Экспресс-анализатор карбокси-, мети общего гемоглобина Докладчик: Костюков Д. В. ЗАО НПП «ТЕХНОМЕДИКА» Молекулы гемоглобина обеспечивают транспорт кислорода в организме Существует ряд производных гемоглобина, часть из них не участвуют в транспорте кислорода (дисгемоглобины). Основными дисгемоглобинами являются HbCO и HbMet. Что может означать «общий гемоглобин в пределах нормы» ? Карбоксигемоглобин Появление карбоксигемоглобина обусловлено связыванием одного или нескольких атомов Fe2+ с группой CO в молекуле Hb. 100 %O 2Hb 80 Увеличение РаСО 60 40 20 0 100 80 60 40 20 Парциальное давление кислорода(мм.рт.ст) Сродство Hb к CO в 200 раз выше, чем к O2. Сдвиг кривой диссоциации оксигемоглобина влево нарушает доставку кислорода к тканям значительно сильнее, чем снижение насыщения крови кислородом. Карбоксигемоглобин % FCOHb в крови Симптомы отравления 0-2 Нормальный уровень среди некурящих 5-6 Нормальный уровень для курильщиков 10-20 Напряжение во лбу, расширение кожных сосудов 20-30 Головная боль и пульс в висках 30-40 Усталость, головокружение, ослабление зрения, тошнота, рвота, упадок сил 40-50 Учащенный темп дыхания и удушье 50-60 Кома, конвульсии, дыхание Чейна-Стокса 60-70 Кома, конвульсии, слабое дыхание и пульс, возможна смерть 70-80 Замедление и остановка дыхания, смерть через несколько часов Карбоксигемоглобин • Содержание карбоксигемоглобина повышается при вдыхании воздуха, содержащего большое количество угарного газа. • Отравление окисью углерода случается при: - неисправности отопительных приборов, использующих углеводородное топливо, - в плохо вентилируемых помещениях, - авариях на производстве, - при пожарах. Метгемоглобин • Появление обусловлено окислением Fe2+ до Fe3+ в молекуле Hb. • В присутствии метгемоглобина кривая диссоциации оксигемоглобина сдвигается влево, и в результате снижается отдача кислорода тканям. Метгемоглобин % FMetHb в крови Симптомы отравления <3 Отсутствие клинических проявлений 3-15 Сероватый оттенок кожных покровов 15-30 Цианоз, шоколадно-коричневое окрашивание крови 30-50 Нарушение дыхания, головная боль, слабость, головокружение, обмороки 50-70 Учащение дыхания, метаболический ацидоз, аритмии, судороги, угнетение ЦНС, возможна кома > 70 Выраженная клиника гипоксии, смерть Виды воздействия и причины метгемоглобинемии Врожденные Приобретенные (медикаментозные воздействия) Приобретенные (химические агенты) Эндогенные причины (характерные для новорожденных и детей первого года жизни) -HbM -Дефицит метгемоглобинредуктазы (цитохром-b5редуктазы) -Амилнитрит -Новокаин -Лидокаин/прилокаин -Дапсон -Нитроглицерин -Нитропруссид -Фенацетин -Феназопиридин -Метоклопрамид -Сульфонамиды -Хиноны (хлорхинон, примаквин) -Оксид азота и некоторые другие -Анилиновые красители -Бутил нитрит -Хлорбензол -Изобутил нитрит -Нафтален -Нитрофенол -Нитрат серебра -Тринитротолуол -Пищевые продукты и питьевая вода с высоким содержанием нитратов -Сниженная активность метгемоглобинредуктазы (цитохром-b5-редуктазы) –Диарея (непереносимость ряда белков, вирусный и бактериальный энтероколит и т.д.) -Состояния, вызывающие метаболический ацидоз -Колонизация кишечника нитрообразующими бактериями Актуальность задачи Согласно Приказу Минздравсоцразвития №302н от 12.04.2011г измерение фракций дисгемоглобинов необходимо в следующих случаях: 1. Метгемоглобин – в случае контакта на рабочем месте со следующими веществами: гидразин и его производные (фенилгидразин гидрохлорид, борингидразин, гептил), мышьяк и его неорганические и органические соединения, амино- и нитросоединения алифатических углеводородов, пестициды. 2. Карбоксигемоглобин – в случае контакта с монооксидом углерода. Существующие методы измерения HbCO и HbMet 1. Качественные методы: - визуально по цвету крови, - с помощью спектроскопа по виду спектра. Недостаток: только качественная оценка. Hb HbO2 HbCO HbMet Существующие методы измерения HbCO и HbMet 2. 2-х волновая фотометрия(как правило, на общелабораторных спектрофотометрах). Недостатки: длительная пробоподготовка, предусматривающая дозирование и центрифугирование пробы. Существующие методы измерения HbCO и HbMet 3. Специализированная спектрофотометрия. Достоинства: результат за короткое время, одновременное определение HbCO и HbMet. Существующее специализированное оборудование • AVOXimeter4000 Цена до $ 10 000 • Различные анализаторы фирмы Radiometer Цена $ 30 000 – 70 000 и более в зависимости от модели • Некоторые приборы других производителей Анализатор ПОЛИГЕМ-ЭКСПРЕСС-ПРО • Спектрофотометр с многоэлементным фотоприемником и специализированным программным обеспечением Анализатор ПОЛИГЕМ-ЭКСПРЕСС-ПРО • • • • • Основные характеристики: одновременное измерение общего гемоглобина Hbtot и фракций дисгемоглобинов FCOHb и FMetHb; объем крови не более 20 мкл; время анализа не более 20 секунд; производительность не менее 60 проб в час; возможность использования не только удобных, не требующих дозирования, одноразовых картриджей, но и привычных наливных кювет. Анализатор ПОЛИГЕМ-ЭКСПРЕСС-ПРО Точностные характеристики Параметр Точность Воспроизводимость HbTot <± 2% <± 1% FCOHb <± 1% <± 0,5% FMetHb <± 1% <± 0,5% Анализатор ПОЛИГЕМ-ЭКСПРЕСС-ПРО Дополнительные возможности: • индикация и управление на цветном сенсорном дисплее; • встроенный термопринтер; • память на 1000 измерений; • USB-порт; • Ethernet-порт; • возможность подключения к лабораторным информационным системам(ЛИС). Анализатор ПОЛИГЕМ-ЭКСПРЕСС-ПРО Контроль качества: • Периодический пользовательский контроль с помощью прилагаемой к прибору меры из цветного стекла. • Поверка с помощью набора мер НОСМОП-7, выпускаемого ЗАО НПП «ТЕХНОМЕДИКА». Анализатор ПОЛИГЕМ-ЭКСПРЕСС-ПРО Сравнение ручных методик на спектрофотометре и ПОЛИГЕМ-ЭКСПРЕСС-ПРО. Карбоксигемоглобин. Параметр Расходные материалы Методика Минздрава РСФСР ПОЛИГЕМЭКСПРЕСС-ПРО Наливная кювета ПОЛИГЕМЭКСПРЕСС-ПРО Картридж ГЕМОЛАЙН Hb Набор из 2 компонентов: 1) 0,04% раствор аммиака в воде, 2) раствор едкого калия или натрия. 0,04% раствор аммиака в воде Картридж Дозирование реагентов Ручное дозирование 2 компонентов разбавителя Ручное дозирование 1 компонента разбавителя Не требуется Дозирование крови Ручное дозирование Ручное дозирование Не требуется Время пробоподготовки 2 минуты 5 секунд 5 секунд Время измерения 30 секунд 10 секунд 10 секунд Сравнение ручных методик на спектрофотометре и ПОЛИГЕМ-ЭКСПРЕСС-ПРО. Метгемоглобин. Параметр Расходные материалы Биохимический метод по Кушаковскому ПОЛИГЕМЭКСПРЕСС-ПРО Наливная кювета ПОЛИГЕМЭКСПРЕСС-ПРО Картридж ГЕМОЛАЙН Hb Набор из 3 компонентов: 1) фосфатный буфер, 2) ацетонциангидрин, 3) феррицианид. 0,04% раствор аммиака в воде Картридж Дозирование реагентов Ручное дозирование 3 компонентов разбавителя Ручное дозирование 1 компонента разбавителя Не требуется Дозирование крови Ручное дозирование Ручное дозирование Не требуется Время пробоподготовки 3 минуты 5 секунд 5 секунд Время измерения 30 секунд 10 секунд 10 секунд Анализатор ПОЛИГЕМ-ЭКСПРЕСС-ПРО Проводить измерения с помощью ПОЛИГЕМ-ЭКСПРЕСС-ПРО так же просто, как с помощью МиниГЕМа, который есть почти во всех российских лабораториях. Спасибо за внимание! Дополнительную информацию можно найти на наших сайтах: technomedica.ru, technomedica.com. Тел. 8 (495) 287-81-00, E-mail: kostiukov@technomedica.com