RU 2012 150 079 A - Московский государственный университет

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ
(19)
RU
(11)
(13)
2012 150 079
A
(51) МПК
C12N 15/00 (2006.01)
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ
(12) ЗАЯВКА
НА ИЗОБРЕТЕНИЕ
(21)(22) Заявка:
2012150079/10, 23.11.2012
Приоритет(ы):
(22) Дата подачи заявки: 23.11.2012
(43) Дата публикации заявки: 27.05.2014 Бюл. № 15
R U
(57) Формула изобретения
1. Слитый белок, специфически узнающий меланомные клетки, формулы S-L-R или
R-L-S, где:
S - мономер стрептавидина,
L - линкер, имеющий аминокислотную последовательность Ser-Arg-Asp-Asp-Asp-AspLys, содержащую сайт расщепления энтеропептидазой и обозначаемую как «d», или
аминокислотную последовательность Ser-Arg-Ala-Gly-Ala,
R - меланома-адресующий олигопептид.
2. Белок по п.1., характеризующийся тем, что R представляет собой аминокислотную
последовательность Asp-Gly-Ala-Arg-Tyr-Cys-Arg-Gly-Asp-Cys-Phe-Asp-Gly - R10.
3. Белок по п.1, характеризующийся тем, что R представляет собой аминокислотную
последовательность Leu-Ser-Gly-Cys-Arg-Gly-Asp-Cys-Phe-Glu-Glu - R13.
4. Белок по п.1, характеризующийся тем, что R представляет собой аминокислотную
последовательность Asp-Gly-Phe-Pro-Gly-Cys-Arg-Gly-Asp-Cys-Ser-Gln-Glu - R15.
5. Рекомбинантная плазмидная ДНК pSR или pSdR на базе вектора pUC18,
включающая последовательность промотора уридинфосфорилазы Е.coli, а также
последовательность, кодирующая слитой белок по п.1.
6. Рекомбинантная плазмидная ДНК pSR10 или pSdR10 по п.5, кодирующая ген
слитого белка по п.2.
7. Рекомбинантная плазмидная ДНК pSR13 или pSdR13 по п.5, кодирующая ген
слитого белка по п.3.
8. Рекомбинантная плазмидная ДНК pSR15 или pSdR15 по п.5, кодирующая ген
слитого белка по п.4.
9. Бактериальный штамм Escherichia coli MG1655/pSR или MG1655/pSdR, трансформированный плазмидной ДНК по п.5, продуцент слитого белка по п.1.
Стр.: 1
A
2 0 1 2 1 5 0 0 7 9
A
(54) СЛИТНЫЙ БЕЛОК, СПЕЦИФИЧЕСКИ УЗНАЮЩИЙ МЕЛАНОМНЫЕ КЛЕТКИ
2 0 1 2 1 5 0 0 7 9
(72) Автор(ы):
Сыркина Марина Сергеевна (RU),
Широков Дмитрий Алексеевич (RU),
Вейко Владимир Петрович (RU),
Попов Владимир Олегович (RU),
Рубцов Михаил Александрович (RU)
R U
Адрес для переписки:
119991, Москва, ГСП-1, Ленинские горы, 1,
Московский государственный университет
имени М.В. Ломоносова, Центр трансфера
технологий, О.Г. Дьяченко
(71) Заявитель(и):
Федеральное государственное бюджетное
образовательно учреждение высшего
профессионального образования
"Московский государственный университет
имени М.В. Ломоносова" (МГУ) (RU)
10. Бактериальный штамм Escherichia coli MG1655/pSR10 или MG1655/pSdR10 по п.9,
трансформированный плазмидной ДНК по п.6, продуцент слитого белка по п.2.
11. Бактериальный штамм Escherichia coli MG1655/pSR13 или MG1655/pSdR13 по п.9,
трансформированный плазмидной ДНК по п.7, продуцент слитого белка по п.3.
12. Бактериальный штамм Escherichia coli MG1655/pSR15 или MG1655/pSdR15 по п.9,
трансформированный плазмидной ДНК по п.8, продуцент слитого белка по п.4.
13. Способ получения меланома-адресующего олигопептида R из рекомбинантного
слитого белка по п.1, содержащего сайт расщепления d, включающий расщепление
данного белка энтеропептидазой и хроматографическую очистку пептида, при этом
очистку осуществляют в два этапа: на первом этапе отщепленный стрептавидин и
нерасщепленные белки удаляют из раствора при помощи аффинной хроматографии
на 2-иминобиотинагарозе, собирают фракцию несвязавшихся с сорбентом белков, с
последующим концентрированием раствора; на втором этапе осуществляют очистку
олигопептида при помощи HPLC.
14. Применение стрептавидина в качестве компонента слитого белка для визуализации
активности меланома-адресующего пептида.
R U
R U
A
2 0 1 2 1 5 0 0 7 9
A
2 0 1 2 1 5 0 0 7 9
Стр.: 2