БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ 2. Кокряков, В.Н. Очерки о врождённом иммунитете / В.Н. Ко кряков. СПб.: Наука, 2006. 261 с. 3. Бухарин, О.В. Антимикробный белок тромбоцитов / О.В. Бу харин, В.А. Черешнев, К.Г. Сулейманов. Екатеринбург, 2000. 200 с. 4. Effects of chicken intestinal antimicrobial peptides on humoral immunity of chickens and antibody titres after vaccination with infectious bursal disease virus vaccine in chicken / Yurong Y., Yibao J., Ruiping S. et al. // Z. Arch. Anim. Nutr. 2006. No. 60(5). Р. 427–435. 5. Бухарин, О.В. Природа и биологическая роль тромбоци тарного катионного белка / О.В. Бухарин, К.Г. Сулейманов // Успехи современной биологии. 1997. № 3. С. 10–15. чески синтезированных гомологов этих соедине ний. Последние могли бы найти применение в медицине и ветеринарии не только в качестве антимикробных средств, но и в качестве имму номодулирующих и даже химиотерапевтических препаратов. Литература 1. Jenssen, H. Peptide antimicrobial agents / H. Jenssen, P. Hamill, R.E.W. Hancock // Clinical Microbiology Reviews. 2006. Vol. 19. No 3. P. 491–511. Видовой состав и биологические свойства грибов рода Candida, выделенных из разных биотопов тела человека О.А. Капустина, Оренбургский ГАУ; Л.Е. Логачева, Орен бургская ЦРБ; О. Л. Карташова, д.биол.н., Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН Грибы рода Candida являются уникальными микроорганизмами, имеющими огромный диа пазон адаптационных возможностей, позволяю щих им существовать как в различных биотопах организма хозяина, так и во внешней среде. Кроме того, грибы рода Candida регистрируются как этиопатогены при различных местных и ге нерализованных процессах [7]. Несмотря на то, что грибам и вызываемым ими инфекциям по священо большое количество работ, весьма про тиворечивы сведения о биологических свойствах изолятов, выделенных из разных биотопов орга низма человека при патологии. В настоящее время обоснована настоятельная необходимость проведения постоянных исследо ваний этиологической структуры микозов и рас пространение устойчивости среди их возбудите лей к антимикотикам [5]. Все вышеизложенное и определило цель нашей работы – изучение видового состава и биологических свойств гри бов рода Candida, выделенных из разных биото пов тела человека. Материалы и методы. Материалом для иссле дования послужили 127 штаммов дрожжеподоб ных грибов рода Candida, полученных из лабора тории дисбиозов ИКиВС УрО РАН и бактерио логической лаборатории ЦРБ Оренбургского района. 31 штамм выделен из фекалий лиц с дисбиозом кишечника, 47 штаммов из мокроты при воспалительных заболеваниях верхних и нижних дыхательных путей, 49 штаммов из реп родуктивного тракта женщин при воспалитель ных заболеваниях. Выделение и идентификацию грибов проводили по Р.Н. Ребровой [6]. Для ха рактеристики биологических свойств у выделен ных микроорганизмов определяли способность к инактивации лизоцима (АЛА) по методике О.В. Бухарина с соавтором [3], антиоксидант ную активность [9], фосфолипазную активность [2], гемолитическую, каталазную и протеолити ческую активности по М.О. Биргеру [1]. Чув ствительность к флуконазолу, итраконазолу, кетоконазолу, амфотерицину В, нистатину, клот римазолу определяли методом диффузии в агар с помощью бумажных дисков. Достоверность по лученных различий оценивали с помощью кри терия Стьюдента. Результаты исследований. Первоначально был изучен видовой состав выделенных микроорга низмов (рис. 1). Оказалось, что наиболее часто из всех биото пов выделялась C. albicans, которая регистриро валась в кишечнике в 69,4% случаев, репродук тивном тракте – в 75% и дыхательной системе – в 88% случаев; C. glabrata выделяли в 5,5; 18,8; 6,0% случаев соответственно; C. tropicalis и C. kefyr выделяли только из кишечника (в 13,9 и 8,3% соответственно) и дыхательной системы (2,0% и 4,0% соответственно); тогда как C. krusei – из кишечника (2,9%) и репродуктивного трак та (6,2%). Изучение факторов патогенности у выделен ных штаммов грибов показало отсутствие у них гемолитической и протеолитической активнос ти, а фосфолипазная активность была характер на лишь для 49,0% штаммов C. albicans. Впервые в данной работе у дрожжеподобных грибов рода Candida определена антиоксидант ная активность (способность инактивировать свободные радикалы), которая обусловлена на личием в клетке таких ферментов, как каталаза, супероксиддисмутаза, глутатионпероксидаза и других, обеспечивающих её защиту от свободно радикальных реакций. Все исследуемые штам мы продуцировали каталазу и обладали антиок сидантной активностью (АОА), причем наибо 179 БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ 1 00 90 80 70 60 % 50 40 30 20 10 0 киш е ч ник C. a lbic a ns ре про д у ктив ный тра кт C. g la bra ta C. k e fy r C. k rus e i д ых а те л ь на я с ис те м а C. tro pic a lis Рис. 1 – Видовой состав грибов рода Candida, выделенных из разных биотопов тела человека 100 90 80 70 60 % 50 40 30 20 10 0 Флуконазол C .krusei Интраконазол C .glabrata C .tropicalis и C . С. kefyr Кетоконазол Амфотерицин В C .albicans Нистатин Клотримазол Рис. 2 – Чувствительность грибов рода Candida к антимикотикам лее высоким уровнем данного признака характе ризовались штаммы C. glabrata (1,61±0,225 ед. кв.), значения АОА у С. albicans составили 1,24±0,067 ед. кв., C. tropicalis – 1,11±0,195 ед. кв., у С. kefyr и C. krusei – 0,91±0,001 ед. кв. и 0,96±0,121 ед. кв. соответственно. На следующем этапе работы у грибов рода Candida была определена антилизоцимная ак тивность. Проведенные исследования показали, что способность инактивировать лизоцим хо зяина регистрировалась в 100% случаев, при этом высокие значения признака отмечены у C. glabrata (1,49±0,031 мкг/мл . ОП), минималь ные – у С. albicans (0,45±0,018 мкг/мл . ОП), для С. kefyr, C. tropicalis, C. krusei были характерны следующие средние значения АЛА: 0,59± 0,067 мкг/мл . ОП, 0,76±0,018 мкг/мл . ОП, 0,77±0,090 мкг/мл . ОП соответственно. Таким образом, уровень антилизоцимной активности микроорганизмов нарастал в ряду: С. albicans < С. kefyr < C. krusei < C. tropicalis < C. glabrata. Данные о распространенности и выраженно сти антилизоцимной активности у разных видов грибов рода Candida свидетельствуют, что спо собность к инактивации лизоцима широко пред ставлена среди микроорганизмов данного рода. При изучении чувствительности дрожжепо добных грибов Candida к противогрибковым пре паратам были получены следующие результаты (рис. 2): у штаммов C. tropicalis и C. kefyr в 100% случаев отмечена чувствительность к нистатину и клотримазолу, в 67% – к кетоконазолу, в 33% к флуконазолу и резистентность к итраконазолу и амфотерицину В. Штаммы С. albicans проявля ли наибольшую чувствительность к нистатину (в 94% случаев), клотримазолу (77%), кетокона золу (74%) и были менее чувствительны к амфо терицину В, флуконазолу и итраконазолу (54; 45 и 33% соответственно). Штаммы C. krusei были чувствительны только к клотримазолу, штаммы C. glabrata – к нистатину и клотримазо лу и резистентны к остальным изученным пре паратам. Результаты проведенных исследований по казали, что наиболее распространенным и присутствующим во всех исследуемых биотопах 180 БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ оказался вид C. albicans, частота выделения которого составила более 65%, а также вид C. glabrata, который наиболее часто (18,8%) выделялся из репродуктивного тракта женщин. Наряду с данными микроорганизмами выделяли также C. tropicalis, C. kefyr, C. krusei. Изучение у выделенных видов грибов рода Candida факторов патогенности (гемолитическая, протеолитическая, фосфолипазная активности) показало, что только C. albicans в 49% случаев обладала фосфолипазной активностью. С высо кой внеклеточной фосфолипазной активностью связывают повреждение мембран клеток макро организма. Напротив, антиоксидантной актив ностью и способностью к инактивации лизоци ма характеризовались все изученные виды гри бов, при этом максимальное значение признаков отмечено у C. glabrata. Следует предположить, данные свойства спо собствуют выживанию микроорганизма в орга низме хозяина, поскольку у этого вида не суще ствует гифальной формы, являющейся важней шим фактором патогенности. Полученные дан ные подтверждают результаты других авторов, показавших, что у дрожжеподобных грибов рода Candida в 100% случаев регистрируется АЛА, а ее выраженность зависит от вида микроорганиз ма [4]. Сообщается также об антиоксидантной активности экстрактов мицелия у некоторых ксилотрофных базидиомицетов [8], тогда как у грибов рода Candida данный признак определен нами впервые. Изучение чувствительности к антимикотичес ким препаратам показало, что Candida non albicans в 100% случаев были чувствительны к клотримазолу, C. glabrata, C. tropicalis, C. kefyr – нистатину и в 100% случаев резистентны к итра коназолу и амфотерицину В. Природную резис тентность некоторых представителей грибов рода Candida, в частности, C. krusei и C. glabrata, от мечает Н.В. Дмитриева [5]. Среди штаммов C. albicans не обнаружено абсолютно резистент ных к изученным препаратам культур. Проведенный мониторинг этиологической структуры изученных заболеваний и распрост ранения устойчивости грибов рода Candida к антимикотикам имеет не только теоретическое значение, связанное с изучением биологических свойств этих микроорганизмов, выделенных из разных биотопов тела человека, но и несомнен ную значимость для практических врачей. Литература 1. Биргер, М.О. Справочник по микробиологическим и виру сологическим методам исследования / М.О. Биргер. М.: Медицина, 1982. 455 с. 2. Богомолова, Т.С. Морфобиологические свойства и пато генность Candida albicans / Т.С. Богомолова. Ленинград, 1990. 25 с. 3. Бухарин, О.В. Антилизоцимный тест как маркер персис тенции микроорганизмов / О.В. Бухарин, Б.Я. Усвяцов // Теоретическая и прикладная иммунология: тезисы докла дов I Всесоюзной конференции. М., 1982. С. 87–88. 4. Валышев, А.В. Факторы персистенции дрожжеподобных грибов рода Candida / А.В. Валышев [и др.] // Успехи ме дицинской микологии: сб. ст. Т. 1. М.: Национальная ака демия микологии, 2003. С. 53. 5. Дмитриева, Н.В. Кандидозные инфекции у онкологичес ких и онкогематологических больных / Н.В. Дмитриева // Антибиотики и химиотерапия. 2007. № 4/5. С. 43–48. 6. Реброва, Р.Н. Грибы рода Candida при заболеваниях негрибковой этиологии / Р.Н. Реброва. М.: Медицина, 1989. 182 с. 7. Сергеев, А.Ю. Кандидоз. Природа инфекции, механизмы агрессии и защиты, лабораторная диагностика, клиника и лечение / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев. М.: ТриадаХ, 2001. 472 с. 8. Шишкина, Л.Н. Антиоксидантная активность липидов ксилотрофных базидиомицетов / Л.Н. Шишкина, А.Н. Капич // Успехи медицинской микологии: сб. ст. Т. 7. М.: Национальная академия микологии, 2006. С. 262–263. 9. Яшин, А.Я. Методика выполнения измерений антиокси дантной активности БАД, напитков, экстрактов растений / А.Я. Яшин [и др.]. М., 2004. 5 с. Влияние микроорганизмов с разным уровнем экспрессии факторов патогенности на активность антиоксидантных ферментов эритроцитов Е. А. Щуплова Щуплова,ê.áèîë.í., Б. Я. Усвяцов Усвяцов, ä.ìåä.í., ïðîôåññîð, Èíñòèòóò êëåòî÷íîãî è âíóòðèêëåòî÷íîãî ñèìáèîçà ÓðÎ ÐÀÍ; С . И. Красиков Икрянникова, Красиков, ä.ìåä.í., ïðîôåññîð, С . В. Икрянникова ê.áèîë.í., Îðåíáóðãñêàÿ ÃÌÀ Супероксиддисмутаза (СОД) и каталаза яв ляются внутриклеточными антиоксидантами и играют важную роль в защите гемоглобина и мембраны эритроцита от повреждающего дей ствия активных форм кислорода (АФК) [1]. Ранее показано, что одним из механизмов антигемоглобинового действия микроорганиз мов является усиление под их влиянием процес сов окислительной деградации гемоглобина [2]. Вместе с тем состояние систем, ответственных за устойчивость гемоглобина к такой деграда ции, в частности ферментов антиокислительной защиты (СОД и каталаза), изучено недостаточно полно. В связи с этим целью работы явилось изуче ние действия факторов патогенности S.epidermidis и E.coli на антиоксидантную систему эритроци тов (СОД и каталазу) при экспериментальной инфекции. 181