BBL GasPak Plus Anaerobic System Envelopes with Palladium

 BBL GasPak Plus Anaerobic System Envelopes
with Palladium Catalyst
8801151
2007/08
Русский
Патент США № 4 976 931

НАЗНАЧЕНИЕ
BBL GasPak Plus — усовершенствованные конверты одноразового применения для генерирования водорода и диоксида
углерода с пакетом катализатора, позволяющие создавать в сосудах BBL GasPak атмосферу, необходимую для
поддержания первичного выделения и культивирования анаэробных бактерий.
КРАТКИЙ ОБЗОР И ОПИСАНИЕ
До середины 1960-х годов рутинное выделение и культивирование анаэробных микроорганизмов из клинических и других
образцов было затруднено вследствие необходимости использования трудоемких методик, необходимых для
осуществления анаэробиоза в анаэробных сосудах.
1
В 1965 г. Брюер (Brewer) и Алгайер (Allgeier) разработали конверт для генерирования водорода одноразового применения ,
модификация которого позволила также генерировать диоксид углерода.
Эффективность анаэробной бактериологии в качестве стандартной лабораторной методики была значительно повышена,
когда в 1966 г. Брюер и Алгайер разработали автономную анаэробную систему, которая не требовала использования
баллонов с газом, вакуумных насосов и прочего внешнего оборудования, а в качестве дополнительной меры защиты
2
включала внутренний катализатор, не требующий внешнего электрического подключения .
Таблетки катализатора GasPak Plus находятся в пакете на конверте, что позволяет не использовать камеры для таблеток
катализатора в крышках сосудов. Конверт GasPak Plus также имеет уникальную возможность простого вскрытия, что
обеспечивает легкий доступ к водяному каналу конверта.
ПРИНЦИПЫ МЕТОДИКИ
Конверт GasPak Plus активируется путем добавления воды, которая проходит через ряд каналов к тампону из
фильтровальной бумаги. Тампон подает воду к таблеткам для генерирования газа в камере для таблеток.
Водород, выделяемый таблеткой борогидрида натрия после добавления воды, связывается с кислородом в сосуде в
присутствии палладиевого катализатора с образованием воды.
Таблетка бикарбоната натрия с лимонной кислотой позволяет создать концентрацию диоксида углерода примерно от 4 до
10 % по данным газожидкостной хроматографии через 1 час после активации. Диоксид углерода требуется для стимуляции
роста анаэробных микроорганизмов, требующих атмосферы, обогащенной CO2 (или лучше растущих в такой атмосфере).
Тампон из фильтровальной бумаги в конверте GasPak Plus замедляет поступление воды в камеру для таблеток, позволяя
закрыть крышку сосуда GasPak до выделения значительных объемов газов.
Эффективность правильно работающей системы GasPak 100, активированной с конвертом GasPak, описана Сейпом (Seip)
3
и Эвансом (Evans) .
Каждый конверт GasPak Plus содержит пакет с катализатором, закрепленный на конверте, что позволяет избежать
проблем, связанных с инактивацией катализатора сероводородом и другими газами, выделяемыми некоторыми
анаэробными микроорганизмами.
РЕАГЕНТЫ
Каждый конверт GasPak для генерирования водорода и диоксида углерода одноразового применения содержит
следующие компоненты.
Одна таблетка борогидрида натрия,
Одна таблетка бикарбоната натрия с лимонной кислотой,
Один кусок фильтровальной бумаги,
Пакет с палладиевым катализатором.
Предупреждения и меры предосторожности
Для диагностики in vitro.
Может вызывать рак при вдыхании.
При использовании пакетов GasPak Plus для генерирования водорода и диоксида углерода необходимо соблюдать все
обычные меры предосторожности, используемые при работе с газообразным водородом.
Водород — легковоспламеняющийся газ. Смесь газообразного водорода с кислородом или воздухом в закрытом
пространстве взрывается при воспламенении от искры, пламени или другого источника воспламенения. Частота
отмеченных случаев воспламенения газообразного водорода составляет примерно 2 (два) случая на миллион конвертов.
Не используйте конверты с признаками преждевременной активации, при наличии которых конверты могут выглядеть
надутыми.
Катализатор
1. Важно. Не допускайте контакта катализатора с водой. Необходимо осторожно добавить 10 мл воды.
2. ВО ВСЕХ СЛУЧАЯХ НЕОБХОДИМО ИСПОЛЬЗОВАТЬ СООТВЕТСТВУЮЩИЙ ШТАТИВ СИСТЕМЫ GasPak.
3. Не следует использовать конверты GasPak с потертостями или разрезами на оболочке пакета с катализатором.
1
4.
После использования следует открыть сосуд и дать проветриться примерно 15 секунд перед извлечением штатива и
его содержимого для уравновешивания среды с атмосферой.
Конверты BBL GasPak для генерирования водорода и диоксида углерода предназначены для использования только в
правильно обслуживаемых и используемых системах GasPak 100 и GasPak 150. Использование конвертов в других
системах может привести к недостоверным результатам и даже может быть опасным для персонала лаборатории. Для
эффективного и безопасного использования необходимо тщательно соблюдать инструкции, приложенные к каждой системе.
В системе GasPak 100 используется один конверт; в каждой системе GasPak 150 используются три конверта. Никогда не
используйте одновременно конверты разных систем в одном сосуде (например, конверты с внутренним катализатором и
без него).
ВСЕ НЕРАБОТАЮЩИЕ КОНВЕРТЫ НЕОБХОДИМО ВСКРЫТЬ И ПРОВЕРИТЬ НА НАЛИЧИЕ СОХРАНИВШИХСЯ ИЛИ
ЧАСТИЧНО СОХРАНИВШИХСЯ ТАБЛЕТОК. ВСЕ ОСТАВШИЕСЯ ТАБЛЕТКИ СЛЕДУЕТ ПОМЕСТИТЬ В ПОДХОДЯЩИЙ
СТОК И РАСТВОРИТЬ В ПРОТОЧНОЙ ВОДЕ. НЕ УТИЛИЗИРУЙТЕ НЕВСКРЫТЫЕ КОНВЕРТЫ.
Условия хранения. После получения храните конверты в сухом помещении при температуре от 20 до 30 °C. Избегайте
хранения в непосредственной близости от лабораторных химикатов.
Конверты GasPak Plus готовы к использованию и должны быть активированы в соответствии с инструкциями,
приведенными ниже и на конвертах. Дата окончания срока годности указана для неповрежденных закрытых конвертов.
Открывайте непосредственно перед использованием.
Разложение продукта. Не используйте, если на конвертах или пакетах с катализатором имеются признаки проколов,
разрушений, деформаций, вздутия, воздействия влаги или другие признаки повреждения.
МЕТОДИКА
Поставляемые материалы. Конверты GasPak Plus Anaerobic System Envelopes with Palladium Catalyst (номер по каталогу
271041: с индикаторами).
Необходимые, но не поставляемые материалы
1. Питательные среды в чашках Петри, пробирках, флаконах или других подходящих сосудах,
2. Термостат (35 °C),
3. Система GasPak 100, номера по каталогу 260626, 260627 или
Система GasPak 150, номера по каталогу 260628, 260629,
4. Индикатор GasPak Dry Anaerobic Indicator, номер по каталогу 271051, если не поставляется с позицией 271041,
5. Пипетка вместимостью 10 мл или шприц.
Методика тестирования
Анаэробные системы GasPak 100 и GasPak 150
1. Поместите засеянные чашки или пробирки (в держателе пробирок GasPak) в штатив GasPak 100 или GasPak 150.
Вскройте угол конверта вдоль пунктирной линии и поместите конверт в зажим штатива пакетом с катализатором
наружу. В системе GasPak 100 используется один конверт; в каждой системе GasPak 150 используются три конверта.
Не мните, не сгибайте и не раздавливайте конверт.
2. Откройте сухой анаэробный индикатор GasPak и поместите его в малый зажим штатива GasPak. Поместите штатив в
сосуд GasPak.
3. Добавьте 10 мл водопроводной, дистиллированной или деионизированной воды через открытый (отрезанный) угол
конверта. Используйте пипетку или шприц, вставляя в угол только наконечник. Никогда не вводите в конверт какиелибо посторонние предметы.
4. Закройте сосуд GasPak сразу после активации конверта и затяните от руки защелку крышки, как описано в
инструкциях на листке-вкладыше в упаковке используемой системы. Инкубируйте в условиях, необходимых для роста
культивируемого микроорганизма, но не превышая температуру 42 °C.
5. После использования откройте сосуд, чтобы проветрить его около 15 секунд перед извлечением штатива с
содержимым. Не трогайте конверт GasPak Plus до извлечения штатива из сосуда.
ПРИМЕЧАНИЕ.
Так как конверт GasPak Plus снабжен встроенным катализатором, использование таблеток
палладиевого катализатора в реакционных камерах для катализатора в крышке сосуда GasPak не
требуется.
Контроль качества
1. Каждую систему GasPak необходимо периодически проверять на возможность обеспечивать требуемые условия для
роста анаэробных бактерий.
2. Если образование конденсата не наблюдается через 60 минут после активации конверта GasPak, реакцию следует
прекратить путем открывания сосуда. Проверьте состояние крышки и уплотнительного кольца, как описано ниже.
3. Приведенный ниже контрольный перечень для контроля качества позволяет убедиться в надлежащей эффективности.
а) После активации система GasPak с конвертом GasPak Plus должна всегда оставаться в вертикальном положении.
б) Конверт GasPak Plus для генерирования водорода и диоксида углерода одноразового применения должен
находиться в вертикальном положении с отрезанным краем вдоль пунктирной линии в верхнем правом углу, как
указано на конверте. Таблетки для генерирования газа должны находиться в конверте, не должны быть смещены
или раздавлены, а пленочные каналы и реакционные камеры не должны быть раздавлены или искривлены и
должны обеспечивать ввод 10 мл воды. Неправильное положение конверта или использование поврежденного
конверта может привести к неравномерной реакции. Повреждение каналов, регулирующих скорость реакции,
может привести к разбрызгиванию и выходу через край содержимого конверта и недостаточному количеству газа.
2
Конверт должен быть размещен в сосуде так, чтобы катализатор был направлен наружу.
в) Пластмассовую крышку и защелку следует проверить на наличие трещин, сколов, разрушенных канавок
уплотнительного кольца и других повреждений. Большинство трещин (мелких трещин или линий напряжения)
образуется в результате длительного использования и чрезмерных усилий при затягивании защелок на крышках.
Первоначально трещины могут проявляться в виде тонких черных линий возле центра крышки или вдоль верхних
кромок защелки GasPak 100 возле винта. Крышки и защелки с такими тонкими черными линиями не следует
использовать.
г) Уплотнительное кольцо следует проверить на наличие трещин, вмятин, загрязнений и неправильной посадки в
канавке для уплотнительного кольца. Проверьте стенку канавки уплотнительного кольца на наличие сколов и
трещин. Уплотнительное кольцо должно быть эластичным, чистым и должно плотно удерживаться в канавке
уплотнительного кольца для надлежащей работы системы. При необходимости замените уплотнительное кольцо.
Следуйте требованиям контроля качества в соответствии с применимым местным, региональным и (или) федеральным
законодательством, требованиями аккредитации и методиками контроля качества, принятыми в лаборатории. Для
получения информации о надлежащих методиках контроля качества пользователям рекомендуется ознакомиться с
документацией Института клинических и лабораторных стандартов США (CLSI, ранее NCCLS) и положениями Закона о
совершенствовании работы клинических лабораторий (CLIA).
РЕЗУЛЬТАТЫ
После инкубации в течение 2 часов при температуре 35 °C содержание диоксида углерода должно быть выше 4, но ниже
10 %. Сухой анаэробный индикатор GasPak с метиленовым синим теряет окраску в течение 9 часов при 35 °C.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ
3
В исследовании Сейпа (Seip) и Эванса (Evans) содержание кислорода и диоксида углерода, а также окислительновосстановительный потенциал (Eh среды в чашках) контролировали при помощи конвертов BBL GasPak для
генерирования водорода и диоксида углерода одноразового применения. Через шестьдесят минут после активации
концентрация диоксида углерода составляла от 4,6 до 6,5 %, а концентрация кислорода составляла от 0,2 до 0,7 %. Через
сто минут после активации концентрация кислорода снижалась до значения менее 0,2 %.
НАЛИЧИЕ
№ по каталогу
271040
271041
Описание
BBL GasPak Plus Anaerobic System Envelopes with Palladium Catalyst, Disposable H2 + CO2 Generator
Envelopes, 10 конвертов в упаковке.
BBL GasPak Plus Anaerobic System Envelopes with Palladium Catalyst, Disposable H2 + CO2 Generator
Envelopes, 100 конвертов в упаковке (также поставляется 100 индикаторов GasPak Dry Anaerobic
Indicators).
СПРАВОЧНЫЕ МАТЕРИАЛЫ
1.
Brewer, J.H., and D.L. Allgeier. 1965. Disposable hydrogen generator. Science 147:1033-1034.
2.
Brewer, J.H., and D.L. Allgeier. 1966. Safe self-contained carbon dioxide-hydrogen anaerobic system. Appl. Microbiol. 14:985988.
3.
Seip, W.F., and G.L. Evans. 1980. Atmospheric analysis and redox potentials of culture media in the GasPak system. J. Clin.
Microbiol. 11:226-233.
3
4