Изучение влияния циклофосфана и соевых белков на рост

ÈÇÓ×ÅÍÈÅ
ÂËÈßÍÈß ÖÈÊËÎÔÎÑÔÀÍÀ È ÑÎÅÂÛÕ ÁÅËÊÎÂ
Ã.Â. ÊÈÐÅÅÂ, Þ.Þ. ÀÑÑÅÑÎÐÎÂÀ, À.À. ÞÑÓÏÎÂÀ, Ô.À. ÈÁÐÀÃÈÌÎÂ, Ç. ÃÎËÓÁÅÍÊÎ
ÍÀ ÐÎÑÒ ÏÅÐÅÂÈÂÀÅÌÛÕ ÎÏÓÕÎËÅÉ ÌÛØÅÉ
42
Ã.Â. Êèðååâ1, Þ.Þ. Àññåñîðîâà1, À.À. Þñóïîâà1,
Ô.À. Èáðàãèìîâ2, Ç. Ãîëóáåíêî2
Ðåñïóáëèêàíñêèé îíêîëîãè÷åñêèé íàó÷íûé öåíòð ÌÇ ÐÓç1, ã. Òàøêåíò
Èíñòèòóò áèîîðãàíè÷åñêîé õèìèè ÀÍ ÐÓç èì. àêàä. À.Ñ. Ñàäûêîâà2, ã. Òàøêåíò
Èçó÷åíî âëèÿíèå íîâîãî áèîðåãóëÿòîðà íà îñíîâå ñîåâûõ áåëêîâ íà ðîñò ýêñïåðèìåíòàëüíûõ îïóõîëåé æèâîòíûõ «ñàðêîìà180» è «ìåëàíîìà Â-16». Ðåçóëüòàòû ïîêàçàëè, ÷òî ñîåâûå áåëêè, ïðèìåíÿåìûå êàê ñàìîñòîÿòåëüíûé ïðîòèâîîïóõîëåâé
ïðåïàðàò èëè êàê ñðåäñòâî äîïîëíèòåëüíîé òåðàïèè ïðè ëå÷åíèè öèêëîôîñôàíîì, ïîçâîëÿþò ïîâûñèòü ýôôåêòèâíîñòü
òåðàïèè ýêñïåðèìåíòàëüíûõ îïóõîëåé æèâîòíûõ. Ïðè ýòîì îñíîâíîé ïîëîæèòåëüíûé ýôôåêò ëå÷åíèÿ ïðîÿâëÿåòñÿ â óñèëåíèè
ðåãðåññèè îïóõîëè, óâåëè÷åíèè ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè æèâîòíûõ-îïóõîëåíîñèòåëåé è çàâèñèò îò ãèñòîãåíåçà îïóõîëè.
Âîçäåéñòâèå öèêëîôîñôàíà è ñîåâûõ áåëêîâ èíäóöèðóåò ýêñïðåññèþ â îïóõîëåâûõ êëåòêàõ de novo ïîëèïåïòèäîâ ñ
ìîëåêóëÿðíûìè ìàññàìè 21, 36, 39, 44, 62 è 64 êÄà.
INVESTIGATION OF CYCLOPHOSPHAN AND SOY-BEAN PROTEINS
ON THE GROWTH OF INTERWINED TUMOURS OF MICE
G.V.Kireev1, Yu. Yu. Assesorova1, A.A. Ysupova1, F.A. Ibragimov2, Z. Golubenko2
Republic oncological scientific centre of the Ministry of Public Health of Uzbekistan1, Tashkent
Institute of the bioorganic chemistry of SA Uzbekistan after name of academic A.S. Sadikov2, Tashkent
The influantion of new bioregulator on the basis of soy-been proteins on the growth of the experimental tumors of mice
“sarcoma-180” and “melanoma B-16” was investigated. The results showed, that the soy-been proteins, using as the untitumor drug
or the mean of additional therapy together cyclophosphan, allow to heighten the effect of experimental tumor therapy. By that the
essential positive effect of the therapy is the tumor regression intensification, mice with tumor life-time prolongation and it depends
of tumor gistogenesis. The action of cyclophosphan and soy-been proteins induces the expression in tumor cells de novo polypeptides
with molecular weight 21, 36, 39, 44, 62 è 64 kDà.
Øèðîêîå âíåäðåíèå â êëèíè÷åñêóþ ïðàêòèêó ëåêàðñòâåííûõ ìåòîäîâ ëå÷åíèÿ ðàêà âûäâèíóëî çàäà÷è èçûñêàíèÿ íîâûõ ïóòåé è ñðåäñòâ ïîâûøåíèÿ ðåàêòèâíîñòè áîëüíîãî, à òàêæå óìåíüøåíèÿ òîêñè÷íîñòè àíòèáëàñòîìíûõ àãåíòîâ ïðè óñëîâèè ñîõðàíåíèÿ èõ àêòèâíîñòè.  ýòîì ïëàíå ïðåäñòàâëÿåò èíòåðåñ ïîèñê íîâûõ ìåòîäîâ ñî÷åòàííîãî äåéñòâèÿ ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ïðåïàðàòîâ è ðàçëè÷íûõ ñðåäñòâ áèîòåðàïèè îïóõîëåé, êîòîðûå ìîãóò ïðèâåñòè, ñ îäíîé
ñòîðîíû, ê óìåíüøåíèþ òîêñè÷åñêèõ ðåàêöèé îðãàíèçìà, ñ äðóãîé, – ê óñèëåíèþ ðåãðåññèè îïóõîëè.
Ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà, èñïîëüçóåìûå äëÿ áèîòåðàïèè ðàêà, â íàñòîÿùåå âðåìÿ âåñüìà ðàçíîîáðàçíû. Ýòî ãåííûå êîíñòðóêöèè, áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûå
ñîåäèíåíèÿ, ìîíîêëîíàëüíûå àíòèòåëà, ïðèðîäíûå
è ñèíòåòè÷åñêèå ïåïòèäû, íèçêîìîëåêóëÿðíûå âåùåñòâà è äð. [5, 7, 8, 9, 12].
Øèðîêîå ïðèìåíåíèå êàê â ýêñïåðèìåíòàëüíûõ,
òàê è â êëèíè÷åñêèõ èññëåäîâàíèÿõ íàõîäÿò ñðåäñòâà
ÑÈÁÈÐÑÊÈÉ ÎÍÊÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÉ ÆÓÐÍÀË. 2006. ¹2 (18)
ïðèðîäíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ, ïðèìåíÿåìûå â êà÷åñòâå
áèîðåãóëÿòîðîâ è áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ äîáàâîê
(ÁÀÄ).  íàñòîÿùåå âðåìÿ èçó÷åíû áèîëîãè÷åñêèå
ñâîéñòâà öåëîãî ðÿäà áèîðåãóëÿòîðîâ, êîòîðûå ñî÷åòàþò ïðîòèâîîïóõîëåâóþ àêòèâíîñòü ñ äðóãèìè ïîçèòèâíûìè ôàðìàêîëîãè÷åñêèìè ýôôåêòàìè, îñíîâàííûìè íà èõ àíòèîêñèäàíòíîé, äåòîêñèöèðóþùåé,
èììóíîìîäóëèðóþùåé èëè ïðîòèâîâîñïàëèòåëüíîé
ñïîñîáíîñòè (ïðåïàðàòû è áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûå
äîáàâêè «ëàïðîò», «àíòèîêñèôèò», «ãåðàíîì», «êàñêàòîë», «áàêñèí», «èíñîë», «ìåëàòîíèí», «âèëîí»,
«ýïèòàëîí» è äð.) [3].
Àíàëèç äàííûõ ëèòåðàòóðû è ñîáñòâåííûå ïðåäâàðèòåëüíûå èññëåäîâàíèÿ ïîçâîëÿþò íàì ïðåäïîëîæèòü, ÷òî ïðèðîäíûìè áèîðåãóëÿòîðàìè, ñïîñîáíûìè ïðîÿâëÿòü ïðîòèâîîïóõîëåâûå ñâîéñòâà è óñèëèâàòü òåðàïåâòè÷åñêèé ýôôåêò ïðîòèâîîïóõîëåâîãî
ëå÷åíèÿ, ìîãóò ÿâëÿòüñÿ áåëêè, âûäåëåííûå èç ïëîäîâ áîáîâûõ ðàñòåíèé. Òàê, áåëêîâûå èíãèáèòîðû
Èçó÷åíèå âëèÿíèÿ öèêëîôîñôàíà è ñîåâûõ áåëêîâ íà ðîñò ïåðåâèâàåìûõ îïóõîëåé ìûøåé
ïðîòåàç, âûäåëåííûå èç ñîåâûõ áîáîâ è ãîðîõà, â íåñêîëüêî ðàç ñíèæàþò ÷àñòîòó âîçíèêíîâåíèÿ îïóõîëåé ïðè âîçäåéñòâèè êàíöåðîãåííûõ àãåíòîâ, óñèëèâàþò ðåãðåññèþ îïóõîëè è çàìåäëÿþò èíâàçèþ è
ìåòàñòàçèðîâàíèå [1, 2]. Ó÷èòûâàÿ âûøåèçëîæåííîå,
ìû èçó÷èëè âëèÿíèå íîâîé áèîëîãè÷åñêè àêòèâíîé
äîáàâêè, ñîäåðæàùåé ôðàêöèþ ñîåâûõ áåëêîâ ñ ìîëåêóëÿðíîé ìàññîé îò 24 äî 85 êÄà, íà ðîñò ýêñïåðèìåíòàëüíûõ îïóõîëåé ðàçëè÷íîãî ãèñòîãåíåçà ïðè
ïðîâåäåíèè õèìèîòåðàïèè öèêëîôîñôàíîì.
Èçâåñòíî, ÷òî ðàê ñâÿçàí ñ íàðóøåíèåì ìåõàíèçìîâ, êîíòðîëèðóþùèõ óïîðÿäî÷åííóþ ýêñïðåññèþ
ãåíîâ â äèôôåðåíöèðîâàííûõ òêàíÿõ [12]. Ìèñïðîãðàììèðîâàíèå ãåíåòè÷åñêîé èíôîðìàöèè ÿâëÿåòñÿ
îáùåé ôåíîòèïè÷åñêîé ÷åðòîé îïóõîëåâûõ êëåòîê,
îáóñëîâëèâàþùåé àáåððàíòíûé ñèíòåç áåëêîâ, êîòîðûå ìîãóò áûòü ýíäîãåííûìè ðåãóëÿòîðàìè, ó÷àñòâóþùèìè â êîíòðîëå êëåòî÷íîé ïðîëèôåðàöèè, äèôôåðåíöèðîâêå è ãèáåëè.  ñâÿçè ñ ýòèì ìû ñî÷ëè öåëåñîîáðàçíûì ïðîâåñòè ñðàâíèòåëüíóþ îöåíêó ýêñïðåññèè áåëêîâ â îïóõîëåâûõ êëåòêàõ ïðè âîçäåéñòâèè
öèêëîôîñôàíà è ñîåâûõ áåëêîâ.
Öåëü èññëåäîâàíèÿ – îöåíêà ýôôåêòèâíîñòè ñîåâûõ áåëêîâ êàê ñàìîñòîÿòåëüíîãî ïðîòèâîîïóõîëåâîãî ñðåäñòâà è äîïîëíèòåëüíîãî, êîððåãèðóþùåãî
ñðåäñòâà ïðè ëå÷åíèè öèòîñòàòè÷åñêèì ïðåïàðàòîì
öèêëîôîñôàíîì æèâîòíûõ ñ ïåðåâèâàåìûìè îïóõîëÿìè «ñàðêîìà-180» è «ìåëàíîìà Â-16», à òàêæå èçó÷åíèå ñîñòàâà áåëêîâ, ýêñïðåññèðóåìûõ îïóõîëåâûìè êëåòêàìè äàííûõ øòàììîâ.
Ìàòåðèàëû è ìåòîäû
 íàñòîÿùåé ðàáîòå èñïîëüçîâàëè ìûøè ëèíèè
Ñ57BL è áåëûå áåñïîðîäíûå ðàçâîäêè âèâàðèÿ îïûòíî-ýêñïåðèìåíòàëüíîãî çàâîäà «Íèõîë» ÐÎÍÖ ÌÇ
ÐÓç âåñîì 18–20 ã. Æèâîòíûõ ñîäåðæàëè ïî 4–6 îñîáåé ïðè åñòåñòâåííîì ðåæèìå îñâåùåíèÿ ñî ñâîáîäíûì äîñòóïîì ê âîäå è ïèùå. Âçâåñü îïóõîëåâûõ êëåòîê (îïóõîëè «ñàðêîìà S-180» è «ìåëàíîìà Â-16») â
îáúåìå 0,3 ìë (1,2•106 êëåòîê) ïåðåâèâàëè ïîäêîæíî
ñîãëàñíî ìåòîäèêå [6].
Ñîåâûé áåëîê (ÑÁ), ïðåäñòàâëÿþùèé ñîáîé ñóõîé ïîðîøîê áåëîãî öâåòà áåç çàïàõà è ïðèìåñåé, ïîëó÷àëè ïóòåì ôðàêöèîííîé ýêñòðàêöèè è ïîñëåäóþùåé ãåëüôèëüòðàöèè èç øðîòà ñîè, ïîñëå óäàëåíèÿ
ìàñëà è æèðîâ. ÑÁ ââîäèëè ìûøàì â äîçå 150 ìã/êã
ïåðîðàëüíî, ÷åðåç 48 ÷ ïîñëå ïåðåâèâêè îïóõîëè, â
òå÷åíèå 10 äíåé. Öèêëîôîñôàí ââîäèëè â äîçå 20 ìã/êã
43
âíóòðèáðþøèííî, ÷åðåç 48 ÷ ïîñëå ïåðåâèâêè îïóõîëè, â òå÷åíèå 10 äíåé. Ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ ëèáî çàáèâàëè íà 14-é äåíü ýêñïåðèìåíòà ïîä õëîðîôîðìåííûì íàðêîçîì, ëèáî âåëè íàáëþäåíèå äî
åñòåñòâåííîé ãèáåëè. Ýôôåêò ïðîòèâîîïóõîëåâîãî
äåéñòâèÿ îöåíèâàëè ïî ìàññå (Ì) èçâëå÷åííîé îïóõîëåâîé òêàíè è ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè
(ÑÏÆ). Òîðìîæåíèå ðîñòà îïóõîëè (ÒÐÎ) è óâåëè÷åíèå ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè (ÓÏÆ) æèâîòíûõ âû÷èñëÿëè ïî ôîðìóëàì [3]:
ÒÐÎ = (Ìîïûò – Ìêîíòðîëü) / Ìîïûò · 100%.
ÓÏÆ = (ÑÏÆîïûò – ÑÏÆêîíòðîëü) / ÑÏÆîïûò · 100%.
Ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ ðàçäåëèëè íà 4
ãðóïïû (ïî 6 ìûøåé â êàæäîé): I ãðóïïà – êîíòðîëüíàÿ, âêëþ÷àâøàÿ íåëå÷åíûõ æèâîòíûõ-îïóõîëåíîñèòåëåé; II ãðóïïà – æèâîòíûå-îïóõîëåíîñèòåëè,
ïîëó÷àâøèå öèêëîôîñôàí; III ãðóïïà – æèâîòíûåîïóõîëåíîñèòåëè, ïîëó÷àâøèå öèêëîôîñôàí è ñîåâûé áåëîê; IV ãðóïïà – æèâîòíûå-îïóõîëåíîñèòåëè,
ïîëó÷àâøèå ñîåâûé áåëîê.
Äëÿ âûäåëåíèÿ âîäîðàñòâîðèìûõ êëåòî÷íûõ áåëêîâ íàâåñêó îïóõîëè ìàññîé 2 ã èçìåëü÷àëè â æèäêîì
àçîòå, ãîìîãåíåçèðîâàëè â 10% ðàñòâîðå NaCl, áåëêè
ýêñòðàãèðîâàëè â ýòîì æå ðàñòâîðå 30 ìèí ïðè 40Ñ.
Ãîìîãåíàò öåíòðèôóãèðîâàëè 5 ìèí ïðè 1500 îá/ìèí
äëÿ óäàëåíèÿ êëåòî÷íûõ îáëîìêîâ. Ñóïåðíàòàíò öåíòðèôóãèðîâàëè 20 ìèí ïðè 6000 îá/ìèí è òåìïåðàòóðå 40Ñ. Ýëåêòðîôîðåç áåëêîâ ïðîâîäèëè â 10–15 %
ïîëèàêðèëàìèäíîãî ãåëÿ (ÏÀÀÃ) ïî ìåòîäó Laemmli
[10]. Ïëàñòèíó ÏÀÀÃ îêðàøèâàëè êóìàñè-áðèëëèàíòîâûé-ñèíèé-G-250.
Ñòàòèñòè÷åñêàÿ îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäèëàñü ïî Ñòüþäåíòó. Äîñòîâåðíîñòü ïîëó÷åííûõ ðåçóëüòàòîâ îöåíèâàëè ïðè äîâåðèòåëüíîì
èíòåðâàëå (p<0,05).
Ðåçóëüòàòû è îáñóæäåíèå
Ðåçóëüòàòû ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé ïîêàçàëè,
÷òî ïðèìåíåíèå öèêëîôîñôàíà â óêàçàííîé äîçå òîðìîçèò ðîñò îïóõîëè «ñàðêîìà-180» äî 91 % ïî ìàññå
ïðè äîñòîâåðíîé ðàçíèöå ñðåäíåé ìàññû îïóõîëè â
äàííîé ãðóïïå ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì è óâåëè÷èâàåò ñðåäíþþ ïðîäîëæèòåëüíîñòü æèçíè æèâîòíûõîïóõîëåíîñèòåëåé â 1,4 ðàçà (òàáë. 1).
Âîçäåéñòâèå íà ðîñò îïóõîëè ÑÁ ñîâìåñòíî ñ öèêëîôîñôàíîì ïîâûøàåò ýôôåêòèâíîñòü ïðîòèâîîïóõîëåâîãî ëå÷åíèÿ: ÒÐÎ ïî ìàññå ñîñòàâèëî 93 % (ïðè
äîñòîâåðíîé ðàçíèöå ñðåäíåé ìàññû îïóõîëè ñ êîíòÑÈÁÈÐÑÊÈÉ ÎÍÊÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÉ ÆÓÐÍÀË. 2006. ¹2 (18)
Ã.Â. ÊÈÐÅÅÂ, Þ.Þ. ÀÑÑÅÑÎÐÎÂÀ, À.À. ÞÑÓÏÎÂÀ, Ô.À. ÈÁÐÀÃÈÌÎÂ, Ç. ÃÎËÓÁÅÍÊÎ
44
Ò à á ë è ö à
Äåéñòâèå ñîåâîãî áåëêà è öèêëîôîñôàíà
íà ðîñò îïóõîëè «ñàðêîìà S-180»
(ìûøè áåëûå áåñïîðîäíûå)
1
Ò à á ë è ö à
Äåéñòâèå ñîåâîãî áåëêà è öèêëîôîñôàíà
íà ðîñò îïóõîëè «ìåëàíîìà Â-16»,
(ìûøè ëèíèè Â 57 ÂL)
Ãðóïïû
æèâîòíûõ
I ãðóïïà
Ïðåïàðàòû
Ìàññà
îïóõîëè,
ã.
1,8±0,09
êîíòðîëü
1,7±0,08
ÒÐÎ
%
ÑÏÆ
äíåé
2
ÓÏÆ
%
23,4±1,17
II ãðóïïà Öèêëîôîñôàí 0,62±0,03 45,0±2, 35,4±1,72 51,28±2,6
Öèêëîôîñôàí
III ãðóïïà
0,40±0,02 76,4±3,2 41,8±2,06 78,6±3,94
+ ÑÁ
IV ãðóïïà
ÑÁ
1,02±0,05 40,0±1,9 30,6±1,53 30,7±1,53
4
1
3
2
(à)
(á)
Ðèñ. 1. Äåéñòâèÿ öèêëîôîñôàìèäà è ñîåâîãî áåëêà íà ìàññó îïóõîëè «ìåëàíîìà Â-16» (à) è «ñàðêîìà S-180» (á):
1 – ãðóïïà êîíòðîëÿ, 2 – ãðóïïà æèâîòíûõ, ïîëó÷àâøèõ öèêëîôîñôàí, 3 – ãðóïïà æèâîòíûõ, ïîëó÷àâøèõ öèêëîôîñôàí + ÑÁ,
4 – ãðóïïà æèâîòíûõ, ïîëó÷àâøèõ ÑÁ
Ðèñ. 2. Ýëåêòðîôîðåãðàììà 10–15 % ÏÀÀÃ â
ïðèñóòñòâèè SDS áåëêîâ «ñàðêîìû S-180» è
«ìåëàíîìû Â-16» ïîñëå âîçäåéñòâèÿ
öèêëîôîñôàíà è ñîåâîãî áåëêà: 1, 6 –
öèêëîôîñôàí, 2, 7 – öèêëîôîñôàí +ñîåâûé
áåëîê, 3, 8 – ñîåâûé áåëîê, 4, 9 – êîíòðîëü,
5,10 – ìàðêåðû (ÁÑÀ; Õèìîòðèïñèíîàãåíò)
ÑÈÁÈÐÑÊÈÉ ÎÍÊÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÉ ÆÓÐÍÀË. 2006. ¹2 (18)
Èçó÷åíèå âëèÿíèÿ öèêëîôîñôàíà è ñîåâûõ áåëêîâ íà ðîñò ïåðåâèâàåìûõ îïóõîëåé ìûøåé
ðîëåì è íåäîñòîâåðíîé ñ ãðóïïîé II), ÑÏÆ óâåëè÷èëàñü â 1,8 ðàçà ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì, à ïîêàçàòåëü ÓÏÆ äîñòèã 78 %.
Îäíàêî ÑÁ, ïðèìåíÿâøèåñÿ äëÿ ëå÷åíèÿ æèâîòíûõ ñ îïóõîëüþ «ñàðêîìà S-180» êàê ñàìîñòîÿòåëüíûé ïðîòèâîîïóõîëåâûé ïðåïàðàò â äîçå 150 ìã/êã,
òàêæå ïðîÿâèëè âûñîêóþ öèòîñòàòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü:
ÒÐÎ ïî ìàññå äîñòèãàëî 89 % ïðè äîñòîâåðíîé ðàçíèöå ñðåäíåé ìàññû îïóõîëè â ñðàâíåíèè ñ êîíòðîëåì.
Îöåíêà âëèÿíèÿ ÑÁ íà ïðîäîëæèòåëüíîñòü æèçíè æèâîòíûõ-îïóõîëåíîñòèòåëåé òàêæå ïîêàçàëà áèîëîãè÷åñêè çíà÷èìûé ýôôåêò: ÓÏÆ ñîñòàâèëî 54 %.
Ðåçóëüòàòû ýêñïåðèìåíòà, ïðîâåäåííîãî íà æèâîòíûõ ñ îïóõîëüþ «ìåëàíîìà Â-16», ïîêàçàëè, ÷òî ïðèìåíåíèå öèêëîôîñôàíà çàäåðæèâàåò ðîñò äàííîé îïóõîëè äî 45 % ïðè äîñòîâåðíîé ðàçíèöå ñðåäíåé ìàññû
îïóõîëè ñ êîíòðîëåì (òàáë. 2). Ñðåäíÿÿ ïðîäîëæèòåëüíîñòü æèçíè æèâîòíûõ-îïóõîëåíîñèòåëåé â äàííîé
ãðóïïå â 1,5 ðàçà áîëüøå, ÷åì â êîíòðîëå. Êàê è â ñëó÷àå «ñàðêîìû S-180», âîçäåéñòâèå ÑÁ óñèëèâàåò ïðîòèâîîïóõîëåâûé ýôôåêò öèêëîôîñôàíà: ÒÐÎ ïî ìàññå ñîñòàâèëî 76 % ïðè äîñòîâåðíîé ðàçíèöå ñðåäíåé
ìàññû îïóõîëè êàê ñ êîíòðîëåì, òàê è ñ ãðóïïîé II;
ÑÏÆ óâåëè÷èëàñü â 1,8 ðàçà ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì, à ïîêàçàòåëü ÓÏÆ ñîñòàâèë 79 %. Ñàìîñòîÿòåëüíûé æå ïðîòèâîîïóõîëåâûé ýôôåêò ÑÁ, ïðèìåíÿâøèõñÿ äëÿ ëå÷åíèÿ îïóõîëè «ìåëàíîìà Â-16», îêàçàëñÿ
íåâûñîêèì: ÒÐÎ ïî ìàññå ñîñòàâèëî 40 %, ÑÏÆ óâåëè÷èëàñü âñåãî â 1,3 ðàçà ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì, à
ÓÏÆ íå ïðåâûøàëî 31 %. Îäíàêî ýòè äàííûå ïîçâîëÿþò ñ óâåðåííîñòüþ ñêàçàòü, ÷òî èçó÷àåìûé áèîðåãóëÿòîð íå ñòèìóëèðóåò ðîñòà îïóõîëè «ìåëàíîìà Â-16».
Èññëåäîâàíèå ìåòîäîì ýëåêòðîôîðåçà â ÏÀÀÃ
ñïåêòðà êëåòî÷íûõ áåëêîâ, âûäåëåííûõ èç îïóõîëåé
«ñàðêîìà S-180» è «ìåëàíîìà Â-16» (ðèñ. 2), ïîêàçàëî ñóùåñòâåííîå ðàçëè÷èå â èõ ñîñòàâå. Ýòîò ôàêò íå
ïðîòèâîðå÷èò äàííûì ëèòåðàòóðû, ïîñêîëüêó èçâåñòíî, ÷òî äëÿ îïóõîëåé ðàçëè÷íîãî ãèñòîãåíåçà õàðàêòåðíû ñïåöèôè÷åñêèå èçìåíåíèÿ ñîñòàâà êëåòî÷íûõ
áåëêîâ, çàòðàãèâàþùèå â êàæäîì ñëó÷àå ìîëåêóëÿðíóþ ìàññó, ñòðóêòóðó, ôóíêöèîíàëüíóþ àêòèâíîñòü
è äðóãèå õàðàêòåðèñòèêè ïîëèïåïòèäîâ.
Àíàëèç ýëåêòðîôîðåãðàìì êëåòî÷íûõ áåëêîâ,
âûäåëåííûõ èç îïóõîëåé ó æèâîòíûõ, ïîäâåðãàâøèõñÿ âîçäåéñòâèþ êàê ïðîòèâîîïóõîëåâîãî öèòîñòàòèêà, òàê è ñîåâûõ áåëêîâ, òàêæå ïîêàçàë ñïåöèôè÷åñêèå èçìåíåíèÿ ñïåêòðà ýêñïðåññèðóåìûõ ïðîòåèíîâ.
 îòâåò íà âîçäåéñòâèå èçó÷àåìûõ âåùåñòâ îïóõîëåâûå êëåòêè èíäóöèðîâàëè ñïåöèôè÷åñêèå de novo
áåëêè. Òàê, ïðè âîçäåéñòâèè öèêëîôîñôàíà â îïóõîëè «ìåëàíîìà Â-16» èíäóöèðóåòñÿ ýêñïðåññèÿ ïîëèïåïòèäîâ ñ ìîë. ìàññîé 62 êÄà è 44 êÄà, öèêëîôîñôà-
45
íà è ñîåâûõ áåëêîâ – ïîëèïåïòèäà â 44 êÄà, è òîëüêî
ñîåâûõ áåëêîâ – ïîëèïåïòèäîâ ìàññîé 44 êÄà è
36 êÄà.  êëåòêàõ îïóõîëè «ñàðêîìà S-180» ïîä âëèÿíèåì öèêëîôîñôàíà ýêñïðåññèðóþòñÿ ïîëèïåïòèäû
ñ ìîë. ìàññîé 64 êÄà è 21 êÄà; ïðè âîçäåéñòâèè öèêëîôîñôàíà è ñîåâûõ áåëêîâ – ïîëèïåïòèäû â 64 êÄà è
39 êÄà, è òîëüêî ñîåâûõ áåëêîâ – ïîëèïåïòèäà ñ ìîë.ìàññîé 64 êÄ.
Òàêèì îáðàçîì, ðåçóëüòàòû ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé ñâèäåòåëüñòâóåò î òîì, ÷òî íîâàÿ áèîëîãè÷åñêè àêòèâíàÿ äîáàâêà, ñîäåðæàùàÿ ñîåâûå áåëêè,
íå ñòèìóëèðóåò ðîñòà îïóõîëåé, à îáëàäàåò ïðîòèâîîïóõîëåâûì äåéñòâèåì. Äîïîëíåíèå ïðîòèâîîïóõîëåâîãî ëå÷åíèÿ ñîåâûìè áåëêàìè ïîçâîëÿåò ïîâûñèòü
ýôôåêòèâíîñòü õèìèîòåðàïèè ýêñïåðèìåíòàëüíûõ
îïóõîëåé æèâîòíûõ. Ïðè ýòîì îñíîâíîé ïîëîæèòåëüíûé ýôôåêò ëå÷åíèÿ ïðîÿâëÿåòñÿ â óñèëåíèè ðåãðåññèè îïóõîëè, óâåëè÷åíèè ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè
æèâîòíûõ-îïóõîëåíîñèòåëåé è çàâèñèò îò ãèñòîãåíåçà îïóõîëè. Ìîäóëèðóþùàÿ àêòèâíîñòü íîâîé áèîëîãè÷åñêîé äîáàâêè, íà îñíîâàíèè ðåçóëüòàòîâ äàííûõ ýêñïåðèìåíòîâ, ìîæåò îáúÿñíÿòüñÿ ñâîéñòâàìè
ñîåâûõ áåëêîâ èíäóöèðîâàòü ýêñïðåññèþ de novo êëåòî÷íûõ ïîëèïåïòèäîâ, êîòîðûå ìîãóò ÿâëÿòüñÿ ñïåöèôè÷åñêèìè ýíäîãåííûìè ðåãóëÿòîðàìè ìåòàáîëè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, íàïðàâëåííûõ íà ïîäàâëåíèå àêòèâíîñòè è ðîñòà îïóõîëåâîé êëåòêè.
Âûâîäû
1. Ïðèìåíåíèå ñîåâûõ áåëêîâ êàê ïðîòèâîîïóõîëåâîãî ïðåïàðàòà ïðè ëå÷åíèè æèâîòíûõ ñ îïóõîëÿìè «ñàðêîìà S-180» è «ìåëàíîìà Â-16» ñïîñîáñòâóåò ðåãðåññèè îïóõîëè â 1,7–9,5 ðàçà è â 1,3–1,5 ðàçà
óâåëè÷èâàåò ïðîäîëæèòåëüíîñòü æèçíè æèâîòíûõ.
2. Ñîåâûå áåëêè, èñïîëüçóåìûå êàê äîïîëíèòåëüíîå ñðåäñòâî ïðè ëå÷åíèè öèêëîôîñôàíîì æèâîòíûõ
ñ îïóõîëÿìè «ñàðêîìà S-180» è «ìåëàíîìà Â-16»,
ïîâûøàþò ïðîòèâîîïóõîëåâûé ýôôåêò ëå÷åíèÿ, óâåëè÷èâàÿ ðåãðåññèþ îïóõîëè â 4,2–15 ðàç è ïðîäîëæèòåëüíîñòü æèçíè æèâîòíûõ – â 1,8 ðàçà.
3. Âîçäåéñòâèå öèêëîôîñôàíà è ñîåâûõ áåëêîâ èíäóöèðóåò ýêñïðåññèþ â îïóõîëåâûõ êëåòêàõ de novo
ïîëèïåïòèäîâ ñ ìîëåêóëÿðíûìè ìàññàìè 21, 36, 39,
44, 62 è 64 êÄà.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
1. Âåðøèíèíà Ñ.Ô., Ïîòÿâèíà Å.Â. Ïðèìåíåíèå ïðèðîäíûõ áèîðåãóëÿòîðîâ â îíêîëîãèè // Âîïð. îíêîë. 2003.
Ò. 49, ¹ 2. Ñ. 145–151.
ÑÈÁÈÐÑÊÈÉ ÎÍÊÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÉ ÆÓÐÍÀË. 2006. ¹2 (18)
46
Ã.Â. ÊÈÐÅÅÂ, Þ.Þ. ÀÑÑÅÑÎÐÎÂÀ, À.À. ÞÑÓÏÎÂÀ, Ô.À. ÈÁÐÀÃÈÌÎÂ, Ç. ÃÎËÓÁÅÍÊÎ
2. Êðóòÿêîâ Â.Ì. Áèîòåðàïèÿ ðàêà è èíãèáèòîðû ïðîòåàç // Âîïð. îíêîë. 2001. Ò. 47, ¹ 1. Ñ. 106–108.
3. Íåìöîâà Å.Ð., Ñåðãååâà Ò.Â., Àíäðååâà Ê.Ë. è äð. Ïðîôèëàêòèêà çëîêà÷åñòâåííûõ íîâîîáðàçîâàíèé â ýêñïåðèìåíòå ïðè ïîìîùè ñðåäñòâ ïðèðîäíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ // Ðîñ.
îíêîë. æóðí. 2002. ¹ 3. Ñ. 30–34.
4. Íèêîëèí Â.Ï., Êàëåäèí Â.È., Áàéìàê Ò.Þ. è äð. Àïîïòîç-èíäóöèðóþùàÿ è ïðîòèâîîïóõîëåâàÿ ýôôåêòèâíîñòü öèêëîôîñôàíà, ïëàòèíà è àäðèàìèöèíà ïðè èõ ðàçäåëüíîì ïðèìåíåíèè è â êîìáèíàöèè ó ìûøåé ñ ëèìôîñàðêîìîé LS //
Âîïð. îíêîë. 2002. Ò. 48, ¹ 2. Ñ. 211–215.
5. Ðûæîâ Ñ.Â., Íîâèêîâ Â.Â. Ìîëåêóëÿðíûå ìåõàíèçìû
àïîïòîòè÷åñêèõ ïðîöåññîâ // Ðîñ. áèîòåðàïåâò. æóðí. 2002.
Ò. 1, ¹ 3. Ñ. 27–33.
6. Ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ îöåíêà ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ïðåïàðàòîâ â ÑÑÑÐ è ÑØÀ / Ïîä ðåä. Ç.Ï. Ñîôüèíîé, À.Á. Ñûðêèíà, À. Ãîëäèíà è äð. Ì., 1980. Ñ. 71–131.
7. ßêóáîâñêàÿ Ð.È. Ñîâðåìåííûå ïîäõîäû ê áèîòåðàïèè
ðàêà // Ðîñ. áèîòåðàïåâ. æóðí. 2002. Ò. 1, ¹ 3. Ñ. 5–14.
8. Davis I.D. An overview of cancer immunotherapy //
Immunol. Cell. Biol. 2000. ¹ 78. P. 179–195.
9. Gavilondo I.V., Larrick J.W., Borrebaeck C.A.K. Human
antibodies therapy // Immunologist. 2000. ¹ 8. P.58–65.
10. Laemmli U.K. // Nature. 1999. Vol. 227. P.680.
11. Monari S.// Am. Soybean Association. 1995. P. 44.
12. Ponder B.A.J. Cancer geneticcs // Nature. 2001.
Vol. 411. P. 336–341.
Ïîñòóïèëà 18.08.05
ÑÈÁÈÐÑÊÈÉ ÎÍÊÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÉ ÆÓÐÍÀË. 2006. ¹2 (18)