СТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПРОКАРИОТНОЙ КЛЕТКИ

ЗАНЯТИЕ 5.
20
СТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПРОКАРИОТНОЙ
КЛЕТКИ
5.1
ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ. СТРУКТУРЫ ПРОКАРИОТНОЙ КЛЕТКИ.
Химический состав и структура клетки.
Клеточная стенка. Окраска бактерий по Граму. Строение и химизм клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий. Функции клеточной стенки. Образование протопластов и
сферопластов. L-формы бактерий.
Цитоплазматическая мембрана и ее производные. Мезосомы бактерий. Химизм и предполагаемое строение цитоплазматической мембраны бактерий. Жидкостно-мозаичная модель мембраны.
Хроматофоры, внутрицитоплазматические мембранные образования фотосинтезирующих бактерий. Функции цитоплазматической мембраны.
Нуклеоид. Принципиальное отличие нуклеоида бактерий от ядра эукариот. Природа нуклеоида. Размер генома. Предполагаемый механизм репликации и сегрегации бактериальной хромосомы.
Плазмиды.
Капсула. Химическая природа капсул и их функции.
Жгутики. Строение жгутика. Расположение жгутиков на поверхности бактериальной клетки.
Движение бактерий за счет жгутиков. Прочие типы движения бактерий. Движение спирохет. Скользящий тип движения миксобактерий, микоплазм, нитчатых серобактерий и цианобактерий. Таксисы.
Фимбрии, Строение фимбрий. Типы фимбрий и выполняемые ими функции.
Эндоспоры бактерий. Биологический смысл спорообразования у бактерий. Этапы образования
споры в клетке-спорангии. Строение споры и ее многослойных покровов.
Принципиальные особенности клеточной организации прокариот.
5.2
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
5.2.1 Окраска бактерий по Граму.
Окраска по Граму является важным диагностическим признаком, она коррелирует со многими другими свойствами бактерий. По способности окрашиваться красителями триметилфенолового
ряда все бактерии делятся на две группы: грамположительные и грамотрицатель- ные. Грамположительные бактерии удерживают комплекс генцианового фиолетового с йодом при обработке препарата спиртом и поэтому окрашиваются в фиолетовый цвет. Г рамотрицательные
бактерии не обладают такой способностью и обесцвечиваются спиртом. При последующей обработке фуксином или сафранином они приобретают розовую окраску. Окраска по Граму связана также с возрастными особенностями культуры: лучше красятся бактерии в молодых двух, трехдневных культурах
1) На предметном стекле приготовить 2 мазка: из культуры сенной палочки на середине стекла
и из колонии азотобактера (или культуры уксуснокислых бактерий) на краю стекла.
2) Мазок фиксировать в пламени спиртовки.
3) Мазки залить раствором геницианвиолета на 1 мин, а затем краску слить.
4) Не промывая, на мазки налить раствор Люголя на 1 мин.
5) Препарат промыть водой.
6) Мазки промыть 96° этанолом в течении 30-40 сек, наливая его 3-4 раза на стекло.
7) Препарат быстро перенести в воду и промыть.
ЗАНЯТИЕ 5.
21
8) Не высушивая, мазки залить раствором фуксина (1:10) на 1 мин. 9) Снова промыть водой и
высушить.
Окрашенные мазки рассмотреть с объективом МИ-90. Грамположительные бактерии (Г+) окрасятся в фиолетово-синий, а грамотрицательные (Г-) – в розово-красный цвет. Бактерии зарисовать,
подписать названия видов, их цвет и группу по отношению к окраске по Граму. Объяснить причину
разного окрашивания бактерий по Граму.
Рис. фиксированного препарата окрашенного по Граму
Культура .................................................................... Возраст культуры ......................................................
Морфология клеток .................................................. .
Зарисовать схему структур грамположительных и грамотрицательных эубактерий
Г+
Г-
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
Цитоплазматическая мембрана
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
.. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..
ЗАНЯТИЕ 5.
Заполнить таблицу
Операции влияющие на окраску
22
Цвет Г+
Цвет Г-
5.2.2 Негативная окраска капсул.
Окраска капсулы. Эти структуры часто имеют консистенцию геля и плохо видны при микроскопировании живых клеток. Химический состав капсул у разных бактерий неодинаков, поэтому их нельзя
выявить каким- либо одним методом окраски. Кроме того, капсулы при окраске легко деформируются,
а вещество капсулы слабо связывает краситель, который легко отмывается в процессе обработки
препарата. Чаще всего для выявления капсул применяют способ «негативной» окраски (негативного
контрастирования) с помощью жидкой туши. Для этого небольшое количество клеток с плотной среды
помещают в каплю разбавленного фуксина, смешивают с каплей туши, закрывают покровным стеклом и просматривают с объективом 40 х. На общем темном фоне препарата хорошо видны бес-цветные капсулы, окружающие клетки микроорганизмов.
1) На предметном стекле в капле воды приготовить суспензию клеток азотобактера.
2) Затем к ней прибавить маленькую каплю туши и размешать.
3) Накрыть каплю с тушью покровным стеклом, удалить лишнюю жидкость фильтровальной бумагой.
4) С объективом 40× рассмотреть клетки азотобактера, зарисовать их на фоне туши, отметив протопласт и капсулы.
5) Объяснить, почему капсула не окрашивается тушью.
6)
Рис. фиксированного препарата клеток азотобактера
Культура .................................................................... Возраст культуры ......................................................
Морфология клеток .................................................. .