборудования Автоматические пипетки вместимостью 200-1000 мкл и наконечники к ним. Автоматические пипетки вместимостью 10-100 мкл. И наконечники к ним. Микрошприцы хроматографические на 10 мкл Hamilton, Agilent Technologies для автоинжектора. Виалы стеклянные с завинчивающейся пробкой и тефлонированной мембраной вместимостью 2 мл (для работы с автоинжектором) Agilent Technologies, Thermo. Виалы стеклянные с завинчивающейся пробкой и тефлонированной мембраной вместимостью 4 мл Agilent Technologies. Виалы стеклянные с завинчивающейся пробкой и тефлонированной мембраной вместимостью 9 мл (16 мм х 100 мм) или экстракционные пробирки TOXI-LAB Tubes A-100. Стеклянная мерная колба вместимостью 10-мл. Стеклянный мерный цилиндр вместимостью 100 мл Лабораторные штативы под виалы 16 мм х 100 мм Выпаривательные чашки-колпачки TOXI-LAB (можно заменить виалами Agilent Technologies вместимостью 4 мл). Подставка для работы с алюминиевыми выпарительными чашкамиколпачками TOXI-LAB Omega-12 (можно заменить металлическим лабораторным штативом под виалы вместимостью 4 мл). Весы аналитические пределом измерения 0.1 мг. Центрифуга лабораторная, 3-6 тыс об/мин. Центрифуга лабораторная, 14 тыс об/мин. Патроны для твердофазной экстракции AccuBONDII EVIDEX 3 мл/200 мг. Agilent Technologies. Устройство для твердофазной экстракции, включающее штатив для патронов (картриджей) для твердофазной экстракции с регулятором вакуума, предохранительным клапаном с вакуумным мембранным насосом, обеспечивающий вакуум (20 мм. Рт. Ст.) Ультразвуковая баня мощностью не менее 240 вт. Шейкер орбитальный Вибромиксер Фильтры полимерные 0.5 мкм для фильтрации экстрактов Фен лабораторный мощностью не менее 800 вт. Лабораторная посуда Shott Duran (квадратные стеклянные бутыли для 18 реактивов) с пластиковыми завинчивающимися пробками вместимостью 50, 100, 250, 500, 1000 мл. Вставки в виалы, Conical Inserts with Polymer Feet 250 µL glass inserts with polymer feet and mandrel interior 100/pk 5181-1270 23. Дериватизирующие агенты для ГХ-МС анализа Наименование ед. изм. Кол-во на 1 анализ, мкл Пентафторпропионовый ангидмл 100 рид, pentafluoropropionic anhydride, PFPAA Пентафторпропанол. Pentafluoroмл 50 propanol . Трифторуксусный ангидрид, мл 100 trifluoroacetic anhydride, TFAA N,O –бис(триметилсилил— мл 100 трифторацетамид, N,Obis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide) with 1% Trimethylchlorosilane, BSTFA + 1%TMCS или N-метил (N-триметилсилил— трифторацетамид, N-methyl(Ntrimethylsilyl)-trifluoroacetamide, MSTFA * *При наличии в лаборатории отдельного прибора для процедуры определения веществ в виде TMS производных Уксусный ангидрид Пиридин Beta-глюкуронидаза мл мл 100 100 Растворители и реактивы для ГХ-МС анализа Количество На 1000 анализов Наименование Гелий марки «А». 99.995% ТУ 51-940-80 Метанол для ВЭЖХ (HPLC grade) Ед. изм. Баллон 0.4 л 0.6 19 Пропанол-2 «ОСЧ 13-5» Гептан ХЧ Этилацетат ХЧ Изооктан (триметилпентан) ХЧ Метилен хлористый ХЧ «Lichrosolv» 1,2-Дихлорэтан Натрия хлорид ч.д.а. Ацетон Толуол Карбонат натрия ч.д.а. Бикарбонат натрия ч.д.а. Гидроксид натрия ч.д.а. Кислота соляная ХЧ Аммиак 10% водный Дифениламин >99% л л л л л л кг л л кг кг кг л л г 0.9 0.9 0.9 1.5 2.1 0.9 1.5 0.1 0.1 0.2 0.2 0.6 0.6 0.6 0.1 Приложение 3 Методика определения 11- нор –дельта- 9-карбокси ТГК в моче Реактивы Для щелочного гидролиза используют NaOH или КOH. 1. 5N раствора едкого натрия – 200г/л. Приготовление 5M. К 2г NaOH добавляют дист. воду до объема 10 мл. Приготовление 5M КOH. К 2.8г KOH добавляют дист. воду до объема 10 мл. Приготовление стандартных растворов (смесей). Исходный стандартный раствор 100 мкг/мл 11- нор –дельта- 9-карбоксиТГК в метаноле. Базовый стандартный раствор карбокси-ТГК (10 мкг/мл) в метаноле. К 900 мкл метанола добавить 100 мкл исходного раствора карбокси-ТГК (100 мкг/мл). Или К 450 мкл метанола добавить 50 мкл исходного раствора карбокси-ТГК (100 мкг/мл). 20 Базовый стандартный раствор карбокси-ТГК (0,1 мкг/мл) К 10 мл метанола добавить 100 мкл раствора 10 мкг/мл. Или к 1.5 мл 15 мкл р-ра 10 мкг/мл. Калибровочные растворы карбокси-ТГК a. 6 нг/мл Карбокси-ТГК-калибратор. 1) Внести 9.4 мл мочи в 10-мл стеклянную мерную колбу. 2) Добавить 600 мкл раствора карбокси-ТГК (0,1 мкг/мл). b. 15 нг/мл Карбокси-ТГК-калибратор. 1) Внести 8.5 мл мочи в10-мл стеклянную мерную колбу. 2) Добавить 1500 мкл раствора карбокси-ТГК (0,1 мкг/мл). 3) Доведите объем до метки (10 мл) мочой. c. 50 нг/мл Карбокси-ТГК-калибратор. 1) Внести 10 мл мочи в 10-мл стеклянную мерную колбу. Отобрать и отбросить автоматическим дозатором 50 мкл мочи из пробирки 2) Добавить 50 мкл раствора карбокси-ТГК (10 мкг/мл). d. 100 нг/мл Карбокси-ТГК-калибратор. 1) Внести 10 мл мочи в 10-мл стеклянную мерную колбу. Отобрать и отбросить автоматическим дозатором 100 мкл мочи из пробирки 2) Добавить 100 мкл раствора карбокси-ТГК (10 мкг/мл) в 10-мл мерную колбу. e. 150 нг/мл Карбокси-ТГК-калибратор. 1) Внести 10 мл мочи в 10-мл стеклянную мерную колбу. Отобрать и отбросить автоматическим дозатором 150 мкл мочи из пробирки 2) Добавьте 150 мкл раствора карбокси-ТГК (10 мкг/мл) в эту 10-мл мерную колбу. Подготовка пробы 21 Гидролиз: к 3 мл мочи добавить 0.5 мл 5N раствора NaOH, выдерживать при 500С в течение 20 минут. Выделение определяемых веществ жидкостной экстракцией. Гидролизат подкисляют до рН 2-3 добавлением 250-350 мкл конц. соляной кислоты, экстрагируют 3 мл смеси изооктан-этилацетат 7:1 на орбитальном шейкере 5 мин, центрифугируют (3 мин при 3000 об/мин), отбирают верхний органический слой, добавляют 30 мкл р-ра ВС дифениламина в ацетонитриле конц. 20 мкг/мл (до конц. ВС в пробе 200 нг/мл), упаривают в вакуумном концентраторе и дериватизируют. Дериватизация. (вариант 1). Алкилирование/ацетилирование пентафторпропионовый ангидрид (PFPA) + пентафторпропанол (PFPOH) К сухому остатку добавить 50 мкл PFPA и 25 мкл PFPOH, выдерживать 30 мин при 90оС, упарить остаток реагента растворить в 100 мкл этилацетата. 1 мкл в хроматограф. Дериватизация. (вариант 2). Силилирование. К сухому остатку добавить 70 мкл BSTFA выдержать 30 мин при 70оС, 1мкл в хроматограф. Условия ГХ-МС анализа Условия двух вариантов ГХ/МС хроматографирования и детектирования тетрагидроканнабиноловой кислоты в моче представлены ниже. 1. Определение тетрагидроканнабиноловой кислоты в виде производного с пентафторпропионовым ангидридом и пентафторпропанолом Метод 1 SCREEN: 100оС(1 мин) 35оС/мин300оС (15 мин). Диапазон масс m/z 41 – 650 а.е.м. Характеристические ионы ДФА-PFP m/z 315, 222, 167 время удерживания 5.20 мин Характеристические ионы ТГК-СООН-PFP m/z 607. 622, 459 время удерживания 7.68 мин ГХ-МС Метод 2 DOAS: 50оС (0,5мин.), 99оС/мин 100оС (1мин.), 15оС/мин, 280оС (30 мин.) Время удерживания ДФА- PFP 9.00 мин Время удерживания ТГК-ССООН-PFP 14.49 мин 2. Определение тетрагидроканнабиноловой кислоты в виде производного с BSTFA ГХ-МС Метод 1: 100оС(1 мин) 35оС/мин300оС (15 мин). 22 Диапазон масс m/z 41 – 650 а.е.м. Характеристические ионы ТГК-СООН-TMS m/z 371, 472, 488 время удерживания 9.41 мин Методика определения клофелина в моче Ввод внутреннего стандарта. К 3 мл пробы мочи добавляют 30 мкл р-ра ВС дифениламина в ацетонитриле конц. 20 мкг/мл (конц. ВС в пробе 200 нг/мл). Выделение определяемых веществ жидкостной экстракцией. К 5 мл пробы с введенным ВС добавляют 300 мкл 25% водного NH4OH и экстрагируют 10 мл смеси гексан – изопропанол 9:1, центрифугируют, переносят органический слой в виалу вместимостью 10 мл и упаривают экстракт. Получение производных. К сухому экстракту добавляют 70 мкл (BSTFA), выдерживают 30 мин при 700С,1 мкл пробы вводят в хроматограф. Условия ГХ-МС анализа. ГХ-МС Метод 1 SCREEN: 100оС(1 мин) 35оС/мин300оС (15 мин). Диапазон масс m/z 41 – 650 а.е.м. Характеристические ионы ДФА-TMS m/z 201, 255, 270 время удерживания 2 .73 мин. Характеристические ионы КЛОФЕЛИН-TMS m/z 266, 301 КЛОФЕЛИН-2TMS m/z 338, 373 время удерживанмя 6.40 мин Из BSTFA на клофелин может накладывается ион m/z 379. Примечание: для дериватизации клофелина можно использовать реактив NMethyl-N-(trimethylsilyl)trifluoroacetamide (CAS 24589-78-4). Дериват КЛОФЕЛИН-2TMS m/z 338, 373 время удерживанмя 6.40 мин. Примечание: на клофелин может накладывается фоновый пик с базовым ионом m/z 325 (из реактива). Приложение 4. Пример веществ различных групп, определяемых по процедуре 1 Целевые вещества m/z, в скобках интенсивность 8-Tetrahydrocannabinol, RT DOAS, мин 15.46 2. 2-Amino-5-Chlorbenzophenone 12.69 314(160)299(20)271(90)258(100) 231(270)193(60)174(40) 195 (11) 214 (6 ) 230 (100) 232 (40) 3. 2-Amino-5-Nitrobenzophenone 15.11 165 (180) 195 (29) 241 (100) 242 (84) 4. 5. 6. 7. 8. 9. 2-Amino-5-nitrodenzophenone TFA 2-Methylamino-5-Chlorobenzophenone 2-METHYLAMINOPROPIOPHENON 2-Pyrrolidinone,1,5-dimethyl-3,3-diphenyl 3,4-Methylenedioxy-amphetamine (MDA), 3,4-methylenedioxy-N-ethylamphetamine (MDEA 3-N-pentyl-.delta.9-tetrahydrocannabinol 4-ACETYLAMINOANTIPYRINE-9 analgine met 4-Methylthioamphetamine (MTA) 13.45 13.07 6.68 13.60 8.01 8.90 105 (100) 191 (37) 269 (40) 338 (62) 193(38) 228(45) 244 (91) 245 (100) 15.63 14.17 314(80)299(100)271(45)256(25)321(80) 56(100) 84 (58)203(40) 245(45) 8.77 181(3)166(2)138(30)122(15)91(7)78(4)44 (100) 10. 11. 12. 179(3)136(40)105(3)77(12)44(100) 135(10)105(2)72(100)44(20) 23 13. 4-OH-Methamphetamine 2TFA 8.69 110(22)154( 100 )230 (203) 14. 15. 6-ACETYL-MORPHINE, 6-MAM 6-MAM, 6-АC Morphine 14.95 16.22 16. 17. 18. 19. Acetaminophen Acetaminophen TFA (Paracetamol TFA) Adiphenine Alphaprodine 9.87 8.86 13.76 10.89 20. Aminochlorbenzophenone TFA 12.21 364 (100) 311 (8) 423 (57 ) 327(100)284(10)268(100)215(35)204(15) 162(15)146(25) 151(10)109(400)80(10)53(5)43(10) 1081002055124726 167(10)152(5)99(10)86(100) 261(5)187(50) 172(100)144(20)129(15)84(35)57(20)42(2 0) 1804325838327 7132923 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. 36. Aminochlorbenzophenone TFA Amitriptylinoxide -(CH3)2NOH Amitriptyline Amobarbital Amphetamine, Amphetamine TFA Amphetamine TFA p-OH-Amphetamine TFA Analgine -M ANALGINE MET. ANALGINE-M TFA Androst-2-en-17-one, (5.alfa.) ANDROSTERONE TFA Anhydroecgonine Aprophene TAREN comp. major Aprophene 12.17 15.12 13.74 10.14 4.584 6.18 6.31 7.77 12.47 12.34 13.15 14.11 14.85 7.28 13.95 13.94 37. 38. 39. 13.77 8.20 12.56 40. Atropine Barbital BENZOIC ACID 4-AMINO-2DIETHYLAMINOETHER Benzphetamine TFA 180 40 258 37 327 70 204 31 219 39 232 100 58 100 202 4 215 2 141 (80) 156 (100) 120(5)115(3)91(15)65(10)44(100) 91491897140100 140(100)118(100)91(60)65(20) 1401002031223075 299(100)230(77)83(62)56(98) 56(100)84(75)203(90) 56(90)123(70)216(80)313(100) 91(80)161(55)218(100)272(75) 342(85)368(25)386(100) 152 (100) 166 (7) 181 (32) 86(100)99(47)181(40) 325(2)310(5)253(3)181(20)165(15)99(30) 86(100) 94(25)124 (100) 289(23) 141( 94 )156 (100) 86(100)99(45)120(25) 11.23 91 100 148 90 41. 42. Benzylamphetamine Bromantane TFA 11.16 13.00 148(90)91(100)65(10) 24710034320 36022 402 21 43. 44. 45. 46. Bromantane-M(OH) TFA Buthorphanol (stadol)2TFA Buthorphanol (stadol)-M TFA Caffeine 14.94 14.76 15.91 11.09 47. Cannabichromene 14.91 48. Cannabicoumaronone 15.13 49. Cannabidiol 14.92 50. 51. 52. 53. 54. 55. 56. 57. 58. Cannabigerol Cannabinol, Carbamazepine CARBAMAZEPINE MET CARBAMAZEPINE MET/artifact Carbamazepine-10,11-epoxide CARBAMAZEPINE-M (ACRIDINE) CARPHEDON Carphedon 2TFA 16.01 16.20 14.64 12.87 12.18 12.88 11.00 13.57 9.63 247 36 269 8 515 8 350 30 351 9 464 100 465 21 350 24 414 17 464 100 465 22 194(100)165(6,5)109(60,4)82(28,4)67(41, 5)55(38,7)42(14,0) 314(10)299(5) 231(100)174(20) 328(60)313(20) 285(100)271(20)257(50)243(20)214(50)2 02(15)185920) 314(10)246(13) 231(100)193(10)174(10) 316(15)247(15)231(40)193(100)123(30) 310(10)295(100)238(15)223(5) 165(25) 193(100) 236(28) 151(25)179(100)207(80) 16(25)193(100)204(20) 151 (23) 179 (100) 207 (81) 151 (9) 178 (23) 179 (100) 160 93 174 100 218 22 270 100 290 5 367 27 24 59. 60. 61. 11.60 6.53 6.40 104 100 173 3 200 30 140(100)203(10)230(20) 140100203623011 62. CARPHEDON Nitril CATHINE, NORPSEUDOEPHEDRINE Cathine TFA (orpseudoephedrine TFA) Chlorphenamine-M (bis-nor-) AC 13.90 167 41 203 61 216 100 218 34 63. 64. CHLORPHENIRAMINE Chlorpheniramine 12.41 12.41 167(25)203(100) 167 20 203 100 205 33 65. Chlorpromazine 16.12 232 6 272 13 274 5 318 22 320 8 66. 67. 68. 69. 70. 71. Chlorpromazine Chlorpromazine, Chlorprothixene Clobenzorex TFA Clozapine Coaxil (Tianeptine)-M 16.00 15.94 15.92 12.97 20.32 25.29 72. 73. Cocaethylene Cocaine 14.11 13.76 74. Cocaine 13.80 75. Cocaine-M (methylecgonine) TFA 7.69 58 100 232 9 272 14 318 24 318(50)272(30)232(15)86(30)58(100) 58 (100) 221 (15) 12510023023 26415 192 (227) 243 (256) 228 (100) 255 (46) 283 (24) 297 (23) 311 (26) 390 (18) 196 83 272 12 317 17 82100182962729 30320 303(10)272(5)198(5)182(550)94(250)82(6 00) 182 (100) 264 (10) 295 (25) 76. CODEINE 15.18 299(100),282(10),229(30),162(40) 77. Codeine TFA 14.49 282(100),395(70),266(15),225(15) 78. 79. 80. Cropropamide Crotethamide Desomorphine 8.98 8.44 14.17 6975100100168 33 69628610015433 214 30 228 17 256 15 270 38 271 100 81. Desomorphine TFA 13.213 324 18 350 12 352 18 367 100 82. Diazepam 15.58 83. 84. Dicaine (Tetracaine) Dietyltryptamine 13.88 11.74 85. 86. Diphenhydramine Doxepin 11.37 13.95 87. Doxepine 14.01 2212725610028390283(250)256(300)241(50 )221(100) 150 176 193 216(3)144(3)130(5)115(3)86(100)58(5)42 (2) 58(290)73(60)152(20)165(40) 58(100),152(5),165(5)178(5)189(5)202(3) 279(3М) 58 100 165 2 189 1 88. 89. 90. 91. 92. 93. 94. 95. Ecgonine N,O-di TFA Ephedrine, Ephedrine TFA Ephedrine 2TFA Etamivan TFA Ethamivan Ethylephrine TFA Ethylmorphine 6.06 7.04 7.13 7.21 10.17 11.54 8.04 15.39 164 100 194 28 232 40 308 36 58(100)77(15)91(3) 110241541002443 244(10)154(100)110(20)69(10) 247, 318,319 151 (100) 222 (26) 223 (22) 126281541002173 96. Ethylmorphine TFA 14.78 313(100)284(25)256(15)243(20)214(25)1 62(45) 409(100)380(20)296(100)281(50)266(30) 97. 98. 99. Etofylline TFA Fenazepam-Hy TFA Fenfluramine TFA 12.07 13.51 7.63 206 (37) 207 (38) 320 (100) 224 28 226 28 336 17 405 40 407 49 140 31 159 17 168 100 25 100. Fenproporex TFA 10.09 118 59 140 44 152 13 193 100 101. Fentanyl 18.17 102. 103. 104. 105. Fludiazepam Haloperidol-M (N-desalkyl-) AC Haloperidol-M -2H2O Heroine, 15.88 14.17 9.67 17.29 106. 107. Hexobarbital Hydrocodone 11.34 15.72 245(400)189(125)146(220)132(30)105(60 )91(30)77(50) 273 (53 )274 (100) 283 (37) 302 (93) 210 (70) 237 (30) 255 (36) 309 (10) 127 (33) 154 (27) 189 (100) 191 (33) 369(140)327(200)310(110)268(150)215(7 0)204(65) 155 (23) 157 (37) 221 (100) 242 51 243 33 270 11 284 13 299 100 108. Hydromorphone TFA 14.83 325 71 352 16 381 100 109. Imipramine 13.98 193 (35) 234 (100) 280 (29) 110. 111. ISTD DPA Ketamine TFA 9.27 12.08 112. Levorphanol TFA 12.33 169100 168 63167 33 262 (35) 270 (63)276 (16) 298 (20) 305 (14) 150 71 285 81 352 84 353 100 113. MDA TFA 9.35 135 100 162 40 275 13 114. MDA-M/precursor-3 7.86 105 7 135 100 136 10 178 23 115. MDMA TFA 10.40 1541001627928915 116. 117. Meconin, Mefenorex TFA 10.31 10.26 194(90) 176(40)165(100)147(80) 118 44 140 49 216 100 218 43 118. Meperidine 10.46 119. Meprobamate 10.74 120. Mescaline TFA 10.91 172 27 218 20 247 35247(40)232(10) 218(23)190(8) 172(30)71(100)57(25)42(23) 144(20),114(20),96(30),83(100),71(50),62 (40),55(80) 1811001943330732 121. 122. Mescaline, Methadone, 9.93 13.38 123. 124. Methamphetamine Methamphetamine TFA 5.13 7.35 125. Methaqualone, 13.52 126. Methorphan 13.38 211(30)182(100)167(60)151(20)139(10) 72(100)91(3)115(3)165(3)178(3)223(4)29 4(5) 58(100)65 1102811832154100154(100)118(45)110(50) 91(23)69(20) 233 30 235 100 250 30250(30) 235(100)217(5)207(5)143(5)132(10) 171 39 214 41 271 100 127. Methoxyphenamine TFA 8.90 91 50 110 60 121 30 148 100 154 128. Methylaminochlorbenzophenone TFA 12.51 236 (96) 288 (22) 307 (16) 340 (20) 129. 130. Methylaminopropiophenon Methylenedioxymeth-amphetamine (MDMA), Methylphenidate Methylphenidate 6.68 8.50 105(5)77(15)58(100)42(5) 193(1)135(5)77(5)58(100) 11.40 10.31 1801001508 172(3)150(5)91(15)84(100)65(3)56(10) 131. 132. 99 26 133. 134. Morphine 2TFA Morphine mono-TFA 14.10 14.44 364 100 477 25 268 100 381 56382 13 135. Morphine, 15.58 285(120)268(20)215(40)162(50)42(45) 136. N,N-Dimethyltryptamine 10.65 188(10)143(5)130(10)115(5)77(5) 58(100)42(5) 137. 138. N,N-DIMETHYLTRYPTAMINE Naltrexone 2TFA 15.61 420 40 436 29 492 19 533 100 139. 140. 141. 142. 143. 144. Naltrexone-M TFA Naltrexone-M TFA Nicotine Nikethamide Nitrazepam Nordazepam 14.40 16.09 6.76 8.76 18.85Doas 518 73 534 51 632 21 422 13 480 14 494 50 535 100 161(40)162(40)133(80)84(280)42(60) 7838 106 100 17746 206 234 253 264 280 241 89 242 100 269 87 145. Norephedrine TFA 6.34 140100203623011 146. 147. 148. Norfenyramine TFA norketamine Norketamine TFA 12.57 11.10 10.83 167 (41) 169 (70) 182 (100) 149. 150. 151. 152. Nortriptyline Noscapine Octopanine TFA Oxazepam 13.86 27.10 7.93 14.80 44(100)202(5)215(3) 220(100)205(20) 287,315,328 205 96 233 75 239 91 268100 153. Oxycodone 16.43 154. Papaverine, 19.70 315(100)300(5)281(10)258(20) 230(50)201(20)187(17)140(17)115(17) 338(100)324(90)308(30)293(20) 155. 156. Phenazepam Phencyclidine 18.10 11.61 157. 158. Phendimetrazine Phendimetrazine 159. Pheniramine 160. 161. 162. Phenproporex phentermine 4.968 Phentermine TFA 9.160 97(100)68(10)56(22) 6.34 114 (24) 132 (45) 154 (100) 163. Phenylephrine TFA 8.18 1401003287342 3 164. 165. 166. 167. Prolintane Promazine Promedol (Trimeperidine) Propoxyphene 9.51 14.67 11.14 13.54 126 100 174 6 199 (34) 238 (40) 284 (60) 186 100 201 18 58 100 91 4 115 3 117 1 168. 169. 170. 171. Propylcannabinol Pseudococaine (+)-PSEUDOEPHEDRINE Pseudoephedrine TFA 14.65 10.97 7.04 7.52 282(18)267(100)238(20)223(10) 82 (96) 182 (100) 303 (22) 58(100)77(15)91(3) 110241541002443 172. Pseudoephedrine 2TFA 7.70 154(100)110(60)69(50)56(20) 173. 174. Scopolamine Sibitramine 14.64 10.96 138, 154, 303 72 1411410011510 239 (54) 256 (72) 275 (50) 284 (100) 315 319 321 350 242(40)200(100)186(20)166(17)117(10)9 1(30) DPATFA 9.13 85 91 117 7 191 13 7.950 191(15)117(10)105(10)85(90)70(15)57(10 0)42(50)42(50) 11.19 167 (15) 168 (36) 169 (100) 182 (3) 27 175. 176. 177. 178. 179. 180. Sibutramine-M (bis-nor-) TFA Sibutramine-M (nor-) TFA Sidnocarb TFA Sinephrine TFA Struchnine Tenocyclidine 10.90 11.92 14.36 8.17 27.72 11.609 13730165100263 6 1402815435196100 91100 11929 23018 2993 14010032816 342 6 333 (34) 334 (100) 335 (51) 249(40)206(55)192(15)165(80)123(20)11 0(15)97(100)84(22) 407(80)306(30)280(20)266(30)248(30)14 1(40)113(100)70(70) 181. Trifluopeazine 17.62 182. 183. 184. Trifluoropromazine Trimeperazine, TRIMEPRAZINE 13.90 14.45 14.47 248(10)234(10)86(20)58(100) 298(40)252(15)198(15)180(13)58(100) 58 100 198 10 252 7 298 21 185. Tropacocaine 12.05 245(30)140(10) 124(100)105(20) 94(40)82(80)67(20)42(23) Приложение 5. Применение методов ГХ-МС и ВЭЖХ-МС/МС для определения наркотических веществ в волосах 1 Савчук С.А., 2Никитина Н.М., 3Зулаева А.С., 4Несмеянова Н.И., 4Константинова С.Д. 1 – Национальный научный центр наркологии МЗ. 2- Наркологический диспансер Псковской области. 3- Городское бюро судебно-медицинской экспертизы, Москва. 4 – Бюро судебно-медицинской экспертизы, Якутск. К обнаружению веществ в образцах волос в последние годы увеличивается интерес судебной и клинической токсикологии. Анализ волос расширяет возможности химикотоксикологических лабораторий по обнаружению наркотических и лекарственных веществ в организме человека. Волосы как объект имеют некоторые преимущества перед мочой или кровью, такие как наиболее долгое удерживание попавших в организм человека токсикантов, легкодоступность для корректного отбора и исследования [13], стабильность образцов волос (они не нуждаются в специальных условиях хранения как биожидкости и могут храниться в простом бумажном конверте). Анализ волос по сегментам позволяет установить время потребления веществ по месяцам из расчета, что скорость роста волос приблизительно равна 1 см в месяц. Также к преимущесвам выбора волос в качестве биообъекта для исследования можно отнести меньший процент получения ложноположительных и ложноотрицательных результатов из-за включения в процесс подготовки пробы стадии отмывки от поверхностных загрязнений [6]. С помощью современных аналитических методов в волосах можно обнаружить практически любые классы токсикантов. Главной особенностью исследования волос является правильный подбор механизма пробоподготовки для более полного извлечения аналитов из внутренней части волоса [6]. В соответствии со строением волоса и спецификой образцов волос большинство исследователей выделяют несколько стадий пробоподготовки: отмывка образцов волос, извлечение и экстракция образцов волос [2,4-8]. Идентификация веществ из экстрактов волос в основном проводится газовой хроматографией/масс-спектрометрией [1,2,4,5,6], у которой есть недостаток - потребность дериватизации полярных аналитов, к которым относятся большинство наркотических веществ. Эта проблема решена с помощью использования метода жидкостной хроматографии с традиционными детекторами или в тандеме с различными масс-спектрометрическими детекторами, например как тройной квадркполь, ионная ловушка или время-пролетная массспектрометрия [2,3,6,8,11]. 28 Стадия отмывки является одной из обязательных, так как позволяет исключить факт внешнего загрязнения образца волос исследуемыми веществами. В основном для отмывки используются растворы щелочи или органические спирты, или другие растворители [24,7,10]. Настаивание проводить необходимо в течение 15 минут, а затем промывать дистиллированной водой. Симонов Е.А. и др. предлагают волосы последовательно отмывать 2 мл 0,2N раствора хлористоводородной кислоты и 2 мл метанола (или этанола), по 10 минут каждым. Операция проводится до полного исчезновения в последнем растворителе, после его упаривания, следов наркотического средства [1]. Некоторые исследователи предлагают следующий вариант отмывки: волосы, разделенные на сегменты, моют шампунем и ополаскивают деионизированной водой, затем споласкивают ацетоном и просушивают в течение ночи на воздухе или при температуре 60 оС [6,8]. После высушивания образцы волос режут на сегменты и помещают в пробирки для дальнейшего изолирования. Все описываемые в литературе методы изолирования аналитов из образцов волос можно объединить в несколько вариантов [2,6]: 1) Щелочной гидролиз. Проводится настаивание проб волос с раствором NaОН (до 2,5М) при 37оС в течение ночи. При увеличении температуры проведения изолирования время экспозиции соответственно снижается. После этого доводят кислотой рН до 9 и проводят жидкость-жидкостную экстракцию. Данный метод изолирования используют в основном для обнаружения каннабиноидов [4,9,10,12], амфетаминов, нейролептиков и психостимуляторов [4,7] 2) Ферментативный гидролиз проводят с раствором глюкуронидазы в течение 2 часов при 40оС. После центрифугирования обычно проводят ТФЭ. Данный метод экстракции описан для для 6-МАМ и кокаина, бензодиазепинов [4,]. 3) Кислотный гидролиз возможно проводить несколькими методами. с растворами соляной или серной кислот при 37оС в течение ночи. При увеличении температуры проведения гидролиза сокращается время экспозиции. После нейтрализации проводят ТФЭ [2] или жидкость-жидкостную экстракцию смесью растворителей [1,3]. Данный метод используется для извлечения веществ морфиновой группы, бензодиазепинов, антипсихотических средств, кокаина. с метанолом [1,4], часто при использовании настаивания в ультразвуковой бане в течение нескольких часов [5,6]. Используется для обнаружения веществ группы опиатов, тетрагидроканнабинола, кокаина; с метанолом, подкисленным раствором соляной кислоты. Извлечение проводится с использованием ультразвуковой бани в течение 1 часа [2], затем настаивание в течение ночи. Данный вид изолирования используется для выделения меторфана [3], амфетаминов [8,11]. метанол + ТФ кислота (9:1) с использованием ультразвуковой бани в течение 1 часа, затем настаивают при повышенной температуре в течение ночи. После чего проводят ТФЭ. Частный метод изолирования проводится для обнаружения 6-МАМ, метадона, кокаина [2,8] Прямое метанольное извлечение показало более высокую степень и чистоту извлечения аналитов [4,6]. При исследовании на амфетамины и другие стимуляторы показано целесообразное применение в щелочного гидролиза, так как при этом получаются более полные извлечения [4]. После кислотного и щелочного гидролиза, дающего более «грязные» извле29 чения чаще всего используется ТФЭ [6]. При анализе волос на содержание каннабиноидов используется только щелочной гидролиз [4,7]. Для отдельных групп веществ, например амфетамины и другие стимуляторы, успокоительные средства, кокаин и опиаты, каннабиноиды, описано значительное количество методик анализа. Но по разработке скрининговых методик было опубликовано всего несколько работ [3]. Поэтому несомненно разработка скрининговых методик для введения в рутинную работу является наиболее перспективным направлением. Экспериментальная часть Подготовка образцов волос для анализа. Сравнивали три варианта гидролиза волос: кислотного, щелочного и ферментного. Также сравнивали жидкостную и твердофазную экстракцию. • • • • • • • • • Ферментный гидролиз Образец волос отмывали от загрязнений в химическом стакане с водным раствором ПАВ. Промывали деионизированной водой до полного удаления моющего средства, промыть метанололм. Высушивали и измельчали (ножницами). Взвешивали, масса навески 20-100 мг навесок волос Добавляли 1 мл водного раствора (pH 6.5.) β-глюкуронидазы 1/10. Выдерживали при 40º С в течение 12 часов. Орабатывали на 1 час на ультразвуковой бане. Центрифугировали в течение 5 минут 14000 об/мин. Водную фазу отделяли и обрабатывали методом твердофазной экстракции. Кислотный гидролиз. К навеске волос добавляли 1 мл 5М HCl. Выдерживали 45 мин при 90º С. Щелочной гидролиз. К навеске волос добавляли 1 мл 1М KOH. Выдерживали 40 мин при 50º С. Жидкостная экстракция В пробирку объемом 10 мл вносят 3 г хлорида натрия, твердый буфер на кончике шпателя 40-50 мг и 3 мл экстракционной смеси. В пробирку с экстракционной смесью вносят 1 мл гидролизата волос. Добавляют 30 мкл внутреннего стандарта дифениламина (раствор «Б» концентрацией 20 мкг/мл), концентрация ВС в пробе 200 нг/мл. Экстрагируют 10 мин на орбитальном шейкере Центрифугируют при 3000 об/мин 5 мин. Отделяют органический слой, переносят его в пробирку объемом 4 мл или в металлический колпачок TOX-LAB для упаривания и упаривают в токе горячего воздуха. (К сухому остатку добавляют 70 мкл этилацетата, встряхивают на вибромиксере 2-3 сек, 1 мкл пробы вводят в хроматограф. Твердофазная экстракция • • Кондиционирование картриджа (колонки) (поток 3-5 мл/мин). – 3 мл метанола. – 3 мл 0,1 М фосфатного буфера, рН 6.0. Нанесение образца на колонку. 30 – Пропускали пробу через колонку. • Промывка водой. – Пропускали через колонку 3 мл деионизованной воды (поток 3-5 мл/мин). • Подкисление. – Пропускали 2 мл 1М уксусной кислоты через колонку (поток 3-5 мл/мин). – Высушивали колонку в течение 2 минут. • Промывка гексаном. – Пропускали через колонку 3 мл гексана (поток 3-5 мл/мин). • Сбор кислой/нейтральной фракции. – Пропускали через колонку 1,7 мл смеси гексан:этилацетат (1:1) (поток 1-2 мл/мин). – Собирали кислую/нейтральную фракцию. – Удаляли остатки элюента током азота. • Промывка колонки метанолом. – Пропустить через колонки 3 мл метанола (поток 3-5 мл/мин). – Высушить колонку в течение 2 минут. • Сбор основной фракции. – Пропустить через колонки 1,7 мл смеси дихлорметан : пропанол-2 : концентрированный раствор аммиака (78:20:2) (поток 1-2 мл/мин). – Собрать основную фракцию. • Концентрирование фракций. – Упарить содержимое виал с собранными фракциями. – Перерастворить остаток в 100 µл этилацетата. – Аппаратура ГХ-МС. Скрининговый анализ выполняли на хроматографе с массселективным детектором Agilent 7820/5975 Маэстро с колонками НР-5MS. Условия анализа: газ-носитель гелий, скорость потока через колонку 2 мл/мин. Программа: 500С(0.5мин) 990С /мин 1000С (1мин) 150С/мин 280 0С (30 мин) время удерживания ВС ДФА 9.27 мин. Условия масс-спектрометрического детектирования: Анализ в режиме сканирования по полному ионному току (SCAN) Температура источника ионов 230оС Температура анализатора 150оС Диапазон масс m/z 29-650 а. е. м. Напряжение на умножителе: результат, полученный при автоматической настройки по перфторбутиламину в режиме ATUNE + 100 кВ. Идентификацию веществ выполняли веществ в режиме автоматической AMDIS идентификации по фиксированным временам удерживания [14-16]. Апаратура ВЭЖХ-МС/МС. Жидкостный хроматограф Agilent 1200 с тандемным масс-спектрометрическим детектором Agilent 6460 с электроспрей ионизацией Условия ВЭЖХ анализа [17]. Колонка: Рrontosil C18 75 мм 2.1 мм 5 мкм Элюенты: А- ацетат аммония водный (0.15 г на 100 мл), c добавлением 50 мкл муравьиной кислоты). В - метанол Условия элюирования: 5%В300 мл, 90%В1025 мл, 90%В1600 мл, 100%В1610 мл 100%В2400 мл. Объем вводимой пробы 10 мкл. Результаты и их обсуждение Целью исследования было - оптимизировать методы подготовки и твердофазной очистки малых навесок проб волос. Анализировали волосы от трупа и от живых лиц. 31 Целевые вещества: новые синтетические стимуляторы, известные наркотические и лекарственные препараты. Выбор и обоснование методов гидролиза. Сравнивали кислотный щелочной и ферментный гидролиз. Условия представлены в разделе экспериментальная часть. Для анализа использовали три навески волос по 100 мг, полученные от одного образца. Волосы были отобраны от трупа и, как показал предварительный анализ, содержали трамадол и его метаболиты. Также проводили оптимизацию методики ферментного гидролиза. Исследовали влияние различных значений рН: 4.0, 6.5 и 7.5 на эффективность гидролиза. Полученные гидролизаты волос подвергали твердофазной очистке. Результаты ГХ-МС анализа показали, что ферментный гидролиз наиболее эффективен при всех трех значениях рН. При кислотном гидролизе наблюдали значительные до 70% потери трамадола, при шелочном гидролизе трамадол в исследуемых волосах обнаружен не был. Влияние твердофазной очистки на чувствительность определения. Сравнивали результаты анализа навесок (100 мг) волос, отобранных от трупов и содержащих параметоксиметамфетамин. Навески подвергали кислотному гидролизу с последующей жидкостной или твердофазной экстракцией. Результаты ГХ-МС анализа показали, что применение твердофазной экстракции позволяет на порядок величины поднять чувствительность определения. Наиболее эффективно совмещать твердофазную экстракцию с предварительным ферментным гидролизом. ГХ-МС профили (в режиме полного сканирования) экстрактов гидролизатов волос даны на рис. 1 и 2. Abundance TIC: 120128_hair_manak_HCL_L_L.D\data.ms 3e+07 2.8e+07 2.6e+07 PMMA 2.4e+07 2.2e+07 2e+07 1.8e+07 1.6e+07 1.4e+07 1.2e+07 1e+07 8000000 6000000 4000000 2000000 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 Time--> 32 Рис.1. р-Метоксиметамфетамин в волосах трупа, кислотный гидролиз (5M HCL), жидкостная экстракция смесью растворителей метиленхлорид-гептан-изопропанол 7:2:1. (100 мг волос) A bundanc e T IC : P A V L IV _ P h 4 _ O S N .D \ d a ta .m s Abundanc e 6000000 S c a n 3 0 2 (7 .6 3 1 min ): P A V L IV _ P h 4 _ O S N .D \ d a ta .ms (-2 6 8 ) (-) 500000 5 8 .1 5500000 450000 5000000 400000 350000 4500000 300000 4000000 р-Метоксиметамфетамин 250000 3500000 200000 150000 3000000 100000 2500000 50000 1 2 1 .1 4 2 .1 2000000 0 7 7 .0 9 1 .1 1 0 7 .1 1 4 8 .11 6 4 .0 1 3 3 .9 1 7 8 .1 1 9 1 .12 0 6 .9 4 0 5 0 6 0 7 0 8 0 9 0 1 0 01 1 01 2 01 3 01 4 01 5 01 6 01 7 01 8 01 9 02 0 02 1 0 m/ z--> 1500000 1000000 500000 4 .0 0 6 .0 0 8 . 0 0 1 0 . 0 01 2 . 0 01 4 . 0 01 6 . 0 01 8 . 0 02 0 . 0 02 2 . 0 02 4 . 0 0 T im e --> Рис. 2. Хроматограмма по полному ионному току экстракта гидролизованных волос трупа р-Метоксиметамфетамин в волосах трупа, ферментный гидролиз рН 4, SPE Bond Elute Sertify (100 мг волос) Выбор и сравнение картриджей твердофазной очистки для ГХ-МС анализа волос. Сравнивали два типа патронов для твердофазной экстракции Bond Elute Sertify и AccuBond II SPE Evidex. Исследовали навески по 50 мг волос, содержащие различные наркотические и лекарственные препараты. Для подготовки образцов использовали ферментный гидролиз. Полученные результаты позволяют говорить о сравнимой эффективности твердофазной очистки при использовании обоих картриджей. Однако, при определении метадона мы столкнулись с проблемой, которая заключалась в следующем. При использовании картриджей Bond Elute Sertify на ГХ-МС хроматограмме наблюдали элюирование незначительного количества фоновых углеводородов. Пик одного из гомологов этих фоновых веществ накладывался на пик метадона и препятствовал его определению. Это происходило из-за того, что массспектр фонового вещества содержал значительный фрагментный ион m/z 72, а этот ион является целевым ионом метадона. При этом в масс-спектре метадона отсутствуют другие ионы пригодные для детектирования. В исследуемом случае метадон удалость определить при 33 сравнении профилей волос содержащих и не содержащих метадон. Однако масс-спектр метадона в этих образцах удалость зафиксировать только в случае использования картриджей AccuBond II SPE Evidex. Профили и масс-спектры представлены на рис. 3. Применение ВЭЖХ-МС/МС позволяет уверенно определять метадон при использовании обоих картриджей. Профиль экстракта волос, содержащих метадон представлен на рис.4. Abundance Abundanc e Io n 7 2 .0 0 (7 1 .7 0 to 7 2 .7 0 ): H a ir_ b la n k 1 .D \ d a ta .ms Io n 7 2 .0 0 (7 1 .7 0 to 7 2 .7 0 ): H a ir_ 2 .D \ d a ta .ms Scan 1493 (13.373 min): Hair_2.d\data.ms 43.1 220000 40000 200000 35000 180000 160000 30000 83.1 140000 25000 120000 ÂÎËÎÑÛ ÁËÀÍÊ 20000 100000 80000 15000 ÌÅÒÀÄÎÍ 60000 ÂÎËÎÑÛ ÌÅÒÀÄÎÍ 10000 40000 5000 125.1 20000 224.3 168.2 281.1 0 0 1 2 .2 0 1 2 .4 0 1 2 .6 0 1 2 .8 0 1 3 .0 0 1 3 .2 0 1 3 .4 0 1 3 .6 0 T ime --> 50 100 150 200 250 341.1 300 405.2 350 400 460.4 450 m/z--> (а) (в) A b und a nc e A b u n d a n c e S c a n 1 4 8 1 (1 3 .2 8 3 m in ): O s ip o v a _ h a ir_ o s n .D \ d a ta .m s Io n 7 2 .0 0 (7 1 . 7 0 to 7 2 .1 200000 7 2 . 7 0 ) : O s ip o v a _ h a ir _ o s n . D \ d a t a . m s 190000 2 0 0 0 0 0 180000 170000 1 8 0 0 0 0 160000 150000 Метадон 1 6 0 0 0 0 140000 130000 1 4 0 0 0 0 120000 110000 1 2 0 0 0 0 100000 1 0 0 0 0 0 90000 80000 8 0 0 0 0 70000 60000 6 0 0 0 0 50000 40000 4 0 0 0 0 30000 20000 2 0 0 0 0 4 3 .1 1 1 1 .1 10000 0 1 6 5 .0 1 9 4 .0 0 1 2 .0 0 1 2 .5 0 1 3 .0 0 1 3 .5 0 1 4 .0 0 1 4 .5 0 40 1 5 .0 0 60 80 100 120 140 160 180 200 2 2 3 .1 220 2 5 6 .1 240 260 2 9 4 .1 280 300 3 5 4 .2 320 340 360 4 0 5 .1 380 400 420 4 4 6 .2 440 m / z --> T im e - - > (в) (г) Рис 3(а). Наложение ГХ-МС профилей (по m/z 72) образцов волос, содержащих и не содержащих метадон. Ферментный гидролиз, картридж Bond Elute Sertify. 34 Рис 3(б). Наложение масс-спектров метадона и фонового вещества, картридж Bond Elute Sertify. Рис 3(в). ГХ-МС профиль (по m/z 72) образца волос, содержащего метадон. Ферментный гидролиз, картридж AccuBond II SPE Evidex. Рис 3(г). Масс-спектр метадона, зафиксированный в образце волос, картридж Bond Elute Sertify. XIC of +MRM (55 pairs): 310,2/265,2 Da ID: Metadone from Sample 12 (TCH-COOH 200ng_200meoh_faza) of ur_SPE_Sasha2_200THC-COO... Max. 2710,0 cps. 20,73 2710 2600 2400 2200 2000 Метадон In te n s ity , c p s 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 21,89 2 4 6 8 10 12 14 16 18 Time, min 20 22 24 26 28 30 32 Рис 4. ВЭЖХ-МС/МС профиль (MRM 310/265) образца волос, содержащего метадон. Ферментный гидролиз, картридж AccuBond II SPE Evidex. Рис 3(г). Масс-спектр метадона, зафиксированный в образце волос, картридж Bond Elute Sertify. Анализ малых навесок волос Исследовали возможность анализа малых навесок волос. Анализировали 20, 50 и 100 мг пробы. Полученные результаты позволяют сделать следующий вывод. Возможно анализировать без потери чувствительности малые навески волос (20 мг) при этом объем финального экстракта, поступающего на анализ, должен быть уменьшен и составлять 25-30 мкл. На рис. 5 и 6 даны ГХ-МС профили экстракта волос, масса навески 20 мг. В исследуемом образце. обнаружены: кетамин с метаболитами и кокаин с метаболитом (ангидроэкгонина метиловым эфиром), а также никотин и кофеин.. 35 A b und a nce T IC : P o l i ti k a _ o s n o v n o y .D \ d a ta .m s 2800000 2700000 2600000 2500000 К Е Т А М И Н 2400000 2300000 2200000 В С 2100000 Н О Р К Е Т А М И Н 2000000 1900000 1800000 1700000 1600000 1500000 1400000 1300000 1200000 1100000 1000000 900000 800000 700000 600000 500000 400000 300000 200000 100000 6 .0 0 7 .0 0 8 .0 0 9 .0 0 1 0 .0 0 1 1 .0 0 1 2 .0 0 1 3 .0 0 1 4 .0 0 1 5 .0 0 1 6 .0 0 1 7 .0 0 1 8 .0 0 1 9 .0 0 2 0 .0 0 T im e --> Abundance S c a n 5 0 7 (1 0 . 3 8 5 m in ): P o lit ik a _ o s n o v n o y . D \ d a t a . m s 152 130000 120000 110000 100000 Cl 90000 O 80000 70000 60000 NH 50000 40000 43 30000 138 20000 57 10000 180 102 71 85 125 196 166 0 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 237 253 269 285 220 240 260 280 331346 300 320 340 m / z --> (б) A b u n d a n c e S c a n 5 6 1 ( 1 1 . 1 1 0 m i n ) : P o l it ik a _ o s n o v n o y . D \ d a t a . m s 1 6 6 4 5 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 Н о р ке та м и н 3 5 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 2 5 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 1 5 0 0 0 0 1 9 5 1 0 0 0 0 0 1 3 8 5 0 0 0 0 7 7 4 3 4 0 m / z --> 1 0 2 1 2 0 0 6 0 8 0 2 2 3 2 4 9 2 8 1 3 2 5 4 0 5 4 4 8 1 0 0 1 2 0 1 4 0 1 6 0 1 8 0 2 0 0 2 2 0 2 4 0 2 6 0 2 8 0 3 0 0 3 2 0 3 4 0 3 6 0 3 8 0 4 0 0 4 2 0 4 4 0 (в) 36 A b u n d a n c e S c a n 5 0 8 (1 0 . 3 9 8 1 5 2 1 1 0 0 0 0 m in ) : P o lit ik a _ o s n o v n o y . D \ d a t a . m s ( - 4 9 9 ) ( - ) 5 ,6 - Д е з а м и н о н о р к е т а м и н 1 0 0 0 0 0 9 0 0 0 0 8 0 0 0 0 7 0 0 0 0 6 0 0 0 0 5 0 0 0 0 4 0 0 0 0 3 0 0 0 0 2 0 0 0 0 1 8 0 1 0 2 1 0 0 0 0 7 5 4 1 1 2 5 4 0 6 0 8 0 1 0 0 1 2 0 2 2 0 1 9 6 5 9 0 1 4 0 1 6 0 1 8 0 2 0 0 2 2 0 2 3 7 2 5 3 3 3 1 2 6 9 2 4 0 2 6 0 2 8 0 3 0 0 3 2 0 3 5 5 3 4 0 4 0 6 3 6 0 3 8 0 (г) 4 0 0 m / z --> Рис. 5.(а) - Хроматограмма исследуемой пробы (SCAN) по экстрагированным ионам, соответствующим внутреннему стандарту, кетамину и его метаболитам. Вещества идентифицированы по временам удерживания и по масс-спектрам. Пик с временем удерживания 11.37 мин соответствует кетамину, 11.10 мин – норкетамину, 10.39 мин – 5,6дезаминонроркетамину, 9.28 – дифениламин, внутренний стандарт. Масс-спектры представлены на рис. 5 (б-г), соответственно. A b u n d a n c e Io n Io n Io n 4 0 0 0 0 1 6 9 .0 0 1 8 1 .0 0 1 8 2 .0 0 (1 6 8 .7 0 (1 8 0 .7 0 (1 8 1 .7 0 to to to 1 6 9 . 7 0 ) : P o lit ik a _ o s n o v n o y . D \ d a t a . m s 1 8 1 . 7 0 ) : P o lit ik a _ o s n o v n o y . D \ d a t a . m s 1 8 2 . 7 0 ) : P o lit ik a _ o s n o v n o y . D \ d a t a . m s 3 5 0 0 0 3 0 0 0 0 К о к а и н 2 5 0 0 0 2 0 0 0 0 1 5 0 0 0 1 0 0 0 0 5 0 0 0 0 1 2 .8 0 1 3 .0 0 1 3 .2 0 1 3 .4 0 1 3 .6 0 1 3 .8 0 1 4 .0 0 1 4 .2 0 1 4 .4 0 1 4 .6 0 1 4 .8 0 1 5 .0 0 (а) 1 5 .2 0 T im e - - > A b u n d a n c e 2 4 0 0 0 2 3 0 0 0 2 2 0 0 0 2 1 0 0 0 2 0 0 0 0 1 9 0 0 0 1 8 0 0 0 1 7 0 0 0 1 6 0 0 0 1 5 0 0 0 1 4 0 0 0 1 3 0 0 0 1 2 0 0 0 1 1 0 0 1 0 0 0 0 9 0 0 0 8 0 0 0 7 0 0 0 6 0 0 0 8 S 2 c a n 7 6 5 ( 1 3 . 8 5 1 m 1 0 0 0 4 0 0 0 3 0 0 0 2 0 0 0 o lit ik a _ o s n o v n o y . D \ d a t a . m s ( - 7 5 7 ) ( - ) 2 O O H O H O 1 0 5 2 3 1 0 P 0 5 0 8 ) : N 4 1 in 5 9 6 0 2 2 2 1 0 5 2 1 9 9 2 2 0 0 1 2 5 3 0 2 6 7 0 3 2 7 3 2 7 2 0 3 3 5 5 3 7 3 0 3 8 4 0 3 4 0 4 m / z - - > 0 8 0 1 0 0 1 2 0 1 4 0 1 6 0 1 8 0 2 2 0 2 4 0 2 8 0 3 0 0 3 4 0 3 6 0 4 0 0 4 2 0 3 1 (б) 37 A b u n d a n c e Io n Io n Io n 1 9 0 0 0 1 6 9 .0 0 1 8 1 .0 0 1 8 2 .0 0 (1 6 8 . 7 0 (1 8 0 . 7 0 (1 8 1 . 7 0 to to to 1 6 9 . 7 0 ) : P o lit ik a _ o s n o v n o y . D \ d a t a . m s 1 8 1 . 7 0 ) : P o lit ik a _ o s n o v n o y . D \ d a t a . m s 1 8 2 . 7 0 ) : P o lit ik a _ o s n o v n o y . D \ d a t a . m s 1 8 0 0 0 1 7 0 0 0 1 6 0 0 0 1 5 0 0 0 1 4 0 0 0 1 3 0 0 0 1 2 0 0 0 1 1 0 0 0 А н ги д р о э к го н и н 1 0 0 0 0 М Е 9 0 0 0 8 0 0 0 7 0 0 0 6 0 0 0 5 0 0 0 4 0 0 0 3 0 0 0 2 0 0 0 1 0 0 0 0 6 .0 0 6 .5 0 7 .0 0 7 .5 0 8 .0 0 8 .5 0 9 .0 0 9 .5 0 1 0 .0 0 (в) 1 0 .5 0 T im e - - > Abundance Scan 278 (7.308 min): Politika_osnovnoy.D\data.ms (-273) (-) 152.0 22000 20000 18000 16000 14000 12000 41.1 10000 8000 181.1 6000 82.1 120.1 4000 2000 222.1 0 40 m/z--> 60 80 100 120 140 160 180 200 220 252.9 240 260 342.1 280 300 320 340 (г) Рис. 6. - Хроматограмма исследуемой пробы (SCAN) по экстрагированным ионам, соответствующим кокаину и метиловому эфиру ангидробензоилэкгонина. Вещества идентифицированы по временам удерживания и по масс-спектрам. Пик с временем удерживания 13.85 мин соответствует кокаину, 7.31 мин – метиловому эфиру ангидробензоилэкгонина. Массспектры представлены на рис. 6 (б,г), соответственно. 1) 2) 3) 4) 5) 6) Список литературы Е.А. Симонов, Б.Н. Изотов, А.В. Фесенко «Наркотики: методы анализа на коже, в еѐ придатках и выделениях» М.: «Анахарсис», 2000.—130 с. Yuji Nakahara «Hair analysis for abused and therapeutic drugs» - Journal of Chromatography B, 733 (1999) 161–180 Yvan Gaillard, Gilbert Pe´pin «Testing hair for pharmaceuticals» - Journal of Chromatography B, 733 (1999) 231–246 Hans Sachsa, Pascal Kintzb «Testing for drugs in hair. Critical review of chromatographic procedures since 1992» - Journal of Chromatography B, 713 (1998) 147–161 Katrin Lachenmeier, Frank Musshoff, Burkhard Madea «Determination of opiates and cocaine in hair using automated enzyme immunoassay screening methodologies followed by gas chromatographic–mass spectrometric (GC–MS) confirmation» - Forensic Science International 159 (2006) 189–199 Juan C. Domнnguez-Romero, Juan F. Garcнa-Reyes, Antonio Molina-Dнaz «Screening and quantitation of multiclass drugs of abuse and pharmaceuticals in hair by fast liquid chroma38 7) 8) 9) 10) 11) 12) 13) 14) 15) 16) 17) tography electrospray time-of-flight mass spectrometry» - Journal of Chromatography B, 879 (2011) 2034– 2042 Elissandro SoaresEmídioa, VanessadeMenezesPrataa, FernandoJoséMalague˜no deSantanab, Haroldo SilveiraDóreaa «Hollow fiber-based liquidphase microextraction with factorial design optimization andgaschromatography–tandemmassspectrometryfor determination of cannabinoids in human hair» - Journal ofChromatographyB, 878 (2010) 2175–2183 Donata Favrettoa, Susanna Vogliardia, Giulia Stoccherob, Alessandro Nalessoa, Marianna Tuccia, Santo Davide Ferraraa «High performance liquid chromatography–high resolution mass spectrometry and micropulverized extraction for the quantification of amphetamines, cocaine, opioids, benzodiazepines, antidepressants and hallucinogens in 2.5 mg hair samples» - Journal of Chromatography A, 1218 (2011) 6583– 6595 Analytical methods for abused drugs in hair and their applications Elissandro Soares Emнdio, Vanessa de Menezes Prata, Haroldo Silveira Dуrea «Validation of an analytical method for analysis of cannabinoids in hair by headspace solid-phase microextraction and gas chromatography–ion trap tandem mass spectrometry» - Analytica Chimica Acta 670 (2010) 63–71 «Development of a simultaneous analytical method for selected anorectics, methamphetamine, MDMA, and their metabolites in hair using LC-MS/MS to prove anorectics abuse» Anal Bioanal Chem (2012) 403:1385–1394 «Segmental Hair Analysis for 11-Nor-D9-Tetrahydrocannabinol-9-Carboxylic Acid and the Patterns of Cannabis Use» - Journal of Analytical Toxicology 2012;36:195–200 Токсикологическая химия. Метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие (под ред. Н.И. Калетиной) – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 1016с. с ил. Савчук С.А. Система удаленной идентификации и распознавания объектов сложного состава Патент на изобретение (19)RU(11) 77474 (13) (51) МПК G06K 17/00 (2006.01). Дата начала срока действия патента 15.07.2008. Опубликовано 20.10.2008 Бюл. №29. С.А.Савчук, А.Н.Веденин Применение программы фиксации времен удерживания при хромато-масс-спектрометрическом определении анализируемых веществ Российский химический журнал(Ж.Рос.хим.об-ва им.Д.И.Менделеева),2003,т.XLVII, №1,с.141. С.А.Савчук, Е.А.Симонов, В.И.Сорокин, О.Б.Дорогокупец, А.Н.Веденин. Применение метода фиксации времен удерживания при хромато-масс-спектрометрическом и хроматографическом определении наркотических средств Журнал Аналитической Химии , 2004, Т.59, №10, с.1059-1069. Andrej Grigoryev, Sergey Savchuk, Aleksandra Melnik, Natal’ja Moskaleva, Jurij Dzhurko,Mihail Ershov, Aleksandr Nosyrev, Aleksandr Vedenin, Boris Izotov, Irina Zabirova, Vladimir Rozhanets. Chromatography–mass spectrometry studies on the metabolism of synthetic cannabinoids JWH-018 and JWH-073, psychoactive components of smoking mixtures. Journal of Chromatography B, 879 (2011) 1126–1136 39 Приложение 6. Cводная библиотека масс-спектров SUDMED_1465 адрес постоянного размещения пакета Состав пакета: SUDMED_1465_NISTLIB_20141026 SUDMED_1465_AMDISLIB_20141026 SUDMED_1465_ACSLIB_20141026 SUDMED_1465_20141026.pdf - http://www.sudmed.ru/index.php?showtopic=6924 библиотека в формате NIST Search библиотека в формате AMDIS библиотека в формате хемстанции (Agilent ChemStation) список содержимого библиотеки Сводная библиотека включает спектры метаболитов преимущественно в виде триметилсилильных и метильных дериватов, включает многие рабочие структуры и линейные индексы удерживания. В сводную библиотеку вошли спектры опубликованные для свободного использования в открытых источниках, в том числе в библиотеках CAYMANSPECTRALLIBRARY, SWGDRUG, rf-des_drug, pub_cann, на интернет ресурсе sudmed.ru, в научных публикациях. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. JWH-250 -M1 JWH-250 -M2 AC JWH-250 -M6 2AC JWH-250 -M7 2AC JWH-250 -M2 TMS JWH-250 -M6 2TMS JWH-250 -M7 2TMS JWH-250 -M1 TFA JWH-250 -M/artifact TMS Ether 1-pentyl-1Hindole-3-carboxylic acid quinolin-8-ol TMSEther artefact I base hydr PB-22 (TMS) Artefact II base Hydr PB22 (TMS) Acid Hydr PB-22 Artefact I (TMS) 2(Diphenylmethyl)pyrrolidin e, N-acetyl2(Diphenylmethyl)pyrrolidin e 5-APB 5-APB, Ac 6-APB 6-APB, Ac Methoxetamine Methoxetamine, N-acetylAB-PINACA-M2 (COOH, oxo=), methylAB-PINACA-M2 (COOH, oxo=), TMS AB-PINACA-M3 (COOH, OH), methylAB-PINACA-M3 (COOH, Alkyl-OH) methyl-, TMS AB-PINACA-M3 (COOH, alkyl-OH), diTMS AB-PINACA-M4 (COOH, Aryl-OH), dimethylAB-PINACA-M4 (COOH, Aryl-OH), diTMS AB-PINACA-M3 (COOH, 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39. 40. 41. 42. 43. 44. 45. 46. 47. 48. 49. 50. 51. 52. 53. 54. 55. 56. 57. 58. 59. 60. 61. 62. 63. 64. 65. 66. 67. alkyl-OH), methyl-, acetylLTI-258 (APINACA) ABCM(N)-2201 ACBM-018 (APICA) ACBM-2201 A-836,339 25I-NBOMe 25I-NBOMe imine Carfentanyl CP47,497-C8 homolog JWH-018 JWH-073 CP47,497-C8 homolog, diacetylCP47,497-C8 homolog, diTMSCP-47,497-C8 isomer, diacetylCP-47,497-C8 isomer, diPFPCP-47,497-C8 isomer, diTFACP-47,497-C8, di-TMSCP-47,497-C8, diacetylCP-47,497-C8, diPFPCP-47,497-C8, diTFACP47,497-C8 CP47,497-C8 isomer CP-47,497-C8 isomer, methylCP-47,497-C8, methylACBM(N)-2201 STS-135 LTI-258 (APINACA) Desomorphine, acetylDesomorphine Desomorphine, methylDesomorphine, butyrateDesomorphine, TMS Desomorphine, PropionylDesomorphine, PFPDesomorphine, pentafluorbenzylDesomorphine, TFADiphenyl-2- 68. 69. 70. 71. 72. 73. 74. 75. 76. 77. 78. 79. 80. 81. 82. 83. 84. 85. 86. 87. 88. 89. 90. 91. 92. 93. 94. 95. 96. 97. 98. pyrrolidinylmethane ME Diphenyl-2pyrrolidinylmethane TFA Nalidixinic Acid, TMS Nalidixic acid, methyl ether Nalidixic acid, PFPyl ether Scopolamine Scopolamine, -H2O Scopolamine, acetylSibutramine Tramadol acetylZopiclone Zopiclone artifact Zopiclone hydr acetylZopiclone hydr, methylZopiclone, hydr, TMS Zopiclone, hydr Zopiclone, hydr, methylZopiclone, hydr, PFPZopiclone, hydr, ethylZopiclone, hydr, PFBzZopiclone, hydr, PFBz2-amino-5-chloropyridine 2-amino-5-chloropyridine acetylKetorolac Artefact JWH-018 JWH-018 JWH-073 Methamphetamine para-methylephedrone $$$ 2-(methylamino)-1(4-methylphenyl)propan1-one (1RS,3SR)-3-[4-(1,1dimethyloctyl)-2hydroxyphenyl]cyclohexan -1-ol $$$ CP-47,497-C8 JWH-073 (1RS,3SR)-3-[4-(1,1dimethylheptyl)-2hydroxyphenyl]cyclohexan -1-ol $$$ CP-47,497-C7 $$$ CP-47,4 40 99. 100. 101. 102. 103. 104. 105. 106. 107. 108. 109. 110. 111. 112. 113. 114. 115. 116. Fluoromethcathinone $$$ 1-(fluorophenyl)-2(methylamino)propan-1one Fluoromethcathinone $$$ 1-(fluorophenyl)-2(methylamino)propan-1one para-methylephedrone $$$ 2-(methylamino)-1(4-methylphenyl)propan1-one 3,4Methylenedioxypyrovalero ne $$$ MDPV $$$ 1-(3,4Methylenedioxyphenyl)-2(1-pyrrolidinyl)-1-pen 3,4Methylenedioxypyrovalero ne $$$ MDPV $$$ 1-(3,4Methylenedioxyphenyl)-2(1-pyrrolidinyl)-1-pen Aprofene $$$ Propionic acid, 2,2-diphenyl-, 2(diethylamino)ethyl ester 105 (4-methoxyphenyl)(1pentyl-1H-indol-3yl)methanone Ethcathinone $$$ 2(ethylamino)-1phenylpropan-1-one $$$ N-ethylcathinone Ethcathinone $$$ 2(ethylamino)-1phenylpropan-1-one $$$ N-ethylcathinone JWH-250 $$$ 1-penthyl-3(2methoxyphenylacetyl)indol e JWH-250 $$$ 1-penthyl-3(2methoxyphenylacetyl)indol e JWH-251 $$$ 1-pentyl-3(2methylphenylacetyl)indole JWH-251 $$$ 1-pentyl-3(2methylphenylacetyl)indole (1-naphthyl)(1H-indol-3yl)methanone $$$ 3-(1naphthoyl)indole (1-naphthyl)(1H-indol-3yl)methanone $$$ 3-(1naphthoyl)indole Naphyrone $$$ 1(naphthalen-2-yl)-2(pyrrolidin-1-yl)pentan-1one Naphyrone $$$ 1(naphthalen-2-yl)-2(pyrrolidin-1-yl)pentan-1one Methylone $$$ 2methylamino-1-(3,4- 117. 118. 119. 120. 121. 122. 123. 124. 125. 126. 127. 128. 129. 130. 131. 132. 133. 134. 135. 136. 137. 138. 139. 140. 141. 142. 143. 144. 145. methylenedioxyphenyl)pro pan-1-one Methylone $$$ 2methylamino-1-(3,4methylenedioxyphenyl)pro pan-1-one 5-MeO-DALT $$$ N,Ndiallyl-5methoxytryptamine 5-MeO-DALT $$$ N,Ndiallyl-5methoxytryptamine AM-694 $$$ (1-(5fluoropentyl)-1H-indol-3yl)(2iodophenyl)methanone JWH-081 $$$ 1-Pentyl-3(4-methoxy-1naphthoyl)indole JWH-122 $$$ 1-Pentyl-3(4-methyl-1naphthoyl)indole 2C-E $$$ 4-Ethyl-2,5Dimethoxyphenethylamine para-methylethcathinone $$$ 2-(ethylamino)-1-(4methylphenyl)propan-1one para-methylethcathinone $$$ 2-(ethylamino)-1-(4methylphenyl)propan-1one Butylone $$$ 2methylamino-1-(3,4methylenedioxyphenyl)but an-1-one para-methylamphetamine para-fluoroamphetamine Salvinorin $$$ Divinorin A JWH-210 $$$ 1-Pentyl-3(4-ethyl-1naphthoyl)indole 2C-B-FLY 3C-B-FLY Bromo-DragonFLY Dimethylcathinone Ethylcathinone Ethylcathinone, Ac 2,4,5Trimethoxyamphetamine 2,4,6Trimethoxyamphetamine 3,4,5Trimethoxyamphetamine 2,4,5Trimethoxyamphetamine, TFA 2,4,6Trimethoxyamphetamine, TFA 3,4,5Trimethoxyamphetamine, TFA 4-Methoxypiperazine Benzylpiperazine Benzylpiperazine, TMS 146. 147. 148. 149. 150. 151. 152. 153. 154. 155. 156. 157. 158. 159. 160. 161. 162. 163. 164. 165. 166. 167. 168. 169. 170. 171. 172. 173. 174. 175. 176. 177. 178. 179. 180. 181. 182. 183. 184. 185. mCPP, TMS Piperonylpiperazine Bupropion 2-Bromo-2,5dimethoxybenzylpiperazine 2-Bromo-2,5dimethoxybenzylpiperazine , acetylJWH 018 -M1 (HO-) TMS JWH 018 -M4 (HO-) TMS JWH 018 -M5 (-COOH) TMS JWH 018 -M7 2(HO-) 2TMS JWH 018 -M8 2(HO-) 2TMS JWH 073 -M1 (HO-) TMS AB-FUBINACA M1, TMS BB-22 marker, methylPB-22 marker, EthylPB-22 marker, methylPB-22 marker, TMS PB-22F marker, methylPB-22F marker, TMS 5-Fluoro AB-PINACA M1 (marker), methyl5-Fluoro AB-PINACA M1, bisTMS5-Fluoro AB-PINACA M1, TMS AB-CHMINACA M1 (marker), methylAB-CHMINACA, TMSAB-CHMINACA, bis-TMSAB-FUBINACA M1 methyl(marker AB-FUBINACA) MDPV MDPV-M (3,4dihydroxyphenyl-), dimethylMDPV-M (4-HO-,3-MeO-), acetylMDPV-M (4-HO-,3-MeO-) MDPV-M (acycl), dimethylMDPV-M (acycl, 3,4dihydroxyphenyl-), tetramethylMDPV-M (3,4dihydroxyphenyl-), diacetylMDPV-M (oxo=, 3,4dihydroxyphenyl-), diacetylMDPV-M (oxo=,3,4dihydroxyphenyl-), dimethylMDPV-M, (oxo=) MDPV-M (oxo=, 4-HO-, 3MeO-), acetylMephedrone -M (HO-) 2Ac Mephedrone -M (Mephedrine) 2Ac Mephedrone -M (normephedrine-) 2 Ac isomer1 Mephedrone -M 41 186. 187. 188. 189. 190. 191. 192. 193. 194. 195. 196. 197. 198. 199. 200. 201. 202. 203. 204. 205. 206. 207. 208. 209. 210. 211. 212. 213. 214. 215. 216. 217. 218. 219. 220. 221. 222. 223. 224. 225. 226. 227. 228. 229. 230. 231. 232. 233. 234. 235. 236. 237. 238. 239. 240. 241. 242. 243. 244. 245. 246. 247. 248. 249. (normephedrine-) 2Ac isomer 2 Mephedrone ME Methedrone TFA Methedrone TFA Methedrone ME Methedrone AC Methedrone AC Methedrone AC Methedrone Methedrone Methedrone Methedrone Methedrone Methedrone Methedrone 4-MeO-PCP Psilocin, diTMS4-FMC (IT-MS) MDPV (IT-MS) MDPBP (IT-MS) Pentylone (IT-MS) MPPP (IT-MS) HU-210 2TMS HU-331 CB-25 CB-52 HU-210 HU-211 CP 47,497 C7 CP 55, 940 L-759, 633 BAY 59-3074 Oleamide WIN 55212-2 JWH-200 JWH-133 JWH-015 JWH-020 JWH-072 JWH-019 DEA Salvinorin A DD-001 JWH-210-tomsk 4-FMP 4-FMP Indan-2-amine PMMA MBZP BDB HMDMA-2 MMDA-2 2C-E 2C-C 4-mpp bk-MDEA TMA-6 MDBP 2C-I DOI 2C-T2 MIPT 2C-T4 5-MeO-AMT 5-MeO-DMT 250. 251. 252. 253. 254. 255. 256. 257. 258. 259. 260. 261. 262. 263. 264. 265. 266. 267. 268. 269. 270. 271. 272. 273. 274. 275. 276. 277. 278. 279. 280. 281. 282. 283. DIPT DPT 5-MeO-DET 5-MeO-MIPT 4-OH-DIPT 5-MeO-DPT 4-AcO-DIPT N (Cyclopropylmethyl)mephe drone$$N,N Cyclopropylmethyl methyl 1 (4 methylphenyl) 2 aminopropan N Allylmephedrone$$N Allyl 4 methylmethcathinone Butylone ME$$N Methylbutylone, bk MMBDB N(Methylcyclopropyl)butylon e N Allylbutylone Methylone ET N (Cyclopropylmethyl)methyl one N Allylmethylone$$2 (N,N Allyl methylamino) 1 (3,4 methylenedioxyphenyl)pro pan 1 one N-ethylmethylone N-allylbutylone N (Methylcyclopropyl)butylon e TMA-2 TMA-2 TMA 2C-B 2CT-2 2CT-7 desmethylpyrovaleron Benzylpiperazine Benzylpiperazine Memantine Memantine Desmethylvenlafaxine, ODesmethylvenlafaxine, ODehydronorketamine Dehydronorketamine 290. 291. 292. 293. 294. 295. 296. 297. 298. 299. 300. 301. 302. 303. 304. Trifluoromethylphenylpiper azine 2305. Trifluoromethylphenylpiper azine 2306. Trifluoromethylphenylpiper azine 4307. 308. 309. 310. 311. 312. 313. Trifluoromethylphenylpiper azine, 3- # TFMPP 284. 285. 286. 287. 288. 289. Trifluoromethylphenylpiper azine, 3- # TFMPP Benzylpiperazine, N- # BZP Methylenedioxyphenyl-2butanamine, -3,4- # BDB Methylenedioxyphenyl-2butanamine, -3,4- # BDB BDB Formyl artifact Hydroxy-3methoxyamphetamine, 4- # HMA Hydroxy-3methoxyamphetamine, 4# HMA Norketamine Norketamine Norfentanyl Norfentanyl Bromo-2,5dimethoxyamphetamine, 1,4- # DOB Bromo-2,5dimethoxyamphetamine, 1,4- # DOB Diisoproyltryptamine formyl artifact Diispropyltryptamine, N,N# DiPT Diisopropyltryptamine N,N- # DiPT Hydroxyquetiapine 7Hydroxyquetiapine 7Hydroxy-N-des{[2-(2hydroxy)ethoxy]ethyl} Quetiapine Hydroxy-N-des{[2-(2hydroxy)ethoxy]ethyl} Quetiapine 314. 315. 316. 317. 318. 319. 320. Trifluoromethylphenylpiper azine 4Didesmethylvenlafaxine N,NDidesmethylvenlafaxine N,NQuetiapine sulfoxide (?artifact) Quetiapine sulfoxide (?artifact) N-Des[2-(2hydroxyethoxy)ethyl] Quetiapine N-Des[2-(2hydroxyethoxy)ethyl] Quetiapine Norverapamil Norverapamil Hydroxybuproprion erythro metabolite Hydroxybuproprion erythro metabolite Hydroxybuproprion threo metabolite Hydroxybuproprion threo metabolite Hydroxybupropion (morphinol metabolite) 42 321. 322. 323. 324. 325. 326. 327. 328. 329. 330. 331. 332. 333. 334. 335. 336. 337. 338. 339. 340. 341. 342. 343. 344. 345. 346. 347. 348. 349. 350. 351. 352. 353. 354. 355. 356. 357. 358. 359. 360. 361. 362. 363. 364. 365. 366. 367. 368. 369. 370. Hydroxybupropion (morphinol metabolite) Bromo-2,5dimethoxyamphetamine 4# DOB Bromo-2,5dimethoxyamphetamine 4# DOB DOB Formyl artifact DOB Formyl artifact Dimethoxy-4methylamphetamine 2,5# DOM DOM Formyl artifact DOM Formyl artifact Fenethylline Fenethylline Dihydroxymethamphetamine 3,4- # HHMA Dihydroxymethamphetamine 3,4- # HHMA Hydroxy-3methoxymethamphetamin e 4Hydroxy-3methoxymethamphetamin e 4Tetrazepam Tetrazepam Tetrazepam artifact Tetrazepam artifact Chlorophenylpiperazine 3# CPP Desmethylvenlafaxine ODesmethylvenlafaxine ODesmethylvenlafaxine ONorhydrocodone Norhydrocodone Salvinorin-A Salvinorin-A Tadalafil Tadalafil Vardenafil Vardenafil Lansoprazole breakdown Lansoprazole breakdown Lansoprazole sulfide Lansoprazole sulfide Omeprazole sulfide Omeprazole sulfide Pantoprazole sulfide Pantoprazole sulfide Rabeprazole sulfide Rabeprazole sulfide Pramipexole Pramipexole Ambroxol Ambroxol Biperiden Biperiden Penfluridol Penfluridol Solifenacin Solifenacin 371. 372. 373. 374. 375. 376. 377. 378. 379. 380. 381. 382. 383. 384. 385. 386. 387. 388. 389. 390. 391. 392. 393. 394. 395. 396. 397. 398. 399. 400. 401. 402. 403. 404. 405. 406. 407. 408. 409. 410. 411. Cocaethylene Cocaethylene Cocaethylene OXAZEPAM B'DOWN LORAZEPAM B'DOWN Oxazepam artifact Cyproheptadine Flunitrazepam Flunitrazepam Nifedipine artifact Nifedipine artifact Nifedipine artifact Nifedipine Nifedipine Zopiclone artifact # 2Amino-5-chloropyridine Zopiclone artifact # 2Amino-5-chloropyridine Norketamine Aminoflunitrazepam Aminoflunitrazepam Pregabalin artifact Pregabalin artifact Ramelteon Ramelteon Ropinirole Ropinirole Stiripentol Stiripentol Norverapamil Fentanyl Metaxalone Metaxalone Varenicline Varenicline 2,5-Dimethoxy-4ethylthiophenethylamine # 2 C-T-2 2,5-Dimethoxy-4ethylthiophenethylamine # 2 C-T-2 2,5-Dimethoxy-4isopropylthiophenethylami ne # 2 C-T-4 2,5-Dimethoxy-4isopropylthiophenethylami ne # 2 C-T-4 2,5-Dimethoxy-4ethylamphetamine # DOET 2,5-Dimethoxy-4ethylamphetamine # DOET 2,5-Dimethoxy-4iodoamphetamine # DOI 2,5-Dimethoxy-4iodoamphetamine # DOI 412. 416. 417. 418. 419. 420. 421. 422. 423. 424. 425. 426. 427. 428. 429. 430. 431. 432. 433. 434. 435. 436. 437. 438. 439. 440. 441. 442. 443. 444. 445. Trifluoromethylphenylpiper azine, 2413. 414. 415. 446. Trifluoromethylphenylpiper azine, 4447. Benzylpiperazine, N- # BZP 448. Dimethoxy-4methylamphtamine, 2,5- # DOM 449. Didesmethylvenlafaxine Dehydronorketamine 5-Methoxy-N,Ndiisopropyltryptamine Diisopropyltryptamine, N,NMethylenedioxyphenyl-2butanamine, 3,4- # BDB Hydrox-3methoxyamphetamine, 4# HMA Norvenlafaxine Fenethyline Hydroxy-N-des{[2-(2hydroxy)ethoxy]ethyl} Quetiapine N-Des[2-(2hydroxyethoxy)ethyl] Quetiapine Hydroxy-3methoxymethylamphetami ne # HMMA Norfentanyl Norverapamil Quetiapine sulfoxide (?artifact) Salvinorin-A Tetrazepam artifact Tetrazepam Tetrazepam Nicotinamide RCS-4 WIN 55,212-2 CP 55,940 AM-694$$1-[(5Fluorpentyl)-1H-indol-3yl]-(2-iodphenyl)methanon JWH-398 HU-308$$[(1R,2R,5R)-2[2,6-dimethoxy-4-(2methyloctan-2-yl)phenyl]7,7-dimethyl-4bicyclo[3.1.1]he HU-331 N-Cyclopropyl-11-(3hydroxy-5pentylphenoxy)undecanam id$$CB-25 N-Cyclopropyl-11-(2hexyl-5hydroxyphenoxy)undecana mid$$CB-52 N-Ethyl-2-(3,4methylenedioxyphenyl)propan-1-amin 1-(3,4Methylendioxyphenyl)2methylamino-propan-1-on 4-Bromo-2,5dimethoxybenzylpiperazine 2-Bromo-4,5dimethoxybenzylpiperazine 4-Bromo-2,5dimethoxybenzylpiperazine AC 2-Bromo-4,5- 43 450. 451. 452. 453. 454. 455. 456. 457. 458. 459. 460. 461. 462. 463. 464. 465. 466. 467. 468. 469. 470. 471. 472. 473. 474. 475. 476. 477. 478. dimethoxybenzylpiperazine AC 1,4-Di(4-Bromo-2,5dimethoxybenzyl)piperazin e 1,4-Di(2-Bromo-4,5dimethoxybenzyl)piperazin e 3,4-Methylenedioxy-N-(2hydroxyethyl)amphetamin e (MDHOET) 3,4-Methylenedioxy-N-(2hydroxyethyl)amphetamin e (MDHOET) bisACetylated 2,4-Dimethoxy-3methylphenethylamine 5-MeO-DMT$$ 5-MethoxyN,N-dimethyltryptamine 5-Methoxy-N,Ndiisopropyltryptamine 4-(2-aminopropyl)-2,3dihydro-1H-indene (4-IAP) 5-(2-aminopropyl)-2,3dihydro-1H-indene (5-IAP) 4-Methoxy-Nethylamphetamine acetylethcathinone dimethcathinone ethcathinone 2C-B-FLY 3C-B-FLY 3C-B-FLY(norm to 254m/z) 3C-B-DragonFLY 3C-B-DragonFLY (norm to 142m/z) (D) 1-(3METHYLPHENYL)PIPERAZI NE$$mMPP 1-(4FLUOROPHENYL)PIPERAZI NE$$(pFPP) 1-(3methylphenyl)piperazine$$ mMPP 3FLUOROISOMETHCATHINO NE - by-product of synthesis of 3-FMC 4-METHOXYMETHYLAMINOBUTYRONE$ $1-(4-methoxyphenyl)-2(methylamino)butan-1-one bupropion DOCl ethacthinon$$2(ethylamino)-1phenylpropan-1-one MBZP$$1-Methyl-4benzylpiperazine (MBZP) 1-hexyl-3-(naphthalen-1ylmethyl)-1H-indole, RI(ZB5MS) 3030, TOF01403.7rw 1-heptyl-3-(naphthalen-1- 479. 480. 481. 482. 483. 484. 485. 486. 487. 488. 489. 490. 491. 492. 493. 494. ylmethyl)-1H-indole, RI(ZB5MS) 3129 , TOF01404.7rw 1-butyl-3-(naphthalen-1ylmethyl)-1H-indole, RI(ZB5MS) 2841 , TOF01406.7rw 3-(naphthalen-1ylmethyl)-1-pentyl-1Hindole, RI(ZB5MS) 2936 , TOF01342-Centroided.7rw (1-hexyl-1H-indol-3yl)(naphthalen-1yl)methanone, RI(ZB5MS) 3371 TOF01313Centroided.7rw naphthalen-1-yl(1-pentyl1H-indol-3-yl)methanone, RI(ZB5MS) 3261, TOF01313-Centroided.7rw (1-butyl-1H-indol-3yl)(naphthalen-1yl)methanone, RI(ZB5MS) 3166, TOF01313 (1-heptyl-1H-indol-3yl)(naphthalen-1yl)methanone, RI(ZB5MS) > 3400, TOF01371Centroided.7rw naphthalen-1-yl(1-propyl1H-indol-3-yl)methanone, RI(ZB5MS) 3083, TOF01347-Centroided.7rw 1-butyl-1H-indole, RI(ZB5MS) 1525, TOF01299-Centroided.cdf 1-hexyl-1H-indole, RI(ZB5MS) 1727, TOF01299-Centroided.cdf 1-pentyl-1H-indole, RI(ZB5MS) 1620, TOF01287-Centroided.cdf 1-heptyl-1H-indole, RI(ZB5MS) 1827, TOF01338-Centroided.7rw 1-propyl-1H-indole, RI(ZB5MS) 1425, TOF01325-Centroided.7rw 3-(naphthalen-1ylmethyl)-1-propyl-1Hindole, RI(ZB5MS) 2757, TOF01409.7rw trimethyl(5-(2methylnonan-2-yl)-2((1S,3S)-3(trimethylsilyloxy)cyclohex yl)phenoxy)silane, RI(ZB5MS) trimethyl(5-(2methylnonan-2-yl)-2((1S,3R)-3(trimethylsilyloxy)cyclohex yl)phenoxy)silane, RI(ZB5MS (1S,3S)-3-(2-acetoxy-4(2-methylnonan-2- 495. 496. 497. 498. 499. 500. 501. 502. 503. 504. 505. 506. 507. 508. 509. 510. 511. 512. 513. 514. 515. 516. 517. 518. 519. 520. 521. 522. 523. 524. 525. 526. 527. 528. 529. 530. 531. 532. 533. 534. 535. 536. 537. 538. 539. 540. yl)phenyl)cyclohexyl acetate, RI(ZB5MS) 2756, TOF01304-C (1R,3S)-3-(2-acetoxy-4(2-methylnonan-2yl)phenyl)cyclohexyl acetate, RI(ZB5MS) 2749, TOF01304-C 2-((1S,3S)-3hydroxycyclohexyl)-5-(2methylnonan-2-yl)phenol, RI(ZB5MS) 2717, TOF01306-Centroid 2-((1S,3R)-3hydroxycyclohexyl)-5-(2methylnonan-2-yl)phenol, RI(ZB5MS) 2732, TOF01306-Centroid Butylone Butylone, PFPButylone, TFAButylone, acetylMDPV Mephedrone Mephedrone, acetylMephedrone, TFAFluoroamphetamine Ac Fluoroamphetamine PrO FMA Ac FMA -M (-OH) 2Ac FMA -M(HO-) 2PRO FMA -M(HO-) 2TFA FMA -PrO FMA TFA TFMPP TFMPP M(trifluoromethylaniline) Ac TFMPP Ac TFMPP HFB TFMPP -M(HO-) 2Ac TFMPP -M(HO-, trifluoromethylaniline) 2Ac TFMPP PrO CP 47,497-C8 Z-izomer Salvinorin A Salvinorin B CP47,497-C8 E-izomer Salvinorin C Mefedrone (4-MMC) O-2482 (Naphyrone) 1-(2naphthyl)-2-(1pyrrolidinyl)-1-pentanone Desoxypipradrol (2-DPMP) 2C-B AC 2C-B PFP 2C-B PrO 2C-B TFA Mescaline 2AC Mescaline 2TFA Mescaline PFP Mescaline PrO DIMETHOCAINE DIMETHOCAINE-AC DIMETHOCAINE-PFP DIMETHOCAINE-PRO 44 541. 542. 543. 544. 545. 546. 547. 548. 549. 550. 551. 552. 553. 554. 555. 556. 557. 558. 559. 560. 561. 562. 563. 564. 565. 566. 567. 568. 569. 570. 571. 572. 573. 574. 575. 576. DIMETHOCAINE-TFA a-PBP 25-C-NBOMe Ac 25-C-NBOMe PFP 25-C-NBOMe PrO 25-C-NBOMe TFA 25H-NBOMe Ac 25H-NBOMe PFP 25H-NBOMe PrO 25H-NBOMe TFA 25I-NBOMe Ac 25I-NBOMe PFP 25I-NBOMe PrO 25I-NBOMe TFA 5-MeO-MiPT PFP 5-MeO-MiPT PrO 5-MeO-MiPT TFA 2C-D PFP 2C-D TFA Pregabalin cyclic artefact Diphenylamine THJ-018 THJ-2201 N,N-Diethyl-2-(1-pentyl1H-indol-3-yl)-4thiazolemethanamine N-(2-Methoxyethyl),N-isopropyl-2-(1-pentyl-1Hindol-3-yl)-4thiazolemethanamine 1-benzyl-4methylpiperazine$$MBZP 1,4-dibenzylpiperazine 1-(1,3-benzodioxol-5-yl)2-(benzylamino)propan-1one Phenylephrine 5-MeOMIPT$$5-MeOmethylisopropiltryptamin 5-MeoDIPT$$5-MeOdilisopropiltryptamin 4-AcDIPT$$4-Acdilisopropiltryptamin 4-AcMIPT$$4-Acmethylisopropiltryptamin 4-OHDIPT$$4-OHdiisopropiltryptamin DPT$$dipropiltryptamin 589. 590. 591. 592. 593. 594. 595. 596. 597. 598. 599. 600. 601. 602. 603. 604. 605. 606. 607. 608. 609. 610. 611. 612. 613. 614. 615. 616. 617. 618. 619. 620. 621. 622. MIPT$$methylisopropiltryp 623. tamin 577. 578. 579. 580. 581. 582. 583. 584. 585. 586. 587. 588. 624. AMT$$alphamethyltryptam in 3,4-MDBP 4-MeOPP impurity to RCS-4 impurity to RCS-4 Pentedrone FUB-PB-22 marker TMS 584 5-MeOAMT$$5-MeOalphamethyltryptamin a-PVT α-PVT 5-IT AH 7921 625. 626. 627. 628. 629. 630. 631. AH-7921 5-IT MT-45 α-Tocopheryl acetate FUB-PB-22 marker Me ??? FUB-PB-22 M-OH Me ??? AB-PINACA-M1 (COOH), methylAB-PINACA-M1 (COOH), TMSADBICA ADBICA-5F CP-47,497-C8 isomer, diacetylCP-47,497-C8 isomer, diPFPCP-47,497-C8 isomer, diTFACP-47,497-C8, di-TMSCP-47,497-C8, diacetylCP-47,497-C8, diPFPCP-47,497-C8, diTFACP47,497-C8 CP47,497-C8 isomer CP-47,497-C8 isomer, methylCP-47,497-C8, methylFUB-PB-22-ACID-OH-TMS AB-FUBINACA M (...indazol-3-carbonic acid), methylAB-FUBINACA M1, bisTMSAB-FUBINACA M1, methyl, N-TMSAB-FUBINACA M2 (Indazol-OH), dimethyAB-FUBINACA M2 (Indazol-OH), methy-, acetylAB-FUBINACA, bis-TMSPB-22 M2 (COOCH3, OTMS) PB-22 M2 diTMS PB-22 M2 methylPB-22 M2 methyl- acetylPB-22 M3 methylPB-22 M3 TMS PB-22 M4 (Alk-COOH), dimethylPB-22 M5 (di-OH), dimethylPB-22F M2 (alk-OH) diTMS PB-22F M2 (alk-OH) methylPB-22F M3 (des-F, COOH) dimethylPB-22F M3 (des-F, COOH) diTMS PB-22F M4 (Aryl-OH) dimethylAB-CHMINACA M2 (3COOH), methylAB-CHMINACA M3 (OH), diTMS- 632. 633. 634. 635. 636. 637. 638. 639. 640. 641. 642. 643. 644. 645. 646. 647. 648. 649. 650. 651. 652. 653. 654. 655. 656. 657. 658. 659. 660. 661. 662. 663. 664. 665. 666. 667. 668. AB-CHMINACA M3 (OH), methylAB-CHMINACA M3 (OH), methyl-, O-acetylAB-CHMINACA M4 (2'OH), methyl- O-acetylAB-CHMINACA M4 (2'OH), metylAB-PINACA-M6 (3-COOH), methylAB-PINACA-M5 (4-OH alk), methylFUB-PB-22 M1 (marker), ethylFUB-PB-22 M2, dimethylFUB-PB-22 M2, diTMS FUB-PB-22 M2, monomethylFUB-PB-22 M2, PFPA/PFPOH AB-CHMINACA M1 (marker), PFPAB-FUBINACA M1 PFPAB-PINACA-M1 (COOH), PFPAB-PINACA-M2 (COOH, oxo=), PFP??? FUB-PB-22 M-OH PFP ??? FUB-PB-22 marker PFP SDB-006 (E)-4-Chloro-N-(1-(4nitrophenylethyl)piperidin2-ylidene)sulfonamide W-15 Naphthalene, 1-methoxySilane, trimethyl(1naphthalenyloxy)XLR11 M28 (-COOH) degradan2cyclo Me XLR11 M27 (-COOH) degradant Me XLR11 M28 (-COOH) degradant Me XLR11 M28 (-COOH) degradant TMS 5-fluoro-AKB48 N-(5hydroxypentyl) metabolite AB-PINACA N-(5hydroxypentyl) metabolite AKB48 N-(4hydroxypentyl) metabolite AKB48 N-(5hydroxypentyl) metabolite AM2201 5-hydroxyindole metabolite AM2201 6-hydroxyindole metabolite AM2201 7-hydroxyindole metabolite AM2201 N-(4hydroxypentyl) metabolite Buphedrone metabolite JWH 018 N-(4-oxo-pentyl) metabolite JWH-018 N-(2- 45 669. 670. 671. 672. 673. 674. 675. 676. 677. 678. 679. 680. 681. 682. 683. 684. 685. 686. 687. 688. 689. 690. 691. 692. 693. 694. 695. 696. 697. 698. 699. 700. 701. 702. 703. hydroxypentyl) metabolite JWH-018 N-(3hydroxypentyl) metabolite JWH-018 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH-018 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH-019 5-hydroxyindole metabolite JWH-019 N-(5hydroxyhexyl) metabolite JWH-019 N-(6hydroxyhexyl) metabolite JWH-073 2-hydroxyindole metabolite JWH-073 N-(2hydroxybutyl) metabolite JWH-073 N-(3hydroxybutyl) metabolite JWH-073 N-(4hydroxybutyl) metabolite JWH-081 4hydroxynaphthyl metabolite JWH-081 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH-081 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH-122 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH-122 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH-200 4-hydroxyindole metabolite JWH-200 5-hydroxyindole metabolite JWH-200 6-hydroxyindole metabolite JWH-200 7-hydroxyindole metabolite JWH-203 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH-203 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH-210 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH-210 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH-250 5-hydroxyindole metabolite JWH-250 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH-250 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH-398 N-(4hydroxypentyl) metabolite MDPV metabolite Normephedrone RCS-4 4-hydroxyphenyl metabolite RCS-4 M10 Metabolite RCS-4 M11 metabolite RCS-4 M9 metabolite RCS-4 N-(4hydroxypentyl) metabolite RCS-4 N-(5- 704. 705. 706. 707. 708. 709. 710. 711. 712. 713. 714. 715. 716. 717. 718. 719. 720. 721. 722. 723. 724. 725. 726. 727. 728. 729. 730. 731. 732. 733. 734. hydroxypentyl) metabolite UR-144 N-(4hydroxypentyl) metabolite XLR11 N-(4hydroxypentyl) metabolite αPyrrolidinopentiophenone metabolite (±)-JWH 018 N-(2hydroxypenyl) metabolite (±)-JWH 018 N-(3hydroxypentyl) metabolite (±)-JWH 018 N-(4hydroxypentyl) metabolite (±)-UR-144 N-(4hydroxypentyl) metabolite 5-fluoro-AKB48 N-(5hydroxypentyl) metabolite aPyrrolidinopentiophenone metabolite 1 AB-PINACA N-(5hydroxypentyl) metabolite AKB48 N-(4hydroxypentyl) metabolite AKB48 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH 018 N-(4-oxo-pentyl) metabolite JWH 018 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH 019 5-hydroxyindole metabolite JWH 019 N-(5hydroxyhexyl) metabolite JWH 019 N-(6hydroxyhexyl) metabolite JWH 073 2-hydroxyindole metabolite JWH 073 N-(2hydroxybutyl) metabolite JWH 073 N-(3hydroxybutyl) metabolite JWH 073 N-(4hydroxybutyl) metabolite JWH 081 4hydroxynaphthyl metabolite JWH 081 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH 081 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH 122 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH 122 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH 200 4-hydroxyindole metabolite JWH 200 5-hydroxyindole metabolite JWH 200 6-hydroxyindole metabolite JWH 200 7-hydroxyindole metabolite JWH 203 N-(4hydroxypentyl) metabolite 735. 736. 737. 738. 739. 740. 741. 742. 743. 744. 745. 746. 747. 748. 749. 750. 751. 752. 753. 754. 755. 756. 757. 758. 759. 760. 761. 762. 763. 764. JWH 203 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH 210 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH 210 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH 250 5-hydroxyindole metabolite JWH 250 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH 250 N-(5hydroxypentyl) metabolite JWH 398 N-(4hydroxypentyl) metabolite JWH-018 N-(5hydroxypentyl) metabolited5 MDPV metabolite 2 JWH-022(indazol)$$$3-(1Naphthoyl)-1-(pent-4enyl)indazol$$$(InChI=1/ C24H21NO/c1-2-3-8-1625-1 JWH-018(indazol) N-(5hydroxypentyl) metabolite$$$InChI=1/C2 3H22N2O2/c26-16-7-1-615-25-21-1 AM(indazol)-2201-C5chain-OH-TMS-iso-3$$ AM(indazol)-2201-C5chain-OH-TMS-iso-2$$ AM(indazol)-2201-C5chain-OH-TMS-iso1$$ AM(indazol)-2201-C5chain-OH-TMS-iso-4$$ JWH-018(Indazol)-5OHTMS JWH-018(Indazole)-5-OHTMS$$InChI=1/C26H30N2 O2Si/c1-31(2,3)30-19-104-9-18-28-24-17-8-7-1 JWH-018(Indazole)-5COOHTMS$$InChI=1/C26H28N2 O3Si/c1-32(2,3)3124(29)17-8-9-18-28-2316 THJ2201-M5 (-COOH) Me THJ2201-M5 (-COOH) TMS THJ2201-M1 (5-OH) TMS THJ2201-M (-C2-COOH) TMS THJ2201-M (C2-COOH) Me Quinoline, 8-methoxyAKB48-M1-TMS THJ-2201 M2 (-F, COOH), TMS THJ-2201 M1 (-C2H4F, COOH), TMSAM-2201 (-C2H4F, 3COOH), methylTHJ-2201-M2 (-F, AlkCOOH), methylTHJ-2201-M1 (-C2H4F, COOH), methyl- 46 765. 766. 767. 768. 769. 770. 771. 772. 773. 774. 775. 776. 777. 778. 779. 780. 781. 782. 783. 784. 785. 786. 787. 788. 789. 790. 791. THJ-2201-M4 (-F, Alk-4en, indazol-OH), methylXLR11 M28 # UR-144 # TMCP-018, N-pentanoic acid metabolite, methyl(thermal isomer) XLR11 (-F, COOH) degradant, methylXLR11 (-C2H4F, 3-COOH) # UR-144 M (-C2H4, 3COOH) thermoisomer, methylXLR11 M28 # UR-144 # TMCP-018, N-pentanoic acid metabolite, methylMMB-2201 MMB-2201 M (-COOH) TMS MMB-2201 marker, TMSMMB-2201 marker, ethylMMB-2201 marker, diTMSMMB-2201 / MMB-2201 marker, metylMMB-2201 JWH-018(N) (dealkyl-HOindazol) isomer-di TMS Ether$$$(hydroxy-1Hindazol-3-yl)(naphthalen1-yl)m JWH-018(N) (dealkyl-HOindazol) isomer-2 -di TMS Ether$$$(hydroxy-1Hindazol-3-yl)(naphthalen1-yl JWH-018(N) dealkyl-HOnaphtyl isomer-1 di TMS Ether$$$ JWH-018(N) dealkyl-HOnaphtoyl isomer-2 di TMS Ether JWH-018(N) (dealkyl-HOindazol) isomer-3 di TMS Ether$$$(hydroxy-1Hindazol-3-yl)(naphthalen1-yl FUB-PB-22 marker TMS THJ2201-M5-2TMS THJ2201-M6-TMS THJ2201-M3-2TMS THJ2201-M4-TMS JWH-018(N) (dealkyl2*HO-indazol) isomer$$$(dihydroxy-1Hindazol-3-yl)(naphthalen1-yl)methanon MDMB-CHMINACA, TMS # MDB-CHMINACA, TMS MDMB-CHMINACA marker TMS # MDB-CHMINACA marker TMS MDMB-CHMINACA M2, diTMS # MDB-CHMINACA M2, diTMS MDMB-CHMINACA M1, TMS # MDB-CHMINACA 792. 793. 794. 795. 796. 797. 798. 799. 800. 801. 802. 803. 804. 805. 806. 807. 808. 809. 810. 811. 812. 813. 814. 815. 816. 817. 818. 819. 820. 821. 822. 823. M1, TMS MDMB-CHMINACA # MDBCHMINACA MDB-CHMINACA TMSCBL-2201 1-Naphthalenol QCBL(N)-2201-M marker, methylMDB-CHMINACA ADB-CHMINACA marker TMSADB-CHMINACA marker 2TMSKetoprofen TMS JWH-250-M (HO-chain-) isomer-1 JWH-250-M (HO-phenylHO-chain-) isomer-3 JWH-250-M (HO-phenylHO-chain-) isomer-4 JWH-250-M (HO-phenyloxo-) isomer-2 JWH-210-M (dealkyl-diHO-ethylnaphthalene) Me2TMS JWH-073-M (dealkyl-HOnaphthalene-) isomer-1 2Me JWH-073-M (dealkyl-HOindol-) isomer-2 2Me JWH-073-M (dealkyl-HOindol-) isomer-1 2Me JWH-018-M (HOOC-) Me AB-001-M (HOadamantyl-) isomer-1 TMS AB-001-M (HOadamantyl-) isomer-2 TMS AB-001-M (HOadamantyl-) isomer-3 TMS AB-001-M (3-HOadamantyl-) isomer-1 3TMS AB-001-M (HO-chain-HOadamantyl-) isomer-1 2TMS AB-001-M (dealkyl-HOadamantyl-) isomer-3 MeTMS AB-001-M (dealkyl-HOadamantyl-) isomer-2 MeTMS AB-001-M (dealkyl-HOadamantyl-) isomer-1 MeTMS AM-694-M (HO-chain-) isomer-2 TMS AM-694-M (HO-chain-) isomer-1 TMS AM-694-M (defluoro-HOchain-) TMS JWH-073-M (dealkyl-HOnaphthalene-) isomer-2 2Me JWH-251-M (HO-chain-) isomer-1 JWH-251-M (HO-chain-) 824. 825. 826. 827. 828. 829. 830. 831. 832. 833. 834. 835. 836. 837. 838. 839. 840. 841. 842. 843. 844. 845. 846. 847. 848. 849. 850. 851. 852. 853. 854. 855. isomer-1 AC JWH-251-M (HO-chainHO-indol-) isomer-1 2TMS JWH-251-M (HO-chain-) isomer-1 TMS JWH-251-M (HO-chain-) isomer-3 TMS JWH-203-M (HO-chain-) isomer-2 AC JWH-203-M (HO-chain-) isomer-1 AC AB-001-M (dealkyl-HOadamantyl) isomer-1 2TMS JWH-073-M (dealkyl-HOnaphthalene-) isomer-2 2TMS JWH-073-M (dealkyl-HOnaphthalene-) isomer-1 2TMS JWH-073-M (dealkyl-HOindol-) isomer-2 2TMS JWH-073-M (dealkyl-HOindol-) isomer-1 2TMS JWH-203-M (HO-chain-) isomer-1 JWH-203-M (dealkyl-HOindol) isomer-1 2TMS JWH-203-M (HO-chainHO-indol) isomer-1 2TMS JWH-203-M (HO-chain-) isomer-2 TMS JWH-203-M (HO-chain-) isomer-1 TMS AB-001-M (dealkyl-HOadamantyl-) isomer-1 AB-001-M (dealkyl-HOadamantyl-) isomer-3 AB-001-M (dealkyl-HOadamantyl) isomer-3 2TMS JWH-250-M (dealkyl-HOindol-) isomer-2 2TMS JWH-250-M (dealkyl-HOphenyl-) isomer-2 2TMS JWH-018-M (HO-chainHO-indol-) 2TMS JWH-018-M (HO-chainHO-naphthalene-) isomer1 2TMS JWH-018-M (HOOC-) TMS JWH-018-M isomer-1 TFA/artifact (pentenyl) JWH-210-M (3-HO-) isomer-1 3TMS JWH-210-M (HO-ethylHO-chain-) isomer-1 2TMS JWH-210-M (HO-ethylHO-indol-) 2TMS JWH-210-M (HO-ethyl-) TMS JWH-210-M (oxo-ethylHO-chain-) TMS JWH-250-M (3-HO-) isomer-1 3TMS JWH-250-M (3-HO-) isomer-2 3TMS JWH-250-M (dealkyl-HO- 47 856. 857. 858. 859. 860. 861. 862. 863. 864. 865. 866. 867. 868. 869. 870. 871. 872. 873. 874. 875. 876. 877. 878. 879. 880. 881. 882. 883. 884. 885. 886. 887. 888. 889. 890. 891. 892. 893. indol-) isomer-2 2AC JWH-250-M (dealkyl-HOphenyl-) isomer-2 2AC JWH-250-M (HO-chain-) isomer-1 AC JWH-250-M (HO-chain-) isomer-1 TMS JWH-250-M (HO-phenylHO-chain-) isomer-3 2AC JWH-250-M (HO-phenylHO-chain-) isomer-4 2AC JWH-250-M (HO-phenylHO-chain-) isomer-3 2TMS JWH-250-M (HO-phenylHO-chain-) isomer-4 2TMS JWH-250-M (HO-phenyloxo-) isomer-1 AC JWH-250-M (HO-phenyloxo-) isomer-2 AC JWH-250-M (HO-phenyloxo-) isomer-1 TMS JWH-250-M (HO-phenyloxo-) isomer-2 TMS JWH-250-M (HO-phenyl-) TMS JWH-251-M (HO-chainHO-methylphenyl-) isomer-2 2TMS RCS-4 RCS-4-M (HO-indol-Ndealkyl-) isomer-2 2TMS RCS-4-M (HO-phenyl-HOchain-) 2AC RCS-4-M (HO-phenyl-HOchain-) 2TMS RCS-4-M (HO-phenyl-HOchain-) RCS-4-M (HO-phenyl-oxo) RCS-4-M (O-demethylHO-chain-) isomer-2 2TMS RCS-4-M (O-demethylHO-chain-) isomer-2 RCS-4-M (O-demethylHO-chain-) isomer-2 2AC RCS-4-M (O-demethyl-Ndealkyl-) 2TMS RCS-4-M (O-demethyloxo-) AC RCS-4-M (O-demethyloxo-) TMS RCS-4-M (O-demethyloxo-) AM-694-M (HOOC-) Me AM-694-M (HOOC-) TMS UR-144 HY TMS UR-144 HY/artifact UR-144 artifact UR-144 UR-144 (F-chain-) UR-144 (F-chain-) artifact PB-22-M HY PFP AKB-48-M (HOadamantyl-) TMS AKB-48-M (di-HO-) 2TMS AKB-48-M (tri-HO-) 3TMS 894. 895. 896. 897. 898. 899. 900. 901. 902. 903. 904. 905. 906. 907. 908. 909. 910. 911. 912. 913. 914. 915. 916. 917. 918. 919. 920. 921. 922. 923. 924. 925. 926. 927. 928. 929. 930. 931. 932. AKB-48-M (tri-HO-)2 3TMS AKB-48-M (dealkyl-HOadamantyl-) 2TMS AKB-48-M (dealkyl-di-HOadamantyl-) 3TMS AKB-48F-M (HOadamantyl-HOOC-) 2TMS CP 47,497 C8 (cis) CP 47,497 C8 (trans) CP 47,497 C8 2AC 1 CP 47,497 C8 2AC 2 CP 47,497 C8 2TFA1 CP 47,497 C8 2TFA2 CP 47,497 C8 2TMS CP 47,497 C8 TFA1 CP 47,497 C8 TFA2 JWH-073-M/artifact (HOnaphthalene-HO-chain-) isomer-1 2TMS JWH-073-M/artifact (HOnaphthalene-) isomer-2 TMS JWH-073-M/artifact (HOnaphthalene-) isomer-1 TMS JWH-073-M/artifact (HOnaphthalene-HO-chain-) isomer-2 2TMS JWH-018-M (HO-chain-) isomer-1 TMS JWH-018-M (HO-chain-) isomer-1 TFA JWH-018-M (HO-chain-) isomer-2 TFA JWH-018-M (HO-chain-) isomer-1 AC JWH-018-M (HO-chain-) isomer-2 AC JWH-018-M (HO-chain-) isomer-1 JWH-018-M (HO-chain-) isomer-2 TMS JWH-073-M (HO-chain-) isomer-1 TMS JWH-073-M (HO-chain-) isomer-2 TMS AM-694 JWH-018 JWH-073 JWH-203 JWH-210 JWH-250 JWH-251 UR-144-M/artifact (di-HO) isomer-1 UR-144-M/artifact (di-HO) isomer-2 UR-144-M (HO-heptyl-) +H2O (dehydro-) TMS UR-144-M (HO-heptyl-) +H2O 2TMS UR-144-M (di-HO-) isomer-1 +H2O 3TMS UR-144-M (di-HO-) isomer-1 +H2O (dehydro) 933. 934. 935. 936. 937. 938. 939. 940. 941. 942. 943. 944. 945. 946. 947. 948. 949. 950. 951. 952. 953. 954. 955. 956. 957. 958. 959. 960. 961. 962. 963. 964. 965. 966. 967. 968. 969. 970. 971. 972. 973. 974. 975. 976. 2TMS UR-144-M (di-HO-) isomer-2 +H2O (dehydro) 2TMS UR-144-M (di-HO-) isomer-2 +H2O 3TMS UR-144-M/artifact (HOcycle-) TMS UR-144-M/artifact (HOchain-) +H2O (dehydro) TMS UR-144-M/artifact (HOchain-) +H2O 2TMS UR-144-M/artifact (di-HO) isomer-1 +H2O 3TMS UR-144-M/artifact (di-HO) isomer-1 +H2O (dehydro) 2TMS UR-144-M/artifact (di-HO) isomer-2 +H2O (dehydro) 2TMS UR-144-M/artifact (di-HO) isomer-2 +H2O 3TMS UR-144-M/artifact (HOheptyl-) UR-144-M/artifact (HOchain-) PB-22 PB-22F AKB-48F AKB-48 AM-2233-M (nor-) AC AM-2233 AM-2233-M (nor-) PB-22-M HY (HO-chain-) 2TMS PB-22-M HY (oxo-) TMS PB-22-M HY TMS PB-22F-M HY TMS PB-22F-M HY (HOOC-) 2TMS PB-22F-M HY PFP JWH-175 AM-2201 AB-FUBINACA AB-FPINACA AB-CHMINACA BB-22-M HY PFP BB-22-M HY (HO-) PFP AB-FUBINACA-M (indazole HOOC-) TMS AB-FUBINACA-M (HOOC-) TMS AB-PINACA-M (oxo-HOOC) TMS AB-PINACA-M (HOOC-) TMS FDU-PB22 FUB-PB22 JWH-307 JWH-081 STS-135 AB-001 8-Hydroxyquinoline 8-Hydroxyquinoline TMS MAM-2201 48 977. 978. 979. 980. 981. 982. 983. 984. 985. 986. 987. 988. 989. 990. 991. 992. 993. 994. 995. 996. 997. 998. 999. 1000. 1001. 1002. 1003. 1004. 1005. 1006. 1007. 1008. 1009. 1010. 1011. 1012. 1013. 1014. 1015. 1016. 1017. 1018. AB-CHMINACA-M (HOOCHO-) 2TMS AB-CHMINACA-M (HOOC-) TMS ADB-CHMINACA-M (HOOC-) TMS ADB-CHMINACA-M (HOOC-HO-) 2TMS AB-FPINACA-M (HOOC-) TMS ADB-CHMINACA (MeO-) CBL-2201 1-Naphthol AC 1-Naphthol TMS 1-Naphthol AB-PINACA THJ-2201 THJ-2201-M/artifact (defluoro-di-HO-) 2TMS THJ-2201-M/artifact (defluoro-HOOC-HO-) 2TMS THJ-2201-M/artifact (HOnaphthalene-) TMS THJ-2201-M (dealkyl-HOindazol-) 2TMS THJ-2201-M (defluoroethyl-HOOC-) TMS THJ-2201-M (defluoro-HO) TMS THJ-2201-M (defluoroHOOC-) TMS FUBIMINA Naphtol-1 PFP THJ-2201-M (-F, HO-) PFP THJ-2201-M (-F,COOH-) PFPr THJ-2201 M (alkyl HO-) PFP THJ-2201 M1 (C2H4F+COOH) PFPr AB-PINACA-M3.2 (2COOH), 2TMSDOVES Tablet Uncown compaund #1 DOVES Tablet Uncown compaund #2 fenozepam Butylone (bk-MBDB) | 1(1,3-benzodioxol-5-yl)-2(methylamino)butan-1-one Tramadol Diffusion pump fluid JWH-210 JWH-250 MDPBP O-2482 Desoxypipradrol N-Acetyl-2Diphenylmethylpyrrolidine (????) N-Acetyl Desoxypipradrol JWH-073 JWH-073 DBZP ????? 1019. 1020. 1021. 1022. 1023. 1024. 1025. 1026. 1027. 1028. 1029. 1030. 1031. 1032. 1033. 1034. 1035. 1036. 1037. 1038. 1039. 1040. 1041. 1042. 1043. 1044. 1045. 1046. 1047. 1048. 1049. 1050. 1051. 1052. 1053. 1054. 1055. 1056. 1057. 1058. 1059. 1060. 1061. 1062. 1063. 1064. 1065. 1066. 1067. 1068. 1069. 1070. 1071. 1072. 1073. 1074. 1075. 1076. 1077. 1078. 1079. AM-694 AM-1220 3-(4-Metoxybenzoyl)-1butylindol 3-FMC 3-FisoMC 6-desoxycodeine 4-FMC Salvinorin A Salvinorin B N-Acetyl-Pentylone JWH-203 JWH-251 Pentedrone Tofisopamum ???? (ne podtverzhden) Salvinorin C DON N-Acetyl-4-MEC N-acetyl Mefedrone N-Acetyl-Pentedrone N-Acetyl-PMMA N-TFA-PMMA JWH-018 2C-I 2C-E Methoxetamine 2Diphenylmethylpyrrolidine N-Acetyl-Benzedrone Methedrone Benzedrone Benzedrone N-Acetyl-iso-Pentedrone (ne podtv!!!) N-Acetyl-Methedrone JWH-011 JWH-011 Artefact MDPV Artefact MDPBP Artefact PVP CP47,497-C8 E-izomer CP 47,497-C8 Z-izomer Nicotine 4-MEC AM-1220 3-(2-methoxybenzoil)-1pentylindol JWH-192 ? RCS-4 Methamphetamine N-TFA-MDAI MDAI N-TFA-5-APB N-TFA-6-APB MPA TFA-MPA Asaleptin JWH-019 Oleamide N-TFA-4-MEC Cannabidiol Tetrahydrocannabinol Cannabinol MDAI JWH-307 1080. 1081. 1082. 1083. 1084. 1085. 1086. 1087. 1088. 1089. 1090. 1091. 1092. 1093. 1094. 1095. 1096. 1097. 1098. 1099. 1100. 1101. 1102. 1103. 1104. 1105. 1106. 1107. 1108. 1109. 1110. 1111. 1112. 1113. 1114. 1115. 1116. 1117. 1118. 1119. 1120. 1121. 1122. 1123. 1124. 1125. 1126. 1127. 1128. 1129. 1130. 1131. 1132. 1133. 1134. 1135. 1136. 1137. 1138. 1139. N-TFA-MXE JWH-200 JWH-018 Caffeine JWH-022 4-MA 4-FA N-Acetyl-4-MA N-Acetyl-4-FA N-ethylcathinone iso-Pentedrone JWH-370 AM-2233 2C-I-NBOMe 2C-P N-Acetyl-MDTHIQ Phenobarbital Benzonale Diazepam AM-2201 JWH-018Cl Methyl stearate JWH-018Br MXE Methandrostenolone N-Acetyl-2C-I N,N-Diacetyl-2C-I N-Acetyl-MXE O-2482 N-Acetyl-2C-E Artefact Naphyrone 2C-C-NBOMe JWH-122 Desomorphine Levomycetin (O,ODiacetyl-) Levomycetin RCS-4-ortho (C4homologue) 5-MeO-DALT 3-TMCP-indol N-TFA-2C-C-NBOMe AM-2233Cl Sibutramine Ethylone MDTHIQ 4-FMA AM-2233 MPPP Pentylone N-Acetyl-Ethylone N-TFA-Ethylone JWH-081 6-APB (it is NOT confirmed) 5-APB (it is NOT confirmed) Dimethocaine N-Acetyl-Dimethocaine N-Acetyl-AMT AMT AMT, Acetone Dimethocaine, Acetone Dimethocaine, N,Ndimethylaminebenzaldehyd e 49 1140. 1141. 1142. 1143. 1144. 1145. 1146. 1147. 1148. 1149. 1150. 1151. 1152. 1153. 1154. 1155. 1156. 1157. 1158. 1159. 1160. 1161. 1162. 1163. 1164. 1165. 1166. 1167. 1168. 1169. 1170. 1171. 1172. 1173. 1174. 1175. 1176. 1177. 1178. 1179. 1180. 1181. 1182. 1183. 1184. 1185. 1186. 1187. AMT, N,Ndimethylaminebenzaldehyd eAMT, Acetone cond. dehydro, JWH-122 URB-602 3-isocyanatobiphenyl 5'-hydroxybiphenyl-3carboxamide 5'-hydroxy-N(trimethylsilyl)biphenyl-3carboxamide N-(trimethylsilyl)-5'(trimethylsilyloxy)biphenyl -3-carboxamide Tropicamide O-Acetyl-Tropicamide Oxycodone Fentanyl O-Acetyl-Oxycodone BMDP JWH-122F AB-001 6-methyl-3-p-tolyl-1Hquinazoline-2,4-dione URB754 TMCP-018 URB754, N-TFA2,2,3,3-tetramethyl-N'-(2oxo-1-pentylindolin-3ylidene)cyclopropanecarbo hydrazide Desmethylfenanyl 2,2,3,3-tetramethyl-N'-(2oxo-1-pentylindolin-3ylidene)cyclopropanecarbo hydrazide 2,2,2-trifluoro-N'-(2-oxo1-pentylindolin-3ylidene)acetohydrazide URB754, TMSMPA, N-AcetylTMCP-200 (1) TMCP-200 (2) GBR-12935 Stanozolol Benzyl Benzoate Testosterone propionate Testosterone isocaproate Testosterone Decanoate Testosterone Phenylpropionate α-Tocopheryl acetate Amphetamine Testosterone enanthate Ephedrine Chlorphenamine Dyphylline Dyphylline, diacetate Ephedrine, N-Acetyl Diacetylephedrine Benzoic acid, 2,5-dichloro, methyl ester MPA α-PVP CB-13 1188. 1189. 1190. 1191. 1192. 1193. 1194. 1195. 1196. 1197. 1198. 1199. 1200. 1201. 1202. 1203. 1204. 1205. 1206. 1207. 1208. 1209. 1210. 1211. 1212. 1213. 1214. 1215. 1216. 1217. 1218. 1219. 1220. 1221. 1222. 1223. 1224. 1225. 1226. 1227. 1228. 1229. 1230. 1231. 1232. 1233. 1234. 1235. 1236. 1237. Furanamine Furanamine, N-AcetylFuranamine, N-AcetoneTMCP-022 MDMA Nandrolone decanoate Dimedrol MDMA, N-AcetylTMCP-2232 Ketamine A-836,339 A-834,735 Tributylamine 6-desoxymorphine (1-(5-fluoropentyl)-1Hindol-3-yl)(pyridin-3yl)methanone AKB48-2H (7-methoxy-1-pentyl-1Hindol-3-yl)(3,4,5trimethylpiperazin-1yl)methanone ethyl 1-pentyl-1H-indole3-carboxylate Boldenone 10undecenoate AKB48-2H AKB48 Diclofensine Diclofensine LR-5182 LR-5182 ACbm-022 ACBM N-(naphthalen-1-yl)-1(pent-4-enyl)-1H-indole-3carboxamide 6'-methoxy-4-(2methyloctan-2-yl)biphenyl2-ol AKB-48Cl Heliamine MDA-19F 2,2,2-trifluoro-N'-(1-(5fluoropentyl)-2-oxoindolin3-ylidene)acetohydrazide Iso-ethcathinone N-ethylcathinone Ethcathinone AC N-Acetyl-iso-EC UR-144F ACBM(N) ACBM(N)-022 Artefact Benocyclidine Benocyclidine BTCPDE BTCPy quinolin-8-yl 4-methyl-3(piperidin-1ylsulfonyl)benzoate Phenolphthalein SEP-225,289 Acetone adduct SEP-225,289, AcetylPhenolphthalein, AcetylPhenolphthalein, DiAcetyl- 1238. 1239. 1240. 1241. 1242. 1243. 1244. 1245. 1246. 1247. 1248. 1249. 1250. 1251. 1252. 1253. 1254. 1255. 1256. 1257. 1258. 1259. 1260. 1261. 1262. 1263. 1264. 1265. 1266. 1267. 1268. 1269. 1270. 1271. 1272. isomer MN-001 1-benzyl-6-fluoro-1Hbenzo[d]imidazol-2(3H)one (5-allyl-2-cyclopentyl2,3,4,5-tetrahydro-1Hpyrido[4,3-b]indol-8-yl)(4methylpiperidin-1yl)methanone N-(1-amino-3,3-dimethyl1-oxobutan-2-yl)-3benzyl-5-fluoro-2-oxo-2,3dihydro-1Hbenzo[d]imidazole-1-c (5-allyl-2(tetrahydrothiophen-3-yl)2,3,4,5- tetrahydro-1hpyrido[4,3- b]indol-8yl)(4- methylpiperidin -1 O-2172 STS-135 AKB-48F methyl 1-pentyl-1Hindole-3-carboxylate methyl 1-(5-fluoropentyl)1H-indole-3-carboxylate BK-4 ClK-4 PB-22Cl Tiletamine Allyl Mescaline FluoroBenztropine ethyl 6-ethyl-4-oxo-1,4dihydroquinoline-3carboxylate ethyl 6-ethyl-4-oxo-1,4dihydroquinoline-3carboxylate butyl 6-ethyl-4-oxo-1,4dihydroquinoline-3carboxylate QCBL-022 N-(1-(6-methylpyridin-2yl)propan-2-yl)acetamide N-acetyl-N-(1-(6methylpyridin-2-yl)propan2-yl)acetamide 1-(6-methylpyridin-2yl)propan-2-amine 1-(6-methylpyridin-2yl)propan-2-amine 1-(6-methylpyridin-2-yl)N-(propan-2ylidene)propan-2-amine 2C-B-NBOMe ME α-PVT Artefakt a-PVT 2-(4-(allyloxy)-3,5dimethoxyphenyl)ethanam ine BZP-2201 LY-2183240 Desmethyl Mescaline artefakt PHP α-PHP Super degradant a-PHP 50 1273. 1274. 1275. 1276. 1277. 1278. 1279. 1280. 1281. 1282. 1283. 1284. 1285. 1286. 1287. 1288. 1289. 1290. 1291. 1292. 1293. 1294. 1295. 1296. 1297. 1298. 1299. 1300. 1301. 1302. 1303. 1304. 1305. 1306. 1307. 1308. 1309. 1310. 1311. 1312. 1313. 1314. 1315. (not confirmed) N-methyl-10,11-dihydro5Hdibenzo[a,d][7]annulene5-carboxamide KL-OH BB-22 ADM-018 TMCP-1220 AB-FUBINACA ADBICA-F AB-FPINACA 5Cl-AB-PINACA AB-PINACA-(-2H) naphthalen-1-yl(1-(pent4-en-1-yl)-1Hbenzo[d]imidazol-2yl)methanone (1-(5-chloropentyl)-1Hbenzo[d]imidazol-2yl)(naphthalen-1yl)methanone ethyl 1-(5-chloropentyl)1H-indole-3-carboxylate 5-MeO-NBpBrT 4-MeO-α-PVP Artefact 4-MeO-α-PVP Superdegradant 4-MeO-αPVP 5-MeO-NBpBrT, N-Acetylmethyl 1-(4-fluorobenzyl)1H-indole-3-carboxylate CBM(N)-018 4F-a-PVP Artefact 4F-α-PBP 4F-α-PBP Artefact 4F-a-PVP PB(N)-FUB JWH(N)-18Cl JWH(N)-022 bk-MDDMA bk-MDDMA Degradant ethyl 1-(4-fluorobenzyl)1H-indole-3-carboxylate N-(2-(ptolyl)cyclopropyl)acetamid e N-methyl-2,3-dihydro-1Hinden-2-amine 6-fluoro-1-(naphthalen-1ylmethyl)-2-(pyridin-3-yl)1H-benzo[d]imidazole naphthalen-1-yl(1-pentyl1H-benzo[d]imidazol-2yl)methanone thienopentedrone N-methyl-N-(1-oxo-1(thiophen-2-yl)pentan-2yl)acetamide FDU-PB22 RH-34 RH-34 artefact? SDB-006F SDB-006 (-2H) CBL-022 MMB-022 1316. 1317. 1318. 1319. 1320. 1321. 1322. 1323. 1324. 1325. 1326. 1327. 1328. 1329. 1330. 1331. 1332. 1333. 1334. 1335. 1336. 1337. 1338. 1339. 1340. 1341. 1342. 1343. 1344. 1345. 1346. 1347. 1348. 1349. 1350. 1351. 1352. 1353. 1354. 1355. 1356. 1357. 1358. 1359. 1360. 1361. 1362. 1363. 1364. 1365. 1366. 1367. 1368. 1369. 1370. MBA-2201 artefact (-NH3) MMB-2201 PB-FUB α-PVP oxo- metabolite αPyrrolidinovalerophenone metabolite 1 W-15 MPhP-2201 QCBL(N-pir)-2201 THJ-018 AM(N)-2201 1-(4-fluorobenzyl)-1Hindole-3-carboxylic acid CBL(N)-2201 CBL(N)-022 4F-α-PVP α-PHP MDPV Pregabalin MITRAGYNINE AB-PINACA ADBICA AB-CHMINACA MDMB(N)-CHM SEP-225,289 NNEI NNEI CBM-2201 PB-22F PB-22F MMB(N)-018Cl MMB(N)-022 1-(benzo[d][1,3]dioxol-5yl)-2-chloropropan-1-one MXP CBL-018 MMB(N)-2201 CBL-2201 Termoliz TMCP-022 Termoliz TMCP-018 Termoliz UR-144F Mephedrone PB(N)-22 AM-2232 JWH-122F QCBL(N)-2201 FUBIMINA FUBIMINA NM-018Cl NM-018MeO methyl 1-(pent-4-en-1yl)-1H-indole-3carboxylate methyl 1-(5methoxypentyl)-1H-indole3-carboxylate methyl 1-(5-chloropentyl)1H-indole-3-carboxylate NM-018EtOH ethyl 1-(pent-4-en-1-yl)1H-indole-3-carboxylate ethyl 1-(5-fluoropentyl)1H-indole-3-carboxylate NM-018EtOH ethyl 1-(5-chloropentyl)- 1371. 1372. 1373. 1374. 1375. 1376. 1377. 1378. 1379. 1380. 1381. 1382. 1383. 1384. 1385. 1386. 1387. 1388. 1389. 1390. 1391. 1392. 1393. 1394. 1395. 1396. 1397. 1398. 1399. 1400. 1401. 1402. 1403. 1404. 1405. 1406. 1407. 1408. 1409. 1410. 1411. 1412. 1413. 1414. 1415. 1H-indole-3-carboxylate ACBM(N)-BZ-F ACBM(N)-BZ-F 1-Isocyanatoadamantane MBA-2201 MBA-2201 artefact (-NH3) ACBM(N)-BZ-F EG-018 MDMB(N)-2201 MDMB(N)-018Cl MDMB(N)-022 5-APB-NBOMe 5-MAPB-NBOMe 4-CMC 5-MAPB Tadalafil Yohimbine Pramipexole MDMB(N)-018OH PX-01 2C-B Acetylfentanyl M(HO-) isomer2 PrO Acetylfentanyl M(HO-) isomer2 Ac Acetylfentanyl M(desacetyl-, nor-) 2TFA Acetylfentanyl M(desacetyl-, nor-) 2PrO Acetylfentanyl M(desacetyl-, nor-) 2PFP Acetylfentanyl M(desacetyl-) PFP Acetylfentanyl M(desacetyl-) TFA Acetylfentanyl M(nor-) PFP Acetylfentanyl M(nor-) PrO Acetylfentanyl M(nor-) Ac Acetylfentanyl M(nor-) TFA Acetylfentanyl M(nor-) Acetylfentanyl M(HO-, MeO-) PrO Acetylfentanyl M(HO-, MeO-) PFP Acetylfentanyl M(HO-, MeO-) TMS Acetylfentanyl M(HO-) TMS Acetylfentanyl M(HO-, MeO-) Ac Acetylfentanyl M(desacetyl-, HO-) 2PrO Acetylfentanyl M(HO-) isomer1 PrO Acetylfentanyl M(desacetyl-, HO-,MeO-) 2PrO Acetylfentanyl M(HO-) isomer1 PFP Acetylfentanyl M(HO-) isomer1 Ac Acetylfentanyl M(2HO-) 2PFP Acetylfentanyl M(desacetyl-, HO-) 2PFP Acetylfentanyl 51 1416. 1417. 1418. 1419. 1420. 1421. 1422. 1423. 1424. 1425. 1426. 1427. 1428. 1429. 1430. 1431. 1432. 1433. 1434. 1435. 1436. 1437. 1438. 1439. 1440. 1441. 1442. 1443. 1444. 1445. 1446. 1447. 1448. 1449. 1450. 1451. 1452. 1453. 1454. 1455. 1456. 1457. 1458. 1459. M(desacetyl-, HO-,MeO-) 2PFP Acetylfentanyl M(desacetyl-, 2HO-) 3PFP Acetylfentanyl M(2HO-) 2Ac Acetylfentanyl M(nor-) ethylformat artifact Acetylfentanyl M(desacetyl-) Acetylfentanyl MDBM-CHM artefact MDBM-CHM artefact MDMB-CHMINACA MDMB(N)-CHM 4-Methylbuphedrone SDB-006 SDB-006 MMB(N)-2201 methyl 1-(5-fluoropentyl)1H-pyrrolo[2,3-c]pyridine3-carboxylate Dimethocaine α-PHP DMBA(O)-CHM EMB(N)-CHM PMB(N)-CHM MBAcid(N)-CHM MBAcid(N)-CHM MMB(N)-CHM Amfonelic acid 4-CMC 4-CMC, -TFA 4-CMC, -TFA MDMB(N)-FUB MPA(N)-2201 Nomifensine Nomifensine, Acetone adductNomifensine, Acetone adductNomifensine, TFAMDMB(N)-Bz-F MDMB-Bz-F MDMB-Bz-F AB-CHMINACA metabolite M1A ADB-PINACA N-(4hydroxypentyl) metabolite ADB-PINACA N-(5hydroxypentyl) metabolite ADBICA N-(4hydroxypentyl) metabolite ADBICA N-(5hydroxypentyl) metabolite XLR11 6-hydroxyindole metabolite MDMB(N)-Bz-F Marker TMS $#$ ADB-FUBINACA Marker TMS MDMB(N)-FUB-M (COOH) TMS $#$ ADB-FUBINACA Marker TMS MDMB(N)-Bz-F Marker PFP $#$ ADB-FUBINACA Marker PFP ADB-FUBINACA α-PBP 1-phenyl-2-(pyrrolidin-1yl)but-2-en-1-one 1463. DMBA(N)-CHM 1464. MDMB(N)-CHM 1465. MMB(N)-Bz-F 1460. 1461. 1462. 52 53