R-6505 ИХТ «Кардио Тропо Тест

28 Pierre Köenig St., Talpiot Industrial Area
P.O.B 53231 Jerusalem 91531 ISRAEL
Phone: 972-2-6781861; Fax : 972-2-6781852
e-mail: info@novamed.co.il
cTnI (Troponin I) Tест
ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ОДНОЭТАПНОГО ЭКСПРЕСС-ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРДИАЛЬНОГО ТРОПОНИНА I (cTnI) В
ОБРАЗЦАХ С МИНИМАЛЬНЫМ ОБЪЁМОМ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ, ПЛАЗМЫ ИЛИ СЫВОРОТКИ ЧЕЛОВЕКА
Номер Каталога: R-6505 (20 определений).
Инструкция по эксплуатации
НАЗНАЧЕНИЕ
cTnI Tест представляет собой бесприборный иммунохроматографический экспресс-анализ проб цельной крови,
плазмы и сыворотки человека для качественного определения
кардиального Тропонина I в минимальных объёмах цельной
крови, плазмы и сыворотки человека
с целью ранней
диагностики острого инфаркта миокарда (ОИМ). Тест
особенно удобен для использования в домашних условиях с
целью скорейшего определения нарушений сердечной
деятельности у людей с высоким риском заболевания.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ И ОБЪЯСНЕНИЕ
Тропониновый комплекс состоит из трех субъединиц:
тропонин T (TnT), тропонин C (TnC) и тропонин I (TnI).
Каждая из трех субъединиц имеет свою определенную
функцию: тропонин C связывает ионы кальция Ca2+,
тропонин T связывает тропомиозин, а тропонин I выступает в
роли субъединицы-ингибитора. Тропониновый комплекс
вместе с тропомиозином участвуют в регулировании Са2+чувствительной АТФ-азной активности актомиозина в
поперечно-полосатой мышечной ткани (скелетной и
сердечной)1. Тропонин С сердечной мышцы идентичен
тропонину С скелетной мыщцы, а кардиальные изоформы
тропонинов Т и I отличаются от скелетных изоформ
особенностями аминокислотной композиции, что делает их
иммунологически
распознаваемыми специфическими
антителами 4-6. Таким образом, даже при обнаружении в крови
скелетных изоформ TnI вызванного обширным физическим
стрессом или повреждением скелетной мускулатуры, уровень
кардиального cTnI в крови может быть определен с высокой
степенью
точности
и
аккуратностью
с
помощью
специфических к нему антител7-8.Последние исследования
показали целесообразность определения сывороточных
уровней различных изоформ тропонина I.2 Кардиальный
Тропонин I (сTnI) поступает в кровь при ОИМ, главным
образом, в виде связанного двойного (I-C) и тройного
комплексов (I-T-C) и, в меньшей степени, в свободной форме3.
У пациентов с ОИМ кардиальный сTnI поступает в кровь
через 4-6 часов после появления первых симптомов и
достигает пика через 12-24 часа. Ранний выброс кардиального
сTnI схож с выбросом креатинкиназы-миоглобина (СК-МВ),
но тогда как уровнь CK-MB возвращается к нормальным
значениям через 72 часа, уровень кардиального сTnI, несмотря
на его относительную нестабильность11,
остается
повышенным в течение 6-10 дней9,10, что дает возможность
для выявления нарушений в работе сердца в течение более
длительного интервала времени.
ПРИНЦИП
cTnI Tест представлет собой вмонтированную в тестовый
прибор (кассету) полоску нитроцеллюлозной мембраны с
фиксированными на ней специфическими моноклональными
антителами к кардиальному сTnI конъюгированными с
коллоидальными частицами золота. Для выполнения анализа
образец цельной крови, сыворотки или плазмы человека
вводится в окошко для принятия пробы. Большая часть клеток
крови, присутствующих в образце, задерживается специальным
фильтром, установленным в начале мембраны, позволяя только
плазме мигрировать далее вдоль мембраны. Во время
капиллярного движения вдоль мембраны, кардиальный сTnI
находящийся в сыворотке или плазме, связывается с
моноклональными
мышиными
антителами
к
сTnI
конъюгированными с коллоидальными
частицами золота,
формируя комплекс антиген-антитело. Образованный комплекс
мигрируя далее по мембране реагирует с другими
моноклональными анти-антителами к кардиальному сTnI,
зафиксированными в реагирующей области мембраны образуя в
тестовой зоне (T) мембраны розово-сиреневую полоску, что
указывает на положительный результат анализа. Интенсивность
цвета полоски тем выше, чем выше концентрация кардиального
сTnI в пробе. Оставшийся конъюгат продолжает мигрировать по
направлению к контрольной зоне (C) реагирующей области
мембраны, где захватывается поликлональными антителами,
также формируя розово-сиреневую полоску, указывающую на
правильность исполнения анализа.
СОСТАВ НАБОРА
Каждый набор cTnI Tест укомплектован:
20 устройств для тестирования cTnI Tест, упакованными в
индивидуальные алюминиевые пакетики и предназначенными
для 20 определений;
1 бутылочка содержащая 3 мл буфера;
1 инструкция к применению.
ХРАНЕНИЕ И УСТОЙЧИВОСТЬ
Набор cTnI Tест можно хранить при комнатной температуре
или в холодильнике (при 2-30°C). При правильном хранении
набор реагентов cTnI Tест может быть использован до конца
срока годности, отпечатанного на упаковке. До использования
устройство для тестирования cTnI Tест должно храниться в
индивидуальной упаковке. НЕ ЗАМОРАЖИВАТЬ.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Только для диагностики
“in vitro” и только для
профессионального использования.
2. Не использовать по истечении срока годности.
3 До использования устройство для тестирования должно
храниться в индивидуальной упаковке.
4. Не использовать, если упаковка повреждена.
5. Во время проведения анализа, быть в защитной одежде,
такой как лабораторные халаты, одноразовые перчатки и очки.
6. Не перемешивать реагенты из наборов разных серий.
7.Условия выполнения анализа (время инкубации, температура
пробы и др.), отличные от рекомендуемых, могут вызвать
ошибочные результаты.
8. Использовать свежевзятые пробы (не более 4 часов после
забора) в случаях тестирования цельной крови.
ОГРАНИЧЕНИЯ
1. Набор cTnI Tест предназначен только для диагностики “in
vitro”.
2. Набор cTnI Tест следует использовать для определения
кардиального сТnI только в образцах цельной крови, сыворотки
или плазмы.
3. Результаты полученные с помощью набора cTnI Tест
указывают только на присутствиe кардиального сТnI в образце.
Этим
качественным
тестом
нельзя
определить
ни
количественное значение кардиального сТnI в образцах, ни
динамику изменения концентрации кардиального сТnI.
4. Полученные результаты не следует использовать в качестве
единственного критерия для диагностики ОИМ. Как в случае со
всеми диагностическими тестами, полученные результаты
набора cTnI Tест должны оцениваться совместно с другой
клинической информацией, имеющейся у врача.
5. Набор cTnI Tест не может обнаружить кардиальный сТnI в
образце цельной крови, сыворотки или плазмы, если его
концентрация меньше чем 1.0 нг/мл. В любом случае
отрицательный результат не исключает возможность ОИМ.
6. Задержка считывания результатов анализа (через 20 минут
после выполнения теста) может стать причиной ложноположительных результатов.
7. Содержание необычно высоких титров гетерофильных
антител или ревматоидного фактора (РФ) в некоторых образцах,
может отразиться на ожидаемых результатах. Даже если
результат
анализа
положительный,
то
последующий
клинический анализ должен рассматриваться совместно с
другой клинической информацией имеющейся у врача.
ЗАБОР
ОБРАЗЦА И РАБОТА С ИССЛЕДУЕМЫМ
МАТЕРИАЛОМ.
cTnI Tест может работать с цельной кровью взятой из пальца
или вены, сывороткой или плазмой обработанными цитратом,
EDTA или гепарином.
Забор указанных проб производится согласно стандартной
лабораторной процедуре с соблюдением правил асептики и в
условиях предотвращающих гемолиз.
Пробы цельной крови должны быть тестированны
немедленно (не более 4 часов после взятия).
При необходимости тестирования пробы в течение 48 часов
после забора пробы, следует заморозить плазму и хранить ее
при температуре -20°С.
Перед тестированием подобная проба должна быть полностью
разморожена, тщательно перемешана и доведена до комнатной
температуры. Повторное замораживание и размораживание
проб нежелательно.
ТЕХНИКА ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА.
Устройство для тестирования cTnI Tест и образец цельной
крови, сыворотки или плазмы пациента следует довести до
комнатной температуры (15-30°C) перед выполнением анализа.
Вскройте индивидуальную упаковку и извлеките устройство для
тестирования cTnI Tест из оберточной фольги. Используйте
разгерметизированное устройство для тестирования cTnI Tест
как можно быстрее.
Поместите устройство для тестирования cTnI Tест на чистую
ровную поверхность.
ПРОЦЕДУРА
Цельная кровь
Удерживая палец или пипетку вертикально позвольте двум
каплям цельной крови (приблизительно 60 мкл упасть в центр
отверстия для образца (S) устройства для тестирования cTnI
Tест .
Cывороткa или плазмa
Удерживая пипетку вертикально позвольте одной капле
сыворотки или плазмы (приблизительно 30 мкл) упасть в
центр отверстия для образца (S) устройства для тестирования
cTnI Tест .
Через 5-10 секунд после полного впитывания образца в
мембрану, добавить в центр отверстия для образца (S) 1 каплю
буфера (приблизительно 55 мкл) из бутылочки прилагаемой к
набору cTnI Tест .
Дождитесь появления цветных полосoк в реагирующей
области устройства для тестирования cTnI Tест . Читать
результаты в течение 20 минут. Явно положительный
результат может быть выражен раньше. Не интерпретировать
результаты через 20 минут после выполнения теста.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
(пожалуйста, см. рисунок, расположенный ниже)
ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ: Видны две розово-сиреневые полоски
в контрольной (C) и тестовой (T) зонах тестового окна.
ВНИМАНИЕ: Интенсивность цвета полоски в тестовой (T)
зоне тестового окна отражает концентрацию кардиального cTnI
присутствующего в образце. Поэтому даже цветовая тень в
тестовой ("T") зоне свидетельствует о положительном
результате.
ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ:
Контрольная
розово-сиреневая полоска
появилась в
контрольной зоне (C) тестового окна, но цветная полоска в
тестовой (T) зоне тестового окна отсутствует.
НЕВЕРНЫЙ:
Результаты теста неверны, если за 20 минут контрольная
полоска так и не появилась. Недостаточное количество образца
или неправильное исполнение процедуры теста служат
основными причинами отсутствия контрольной полоски.
Проанализируйте процедуру и повторите тест
с
использованием нового устройства для тестирования CTnI Tест
. В случае если проблема не решается заменой устройства для
тестирования на новое, прекратите использование данной
серии набора cTnI Tест и обратитесь к Вашему местному
дистрибьютеру.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА.
Каждое устройство для тестирования CTnI Tест содержит
внутреннее средство для контроля процедуры. Окрашенная
полоска, появляющаяся в контрольной зоне (С) тестового окна
служит
внутренним
контролем
за
процедурой,
подтверждающим
достаточный
объем
образца,
удовлетворительное мембранное затекание и правильную
технику выполнения процедур анализа.
Контрольные
стандарты не входят в набор cTnI Tест , однако, рекомендуется
иногда проводить положительное и отрицательное контрольное
тестирование в качестве хорошей лабораторной практики для
подтверждения правильности выполнения процедуры теста.
ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА.
А. Клиническое сравнение.
В ходе клинического исследования, проведенного в одном из
ведущих медицинских центров Израиля, по сравнению
результатов иммунохроматографического экспресс-анализа cTnI
Tест
для качественного определения кардиального cTnI и
стандартного
для
данного
центра
автоматического
биохимического метода для количественного определения cTnI
в цельной крови, плазме и сыворотке больных подозрительных
на ОМИ, набор cTnI Tест правильно продиагностировал ОИМ в
92.4% случаев (в 49 из 53 вовлеченных в исследование случаев
ОИМ) в течение первых 4 часов госпитализации.
Специфичность набора cTnI Tест при ранней диагностике
острого инфаркта миокарда (ОИМ) составила 97%.
В Таблице 1 приведены результаты полученные от 71
пациентов, поступивших в отделение интенсивной терапии
сердечно-сосудистых заболеваний одного из израильских
медицинских центров и 20 здоровых добровольцев.
9. H. A. Katus, A. Remppis, T. Scheffold, K. W. Diederich, W.
Kuebler, Am J Cardiol 67, 1360 (Jun 15, 1991).
10. .A. S. Jaffe et al., Clin Chem 42, 1770 (Nov, 1996).
11. H. A. Katus et al., J Mol Cell Cardiol 21, 1349 (Dec, 1989).
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор ООО «ГЕМ»
________________С.А. Гольдберг
«17» сентября 2010 г.
Таблицa 1: Результаты сравнения показателей
чувствительности cTnI Tест (Novamed, Israel), рутинного
больничного иммунологического анализа на cTnI (Abbott
AxSYM ADV TnI) и конкурирующего коммерческого
иммунохроматографического теста на cTnI (Vedalab, France)
Методы определения
cTnI
Показатель чувствительности (%)
по
при
*Общая
истечении
поступлении
выявляемость
4 часов
cTnI Tест (Novamed,
Israel)
Больничный
иммунологический
анализ на cTnI (Abbott
AxSYM ADV TnI)
Коммерческий
иммунохроматографический тест на
cTnI(Vedalab, France)
82.7%
86.8%
92.4%
86.5%
98%
98.1%
24%
32.7%
32.7%
* Общая выявляемость (%) - вероятность обнаружения в одном
из двух образцов, взятых непосредственно при поступлении
больного в отделение, или по истечении 4 часов
госпитализации.
Специфичность cTnI Tест (Novamed, Israel) к острому инфаркту
миокарда: ~ 97%. Диагноз ОИМ в данном исследовании
ставился при определении концентрации cTnI выше, чем
0.4ng/ml (по данным измерений системы Abbott AxSym ADV
TnI). Порог чувствительности cTnI Tест - 1ng/ml. При этом, 6
из 52 больных (11,5%) показали уровень cTnI ниже порога
чувствительности теста при поступлении и только 1 из 53 (1,8%)
пациентов показал уровень cTnI ниже порога чувствительности
теста по истечении 4 часов.
Б. Перекрестное реагирование.
Сыворотки содержащие известные количества скелетной
изоформы Tропонина I (до 5,000 нг/мл) были тестированы
набором cTnI Tест для ранней диагностики ОИМ. Не было
обнаружено перекрестной реакции со скелетной изоформой
Тропонина I, что говорит о высокой степени специфичности
набора cTnI Tест к кардиальному cTnI в цельной крови,
сыворотке или плазме.
ЛИТЕРАТУРА:
1. S. Takeda, A. Yamashita, K. Maeda, Y. Maeda, Nature 424,
35 (Jul 3, 2003).
2. A. G. Katrukha et al., Clin Chem 43, 1379 (Aug, 1997).
3. L. Babuin, A. S. Jaffe, CMAJ 173, 1191 (Nov 8, 2005).
4. J. M. Wilkinson, R. J. Grand, Nature 271, 31 (Jan 5, 1978).
5. P. Cummins, S. V. Perry, Biochem J 171, 251 (Apr 1, 1978).
6. W. J. Vallins et al., FEBS Lett 270, 57 (Sep 17, 1990).
7. B. Cummins, M. L. Auckland, P. Cummins, Am Heart J 113,
1333 (Jun, 1987).
8. C. Larue et al., Clin Chem 39, 972 (Jun, 1993).
Представительство в РФ: ООО «ГЕМ»
г. Москва, Новый Зыковский проезд, д. 4А
+7 (495) 787-04-32 www.hemltd.ru
IFU-Troponin I-R-6505-HEM-russ-v.6-03.07.12