Лечение местных инфекций у морских млекопитающих

Электронный научный журнал «ИССЛЕДОВАНО В РОССИИ» 1306
http://zhurnal.ape.relarn.ru/articles/2005/128.pdf
Лечение местных инфекций у морских
млекопитающих
Лебедева И.Е., Лаженцева Л.Ю. (smperlov@tinro.ru)
Тихоокеанский научно-исследовательский
рыбохозяйственный центр (ФГУП "ТИНРО-Центр")
Профилактика и лечение местных инфекций кожных покровов является одной из
актуальных проблем в ветеринарной медицине, особенно важна при ветеринарном
обеспечении морских млекопитающих, работа с которыми осложняется специфическим
водным образом их обитания. Язвенные и гнойные раны кожи характеризуются значительной
тяжестью их течения, переходом в затяжные формы, а также возникновением гнойносептических осложнений.
Рана считается инфицированной после попадания в неё и развития микроорганизмов
как специфического раздражителя, вызывающего ответные реакции организма животного с
определённым набором клинических симптомов и соответствующими иммунологическими
показателями (Камаев, 1970). Условно-патогенные микроорганизмы, внедрившиеся в раневой
очаг из внешней среды, с кожи, при благоприятных условиях образуют значительные
скопления бактерий, а в ходе синергизма приобретают высокую патогенность с выраженной
токсической активностью и вирулентностью, чему способствует и применение антибиотиков.
В последнее время для поверхностной асептической обработки ран и поражённых
участков кожи у морских млекопитающих используются 0,2% раствор фурациллина, 3%
раствор борной кислоты, мазь на водорастворимой основе «Левомеколь», ветеринарный
препарат - мазь «Ям», дёготь берёзовый, плёнкообразующие аэрозоли.
Вместе с тем, в терапии поражений кожи различной этиологии у морских
млекопитающих с использованием вышеперечисленных антисептических препаратов
нередко отмечается неэффективность лечения за счёт узкого спектра антимикробного
действия, что вызывает необходимость использования высоких концентраций ингибирующих
веществ. Кроме того, негативно сказывается на результатах лечения вырабатываемая
возбудителями устойчивость к антимикробным средствам, аллергические и общетоксические
реакции организма. Несмотря на значительное количество антимикробных препаратов для
местного лечения инфекционных заболеваний кожи, нередко встречаются случаи отсутствия
эффекта от проведённой терапии, наблюдаются рецидивы, непереносимость и развитие
побочных действий лекарственных веществ.
Опыт ветеринарного обеспечения морских млекопитающих показал, что многие
медицинские препараты, традиционно применяемые в практике океанариумов, не всегда
приносят положительный эффект.
Целью настоящей работы явилось изучение действия антимикробного препарата из
липидов морских рыб в качестве антисептического средства для местной терапии и
профилактики гнойно-воспалительных инфекций у морских млекопитающих.
Антимикробный препарат из липидов морских рыб, разработанный во ФГУП «ТИНРОЦентр» (Патент РФ № 20443725), обладает высоким действием в отношении различных
видов микроорганизмов, обеспечивает выраженный клинический эффект и отсутствие
различных осложнений (Лаженцева, 2000. Шульгина и др., 1998). Авторами доказаны его
антимикробные свойства, получен положительный эффект при лечении гнойновоспалительных очагов кожи без побочного действия на организм больного, а так же
Электронный научный журнал «ИССЛЕДОВАНО В РОССИИ» 1307
http://zhurnal.ape.relarn.ru/articles/2005/128.pdf
разработаны способы его применения (Лаженцева и др. 2002, 2004; Лебедева и др., 2002,
2004).
В основе антимикробного действия препарата лежит способность вызывать
необратимые изменения в структуре и обмене веществ микробной клетки, которые ведут к
остановке роста, размножения и её гибели. Основной механизм противомикробного действия
– антиферментный (Лаженцева, 2000).
Активный состав препарата представлен соединениями, относящимися к классу ά, βненасыщенных гидрокси-альдегидов: 4-гидрокси-2-ноненаль (4-HNE) и 4-гидрокси-2, 6нонадиеналь (4HNDE), а так же веществами с оксодиеновыми ферментами в структуре их
молекул (Рыбин и др., 1999а, 1999б).
Имеющиеся в составе соединений гидрофильные (СНОН-СН=СН-СНО) – и
липофильные (СН³-СН²)4 – фрагменты обусловливают высокую подвижность и
реакционноспособность соединений, а ά, β-ненасыщенность конфигурации веществ
обеспечивает высокие электрофильные свойства (Beckman et al., 1990). Наиболее
чувствительными при атаке данных соединений являются SH-группы ферментов
одноклеточных организмов, скорость обменных процессов которых значительно выше, чем у
многоклеточных.
Для оценки влияния антимикробного препарата на местные инфекции из раневых
очагов у морских млекопитающих отбирали материал, представляющий собой соскобы,
гнойное отделяемое с поверхностей ран и поражённых участков, из которого выделяли
возбудителей. В таблице 1 приведены результаты, которые показывают, что возбудители
гнойно-воспалительных очагов у животных являются преимущественно условно-патогенные
виды бактерий.
Таблица 1
Микроорганизмы, выделенные из гнойно-воспалительных очагов
у морских млекопитающих
Этиология гнойноВозбудитель
Число положительных проб от
воспалительного
исследуемых животных
очага
число
%
Моноинфекция
P. aeruginosa
P. putida
P. fluorescens
A. salmonicida
V. alginolyticus
V. anguillarum
V. fischeri
Acinetobacter
P. vulgaris
Микроскопические грибы
6
7
21
5
34
12
2
11
6
28
3,0
3,5
10,7
2,6
17,4
6,1
1,0
5,6
1,0
14,2
Микстинфекции
P. aeruginosa + микроскопические
грибы
P. putida + Acinetobacter
P. vulgaris + A. salmonicida
+микроскопические. грибы
V. fischeri + P. vulgaris
P. fluorescens + V. alginolyticus
9
4,6
16
4
8,1
2,0
13
20
6,6
10,1
Электронный научный журнал «ИССЛЕДОВАНО В РОССИИ» 1308
http://zhurnal.ape.relarn.ru/articles/2005/128.pdf
3
V. anguillarum + V. alginoliticus
+ P. putida
Всего
1,5
197
Как видно, 67% гнойно-воспалительных процессов кожи и слизистых у морских
млекопитающих вызваны монокультурами, 33% - бактериальными ассоциациями.
Выделенные штаммы микроорганизмов были проверены на чувствительность к
антимикробному препарату у морских млекопитающих.
В таблице 2 приведены результаты изучения по влиянию антимикробного препарата на
выделенные штаммы возбудителей in vitro.
Таблица 2
Минимальные действующие концентрации антимикробного препарата
в зависимости от вида (рода) возбудителя
Микроорганизм
Staphylococcus
aureus
Streptococcus
pyogenes
Proteus vulgaris
Pseudomonas
aeruginosa
Escherichia coli
Corynobacterium
Соотношение
основа:препарат
1:4
Микроорганизм
1:4
1:5
1:4
Enterococcus
faecium
Bacteroides
Salmonella
1:3
1:4
1:5
1:4
Candida albicans
Candida tropicalis
1:3
1:3
Fusobacterium
Соотношение
основа:препарат
1:4
1:4
Примечание: в качестве основы может быть использована дистиллированная вода,
физиологический раствор, глицерин и другие препараты.
В связи с тем, что установлено выраженное действие антимикробного препарата в
отношении выделенных возбудителей гнойно-воспалительных процессов у морских
млекопитающих, препарат был использован для лечения местных инфекций. Всего было
пролечено 11 животных.
Местное введение препарата морским млекопитающим осуществляли в виде
асептической обработки ран, асептического обмывания, орошения, смазывания.
Примерами
выздоравления
морских
млекопитающих
при
использовании
антимикробного препарата для местного лечения различных видов инфекций могут являться
следующие случаи.
У северного морского котика по кличке Бакс был поставлен диагноз – острый
конъюнктивит, кератит. При клиническом осмотре обнаружены гиперемия слизистой
оболочки глаз, отёк верхнего и нижнего век, слезотечение. Общее состояние животного угнетенное, температура тела - 37,5 °С. Через сутки появилась слабость, состояние больного
животного ухудшилось, гипертермия век увеличилась, температура тела достигала 38°С.
Микробная обсемененность отделяемого из глаз достигла выше критического уровня более
100,0 тыс. клеток/мл). Местно сначала промывали глаза липидным препаратом, разведённым
стерильной водой, а затем закапывали в каждый глаз или делали примочки на оба глаза.
Препарат ежедневно задавался также во внутрь в дозе 7 мл. В качестве поддерживающей
Электронный научный журнал «ИССЛЕДОВАНО В РОССИИ» 1309
http://zhurnal.ape.relarn.ru/articles/2005/128.pdf
терапии использовали бициллин – 5 в дозе 1,5 млн. ЕД один раз в 10 дней,
иммуностимулятор «Тинростим» в дозе 100 мг в сутки в течение 10 дней, витаминные
препараты – компливит, гексавит, аскорбиновая кислота, кордиамин. На четвертые сутки
после начала ежедневного применения антимикробного препарата состояние животного
улучшилось, уменьшились общие явления интоксикации и местные явления воспаления.
Микробное обсеменение снизилось до уровня - ниже критического. На шестые сутки исчезла
гиперемия слизистых оболочек глаз, заметно снизилась отёчность век.
У белухи по кличке Надя, самки 4 года, отмечались белые афтозные поражения на
уздечке языка, на языке справа, отёк и гиперимия поражённых участков слизистой оболочки
языка. Диагноз - афтозный стоматит. Бактериоскопически установлено наличие в отделяемом
грамотрицательных и грамположительных бактериальных форм. Микробное обсеменение
раны было выше критического уровня. Местно применяли аппликации с антимикробным
препаратом. На 4 сутки отмечено уменьшение воспаления. Дальнейшего расплавления
соединительнотканных структур слизистой языка не отмечено. Бактериоскопически
обнаружены единичные бактериальные клетки, микробная обсемененность содержимого
раны – ниже критического уровня. На 8 сутки рана полностью очистилась от некротических
тканей. Явление воспаления купировались. На 11 сутки наступила практически полная
регенерация слизистой оболочки языка белухи.
У белухи по кличке Огонёк, 7 лет, 500 кг, в области хвостового плавника обнаружена
хроническая трофическая рана размером 20х12 см. Внутри раны отмечался воспалительный
процесс, гиперемия, внутренний отёк тканей. Из отделяемого раны выделены возбудители P. vulgaris, P. aeruginosa. Для лечения применяли антимикробный препарат из липидов рыб.
При этом поражённый участок кожи обрабатывали раствором антимикробного препарата с
глицерином методом пульсирующей струи при чередовании повышенного и нормального
давления. Обработку проводили чистым препаратом 3 раза в сутки с одновременным
введением внутрь с кормом в дозе 20 мл/сутки. В качестве поддерживающей терапии
использовали нистатин, иммуностимулятор «Иммунал» в дозе 30 капель ежедневно,
витаминные препараты – компливит, гексавит, аэвит. На 3 сутки отмечено уменьшение
отёка. Микробная обсеменённость раны была менее критического уровня (4,2 х 104 клеток в 1
см3). На 5 сутки сохранились явления воспаления, хотя рана видоизменилась, отёк
уменьшился. Появились первые признаки появления грануляционной ткани. На 10 сутки
произошло рубцевание и эпителизация поражённых участков кожи, несколько наблюдалась
незначительная депигментация серого цвета у поражённых пятен, которые через 1,5-2 недели
слились с общим цветом кожного покрова.
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности
использования антимикробного препарата из липидов рыб для местного лечения гнойновоспалительных
очагов.
Применение
препарата
обеспечивает
ингибирование
грамотрицательной и грамположительной микрофлоры, снижение бактериальной
обсемененности раны, а также стимулирующее действие на развитие грануляционной ткани и
процессы эпителизации.
Антимикробный препарат значительно ускоряет процессы очищения кожных
поражений от микроорганизмов. Применение препарата обеспечивает ингибирование
грамотрицательной и грамположительной микрофлоры, снижение бактериальной
обсеменённости поражённой кожи. Отмечена достоверная стимуляция в развитии
грануляционной ткани и действие на процессы эпителизации поверхности очищенных
поражённых участков кожи. Под влиянием препарата значительно быстрее исчезают явления
воспаления, гиперимии, отёка. На основании результатов проведённых исследований в
комплексной терапии гнойно-воспалительных очагов у морских млекопитающих
Электронный научный журнал «ИССЛЕДОВАНО В РОССИИ» 1310
http://zhurnal.ape.relarn.ru/articles/2005/128.pdf
разработаны основные принципы использования антимикробного препарата для лечения
белух и северных морских котиков.
Рациональным путём введения является местный или аппликационный, при котором
антисептический препарат наносится непосредственно на патологический очаг или область
защиты повреждённых либо интактных кожных покровов, слизистых оболочек и полостей.
Обязательным этапом обработки антимикробным препаратом биотопов является
освобождение их от мёртвых тканей, гноя, жира, слущенного эпителия, так как при этом
открывается доступ препарата к локализованным в стенке биотопа микробам и в
благоприятную сторону увеличивается соотношения между молекулами соединений и
микробными клетками.
Местное введение препарата морским млекопитающим возможно в виде асептической
обработки ран, асептического обмывания, орошения, смазывания.
Литература
1. Патент № 20443725. Способ получения пищевого консерванта из природного сырья и
способ приготовления рыбных продуктов с его использованием (Авторы: Блинов Ю.Г.,
Шульгина Л.В., Горшкова М.М., Акулин В.Н., Бывальцева Т.М., Давлетшина Т.А.)
2. Лаженцева Л. Ю. Влияние антимикробного препарата из липидов морских рыб на
возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний: Автореф. канд. дисс... биол. наук.Владивосток, 2000. – 26с.
3. Лаженцева Л. Ю., Лебедева И. Е. Влияние микрофлоры белух на процесс адаптации в
условиях Владивостокского дельфинария // Всероссийская Интернет-конференция молодых
учёных, Владивосток, ТИНРО-Центр, 2002 – С. 56-60.
4. Лаженцева Л. Ю., Шульгина Л. В., Лебедева И. Е. Микрофлора белух в период
адаптации в условиях Владивостокского дельфинария // Известия ТИНРО, 2004. - т. 136. – С.
290-293.
5. Лебедева И.Е., Дорошенко А.Н. Дифференциация распространения дерматомикозов у
белухи, вызванных грибами // Материалы 2 Международной конференции «Морские
млекопитающие Голарктики». – Иркутск, 2002. – 192-196.
6. Лебедева И. Е.. Лаженцева Л. Ю. Некоторые поражения кожи у белух (Delphinapterus
leucas) // Материалы второй Интернет-конференции молодых ученых «Актуальные проблемы
изучения и использования водных биоресурсов». - Владивосток, 2004. – С. 25-28
7. Лебедева И. Е., Лаженцева Л. Ю. Комплексное лечение белух в период адаптации в
условиях Владивостокского дельфинария // Материалы 2 Международной конференции
«Морские млекопитающие Голарктики». Коктебель, 2004. – С. 260-267.
8. Рыбин В.Г., Куклеев Д.В., Бывальцева Т.М, Блинов Ю.Г., Акулин В.Р. (2Е) – 4гидрокси-2-ноненаль – активный компонент нового природного антимикробного препарата //
Биологическая химия. – 1999а. – Т. 25. - №9. - С. 716-720.
9. Рыбин В.Г., Куклеев В.Г., Бывальцева Т.М., Акулин В.Н., Блинов Ю.Г., (2Е, бZ) –4гидрокси-2 ноненаль – активный компонент антимикробного препарата// Известие ТИНРО,
1999б. - Т.125. - С.238-243.
10. Шульгина Л.В., Блинов Ю.Г., Бывальцева Т.М., Давлетшина Т.А., Усов В.В., Дугина
В.М. Применение водного экстракта из липидов морских рыб при лечении гнойных
процессов у хирургических больных // Сб.: Новые биомедицинские технологии с
использованием биологически активных добавок. - Владивосток, 1998.- С. 171-174.
11. Backman J.K., Howard M.J., Greene H.L., Identification of hydroxyalkenals formed from
omega-3 fatty acids // Biochem. Biophys. Res.Commun., 1990.- V. 31.- P. 39-45.