ЗАВИСИМОСТЬ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА

№ 3 - 2012 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки
УДК 615.272.4:577.175.852-575.22
ЗАВИСИМОСТЬ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО
ЭФФЕКТА СИМВАГЕКСАЛА
ОТ ГЕНОТИПОВ ГЕНА
АНГИОТЕНЗИН-ПРЕВРАЩАЮЩЕГО
ФЕРМЕНТА (АСЕ)
М.Ю. Котловский, О.С. Котловская, Д.А. Кириченко, Ю.В. Котловский
ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет»
Минздравсоцразвития России (г. Красноярск)
В статье отражены результаты исследования терапевтического эффекта симвагексала
в зависимости от генотипа ангиотензин-превращающего фермента. Исследования
проведены на группе пациентов с ишемической болезнью сердца, имеющих гипертонию
и без нее в возрастном интервале 45–64 года. Терапевтический эффект оценивали
по показателям липидного спектра сыворотки крови до и после лечения. По результатам
исследования наблюдали достоверное снижение общего холестерина после лечения
симвагексалом независимо от генотипа полиморфизма гена ACE. Однако показатели:
липопротеины низкой плотности и коэффициент атерогенности изменялись только
в группе людей с мутантным аллелем, т. е. генотипами ID и DD. Достоверное снижение
уровня триглицеридов было исключительно у пациентов с DD-генотипом (р = 0,005).
Ключевые слова: полиморфизм, ангиотензин-превращающий фермент, ИБС, гипертония,
симвагексал.
Юрий Васильевич Котловский — доктор медицинских наук, профессор, членкорреспондент РАЕН, заведующий ЦНИЛ ГБОУ ВПО «Красноярский государственный
медицинский университет», рабочий телефон: 8 (3912) 28-09-14, e-mail: kgmacnil@mail.ru
Михаил Юрьевич Котловский — кандидат медицинских наук, врач-терапевт ЦНИЛ
ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет», рабочий
телефон: 8 (3912) 28-09-14, e-mail: kgmacnil@mail.ru
Ольга Сергеевна Котловская — научный сотрудник, биолог ЦНИЛ ГБОУ ВПО
«Красноярский государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8
(3912)28-09-14, e-mail: csrl.ok@gmail.com
Дарья Александровна Кириченко — научный сотрудник, биолог ЦНИЛ ГБОУ ВПО
«Красноярский государственный медицинский университет», e-mail: astheno@mail.ru
Предупреждение
сердечно-сосудистой
патологии
существенно
зависит
от гиполипидемической терапии, включающей ингибиторы 3-гидрокси-3-метилглутарилкоэнзим А (ГМГ-КоА) редуктазы и ингибиторы абсорбции холестерина (ХС) — статины.
Эти препараты хорошо переносятся, но все же у некоторых пациентов могут быть
отмечены серьезные побочные эффекты, а у определенной части пациентов
гиполипидемическая терапия не эффективна [5]. Кроме того, данная группа препаратов
оказывает очень многогранное и в ряде случаев не до конца изученное влияние
на организм. Известно, что артериальная гипертензия (АГ) является фактором развития
ишемической болезни сердца (ИБС). В развитии АГ большое значение имеет работа
ренин-ангиотензиновой системы, активность которой зависит от наличия мутаций гена
ангиотензин-превращающего фермента. Ген АСЕ локализуется в 23-м локусе 17-й
хромосомы и содержит 26 экзонов. Для данного гена известны не менее 12-ти
полиморфизмов, три из которых находятся в кодирующей последовательности [1, 6].
Наиболее интересен полиморфизм типа вставка/отсутствие (insertion/deletion I/D),
расположенный в интроне 16-го гена АСЕ. Вставка размером 287 п.н. состоит из Аluповторов [3]. Этот полиморфизм не изменяет функцию фермента, но влияет на степень
экспрессии гена. Наличие D-аллеля ассоциировано с более высоким уровнем
циркулирующего АСЕ (от 14 до 50 %) и более высокой активностью тканевого фермента
[2, 4]. Таким образом, этиология заболевания может быть обусловлена участием
изучаемой мутации в патогенезе, а может носить иной характер.
Целью нашей работы была оценка эффекта симвагексала при лечении ИБС в зависимости
от наличия или отсутствия вклада мутации гена ACE в патогенез заболевания.
Материалы и методы. Исследуемая группа включает 60 пациентов больных хронической
формой ИБС, имеющих и не имеющих диагноз гипертонии, находящихся
на амбулаторном лечении симвагексалом (действующее вещество симвастатин) в дозе
40 мг в сутки на протяжении двух месяцев, также больные получали конкор
и кардиомагнил. Группы обследуемых находились в возрастном интервале от 45 до 64 лет.
Критерии исключения групп с ИБС и АГ: инфаркт миокарда, прогрессирующая
стенокардия, инсульт, тромбоэмболия легочной артерии менее чем за 6 месяцев
до обследования, стенокардия напряжения 3–4 функционального класса, тяжелые
нарушения функции печени, почек, острые и хронические заболевания в стадии
обострения.
Исследования липидного спектра сыворотки крови проводили энзиматическим
колориметрическим методом. Определяли липопротеины высокой (ЛПВП), низкой
(ЛПНП) и очень низкой плотности (ЛПОНП), триглицериды (ТГ), общий холестерол (ОХ)
и коэффициент атерогенности (КА). Материалом для исследования полиморфизмов
служили образцы ДНК, которые были получены методом фенольно-хлороформной
экстракции из 10 мл цельной венозной крови. Анализ SNP (однонуклеотидных
полиморфизмов генов) проводили методом минисеквенирования с последующей MALDITOF масс-спектрометрической детекцией. Работа проводилась в ЦНИЛ КрасГМУ г.
Красноярск совместно с НПФ «Литех», г. Москва. Статистическая обработка данных,
в том числе таблиц сопряжения, проводилась с использованием программного пакета
SPSS 18.0 (Statistical Package for the Social Sciences). Достоверность различий определяли
по параметрическому t-критерию Стьюдента с проверкой показателей на нормальность
распределения с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. Разница между группами
до и после лечения определяли по Т-критерию для зависимых выборок. Для оценки
степени взаимосвязи исследуемых величин использовали коэффициент корреляции
парных выборок. Различия считаем достоверными при р < 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. Отличий по возрасту и полу между
обследуемыми группами не было, так как в исследование брали тех же пациентов
до и после лечения симвагексалом. Все обследуемые группы имели нормальное
распределение. Полученные результаты показывают отсутствие изменений показателей
ЛПВП и ЛПОНП по всем генотипам (II, DI и DD) полиморфизма гена АСЕ между
группами до и после лечения симвагексалом (см. табл.).
Зависимость показателей липидного спектра от генотипов полиморфизма гена АСЕ
у пациентов до и после лечения симвагексалом
Исследуемые
показатели
II
ЛПВП,
ммоль/л
ЛПНП,
ммоль/л
ЛПОНП,
ммоль/л
ОХ,
ммоль/л
ТГ,
ммоль/л
КА
До лечения
Генотип АСЕ
ID
DD
II
После лечения
Генотип АСЕ
ID
1,52 ± 0,15 1,44 ± 0,05 1,42 ± 0,09 1,42 ± 0,09 1,34 ± 0,05
DD
1,34 ± 0,09
3,10 ± 0,39 3,49 ± 0,24 3,32 ± 0,22 2,61 ± 0,66 1,99 ± 0,11*** 1,93 ± 0,18***
0,56 ± 0,09 0,81 ± 0,09 0,75 ± 0,06 0,57 ± 0,07 0,69 ± 0,06
0,65 ± 0,06
5,18 ± 0,36 5,74 ± 0,27 5,48 ± 0,23 4,07 ± 0,19* 4,03 ± 0,13*** 3,90 ± 0,20***
1,23 ± 0,21 1,79 ± 0,19 1,65 ± 0,15 1,25 ± 0,16 1,52 ± 0,13
1,39 ± 0,14**
2,29 ± 0,43 2,52 ± 0,17 2,49 ± 0,21 1,71 ± 0,34 1,55 ± 0,09*** 1,55 ± 0,17***
Примечание: звездочкой обозначена достоверность изменений между группами больных
с одинаковым типом генотипа до и после лечения * — p ≤ 0,05; ** — p ≤ 0,01; *** — p ≤
0,001
Имеется снижение концентрации ТГ после лечения в группе с мутацией (р = 0,005).
В группе носителей мутантной гомозиготы по ТГ отмечается корреляция между группами
до и после лечения (к = 0,799, при р = 0,001). После лечения симвагексалом отмечается
снижение уровня ЛПНП и КА у пациентов с D-аллелем, т. е. среди носителей
генотипов DI и DD (р = 0,001, см. табл.). При этом между группами до и после лечения
имеется корреляция по ЛПНП (к = 0,422 при р = 0,016) для носителей гетерозиготы —
DI и (к = 0,489 при р = 0,029) для носителей мутантной гомозиготы — DD. Отмечается
корреляция и по КА для носителей мутантной гомозиготы (к = 0,493 при р = 0,027)
до и после лечения. После лечения статином концентрация ОХ сыворотки крови
снизилась среди носителей всех генотипов (р = 0,044, р = 0,001, р = 0,001, см. табл.).
Корреляция между группами до и после лечения по ХС имеется у носителей мутантного
аллеля (к = 0,464 при р = 0,008) для гетерозиготы — DI, (к = 0,446 при р = 0,049) для DDгомозиготы.
Таким образом, терапевтический эффект симвагексала по ТГЛ проявляется только
у носителей мутантной гомозиготы (DD), по ЛПНП и КА у носителей, имеющих аллель D,
по ОХ у носителей обеих аллелей I и D. Все это указывает на необходимость учета
полиморфизмов гена АСЕ при лечении статинами.
Выводы. Таким образом, терапевтический эффект симвагексала по показателям ОХ
не зависел от генотипа гена ACE и проявлялся у носителей обеих аллелей. Эффект же
симвагексала по показателям ТГ проявлялся только у носителей мутантной гомозиготы
(DD) полиморфизма гена ACE, а по ЛПНП и КА у носителей D-аллеля. Влияние
симвагексала на показатели ЛПВП и ЛПОНП не наблюдалось, и не было зависимости
от генотипов. Таким образом, полученные результаты указывают на необходимость
индивидуального учета полиморфизмов гена АСЕ при лечении симвагексалом.
Список литературы
1. Anti-inflammatory effects of atorvastatin: Modulation by the T-786C polymorphism
in the endothelial nitric oxide synthase gene / D. C. Souza-Costa [et al.] //
Atherosclerosis. — 2007. — Vol. 192, N 2. — P. 438–444.
2. Clifford C. P. Racial differences in the freduency of a restriction site polymorphism
of the angiotensin converting enzyme (ACE) gene / C. P. Clifford, D. J. R. Nuner //
Abstracts 16 th Sci. Meeting Jnternat. Soc. Hypertension. Hasgow, UK. — 1996. —
Abstract. 4 B, N 4. — P. 1598.
3. Villard E. Two putatiue functional variants at the angiotensin converting enzyme (ACE)
gene locus involvedvin the genetic determination of plasma ACE / E. Villard, L. Tiret,
A.M. Houot // Abstracts 16 th Sci. Meeting Jnternat. Soc. Hypertension. Hasgow, UK. —
1996. — Abstract. 4, N 2. — P. 0736.
4. Rigat B. PCR detection of the insertion / deletion polymorphism of the human
angiotensine converting enzyme gene (DCP 1) (dipeptidyl — carboxypeptidase 1) / B.
Rigat, C. Hubert, P. Corvol, F. Soubrier // Nucl. Acids. Res. — 1992. — Vol. 20. — P.
1433.
5. Angiotensin converting enzyme in the human heart. Effect of the deletion / insertion
polymorphism / A. H. Danser [et al.] // Circulation. — 1995. — N 92. — P. 1387–1388.
6. Rigat B. An insertion / deletion polymorphism of angiotensine 1 converting enzyme
accounting for half of the variance of the serum enzyme levels / B. Rigat, C. Hybert, F.
Alhenc Jelas // J. Clin. Invest. — 1990. — N 86. — P. 1343–1346.
DEPENDENCE OF THERAPEUTIC
EFFECT OF SIMVAHEXAL ON
GENOTYPES OF ANGIOTENSINCONVERTING-ENZYME GENE (ACE)
M.Y. Kotlovsky, O.S. Kotlovskaya, D.A. Kirichenko, Y.V. Kotlovsky
SBEI HPE «Krasnoyarsk State Medical University Minhealthsocdevelopment» (Krasnoyarsk c.)
The research results of therapeutic effect of simvahexal according to genotype of angiotensinconverting-enzyme are presented in article. Researches are carried out on group of patients with
the coronary disease, who have hypertonia or not at the age of 45-64 years. Therapeutic effect
was estimated according to fats indicators of blood serum before treatment. According to results
of research the authentic depression of general cholesterin after simvahexal treatment regardless
of genotype of polymorphism of ACE gene was observed. However the indicators of
lipoproteins of low density and atherogenicity factor changed only in group of people with
mutant alleles, i.e. genotypes of ID and DD. Authentic depression of triglycerides level was
exclusive at patients with DD genotype (R = 0,005).
Keywords: polymorphism, angiotensin-converting-enzyme, coronary disease, hypertonia,
simvahexal.
About authors:
Yury Vasilievich Kotlovsky — doctor of medical sciences, professor, corresponding member of
the Russian Academy of Natural Sciences, head of CSRL at SBEI HPE «Krasnoyarsk state
medical university», office number: 8 (3912) 28-09-14, e-mail: kgmacnil@mail.ru
Mikhail Yurievich Kotlovsky — candidate of medical sciences, therapist of CSRL at SBEI
HPE «Krasnoyarsk state medical university», office number: 8 (3912) 28-09-14, e-mail:
kgmacnil@mail.ru
Olga Sergeevna Kotlovskaya — research scientist, biologist of CSRL at SBEI HPE
«Krasnoyarsk state medical university», office number: 8 (3912) 28-09-14, e-mail:
csrl.ok@gmail.com
Darya Aleksandrovna Kirichenko — research scientist, biologist of CSRL at SBEI HPE
«Krasnoyarsk state medical university», an e-mail: astheno@mail.ru
List of the Literature:
1. Anti-inflammatory effects of atorvastatin: Modulation by the T-786C polymorphism in
the endothelial nitric oxide synthase gene / D. C. Souza-Costa [et al.] // Atherosclerosis. –
2007. – Vol. 192, N 2. – P. 438–444.
2. Clifford C. P. Racial differences in the freduency of a restriction site polymorphism of
the angiotensin converting enzyme (ACE) gene / C. P. Clifford, D. J. R. Nuner //
Abstracts 16 th Sci. Meeting Jnternat. Soc. Hypertension. Hasgow, UK. – 1996. –
Abstract. 4 B, N 4. – P. 1598.
3. Villard E. Two putatiue functional variants at the angiotensin converting enzyme (ACE)
gene locus involvedvin the genetic determination of plasma ACE / E. Villard, L. Tiret,
A.M. Houot // Abstracts 16 th Sci. Meeting Jnternat. Soc. Hypertension. Hasgow, UK. –
1996. – Abstract. 4, N 2. – P. 0736.
4. Rigat B. PCR detection of the insertion / deletion polymorphism of the human
angiotensine converting enzyme gene (DCP 1) (dipeptidyl – carboxypeptidase 1) / B.
Rigat, C. Hubert, P. Corvol, F. Soubrier // Nucl. Acids. Res. – 1992. – Vol. 20. – P. 1433.
5. Angiotensin converting enzyme in the human heart. Effect of the deletion / insertion
polymorphism / A. H. Danser [et al.] // Circulation. – 1995. – N 92. – P. 1387–1388.
6. Rigat B. An insertion / deletion polymorphism of angiotensine 1 converting enzyme
accounting for half of the variance of the serum enzyme levels / B. Rigat, C. Hybert, F.
Alhenc Jelas // J. Clin. Invest. – 1990. – N 86. – P. 1343–1346.