012300 Область техники, к которой относится изобретение

012300
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к медицине, в частности к новой нутрицевтической композиции.
Diabetes mellitus (сахарный диабет) является широко распространенным хроническим заболеванием, которое до сих пор является неизлечимым. Процент и распространенность сахарного диабета растет
экспоненциально, и он является самым распространенным среди метаболических заболеваний в развитых и развивающихся странах. Diabetes mellitus является комплексным заболеванием, происходящим от
многочисленных каузальных факторов и характеризующимся нарушением углеводного, белкового и жирового метаболизма, связанного с недостатком секреции инсулина и/или резистентностью к инсулину.
Это приводит к постоянному чувству голода и повышению послеобеденных концентраций глюкозы в
сыворотке, которое приводит к осложнениям, если остается без внимания. Существует два главных вида
заболевания: инсулинозависимый сахарный диабет (IDDM, T1DM) и неинсулинозависимый сахарный
диабет (NIDDM, T2DM). T1DM = сахарный диабет тип 1. T2DM = сахарный диабет тип 2.
T1DM и T2DM диабеты связаны с гипергликемией, гиперхолестеринемией и гиперлипидемией. Абсолютное отсутствие инсулина и нечувствительность к инсулину при T1DM и T2DM соответственно,
приводит к уменьшению утилизации глюкозы печенью, мышцами и жировой тканью и приводит к увеличению уровней глюкозы в крови. Неконтролируемая гипергликемия связана с увеличенной и преждевременной смертностью из-за увеличения риска микроваскулярных и макроваскулярных заболеваний,
включая нефропатию, невропатию, ретинопатию, повышенное кровяное давление, инсульт и заболевание
сердца. Недавно было доказано, что жесткий гликемический контроль является основным фактором для
предотвращения этих осложнений при обоих T1DM и T2DM. Следовательно, оптимальный гликемический контроль с помощью лекарственных средств и терапевтических предписаний является важным подходом для лечения диабета.
Терапия при T2DM первоначально включает диету и изменения стиля жизни, если этими мерами не
удается обеспечивать адекватный гликемический контроль, пациентам назначают пероральные гипогликемические агенты и/или внешний инсулин. Современные пероральные фармакологические агенты для
лечения T2DM включают те, которые потенцируют секрецию инсулина (агенты с сульфонилмочевиной),
те, которые улучшают действие инсулина на печень (бигуанидные агенты), инсулин-активизирующие
агенты (тиодиазолидиндионы) и агенты, которые препятствуют усвоению глюкозы (ингибиторы αглюкозидазы). Однако доступные в настоящее время агенты обычно не могут обеспечивать адекватный
гликемический контроль в течение длительного периода времени из-за прогрессирующего ухудшения
гипергликемии, происходящего из-за прогрессирующей потери функции панкреатических клеток. Количество пациентов, для которых удается поддерживать желаемые уровни гликемии, заметно уменьшается
в течение времени, делая необходимым введение дополнительных/альтернативных фармакологических
агентов. Кроме этого, лекарственные средства могут иметь побочные эффекты, что связано с высокими
интенсивностями первичных и вторичных отказов. В конечном счете, использование гипогликемических
лекарственных средств может быть эффективным для контроля уровней глюкозы в крови, но может не
предотвращать всех осложнений диабета. Таким образом, существующие в настоящее время способы
лечения всех типов diabetes mellitus не могут достигать идеалов нормогликемии и предотвращать осложнения диабета.
Поэтому, хотя выбор терапии для лечения T1DM и T2DM основывается, по существу, на введении
инсулина и пероральных гипогликемических лекарственных средств, существует потребность безопасного и эффективного диетического приложения (добавки) с минимальными побочными эффектами для
лечения и предотвращения диабета. Многие пациенты заинтересованы в альтернативных терапиях, которые могли бы минимизировать побочные эффекты, связанные с высокими дозами лекарственных
средств, и приносить дополнительную клиническую пользу. Пациенты с diabetes mellitus имеют особый
интерес к лечению, рассматриваемому как "природный", с мягкими антидиабетическими эффектами и
без основных побочных эффектов, который может использоваться как вспомогательное лечение. T2DM
является прогрессирующим и хроническим заболеванием, которое обычно не распознается, пока не наносит значительный ущерб панкреатическим клеткам, ответственным за производство инсулина (βклетки островков Лангерганса). Поэтому, существует растущий интерес к разработке диетической добавки, которая может использоваться для предотвращения повреждения β-клеток и, таким образом, прогрессирования явного T2DM у людей, находящихся в группе риска, особенно пожилых, которые имеют
высокий риск развития T2DM. Защита панкреатических β-клеток может быть достигнута уменьшением
уровней глюкозы в крови и/или липидов, так как глюкоза и липиды оказывают разрушительное влияние
на β-клетки. Сокращение уровней глюкозы в крови может быть достигнуто с помощью различных механизмов, например, увеличения чувствительности к инсулину и/или сокращения производства печеночной глюкозы. Сокращение уровней липидов в крови также может быть достигнуто с помощью различных механизмов, например, путем увеличения окисления и/или хранения липида. Другая возможная
стратегия защиты панкреатических β-клеток состояла бы в уменьшении окислительного стресса. Окислительный стресс также служит причиной повреждения β-клеток с последующей потерей секреции инсулина и прогрессирования явного T2DM.
-1-
012300
Следовательно, T2DM является сложным заболеванием, проистекающим из-за сосуществующих
дефектов многочисленных участков органов: нечувствительности к действию инсулина в мышечных и
жировых тканях, дефектной панкреатической секреции инсулина, неограниченного производства печеночной глюкозы. Эти дефекты часто связаны с нарушением липидного обмена липида и эндотелиальной
дисфункцией. Учитывая многократные патофизиологические повреждения при T2DM, комбинированная
терапия является привлекательным подходом для его лечения.
Раскрытие изобретения
Настоящее изобретение относится к новым нутрицевтическим композициям, содержащим белковые
гидролизаты и лейцин. Нутрицевтические композиции, содержащие лейцин, также могут содержать негидролизованные белки и углеводы в качестве активных компонентов для лечения или предотвращения
сахарного диабета или других состояний, связанных с нарушением глюкозной толерантности, таких как
синдрома X и ожирения. Другая задача настоящего изобретение касается применения таких композиций
в качестве диетических добавок для упомянутого лечения или предотвращения в качестве, например,
добавки к мультивитаминным препаратам, содержащим витамины и минералы, которые являются существенными для поддержания нормального метаболического функционирования, но не синтезируются в
организме. Еще одна задача изобретения касается способа лечения обоих типов 1 и 2 сахарного диабета и
предотвращения T2DM у субъектов с преддиабетом или нарушением глюкозной толерантности (IGT),
или ожирением, который включает назначение нуждающемуся субъекту такого состава из лейцина и
гидролизатов белка или негидролизованных белков и/или углеводов.
Композиции по настоящему изобретению, в особенности, предназначены для лечения обоих T1DM
и T2DM и для предотвращения T2DM у субъектов с преддиабетом или нарушением глюкозной толерантности (IGT), или тучностью.
Настоящее изобретение касается композиции, которая включает одну аминокислоту и белковый
гидролизат. Предпочтительно, одна аминокислота является лейцином. Под одной аминокислотой или
одной аминокислотой, являющейся лейцином, здесь понимается, что присутствующие в композиции или
в ингредиентах аминокислоты, которые предназначены для применения по настоящему изобретению,
состоят по меньшей мере на 70 мас.% из одной аминокислоты (такой как лейцин), предпочтительно по
меньшей мере на 80 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере на 90 мас.%, и на менее чем 30
мас.%, предпочтительно на менее чем 20 мас.%, более предпочтительно на менее чем 10 мас.% из других
присутствующих аминокислот. Эту комбинацию одной аминокислоты, предпочтительно лейцина и белкового гидролизата предпочтительно используют для увеличения инсулина в плазме крови, предпочтительно для диабета типа 2 или преддиабета.
Неожиданно было найдено, что эта аминокислота, объединенная с гидролизатом, может быть использована для диабетов типа 2 или преддиабетов, предпочтительно для понижения послеобеденных
концентраций глюкозы или увеличения послеобеденной секреции инсулина в кровь. Неожиданно было
найдено, что применение комбинации лейцина и гидролизата дает одинаковые или даже лучшие результаты, чем, например, комбинация двух аминокислот, таких как лейцин и фенилаланин, и гидролизат.
Комбинации, содержащие комбинацию активных ингредиентов, то есть лейцина и белковых гидролизатов или негидролизованных белков и/или углеводов синергически стимулируют секрецию инсулина
и увеличивают передачу глюкозы в чувствительные к инсулину целевые ткани, такие как жировые ткани,
скелетные мышцы и печень и, таким образом, обеспечивают синергические эффекты для лечения сахарного диабета.
Термин «нутрицевтический», как используется здесь, обозначает применимость как в пищевой, так
и в фармацевтической областях. Таким образом, новые нутрицевтические композиции могут найти применение в качестве добавок к пище и напиткам и в качестве фармацевтических препаратов для энтерального и парентерального применения, которые могут быть в твердой форме, как капсулы или таблетки
или в жидкой форме, как растворы или суспензии. Как будет очевидно далее, термин «нутрицевтическая
композиция» также содержит пищу и напитки, содержащие лейцин и белковые гидролизаты или негидролизованные белки и/или углеводы, также как и добавки, содержащие вышеупомянутые активные ингредиенты.
Белковый гидролизат может быть подготовлен инкубированием источника белка с отдельной протеазой или комбинацией протеаз. Такими протеазами могут быть протеазы любого типа, включая, но не
ограничиваясь, эндопротеазами, аминопептидазами, карбоксипептидазами или ди- и триаминопептидазами.
Источником белка может, в принципе, быть любой источник белка.
Предпочтительным источником является казеин или сывороточный белок. Композиция, содержащая сывороточный белок согласно изобретению, может быть любой композицией, содержащей сывороточный белок, такой как молочный, сливочный или сырный сывороточный белок. Препараты сывороточного белка коммерчески доступны в нескольких формах, таких как, концентраты сывороточного белка (WPC) и изоляты сывороточного белка (WPI). Подходящие белковые субстраты для гидролиза также
включают цельное молоко, обезжиренное молоко, кислый казеин, сычужный казеин, продукты кислой
сыворотки или продукты сыворотки сыра. Кроме того, растительные субстраты, такие как пшеничный
-2-
012300
глютен, молотые ячменные и протеиновые фракции, полученные, например, из сои, риса или кукурузы,
также являются подходящими субстратами.
Белковые гидролизаты могут быть получены взаимодействием с одним протеолитическим ферментом или комбинацией протеолитических ферментов. В случае если используется более чем одна протеаза, эти протеазы могут прибавляться к белковому субстрату одновременно. В качестве альтернативы,
протеазы могут прибавляться к белку в заранее определенной последовательности. При необходимости,
прибавлению следующей протеазы предшествует инактивация протеазы или протеаз, которые использовались ранее в процессе гидролиза. Такая инактивация может достигаться различными способами, и выбранный способ зависит от протеазы, которая должна быть инактивирована. Способы инактивации
включают, но не ограничиваются, нагреванием и изменением рН. В качестве альтернативы, могут быть
использованы коммерчески доступные гидролизаты.
Степень гидролиза (DH) белкового субстрата является важным параметром. DH, который может
быть достигнут для белкового гидролизата, зависит от большого числа параметров, которые включают,
но не ограничиваются выбором для конкретной протеазы: время, которое позволяет гидролизу произойти, условия реакции (рН, температура, концентрация соли и т.д.) и пред-обработка белкового субстрата
перед его использованием для протеолитического гидролиза. DH гидролизата, подходящая для процесса
по изобретению, может варьироваться от 5-50, предпочтительно от 10-40, более предпочтительно от 1535. Гидролизат может содержать свободные аминокислоты. Способы определения DH известны специалистам в данной области, например, ОРА-метод, описанный Church et al. (Anal Biochem (1985) 146, 343).
Гидролизаты далее могут быть обработаны различными способами, включающими, но не ограниченными, распылительной сушкой, ультрафильтрацией, осушительным вымораживанием, вакуумной
сушкой. После высушивания сухой материал может быть размолот и/или просеян для получения фракций конкретного размера. Для облегчения высыхания или воздействия на конечные характеристики высушенного гидролизата, такие как тенденция к образованию комков или смачиваемость, к гидролизату
могут быть прибавлены вещества.
В соответствии с настоящим изобретением, неожиданно было найдено, что композиции, включающие лейцин и белковые гидролизаты или лейцин и негидролизованные белки, или лейцин, белковые гидролизаты и углеводы, или лейцин, негидролизованные белки и углеводы, синергически стимулируют
панкреатическую секрецию инсулина и увеличивают передачу глюкозы к инсулин чувствительным целевым тканям. Воздействия композиций намного больше, чем ожидаемые воздействия, оцененные сложением воздействий, проявленных одними лейцином и белковыми гидролизатами или негидролизованными белками или углеводами. Таким образом, композиции, содержащие лейцин и белковые гидролизаты или негидролизованные белки и/или углеводы синергически увеличивают панкреатическую секрецию
инсулина и увеличивают передачу глюкозы к инсулин чувствительным целевым тканям. Поэтому, композиции, содержащие лейцин и белковые гидролизаты или негидролизованные белки и/или углеводы,
могут применяться для предотвращения или лечения обоих T1DM и T2DM, и для предотвращения T2DM
у субъектов с преддиабетом, нарушением глюкозной толерантности (IGT) или ожирением.
Использование комбинаций лейцина и белковых гидролизатов или негидролизованных белков
и/или углеводов, которые индивидуально проявляют различные механизмы действия, являются эффективными для достижения и поддержания целевых уровней глюкозы в крови у диабетических пациентов.
Комбинации активных компонентов, идентифицированных выше, были задуманы из-за их различных воздействий для того, чтобы воспользоваться преимуществом синергических и мультинаправленных
воздействий. Вследствие различных механизмов действия индивидуальных активных ингредиентов,
комбинации не только улучшают гликемический контроль, но также приводят к снижению дозы лекарственного средства в некоторых назначениях и минимизированию неблагоприятных эффектов. Из-за их
различных механизмов и участков действия определенные комбинации диетических добавок, которые
обсуждались выше, также пользуются преимуществом синергических эффектов для достижения понижения уровня глюкозы больше, чем могут обеспечить отдельные агенты. Таким образом, хотя выбранные терапии для терапевтического лечения T1DM и T2DM основаны, по существу, на введении инсулина
и пероральных гипогликемических лекарственных средств, соответствующая диетическая терапия также
имеет большое значение для успешного лечения диабетиков.
Для получения адекватного количества существенного питательного вещества, отсутствующего в
некоторых диетах, к нутрицевтическим композициям по настоящему изобретению может быть добавлен
мультивитамин и минеральная добавка. Мультивитамин и минеральная добавка также могут быть полезны для предотвращения болезни и защиты против пищевых потерь и дефицитов, возникающих из-за образа жизни и обычных неадекватных диетических систем, иногда наблюдаемых при диабетах. Кроме
того, окислительный стресс был включен в развитие резистентности к инсулину. Реагирующие кислородные частицы могут нарушать инсулин стимулируемое усвоение глюкозы нарушением инсулин рецепторного сигнального каскада. Контроль окислительного стресса антиоксидантами, такими как αтокоферол (витамин Е), аскорбиновая кислота (витамин С), может быть ценным при лечении диабета.
Поэтому потребление мультивитаминной добавки может быть добавлено к вышеупомянутым активным
веществам для поддержания хорошо сбалансированного питания.
-3-
012300
Другим важным применением одной аминокислоты, предпочтительно лейцина и белкового гидролизата, является повышение уровня гликогена у субъекта, нуждающегося в повышении гликогенового
уровня или для повышения секреции инсулина для субъекта, нуждающегося в этом. Последние применения могут использоваться, например, для атлетов или других людей, занимающихся физическими упражнениями. Белковый гидролизат и аминокислота, предпочтительно лейцин, могут использоваться как
добавка в любых энергетических и метаболических нутриентах. Энергетические или питательные нутриенты могут быть в форме напитка, такого как спортивные напитки, энергетические напитки или другие
безалкогольные напитки, или любого другого пищевого рецепта, подходящего для атлета или другого
субъекта, нуждающегося в увеличенном уровне гликогена или увеличенном производстве инсулина.
Энергетические или питательные нутриенты, предпочтительно, имеют форму для перорального использования. Такое увеличение уровня гликогена или повышение секреции инсулина может, например, приводить к более быстрому восстановлению запасов гликогена и более быстрому восстановлению деградированных мышечных белков.
Спортивный напиток - напиток, который допускается для регидратирования атлетов, также как восстанавливающие электролиты, сахар и другие нутриенты. Спортивные напитки обычно являются изотоническими, что означает, что они содержат те же самые пропорции питательных веществ, которые присутствуют в человеческом организме. (Источник: < http: // en.wikipedia.org/wiki/Sports drink >)
Энергетические напитки - напитки, которые содержат легальные стимуляторы, витамины (особенно
витамины группы В) и минералы, дают пользователю вспышку энергии. Обычные компоненты включают: кофеин, гуарану (кофеин растения гуарана), таурин, различные формы женьшеня, мальтодекстрин,
инозит, карнитин, креатин, глюкуронолактон и китайское гинкго. Некоторые могут содержать высокие
уровни сахара или глюкозы. Многие такие напитки являются ароматизированными и/или колорированными. (Источник: < http: // en.wikipedia.org/wiki/Energy drink >)
Безалкогольный напиток - напиток, который не содержит алкоголь, в противоположность алкогольным напиткам. В общем, термин применяется только для холодных напитков. Горячий шоколад, чай и
кофе не рассматриваются как безалкогольные напитки. Термин первоначально относился исключительно
к газированным напиткам, и все еще является общеупотребительным в том же смысле. (Источник: < http:
// en.wikipedia.org/wiki/Soft drink >)
В предпочтительном аспекте изобретения, нутрицевтическая композиция по настоящему изобретению содержит лейцин и белковые гидролизаты. Лейцин по изобретению присутствует в композиции в
количестве, обеспечивающем ежедневную дозу от около 0,001 г на кг массы тела до около 1 г на кг массы тела субъекта, которому назначается данная композиция. Пища или напиток соответственно содержат
лейцина от около 0,05 г на порцию до 50 г на порцию. Если нутрицевтическая композиция является фармацевтической композицией, такая композиция может содержать лейцин в количестве от около 0,001 г
до около 1 г на одну единицу дозировки, например, на капсулу или таблетку, или от около 0,035 г на
ежедневную дозу до около 70 г на ежедневную дозу жидкого препарата. Белковые гидролизаты, соответственно, присутствуют в композиции по изобретению в количестве, обеспечивающем дневную дозу от
около 0,01 г на кг массы тела до около 3 г на кг массы тела субъекта, которому назначается данная композиция. Пища или напиток, соответственно, содержат белковых гидролизатов около 0,1 г на порцию до
около 100 г на порцию. Если нутрицевтическая композиция является фармацевтической композицией,
такая композиция может содержать белковых гидролизатов в количестве от около 0,01 г до около 5 г на
одну единицу дозировки, например, на капсулу или таблетку, или от около 0,7 г на ежедневную дозу до
около 210 г на ежедневную дозу жидкого препарата.
В другом предпочтительном аспекте изобретения, композиция содержит лейцин, как определено
выше, и негидролизованные белки. Негидролизованные белки соответственно присутствуют в композиции по изобретению в количестве, обеспечивающем ежедневную дозу от около 0,01 г на кг массы тела до
около 3 г на кг массы тела субъекта, которому назначается данная композиция. Пища или напиток, соответственно, содержат негидролизованных белков от около 0,1 г на порцию до около 100 г на порцию.
Если нутрицевтическая композиция является фармацевтической композицией, такая композиция может
содержать негидролизованных белков в количестве от около 0,01 г до около 5 г на одну единицу дозировки, например, на капсулу или таблетку, или от около 0,7 г на ежедневную дозу до около 210 г на ежедневную дозу жидкого препарата.
В еще одном предпочтительном аспекте изобретения, композиция содержит лейцин и белковые
гидролизаты или негидролизованные белки, как определено выше, и углеводы. Углеводы, соответственно, присутствуют в композиции по изобретению в количестве, обеспечивающем ежедневную дозировку
от около 0,01 г на кг массы тела до около 7 г на кг массы тела субъекта, которому назначается данная
композиция. Пища или напиток соответственно содержат углеводов от около 0,5 г на порцию до около
200 г на порцию. Если нутрицевтическая композиция является фармацевтической композицией, такая
композиция может содержать углеводы в количестве от около 0,05 г до около 10 г на одну единицу дозировки, например, на капсулу или таблетку, или от около 0,7 г на ежедневную дозу до около 490 г на ежедневную дозу жидкого препарата.
Предпочтительные нутрицевтические композиции по изобретению включают лейцин и белковые
-4-
012300
гидролизаты или негидролизованные белки и/или углеводы, особенно комбинации:
Лейцин и белковые гидролизаты;
Лейцин и белковые гидролизаты и углеводы;
Лейцин и негидролизованные белки;
Лейцин и негидролизованные белки и углеводы;
Наиболее предпочтительной является комбинация лейцина и белковых гидролизатов.
Рамки дозировки (для 70-килограммового человека)
Лейцин: 0,005-70 г/дней
Белковые гидролизаты: 0,07-210 г/дней
Негидролизованные белки: 0,07-210 г/дней
Углеводы: 0,1-490 г/дней
Описание фигур
Фиг. 1. Средние (±SEM) концентрации инсулина в плазме (А) и отклик (В) через 4 часа после введения углевода (СНО; пустые столбцы), углевода с белковым гидролизатом (CHO+PRO; заштрихованные столбцы) и углевода, белкового гидролизата и свободного лейцина (CHO+PRO+LEU; закрашенные
столбцы) для пациентов с диабетом типа 2 (T2D) и здоровых контрольных субъектов (CON). *: значительно отличается в сравнении с СНО опытом Р<0,05, #: значительно отличается в сравнении с
CHO+PRO опытом, Р<0,05. Не было найдено отличий в откликах инсулина между группами из одного
опыта; n=10 на группу.
Фиг. 2. Средние (±SEM) концентрации глюкозы в плазме (А) и отклик (В) через 4 часа после введения углевода (СНО; пустые столбцы), углевода с белковым гидролизатом (CHO+PRO; заштрихованные
столбцы) и углевода, белкового гидролизата и свободного лейцина (CHO+PRO+LEU; закрашенные
столбцы) для пациентов с диабетом типа 2 (T2D) и здоровых контрольных субъектов (CON). *: значительно отличается в сравнении с СНО опытом Р<0,05, #: значительно отличается от группы диабета,
Р<0,01; n=10 на группу.
Фиг. 3. Средние (±SEM) отклики незаменимых плазменных (без лейцина, ЕАА-LEU) и заменимых
аминокислот (NEAA) через 4 ч после введения углевода (СНО; пустые столбцы), углевода с белковым
гидролизатом (CHO+PRO; заштрихованные столбцы) и углевода, белкового гидролизата и свободного
лейцина (CHO+PRO+LEU; закрашенные столбцы) для пациентов с диабетом (А) и здоровых контрольных субъектов (В). *: значительно отличается по сравнению с СНО опытом Р<0,05, #: значительно отличается по сравнению с CHO+PRO опытом, Р<0,05. Не было найдено отличий в откликах инсулина между
группами из одного опыта, n=10 на группу.
Следующие примеры также иллюстрируют изобретение.
А. Фармацевтические композиции могут быть приготовлены обычными препаративными способами с применением ингредиентов, определенных ниже:
Пример 1. Мягкая желатиновая капсула
Мягкие желатиновые капсулы могут быть приготовлены обычными способами с применением ингредиентов, определенных ниже:
Активные ингредиенты: лейцин 0,1 г, белковые гидролизаты 0,3 г. Другие ингредиенты: глицерин,
вода, желатин, растительное масло.
Пример 2. Твердая желатиновая капсула
Твердые желатиновые капсулы могут быть приготовлены обычными способами с применением ингредиентов, определенных ниже:
Активные ингредиенты: лейцин 0,3 г, белковые гидролизаты 0,7 г
Другие ингредиенты:
Наполнители: лактоза или целлюлоза или производные целлюлозы.
Лубриканты: стеарат магния, при необходимости (0,5%)
Пример 3. Таблетка
Таблетки могут быть приготовлены обычными способами с применением ингредиентов, определенных ниже:
Активные ингредиенты: лейцин 0,4 г, белковые гидролизаты 0,4 г
Другие ингредиенты: микрокристаллическая целлюлоза, диоксид кремния (SiO2), стеарат магния,
кросскармелоза натрия.
В. Пищевые продукты могут быть приготовлены обычными способами с применением ингредиентов, определенных ниже:
Пример 4.
Безалкогольный напиток с 30% сока
Стандартная порция: 240 мл
Активные ингредиенты:
Лейцин и белковые гидролизаты и мальтодекстрин, который включается в этот пищевой объект в
качестве источника углеводов:
-5-
012300
Лейцин: 0,5-5 г/ на дозу
Белковые гидролизаты: 1,5-15 г/ на дозу
Мальтодекстрин: 3-30 г/ на дозу
I. Безалкогольный напиток готовили из следующих ингредиентов: концентраты сока и водорастворимые ароматизаторы
Концентраты сока и водорастворимые ароматизаторы смешивают без доступа воздуха. Краситель
растворяют в деионизированной воде. Аскорбиновую кислоту и лимонную кислоту растворяют в воде.
Бензоат натрия растворяют в воде. При перемешивании прибавляют пектин и растворяют при кипении.
Раствор охлаждают. Апельсиновое масло и маслорастворимые ароматизаторы предварительно смешивают. Активные ингредиенты, упомянутые в п.1.6, смешивают сухими и затем вмешивают, предпочтительно, в смесь концентрата сока (1.1).
Для приготовления безалкогольного напитка все части 1.1.1 до 1.1.6 смешивают вместе перед гомогенизированием с использованием Turrax и затем высоконапорного гомогенизатора (P1 = 200 бар, p2 = 50
бар).
II. Бутилированный сироп приготовили из следующих ингредиентов:
Ингредиенты бутылочного сиропа смешивают вместе. Бутилированный сироп разбавляют водой до
1 л готового к употреблению напитка.
Варианты: вместо бензоата натрия напиток может быть пастеризован. Напиток также может быть
загазирован.
Пример 5.
Пятизлаковый хлеб
Стандартная порция: 50 г
Активные ингредиенты:
Лейцин и негидролизованный белок, и углеводы (в форме муки пяти злаков) are вводят в этот пи-6-
012300
щевой продукт:
Дрожжи растворяют в части воды. Все ингредиенты смешивают вместе с образованием теста. Соль
добавляют в конце смешивания. После ферментации тесто перерабатывают и разделяют на буханки. Перед выпеканием поверхность буханки смазывают водой.
Способ:
Пример 6.
Печенье типа Milano
Стандартная порция: 30 г
Активные ингредиенты:
Лейцин и белковые гидролизаты, и углеводы (в форме пшеничной муки, типа 550) вводят в этот
пищевой продукт:
Все ингредиенты медленно прибавляют при перемешивании с образованием сладкого сухого сдобного теста.
После охлаждения теста до 4°С в течение по меньшей мере 2 ч, тесто раскатывают до толщины
примерно 5 мм. Куски разрезают, и поверхность смазывают яичным желтком перед выпеканием. Выпекание:
Пример 7. Тосты
Стандартная порция: 100 г
Активные ингредиенты:
лейцин и негидролизованные белки и углеводы (в форме пшеничной муки типа 550) вводят в этот
пищевой продукт:
-7-
012300
Дрожжи растворяют в части воды. Все ингредиенты смешивают вместе с образованием теста. Соль
добавляют в конце смешивания. После обработки тесто разделяют и помещают в на противень для ферментации. После выпекания хлеб используют без дальнейшей обработки.
Способ:
Замес:
Пример 8.
Йогурт 3,5% жирности
Стандартная порция: 225 г
Активные ингредиенты:
лейцин и белковые гидролизаты и углеводы (в форме сахара) вводят в этот пищевой объект:
Молоко подогревают до 35°С перед добавление порошкового молока, стабилизатора, сахара и активных ингредиентов. Эту смесь нагревают до 65°С для растворения всех ингредиентов. Затем смесь
гомогенизируют в высоконапорном гомогенизаторе (p1 = 150 бар, р2 = 50 бар) при 65°С. Эмульсию пастеризуют при 80°С в течение 20 мин. После охлаждения до 45°С вмешивают натуральную йогуртовую
культуру. Затем смесь помещается в чашки и ферментируется при 45°С в течение 3-4 ч до получения рН
4,3. После охлаждения и активного перемешивания йогурт помещается в стаканчики и хранится при 4°С.
Пример 10.
Мороженое 8% жирности
Стандартная порция: 85 г Активные ингредиенты:
Лейцин и белковые гидролизаты, и углеводы (в форме сахара или сиропа глюкозы) вводят в этот
пищевой продукт:
-8-
012300
Сахар, обезжиренное порошковое молоко и стабилизатор прибавляют к молоку и сливкам, смешивают и подогревают до 45°С. Затем добавляют заранее приготовленный раствор красителя и сироп глюкозы, также как и активные ингредиенты. Смесь подогревают и пастеризуют (20 мин, 80°С). Затем смесь
гомогенизируют. После охлаждения смеси при постоянном перемешивании, при 5°С прибавляют ароматизатор. Смесь созревает при 5°С в течение по меньшей мере 4 ч и затем пропускается через машину для
изготовления мороженого (перепроизводство 100% от подсч.). Мороженое помещается в стаканчики и
хранится от -20 до -30°С.
Пример 11. Жевательные конфеты
Активные ингредиенты:
Лейцин и белковые гидролизаты, и углеводы в форме кристаллического сахара или сиропа глюкозы
DE38 вводят в этот пищевой продукт:
Диспергируют желатин в воде I, перемешивают и растворяют нагреванием на паровой бане или с
использованием микроволновой печи. Смешивают сахар с водой II и кипятят до получения прозрачного
раствора. Удаляют нагревание. Смешивают с сиропом глюкозы, пока раствор сахара еще горячий. Медленно прибавляют раствор желатина. Остаток оставляют до тех пор, пока пена сможет быть удалена с
поверхности и температура опустится до 60-65°С. При перемешивании прибавляют ароматизатор, лимонную кислоту и раствор красителя, также как и активные ингредиенты. Размещают в формах, нанесенных на крахмальные лотки, и оставляют по меньшей мере на 48 ч при комнатной температуре. Удаляют порошок крахмала и полируют с маслом или воском. Высушивают при комнатной температуре и
упаковывают в герметичные пакеты
Пример 12.
Этот пример показывает послеобеденный плазменный инсулин и отклики глюкозы после совместного введения инсулинотропного белкового гидролизата с и без дополнительного лейцина, комбинированного с одной порцией углевода. В 3 испытаниях по определению откликов плазменной глюкозы, инсулина и аминокислот после приема напитков различных составов (углевод, СНО; углевод с белковым
гидролизатом, CHO+PRO или углевод, белковый гидролизат и свободный лейцин, CHO+PRO+LEU) уча-9-
012300
ствовали десять пациентов мужчин с длительным диагностированным диабетом типа 2 и десять здоровых контрольных субъектов. Отклики плазменного инсулина были на 141 и 204% больше у пациентов с
диабетом типа 2 и на 66 и 221% больше у контрольных пациентов в опытах с CHO+PRO и
CHO+PRO+LEU, соответственно, по сравнению с опытом с СНО (Р < 0,05). Сопутствующие отклики
глюкозы плазмы были на 15 и 12% ниже у пациентов с диабетом типа 2 и на 92 и 97% ниже у контрольных пациентов по сравнению с опытом с СНО (Р < 0,05). Концентрации плазменного инсулина строго
коррелировали с откликом инсулина (r=0,43, P < 0,001). Мы заключаем, что совместное введение белкового гидролизата с или без дополнительного свободного лейцина увеличивает отклик инсулина после
введения углевода, таким образом значительно сокращая послеобеденное отклонение глюкозы для пациентов с долгосрочным диагностированным диабетом типа 2.
Объекты и методы
Объекты
Десять пациентов мужчин с долгосрочным диагностированным диабетом типа 2 и десять здоровых,
подходящих по возрасту и BMI контрольных пациентов, были отобраны для участия в этом изучении.
Характеристики пациентов приведены в табл. 1. Показателями для исключения были нарушения функции почек или печени, тучность (BMI > 35 кг/м2), сердечная болезнь, гипертония, осложнения диабета и
экзогенное введение инсулина. Все пациенты с диабетом типа 2 использовали пероральные медикаменты
для понижения плазменной глюкозы (метформин и/или сульфонилмочевину). Понижающие уровень
глюкозы медикаменты и препараты сульфонилмочевины отменили за 2 дня до скрининга, но не метформин, который отменяли за 2 дня перед каждым опытом. Все субъекты были информированы о характере
и рисках экспериментальных процедур. Письменное согласие от них было получено. Все клинические
испытания были одобрены местным Медицинским Этическим Комитетом.
Таблица 1. Характеристики субъектов
1. величины приведены как средние ±SEM
2. плазменная концентрация глюкозы после 2-часового OGTT
3. индекс пероральной чувствительности глюкозы к инсулину в течение 2 ч OGTT, как описано в (22).
* Отличается от группы контроля Р < 0,01.
# Отличается от основных величин Р < 0,01.
Скрининг
Перед опытом все субъекты прошли тест на пероральную глюкозную толерантность (OGTT). После
голодания в течение ночи субъекты прибыли в лабораторию в 8,00 на машине или общественном транспорте. Катетер (Baxter BV, Utrecht, the Netherlands) был введен в локтевую вену, и был получен образец
крови в покое, после которого были введены 75 г глюкозы (растворенной в 250 мл воды). После введения
порции отбирали кровь каждые 30 мин до t=120 мин. Были измерены плазменные концентрации глюкозы
для определения нетерпимость глюкозы и/или диабета типа 2 согласно критериям Мировой Организации
здравоохранения 1999 (see: Alberti, К. G. & Zimmet, P. Z. (1998) Definition, diagnosis and classification of
diabetes mellitus and its complications. Part 1: diagnosis and classification of diabetes mellitus provisional report of a WHO consultation. Diabet. Med. 15: 539-553). Кроме того, плазменная глюкоза и концентрации
инсулина использовались для оценки чувствительности к инсулину с применением (OGIS)-индекса пероральной чувствительности глюкозы к инсулину в течение 2 ч, как описано Mari et al J. J. (2001). Diabetes Care 24: 539-548.
- 10 -
012300
Проект
Каждый субъект участвовал в 3 испытаниях, отделенных по меньшей мере 7 днями, в которых
плазменная глюкоза, инсулин и ответы аминокислот определяли после приема напитка 3 различных составов (СНО: углевод, CHO+PRO: углевод и казеиновый белковый гидролизат или CHO+PRO+LEU: углевод, казеиновый белковый гидролизат и лейцин). Субъекты были помещены на спину в лежачее положение и оставались бездействующими в течение 4 ч. Напитки предоставлялись в случайном порядке и
двойным слепым методом.
Протокол
После голодания в течение ночи субъекты прибыли в лабораторию в 8,00 на машине или общественном транспорте. Тефлоновый катетер (Baxter BV, Utrecht, the Netherlands) был введен в локтевую вену
для отбора крови из вены, и был получен образец крови в покое. В момент времени t=0 субъекты выпивали одну порцию (4 мл/кг) экспериментального напитка. Образцы крови собирались каждые 15 мин в
течение первого часа, после которого кровь отбиралась с 30-минутными интервалами до t=240 для измерения плазменной глюкозы и концентраций инсулина. Плазменные концентрации аминокислот определяли с часовым интервалом.
Диета и деятельность до испытания
Все субъекты придерживались их нормальной диеты и системы физической деятельности в течение
полного экспериментального периода. Кроме того, субъекты воздерживались от тяжелой физической
работы и/или упражнений по меньшей мере в течение 3 дней до каждого испытания и заполняли дневник
потребления пищи в течение 2 дней до первого испытания, чтобы придерживаться идентичной диеты,
насколько это возможно, до других испытаний. Вечером перед каждым испытанием субъекты получали
стандартизированную пищу (43,80 кДж/кг массы тела; содержащей 60 % энергии (En %) углеводов, 28
En % жира и 12 En % белка).
Напитки
Субъекты получали одну порцию (4 мл/кг), содержащую 0,7 углеводов г/кг (50 % глюкозы и 50 %
мальтодекстрина, СНО) с 0,3 г/кг казеинового белкового гидролизата (CHO+PRO) или 0,3 г/кг казеинового белкового гидролизата и 0,1 г/кг лейцина (CHO+PRO+LEU). Глюкоза и мальтодекстрин были получены от AVEBE (Veendam, the Netherlands), прозрачный кристаллический лейцин BUFA (Uitgeest, the
Netherlands) и казеиновый белковый гидролизат был приготовлен DSM Food Specialties (Delft, the Netherlands). Казеиновый гидролизат (Insuvital™) был получен энзиматическим гидролизом казеината натрия с
использованием нейтральной протеазы и пролил-специфической эндопротеиназы. Напитки были одинаково ароматизированы прибавлением 0,2 г сахарината натрия, 1,8 г лимонной кислоты и 5 г аромата ванильного крема (Quest International, Naarden, the Netherlands) на литр напитка.
Анализ образца крови
Кровь собирали в EDTA содержащие пробирки и центрифугировали при 1000 g и 4°С в течение 10
мин. Аликвоты плазмы были немедленно заморожены в жидком азоте и хранились при -80°С до анализов. Концентрации глюкозы (Uni Kit III, Roche, Basel) анализировали на COBAS FARA полуавтоматическом анализаторе (Roche). Плазменный инсулин определяли радиоиммунологическим исследованием
(HI-14K, Linco research Inc, St. Charles, USA). Свободные аминокислоты анализировали с использованием
ионообменной хроматографии (JEOL, AminoTac JLC-500/V) с нингидриновой дериватизирующей предколонкой, с норвалином в качестве внутреннего стандарта. Перед исследованием, образцы были депротеинированы с 5-сульфосалициловой кислотой. Для определения содержания HbAlc 3 мл образец крови
был собран в EDTA содержащую пробирку и проанализирован методом высокоэффективной жидкостной
хроматографии (Bio-Rad Diamat, Munich, Germany).
Статистика
Данные представлены как среднее ± SEM. Отклики плазмы рассчитывали как площадь под кривой
выше базовых величин. Чтобы сравнивать концентрации плазменных метаболитов во время между испытаниями, применялся двухсторонний повторный дисперсионный анализ (ANOVA). Изменения по времени в пределах каждой группы проверяли для статистической значимости с использованием одностороннего повторяющегося статистического анализа ANOVA. Тест Scheffe's post-hoc применялся в случае
значительного F-соотношения для расположения специфических разностей. Для независимых от времени переменных применяли многоканальный ANOVA или t-распределение Стьюдента. Значение было
установлено с уровнем достоверности 0,05. Все вычисления были выполнены с применением StatView
5,0 (SAS Institute inc., Cary, NC, USA).
Результаты
Плазменные концентрации инсулина
Базовые концентрации инсулина плазмы были подобными между группами и испытаниями и составляли в среднем 11±1,5 и 13,0±1,1 нмоль/л для пациентов с диабетом типа 2 и группы контроля соответственно (фиг. 1А, Р=0,1). После приема различных напитков плазменные концентрации инсулина не
увеличивались в СНО испытании и увеличивались в CHO+PRO и CHO+PRO+LEU испытаниях для пациентов с диабетом типа 2 (Р < 0,05). В контрольной группе было замечено сильное увеличение плазменной
- 11 -
012300
концентрации инсулина в течение первого часа после приема напитка (Р < 0,05). Это увеличение было
наиболее явным в CHO+PRO и CHO+PRO+LEU испытаниях. Во всех испытаниях плазменные концентрации инсулина возвращались к базовым концентрациям в течение последнего часа эксперимента в
обеих группах. Отклики инсулина (AUC выше базовых величин) в группе пациентов с диабетом были на
141±40 и 204±37% больше в CHO+PRO и CHO+PRO+LEU испытаниях соответственно, по сравнению с
СНО испытанием (Р < 0,05, фиг. 1В). В контрольной группе отклики инсулина были на 66±20 и 221±82%
больше в CHO+PRO и CHO+PRO+LEU испытаниях соответственно, по сравнению с СНО испытанием (Р
< 0,05). Кроме того, в группе контроля отклик инсулина в CHO+PRO+LEU испытании был значительно
больше по сравнению с CHO+PRO испытанием (Р < 0,05). Никакие различия не наблюдались в откликах
инсулина между группами в пределах одного испытания.
Плазменные концентрации глюкозы
Плазменные концентрации глюкозы на голодный желудок были выше для пациентов с диабетом
типа 2 по сравнению с нормогликемической группой контроля (8,6±0,6 против 5,7±0,1 ммоль/л, соответственно Р < 0,01). После введения различных напитков плазменные концентрации глюкозы остались значительно выше для пациентов с диабетом, по сравнению с подходящими контрольными во всех испытаниях (Р < 0,01, фиг. 2А). У пациентов с диабетом типа 2 плазменные концентрации глюкозы значительно
увеличиваются в течение первого часа после приема напитка, после которого значения возвращаются к
базовым значениям (фиг. 2А). Плазменные концентрации глюкозы в группе контроля увеличиваются в
течение первых 30 мин после приема испытательных напитков, после которых плазменные концентрации глюкозы также возвращались к базовым значениям. В группе контроля плазменные концентрации
глюкозы уменьшаются быстрее в CHO+PRO и CHO+PRO+LEU испытаниях по сравнению с СНО испытанием,
заканчивающиеся более низкими плазменными концентрациями глюкозы при t=45 и t=60 мин (Р < 0,05, фиг.
2А). После выражения послеобеденного отклика глюкозы как области под кривой выше базовых значений
(фиг. 2В), отклики глюкозы уменьшились до 15±5 и 12±3% в группе диабета типа 2 и до 92±2 и 97±3% в
группе контроля в CHO+PRO и CHO+PRO+LEU испытаниях соответственно, по сравнению с СНО испытанием (Р < 0,05). Плазменные отклики глюкозы были существенно выше у пациентов с диабетом по
сравнению с контрольной группой во всех испытаниях (Р < 0,1, фиг. 2В). Отклики глюкозы были обратно пропорциональны связанным ответам инсулина для пациентов с диабетом типа 2 (r=-0,48, Р < 0,01).
Плазменные концентрации аминокислоты
Плазменные концентрации аминокислот в голодном состоянии представлены в табл. 2.
Таблица 2. Базовые плазменные концентрации аминокислот1
1
значения представлены (в мкмоль/л) как средние ± SEM,
n=10 для пациентов с диабетом типа 2 и n=10 для группы контроля незаменимая аминокислота.
* отличается от группы контроля Р < 0,05.
В базовом состоянии концентрации плазменных незаменимых аминокислот (EAAs): лейцина
- 12 -
012300
(144,9±3,2 против 122,8±3,0 мкмоль/л), изолейцина (79,1±2,3 против 66,0±2,0 мкмоль/л), лизина
(204,2±5,4 против 187,8±4,7 мкмоль/л) и валина (252,4±4,9 против 216,7±5,0 мкмоль/л) и заменимых
аминокислот (NEAAs): аланина (431±17,0 против 370,3±19,2 мкмоль/л), глютамина (109,7±5,9 против
94,3±4,3 мкмоль/л) и пролина (94,7±5,8 против 77,1 ±3,1 мкмоль/л) были больше для пациентов с диабетом типа 2 по сравнению контрольной группой (Р < 0,05). Концентрации плазменного аргинина (110±0,6
против 128,1 ±7,0 мкмоль/л) и аспарагиновой кислоты (34,8±1,2 против 39,0±1,1 мкмоль/л) были более
низкими в основном состоянии, натощак, для пациентов с диабетом типа 2 по сравнению с контрольной
группой (Р < 0,05). Полный краткий обзор последующих плазменных независимых откликов аминокислот, рассчитанных как области под кривой выше базовых значений, приведен в табл. 3.
Таблица 3. Плазменные ответы аминокислоты после введения напитка
1
значения - области под кривой минус базовые значения (в ммоль/л/4 ч), выраженные как среднее ±SEM,
n=10 пациентов с диабетом типа 2 и n=10 для контрольной группы +: незаменимая аминокислота.
* отличаются от контрольной группы между испытаниями Р < 0,05 + отличаются от СНО испытания в пределах групп Р < 0,05
* отличаются от CHO+PRO испытания в пределах групп Р < 0,05
В общем, отклики аминокислот были отрицательными в СНО испытании, позитивными в CHO+PRO
испытании и промежуточными после введения лейцина в CHO+PRO+LEU испытании. Сильные положительные корреляции наблюдались между откликом инсулина и увеличениями в плазме лейцина (Р < 0,001), цитрулина (Р < 0,001), цистеина (Р < 0,4), лизина ((Р < 0,01), метионина ((Р < 0,4), орнитина ((Р < 0,1) и пролина (Р
< 0,01). При вычислении откликов для заменимых (NEAA) и незаменимых аминокислот, за исключением добавленного лейцина (EAALEU), наблюдались следующие отклики в группе с диабетом типа 2 (фиг. 3А) и
контрольной группе (фиг. 3В). В группе с диабетом типа 2 отклик ЕАА-LEU был отрицательным в СНО испытании и значительно большим в CHO+PRO и CHO+PRO+LEU испытаниях (-27,7±5,8 против 31,2±6,1 и
11,5±4,6 ммоль/л/4 ч соответственно, Р < 0,05). Кроме того, отклик EAA-LEU был значительно ниже (60±4%,
Р < 0,05) в CHO+PRO+LEU по сравнению CHO+PRO испытанием. Плазменные NEAA отклики были отрицательными в СНО испытании и были значительно больше в CHO+PRO и CHO+PRO+LEU испытаниях для
пациентов с диабетом (-28,8±4,7 против 23,1±8,8 и 10,2±13,8 ммоль/л/4часа соответственно; Р < 0,05). Подобные результаты наблюдались в группе контроля. Отрицательный отклик плазменного EAA-LEU наблюдался
в СНО испытании и значительно большие отклики EAA-LEU наблюдались для CHO+PRO и CHO+PRO+LEU
испытаний (-35,0±6,7 против 37,9±5,1 и 12,7±4,1 ммоль/л/4 ч соответственно; Р < 0,05). Введение лейцина в
CHO+PRO+LEU испытании понижает отклик плазменного EAA-LEU до 65±5% по сравнению с CHO+PRO
испытанием (Р < 0,05). Отклики плазменных NEAA были отрицательными в СНО испытании и были
- 13 -
012300
значительно больше в CHO+PRO и CHO+PRO+LEU испытаниях (-60,8±13,6 против 27,6±10,6 и 11,2±9,8
ммоль/л/4 ч соответственно; Р < 0,05). Никакие различия не наблюдались в ответах аминокислот между
группами.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Композиция для лечения или предотвращения сахарного диабета, содержащая по меньшей мере
70 мас.% лейцина и белковый гидролизат со степенью гидролиза 5-50.
2. Композиция по п.1, которая дополнительно содержит углевод.
3. Композиция по п.1 или 2 для лечения и предотвращения сахарного диабета типа 2 (T2DM) у
субъектов с преддиабетом или нарушением глюкозной толерантности (IGT) или ожирением или сахарным диабетом типа 2.
4. Композиция по п.1, в которой присутствует негидролизованный белок.
5. Композиция по любому из пп.1-4, содержащая лейцин в количестве, достаточном для введения
субъекту ежедневной дозы от 0,005 г на кг массы тела до около 1 г на кг массы тела.
6. Композиция по любому из пп.1-5, содержащая белковые гидролизаты в количестве, достаточном
для введения субъекту ежедневной дозы от 0,01 г на кг массы тела до около 3 г на кг массы тела.
7. Композиция по любому из пп.5-6, содержащая негидролизованные белки в количестве, достаточном для введения субъекту ежедневной дозы от 0,01 г на кг массы тела до около 3 г на кг массы тела.
8. Композиция по одному из пп.2-7, содержащая углеводы в количестве, достаточном для введения
субъекту ежедневной дозы от 0,01 г на кг массы тела до около 7 г на кг массы тела.
9. Единичная доза композиции по любому из пп.1-8.
10. Единичная доза по п.9, в твердой форме.
11. Единичная доза, содержащая от 0,01 до около 5 г лейцина.
12. Единичная доза по любому из пп.9-11, содержащая от около 0,1 до около 50 г белковых гидролизатов.
13. Единичная доза по любому из пп.9-12, содержащая от около 0,1 до около 50 г негидролизованного белка.
14. Единичная доза по любому из пп.9-13, содержащая от около 0,3 до около 150 г углеводов.
15. Пищевой продукт, напиток или пищевая добавка для пищевого продукта или напитка, содержащие композицию по любому из пп.1-8.
16. Применение композиции по п.1 или 6 для лечения или предотвращения сахарного диабета в
ежедневной дозе лейцина около 0,001-1 г/кг массы тела субъекта и в ежедневной дозе белковых гидролизатов около 0,01-3 г/кг массы тела, причем содержание лейцина в композиции составляет по меньшей
мере 70 мас.%.
17. Применение по п.16, где композиция присутствует в пище или напитке или добавке к пище или
напитку.
18. Способ лечения диабета типа 1 и 2 и предотвращения диабета типа 2 у субъектов с преддиабетом или нарушением глюкозной толерантности (IGT) или ожирением, который включает введение субъекту нуждающемуся в таком лечении композиции, содержащей по меньшей мере 70 мас.% лейцина и
белковые гидролизаты, со степенью гидролиза 5-50.
19. Применение композиции, содержащей по меньшей мере 70 мас.% лейцина и белковые гидролизаты со степенью гидролиза 5-50 для увеличения инсулина в плазме.
20. Применение по п.19 для увеличения инсулина в плазме при диабете типа 2 или преддиабете.
21. Применение композиции, содержащей по меньшей мере 70 мас.% лейцина и белковые гидролизаты со степенью гидролиза 5-50 для понижения послеобеденных концентраций глюкозы в крови при
диабете типа 2 или преддиабете.
22. Применение композиции, содержащей по меньшей мере 70 мас.% лейцина и белковые гидролизаты со степень гидолиза 5-50 для увеличения послеобеденной секреции инсулина в крови при диабете
типа 2 или преддиабете.
- 14 -
012300
Фиг. 1
Фиг. 2
- 15 -
012300
Фиг. 3
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
- 16 -