Исследование агрегации тромбоцитов БелМАПО Кафедра клинической лабораторной диагностики Старший преподаватель Алехнович Лариса Игоревна Основные функции системы гемостаза n n Обеспечение циркуляции жидкой крови в сосудистом русле Прекращение кровотечения при повреждении сосудов Основные компоненты системы гемостаза n n n n Сосудистая стенка Клеточные элементы крови (тромбоциты, эритроциты и др.) Плазменные факторы свертывания крови Активаторы и ингибиторы фибринолитической системы Этапы гемостаза n n n Первичный гемостаз (белый тромбоцитарный тромб) Вторичный гемостаз (красный кровяной тромб, в основе которого – фибриновый сгусток) Фибринолиз (растворение сгустка) Структура тромбоцитов Гранулы тромбоцитов n n n n Альфа-гранулы Плотные гранулы Лизосомальные гранулы Пероксисомы Компоненты альфа-гранул n n n n n n n n n Тромбоцитарный фактор роста Трансформирующий фактор роста Тромбоцитарный фактор 4 Ø Бета-тромбоглобулин Фактор Виллебранда Фибриноген Фактор V Протеин S Иммуноглобулин Ø Ø Ø Ø Ø Ø Ø Ø Репарация за счет усиления деления фибробластов Репарация ткани Нейтрализация гепарина, воспалительный процесс Воспаление, репарация ткани Свертывание, адгезия тромбоцитов Свертывание, агрегация тромбоцитов Свертывание Антикоагулянт Иммунитет Компоненты плотных гранул тромбоцитов n n n n n n n АДФ – индуктор агрегации Серотонин – индуктор агрегации Антикоагулянт АТФ Ионы Са – основной кофактор коагуляции Антиплазмин Адреналин Гистамин Функции тромбоцитов n n n n n Участие в первичном гемостазе (адгезия и агрегация тромбоцитов) Местное выделение вазоконскрикторов (уменьшение кровотока в пораженном участке) Участие во вторичном гемостазе – активация каскадов свертывания крови Инициирование репарации тканей Регулирование местной воспалительной реакции и иммунитета Участие тромбоцитов в образовании тромба n n n Адгезия Реакция освобождения (секреции) содержимого из гранул тромбоцитов Агрегация Участие тромбоцитов в образовании тромба Участие тромбоцитов в образовании тромба Участие тромбоцитов в образовании тромба В каких случаях исследуют агрегацию тромбоцитов? n n Диагностика наследственных и врожденных аномалий тромбоцитов Диагностика приобретенных аномалий тромбоцитов гипоагрегационного характера (уремия, цирроз печени, миелопроиферативные заболевания, лекарственные вещества и токсины) В каких случаях исследуют агрегацию тромбоцитов? n n Диагностика приобретенных аномалий тромбоцитов гиперагрегационного характера (ИБС, сахарный диабет, атеросклероз, гиперлипопротеинемии, парапротеинемии) Для подбора адекватной антиагрегантной терапии и оценки ее эффективности Принцип исследования агрегации на агрегометре СОЛАР Индукторы агрегации n n n n n n n АДФ Адреналин Коллаген Ристомицин Серотонин Тромбоксан А2 и другие Виды агрегатограмм Условия, необходимые для исследования агрегации тромбоцитов n n n Пациент не должен принимать препараты, влияющие на агрегацию тромбоцитов Забор крови из локтевой вены в пластиковые пробирки!!! Соотношение цитрата натрия и крови –1:9 Условия, необходимые для исследования агрегации тромбоцитов n n n Исследование проводится на плазме, богатой тромбоцитами Количество тромбоцитов - 200 – 250 тысяч Несколько индукторов в разной концентрации Получение образцов для исследования n n n n Забор цитратной крови в пластиковую пробирку Центрифугирование: 1000 – 1500 об/мин – 5 – 7 минут Полученная плазма отбирается в пластиковые пробирки Оставшееся количество крови снова центрифугируют 3000 об/мин – 15 минут и получают бестромбоцитарную плазму Выполнение исследования ИНДУКТОР 0,0 5 мл 0,45 мл ПЛАЗМА Параметры агрегации n n Степень агрегации – максимальный процент светопропускания плазмы, зарегистрированный прибором Скорость агрегации – увеличение светопропускания плазмы за 1 мин Параметры агрегации n n Время агрегации – время достижения максимальной агрегации Длительность «lag»-фазы АДФ-агрегация АДФ-агрегация АДФ-агрегация АДФ-агрегация Гипоагрегация: n n n n n Уменьшение степени агрегации Уменьшение скорости агрегации Появление обратимой агрегации Отсутствие вторичной волны Увеличение «lag»-фазы АДФ-агрегация Гиперагрегация: n Увеличение степени агрегации n Увеличение скорости агрегации n Появление монофазной кривой – слияние первичной и вторичной волн АДФ-агрегация АДФ-агрегация Диагностика наследственных тромбоцитопатий АДФ Патология Адреналин Коллаген Ристомицин 1-ая волна 2-ая волна 1-ая волна 2-ая волна Синдром Бернара-Сулье N N N N N Болезнь Виллебранда N N N N N ___ ___ ___ N Тромбастения Гланцмана ___ ___ Синдром «серых тромбоцитов» ___ ___ ___ N «Аспириноподобный синдром» ___ ___ ___ N