ГЛЮКОЗА гексокиназный метод Назначение. Для количественного определения in vitro концентрации глюкозы в сыворотке, плазме, моче или спинно-мозговой жидкости. GL 1611, 3881 Стабильность и приготовление реактива и стандарта. Глюкоза-6-фосфат + НАД+ ----------------------------> глюконат-6-фосфат + НАДН + H+ R1а Буфер Реактив готов для использования, стабилен до окончания срока годности при температуре хранения +2..+8°C. R1b Энзим реагент Содержимое флакона стабильно до окончания срока годности при температуре хранения +2..+8°C. Рабочий реагент. Для приготовления рабочего реагента перенесите содержимое флакона R1b во флакон R1a. Несколько раз ополосните флакон R1b содержимым флакона R1a, каждый раз переливая во флакон R1a. При малом количестве тестов смешайте 100 мкл энзим реагента (R1b) с 10 мл буфера (R1a). Рабочий реагент стабилен в течение 3 месяцев при температуре хранения +2 - +8оС, либо в течение 2 недель при температуре хранения +15 25оС в защищенном от света месте. Рабочий реагент стабилен на борту анализатора при температуре примерно +10°C приблизительно в течение 4 недель. Стандарт (для набора GL 1611). Содержимое флакона готово к использованию. Стабилен до окончания срока годности при температуре хранения +2 - +8оС. Сбор и подготовка проб. Калибровка и контроль качества. Сыворотка, плазма, моча или спинно-мозговая жидкость. Если сыворотка или плазма не могут быть проанализированы в течение 1 часа после сбора, необходимо отделить сыворотку или плазму от клеток крови. Для подавления гликолиза рекомендуется добавить в образцы ингибитор (NaF или KF). В таком виде образцы стабильны в течение 24 часов при температуре хранения +15 +25 град.С, и в течение 7 суток при температуре хранения +4 град.С. Образцы мочи стабильны в течение 24 часов при их хранении в затемненном флаконе. Выполнение калибровки можно провести либо при помощи стандарта, входящего в состав набора GL 1611, либо с использованием калибровочной мультисыворотки RANDOX уровень 2 (CAL 2350) или уровень 3 (CAL 2351), либо с использованием мультикалибратора RANDOX (MC 1382). Используйте значения для метода Hexokinase. Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать либо контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532), либо контрольную сыворотку на воспроизводимость RANDOX уровень 2 (UN 1557) и уровень 3 (UE 1558), либо RANDOX мультиконтроль уровень 1 (MC 1379), уровень 2 (MC 1380), уровень 3 (MC 1381). Для контроля мочи рекомендуется использовать либо RANDOX контрольную мочу уровень 2 (AU 2352) и уровень 3 (AU 2353), либо RANDOX контрольную мочу на воспроизводимость уровень 2 (UC 1502) и уровень 3 (UC 1503). Для контроля спинно-мозговой жидкости рекомендуется использовать RANDOX контроль спинно-мозговой жидкости уровень 2 (CF 1500) и уровень 3 (CF 1501) Кат. No. GL 1611 R1а Буфер 4 х 100 мл R1b Энзим реагент 4 х 1,0 мл Стандарт 1 х 5 мл Данный набор рассчитан на проведение до 1880 тестов на биохимическом анализаторе Сапфир400. Кат. No. GL 3881 R1а Буфер 4 х 50 мл R1b Энзим реагент 4 х 0,5 мл Данный набор рассчитан на проведение до 920 тестов на биохимическом анализаторе Сапфир400. Принцип метода. Основан на полной утилизации глюкозы при помощи двух последовательных ферментативных реакции с участием гексокиназы и глюкозо-6фосфат дегидрогеназы. гескокиназа Глюкоза + АТФ --------> Глюкоза-6-фосфат + АДФ Глюкозо-6-фосфат дегидрогеназа Состав реактивов. R1а Буфер Пипес 100 ммоль/л; рН 7,6 АТФ 4 ммоль/л + НАД 3 ммоль/л Ионы магния 15 ммоль/л Азид натрия R1b Энзим реагент Гексокиназа (для набора GL 1611) ≥50 Ед/мл Гексокиназа (для набора GL 3881) ≥25 Ед/мл Глюкозо-6-фосфат дегидрогеназа для набора GL 1611 ≥150 Ед/мл для набора GL 3881 ≥75 Ед/мл Азид натрия Стандарт (для набора GL 1611) Раствор глюкозы 5,55 ммоль/л Меры предосторожности Набор предназначен только для диагностики in vitro. Не пипетируйте ртом. Соблюдайте обычные при лабораторных процедурах меры предосторожности. Значения нормы в пробах. В сыворотке и плазме 3,9 – 5,8 ммоль/л В моче 0 – 1,1 ммоль/л В спинно-мозговой жидкости 2,8 – 4,2 ммоль/л Линейность. Метод линеен до концентрации глюкозы в пробе 26 ммоль/л. ГЛЮКОЗА GL 1611, 3881 гексокиназный метод Программирование на биохимическом анализаторе Сапфир-400 с русскоязычной программой Программирование на биохимическом анализаторе Сапфир-400 с англоязычной программой Название Item Name Глюк. (пример) GLUC (пример) DATA INFORMATION Units mmol/l Decimals 1 ИНФОРМАЦИЯ О ДАННЫХ Единицы ммоль/л Точность 1 ANALYSIS TYPE Main W.Length Sub W.Length Параметры анализа Тип END Осн.ДВ 340 Всп.ДВ 380 END 340 380 CORR SLOPE INTER Y= 1 X+ 0 Коррекция Наклон СДВИГ Y= 1 X+ 0 CALIBRATION TYPE Linear STANDARD #1 14.7 (пример) Калибровка Тип Линейный 1 Стандарт #1 14.7 (пример) NORMAL RANGE MALE LOW 3.9 0 3.9 2.8 Значения норм Сыворотка Моча Плазма СМЖ Диализ Другое Мужчина Нижн Верхн 3.9 5.8 0 1.1 3.9 5.8 2.8 4.2 Женщина Нижн Верхн 3.9 5.8 0 1.1 3.9 5.8 2.8 4.2 Serum Urine Plasma CSF Dialysis Other ASPIRATION KIND ● Single Методика анализа Тип ● 1-реаг ○ 2-реаг ОБЪЕМ 3 Образец 200 Реагент 1 μl SAMPLE REAGENT 1 VOL R1 Blank Предел абсорбции Нижн. 0 Верхн. 2.5 ПРЕДЕЛ КОН.Т. 2.5 ЛИНЕЙНОСТЬ (%) 15 ABSORBANCE LIMIT LOW. 0 HIGH 2.5 ENDPOINT LIMIT 2.5 LINEAR CHECK (%) 15 Повтор с авторазведением ● вкл ○ выкл Авторазведение по заданному пределу абсорбции Нижн. ○ вкл ● выкл Верхн ○ вкл ● выкл Предел линейности методики ○ вкл ● выкл Нижн Сыворотка Моча Плазма СМЖ Диализ Другое ● вкл ○ выкл Верхн 26 26 26 26 μl ○ Water-Blank ● R1-Blank 1 DATA PROCESS READ START 52 MAIN SUB Dilution Diluent FEMALE LOW HIGH 3.9 5.8 0 1.1 3.9 5.8 3.8 4.2 ○ Double VOLUME 3 200 ОБРАБОТКА ДАННЫХ Считывание Старт Стоп 52 54 Основн. 9 11 Дополн. Авторазвеление образца Развести ● 99:Разв.1 ○ 100:Разв.2 HIGH 5.8 1.1 5.8 4.2 ● 99:Dil1 Auto Rerun SW ● On ○ Off END 54 ○ 100:Dil.2 Auto Rerun Condition (Absorbance) Absorbance Range Lower ○ On ● Off Higher ○ On ● Off Auto Rerun Range (Result) ○ On ● Off ● On ○ Off LOW HIGH 26 Serum 26 Urine 26 Plasma 26 CSF Dialysis Other