105173, Ìîñêâà, óë. Çàïàäíàÿ, ä. 2, ñòð. 1, ÎÎÎ «Àãàò-Ìåä». Òåë.: (495) 777-41-92. Ôàêñ: (495) 741-25-19. www.agat.ru agat@agat.ru ÁÅËÎÊ Â ÑÌÆ ÀÃÀÒ ÈÍÑÒÐÓÊÖÈß ïî ïðèìåíåíèþ íàáîðà ðåàêòèâîâ äëÿ îïðåäåëåíèÿ áåëêà â ñïèííîìîçãîâîé æèäêîñòè ÍÀÇÍÀ×ÅÍÈÅ Äèàãíîñòè÷åñêèé íàáîð ïðåäíàçíà÷åí äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ áåëêà â ñïèííîìîçãîâîé æèäêîñòè ñ ñóëüôîñàëèöèëîâîé êèñëîòîé è ñóëüôàòîì íàòðèÿ óíèôèöèðîâàííûì ìåòîäîì. Äëÿ êëèíèêî-äèàãíîñòè÷åñêèõ è áèîõèìè÷åñêèõ ëàáîðàòîðèé. Íàáîð ðàññ÷èòàí íà 400 îïðåäåëåíèé ïðè ðàñõîäå 5,0 ìë ðàáî÷åãî ðàñòâîðà íà îäèí àíàëèç. ÏÐÈÍÖÈÏ ÌÅÒÎÄÀ Èíòåíñèâíîñòü ïîìóòíåíèÿ ïðè êîàãóëÿöèè áåëêà ñóëüôîñàëèöèëîâîé êèñëîòîé â ïðèñóòñòâèè íàòðèÿ ñåðíîêèñëîãî (ñóëüôàòà íàòðèÿ), èçìåðåííàÿ ïî îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ïðè 440 íì, ïðîïîðöèîíàëüíà åãî êîíöåíòðàöèè. Êàëèáðîâêà îñóùåñòâëÿåòñÿ ïî ðàñòâîðó ÷åëîâå÷åñêîãî ñûâîðîòî÷íîãî àëüáóìèíà. ÑÎÑÒÀ ÍÀÁÎÐÀ 1. 5-ñóëüôîñàëèöèëîâàÿ êèñëîòà, äèãèäðàò, 60 ã – 1 óïàêîâêà; 2. Íàòðèé ñåðíîêèñëûé, áåçâîäíûé, 140 ã – 1 óïàêîâêà; 3. Êàëèáðîâî÷íûé ðàñòâîð àëüáóìèíà 1000 ìã/ë, 10 ìë – 1 ôëàêîí. ÀÍÀËÈÒÈ×ÅÑÊÈÅ ÕÀÐÀÊÒÅÐÈÑÒÈÊÈ ÍÀÁÎÐÀ Íîðìàëüíûå âåëè÷èíû êîíöåíòðàöèè áåëêà â ñïèííîìîçãîâîé æèäêîñòè: – èç æåëóäî÷êîâ ìîçãà 0,12–0,20 ã/ë; – èç áîëüøîé öèñòåðíû 0,10–0,22 ã/ë; – ïðè ëþìáàëüíîé ïóíêöèè 0,22–0,33 ã/ë. ÎÁÎÐÓÄÎÂÀÍÈÅ È ÐÅÀÃÅÍÒÛ – Ñïåêòðîôîòîìåòð, äëèíà âîëíû 440 íì èëè ôîòîýëåêòðîêîëîðèìåòð, äëèíàâîëíû 410–480 íì (ñèíå-ôèîëåòîâûé ñâåòîôèëüòð), êþâåòà ñ òîëùèíîé ïîãëîùàþùåãî ñâåò ñëîÿ 10 ìì; – ïèïåòêè, ïîçâîëÿþùèå îòáèðàòü îáúåìû æèäêîñòè 0,5 è 5,0 ìë; – ïðîáèðêè âìåñòèìîñòüþ 5,0–10 ìë; – êîëáà ìåðíàÿ âìåñòèìîñòüþ 1000 ìë; – ñåêóíäîìåð; – âîäà äèñòèëëèðîâàííàÿ; – ðàñòâîð íàòðèÿ õëîðèñòîãî, 9 ã/ë; – ïåð÷àòêè ðåçèíîâûå èëè ïëàñòèêîâûå. ÀÍÀËÈÇÈÐÓÅÌÛÅ ÎÁÐÀÇÖÛ Ñïèíîìîçãîâàÿ æèäêîñòü. ÏÎÄÃÎÒÎÂÊÀ ÐÅÀÃÅÍÒΠÄËß ÀÍÀËÈÇÀ 1. Ðàñòâîð ñóëüôîñàëèöèëîâîé êèñëîòû. Ñîäåðæèìîå óïàêîâêè ñ ñóëüôîñàëèöèëîâîé êèñëîòîé êîëè÷åñòâåííî ïåðåíîñÿò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 1000 ìë, ðàñòâîðÿþò â äèñòèëëèðîâàííîé âîäå è äîâîäÿò îáúåì äî ìåòêè. Ðàñòâîð ñòàáèëåí. 2. Ðàñòâîð íàòðèÿ ñåðíîêèñëîãî. Ñîäåðæèìîå óïàêîâêè ñ íàòðèåì ñåðíîêèñëûì êîëè÷åñòâåííî ïåðåíîñÿò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 1000 ìë, ðàñòâîðÿþò â äèñòèëëèðîâàííîé âîäå è äîâîäÿò îáúåì äî ìåòêè. Ðàñòâîð ñòàáèëåí. 3. Ðàáî÷èé ðàñòâîð. Ñìåøèâàþò ðàâíûå îáúåìû ïðèãîòîâëåííûõ ðàñòâîðîâ ñóëüôîñàëèöèëîâîé êèñëîòû è íàòðèÿ ñåðíîêèñëîãî. Ðàñòâîð óñòîé÷èâ â òå÷åíèå 8 ÷àñîâ. ÏÐÎÂÅÄÅÍÈÅ ÀÍÀËÈÇÀ  ïðîáèðêè âíîñÿò ðåàêòèâû ïî ñëåäóþùåé ñõåìå: Ïîëó÷åííûå ðàçâåäåíèÿ îáðàáàòûâàþò òàê æå, êàê è îáðàçåö. Ïðèìå÷àíèå: Ïðè èñïîëüçîâàíèè êþâåòû ìåíüøåãî îáúåìà ðàñõîä ðåàêòèâîâ ìîæåò áûòü ïðîïîðöèîíàëüíî óìåíüøåí ïðè ñîõðàíåíèè ñîîòíîøåíèÿ îáðàçåö/ðàáî÷èé ðàñòâîð 1:10. Ëèíåéíàÿ çàâèñèìîñòü ñîõðàíÿåòñÿ äî êîíöåíòðàöèè áåëêà 1 ã/ë. Ïðè áîëåå âûñîêèõ êîíöåíòðàöèÿõ ïðîáó ñëåäóåò ðàçâåñòè â 2–3 ðàçà, ðåçóëüòàò óìíîæèòü íà ðàçâåäåíèå. Ðåçóëüòàòû, ïîëó÷àåìûå äàííûì ìåòîäîì ÷óâñòâèòåëüíû ê èçìåíåíèÿì òåìïåðàòóðû. Ðåêîìåíäóåòñÿ ïðîèçâîäèòü èçìåðåíèÿ ïðè òåìïåðàòóðå +18–22° Ñ. ÑÐÎÊ ÃÎÄÍÎÑÒÈ, ÓÑËÎÂÈß ÕÐÀÍÅÍÈß Íàáîð ñëåäóåò õðàíèòü â óïàêîâêå ïðåäïðèÿòèÿ-èçãîòîâèòåëÿ ïðè òåìïåðàòóðå +2–8° Ñ â òå÷åíèå âñåãî ñðîêà ãîäíîñòè. Ñðîê ãîäíîñòè íàáîðà – 2 ãîäà. Ëèòåðàòóðà: Ëàáîðàòîðíûå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ â êëèíèêå. Ïîä ðåäàêöèåé ïðîô. Â.Â. Ìåíüøèêîâà, Ì., 1987, ñ. 103. Ïî âîïðîñàì, êàñàþùèìñÿ ïðèîáðåòåíèÿ íàáîðîâ è èõ êà÷åñòâà, ïðîñèì îáðàùàòüñÿ ïî àäðåñó: 105173, ã. Ìîñêâà, óë. Çàïàäíàÿ, ä. 2, ñòð. 1, ÎÎÎ «Àãàò–Ìåä». Òåëåôîí äëÿ ñïðàâîê: (495) 777-41-92. Ñîäåðæèìîå ïðîáèðîê òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò è âûäåðæèâàþò ïðè òåìïåðàòóðå +18–22° Ñ â òå÷åíèå 10 ìèíóò. Îïðåäåëÿþò îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü ïðè äëèíå âîëíû 440 íì (410–480 íì, ñèíå-ôèîëåòîâûé ñâåòîôèëüòð) ïðîòèâ õîëîñòîé ïðîáû â êþâåòå ñ òîëùèíîé ñëîÿ 10 ìì. Ïðè ñòîÿíèè îáðàçöîâ áîëåå 20 ìèíóò âîçìîæíî óìåíüøåíèå çíà÷åíèé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè çà ñ÷åò îñåäàíèÿ ÷àñòè ïðåöèïèòàòà. Íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èçìåðåíèåì ïðîáèðêó ñ îïûòíîé ïðîáîé òùàòåëüíî âñòðÿõíóòü. ÐÀÑ×ÅÒÛ Ðàñ÷åò ïðîâîäÿò ïî êàëèáðîâî÷íîìó ãðàôèêó. Ïîñòðîåíèå êàëèáðîâî÷íîãî ãðàôèêà Äëÿ ïîñòðîåíèÿ êàëèáðîâî÷íîãî ãðàôèêà èç êàëèáðîâî÷íîãî ðàñòâîðà àëüáóìèíà è 9 ã/ë ðàñòâîðà íàòðèÿ õëîðèñòîãî ãîòîâÿò ñëåäóþùèå ðàçâåäåíèÿ: Èíñòðóêöèÿ ñîñòàâëåíà: ê.á.í. È.Â. Ñìèðíîâûì – ñò.í.ñ. Ãåìàòîëîãè÷åñêîãî íàó÷íîãî öåíòðà ÐÀÌÍ, ê.á.í. Í.Í. Êîíòóãàíîâûì, Â.Â. Ìàéîðîâîé – ñîòðóäíèêàìè ÎÎÎ «Àãàò–Ìåä».