Отчет НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского
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Ⱥɤɬɭɚɥɶɧɨɫɬɶ. Ɋɚɡɪɚɛɨɬɤɚ ɢ ɩɨɢɫɤ ɧɨɜɵɯ ɯɢɦɢɨɩɪɟɩɚɪɚɬɨɜ ɫɨ ɫɩɟɰɢɮɢɱɟɫɤɨɣ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶɸ ɤ ɜɢɪɭɫɚɦ ɝɪɢɩɩɚ ɩɪɟɞɫɬɚɜɥɹɟɬ ɚɤɬɭɚɥɶɧɨɟ ɧɚɩɪɚɜɥɟɧɢɟ ɜ ɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɹɯ ɭɱɟɧɵɯ ɦɧɨɝɢɯ ɫɬɪɚɧ ɦɢɪɚ. ȼ Ɋɨɫɫɢɢ ɫɩɟɤɬɪ ɬɚɤɢɯ ɩɪɟɩɚɪɚɬɨɜ ɩɪɟɞɫɬɚɜɥɟɧ ɪɟɦɚɧɬɚɞɢɧɨɦ (ɛɥɨɤɚɬɨɪɨɦ Ɇ2-ɛɟɥɤɚ ɜɢɪɭɫɚ ɝɪɢɩɩɚ Ⱥ) ɢ ɚɪɛɢɞɨɥɨɦ (ɢɧɝɢɛɢɬɨɪɨɦ ɫɥɢɹɧɢɹ ɥɢɩɢɞɧɨɣ ɨɛɨɥɨɱɤɢ ɜɢɪɭɫɚ ɫ ɦɟɦɛɪɚɧɚɦɢ ɷɧɞɨɫɨɦ), ɚ ɬɚɤɠɟ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚɦɢ ɫ ɚɧɬɢɧɟɣɪɚɦɢɧɢɞɚɡɧɨɣ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶɸ -ɨɡɟɥɶɬɚɦɢɜɢɪɨɦ (Ɍɚɦɢɮɥɸ™) ɢ ɡɚɧɚɦɢɜɢɪɨɦ (Ɋɟɥɟɧɡɚ™) [1,2]. ɂɡɜɟɫɬɧɵɦ ɮɚɤɬɨɦ ɹɜɥɹɟɬɫɹ ɨɬɫɭɬɫɬɜɢɟ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ ɪɟɦɚɧɬɚɞɢɧɚ ɜ ɨɬɧɨɲɟɧɢɢ ɜɢɪɭɫɨɜ ɝɪɢɩɩɚ ȼ, ɱɬɨ ɧɟɫɤɨɥɶɤɨ ɨɝɪɚɧɢɱɢɜɚɟɬ ɩɪɢɦɟɧɟɧɢɟ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɜ ɩɟɪɢɨɞ ɷɩɢɞɟɦɢɱɟɫɤɨɣ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ ɷɬɨɝɨ ɜɢɪɭɫɚ [4]. . ȿɳɟ ɨɞɧɢɦ ɧɟɞɨɫɬɚɬɤɨɦ ɪɟɦɚɧɬɚɞɢɧɚ ɹɜɥɹɟɬɫɹ ɛɵɫɬɪɨɟ ɮɨɪɦɢɪɨɜɚɧɢɟ ɭɫɬɨɣɱɢɜɨɫɬɢ ɤ ɩɪɟɩɚɪɚɬɭ ɧɚ ɮɨɧɟ ɩɪɨɜɨɞɢɦɨɣ ɬɟɪɚɩɢɢ, ɚ ɬɚɤɠɟ ɜɵɫɨɤɨɣ ɩɪɨɰɟɧɬ ɰɢɪɤɭɥɹɰɢɢ ɪɟɡɢɫɬɟɧɬɧɵɯ ɤ ɧɟɦɭ ɦɭɬɚɧɬɨɜ ɜ ɩɨɩɭɥɹɰɢɢ ɷɩɢɞɟɦɢɱɟɫɤɢɯ ɲɬɚɦɦɨɜ, ɞɨɫɬɢɝɚɸɳɢɣ ɜ ɩɨɫɥɟɞɧɢɟ ɝɨɞɵ ɜ ɪɹɞɟ ɫɬɪɚɧ 90,0-100% (ɋɒȺ, Ʉɚɧɚɞɚ, Ʉɢɬɚɣ ɢ ɞɪ.) [4,5]. ȼ Ɋɨɫɫɢɢ, ɜ ɫɟɡɨɧɟ 2006-2007 ɝɝ. ɷɬɨɬ ɩɨɤɚɡɚɬɟɥɶ ɧɟ ɩɪɟɜɵɲɚɥ 50,0% . ɒɬɚɦɦɵ, ɭɫɬɨɣɱɢɜɵɟ ɤ ɚɪɛɢɞɨɥɭ, ɭɞɚɥɨɫɶ ɩɨɥɭɱɢɬɶ ɜ ɷɤɫɩɟɪɢɦɟɧɬɚɥɶɧɵɯ ɭɫɥɨɜɢɹɯ ɩɭɬɟɦ ɦɧɨɝɨɤɪɚɬɧɵɯ ɩɚɫɫɚɠɟɣ ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɟ ɤɥɟɬɨɤ, ɨɞɧɚɤɨ ɞɚɧɧɵɟ ɨ ɮɨɪɦɢɪɨɜɚɧɢɢ ɤ ɧɟɦɭ ɭɫɬɨɣɱɢɜɨɫɬɢ ɷɩɢɞɟɦɢɱɟɫɤɢɯ ɲɬɚɦɦɨɜ ɜ ɟɫɬɟɫɬɜɟɧɧɵɯ ɭɫɥɨɜɢɹɯ ɢɥɢ ɧɚ ɮɨɧɟ ɩɪɨɜɨɞɢɦɨɣ ɬɟɪɚɩɢɢ ɨɬɫɭɬɫɬɜɭɸɬ [2]. Ɉɡɟɥɶɬɚɦɢɜɢɪ ɢ ɡɚɧɚɦɢɜɢɪ ɧɟ ɩɨɥɭɱɢɥɢ ɲɢɪɨɤɨɝɨ ɩɪɢɦɟɧɟɧɢɹ ɜ ɧɚɲɟɣ ɫɬɪɚɧɟ ɩɨ ɩɪɢɱɢɧɟ ɜɵɫɨɤɨɣ ɫɬɨɢɦɨɫɬɢ ɩɪɨɜɨɞɢɦɨɝɨ ɤɭɪɫɚ ɩɪɨɮɢɥɚɤɬɢɤɢ ɢ ɥɟɱɟɧɢɹ ɝɪɢɩɩɨɡɧɨɣ ɢɧɮɟɤɰɢɢ. Ɉɞɧɚɤɨ ɷɤɫɩɟɪɬɵ ȼɈɁ ɨɩɪɟɞɟɥɢɥɢ ɢɯ ɨɫɨɛɨɟ ɡɧɚɱɟɧɢɟ ɩɪɢ ɥɟɱɟɧɢɢ ɢ ɩɪɨɮɢɥɚɤɬɢɤɟ ɢɧɮɟɤɰɢɢ, ɜɵɡɜɚɧɧɨɣ ɜɵɫɨɤɨɩɚɬɨɝɟɧɧɵɦɢ ɲɬɚɦɦɚɦɢ ɜɢɪɭɫɚ ɝɪɢɩɩɚ ɩɬɢɰ A(H5N1) [2,5,6]. ɉɨ ɩɪɨɝɧɨɡɭ ȼɫɟɦɢɪɧɨɣ ɨɪɝɚɧɢɡɚɰɢɢ ɡɞɪɚɜɨɨɯɪɚɧɟɧɢɹ, ɜ ɛɥɢɠɚɣɲɢɟ ɝɨɞɵ ɜɨɡɦɨɠɧɨ ɩɨɹɜɥɟɧɢɟ ɧɨɜɨɝɨ ɜɚɪɢɚɧɬɚ ɜɢɪɭɫɚ ɝɪɢɩɩɚ, ɤ ɤɨɬɨɪɨɦɭ ɭ ɥɸɞɟɣ ɧɟ ɛɭɞɟɬ ɢɦɦɭɧɢɬɟɬɚ, ɱɬɨ ɦɨɠɟɬ ɩɪɢɜɟɫɬɢ ɤ ɪɚɡɜɢɬɢɸ ɩɚɧɞɟɦɢɢ. ȼɚɤɰɢɧɵ ɩɪɨɬɢɜ ɢɧɮɟɤɰɢɢ, ɜɵɡɜɚɧɧɵɦ ɬɚɤɢɦ ɲɬɚɦɦɨɦ, ɧɟɬ, ɚ ɢɡ ɩɪɨɬɢɜɨɝɪɢɩɩɨɡɧɵɯ ɩɪɟɩɚɪɚɬɨɜ, ɫɭɳɟɫɬɜɭɸɳɢɯ ɜ ɧɚɫɬɨɹɳɟɟ ɜɪɟɦɹ, ɧɢ ɨɞɢɧ ɧɟ ɩɪɨɢɡɜɨɞɢɬɫɹ ɜ Ɋɨɫɫɢɢ. ȼ ɷɬɨɣ ɫɜɹɡɢ, ɜɨɡɧɢɤɚɟɬ ɧɚɫɬɨɹɬɟɥɶɧɚɹ ɧɟɨɛɯɨɞɢɦɨɫɬɶ ɜ ɫɨɡɞɚɧɢɢ ɧɨɜɵɯ ɫɪɟɞɫɬɜ ɥɟɱɟɧɢɹ ɢ ɩɪɨɮɢɥɚɤɬɢɤɢ ɝɪɢɩɩɚ. Ɇɚɬɟɪɢɚɥɵ ɢ ɦɟɬɨɞɵ: ȼɢɪɭɫ: ȼ ɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɢ ɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɥɢ ɷɬɚɥɨɧɧɵɣ ɜɢɪɭɫ ɝɪɢɩɩɚ ɱɟɥɨɜɟɤɚ - A(H3N2) Ⱥ/Aichi/2/68. ɂɡɭɱɚɟɦɵɣ ɩɪɟɩɚɪɚɬ: ɚɤɬɢɜɧɚɹ ɫɭɛɫɬɚɧɰɢɹ - 1,3-ɞɢɷɬɢɥɛɟɧɡɢɦɢɞɚɡɨɥɢɹ ɬɪɢɣɨɞɢɞ (Per. ʋ ɅɋɊ-000161/09) ɩɪɨɢɡɜɨɞɫɬɜɚ ɈɈɈ «Ɏɚɪɦɩɪɟɩɚɪɚɬ» ɜ ɜɢɞɟ ɜɨɞɨɪɚɫɬɜɨɪɢɦɨɝɨ ɤɨɦɩɥɟɤɫɚ ɫ ɩɨɥɢɜɢɧɢɥɩɢɪɪɨɥɢɞɨɧɨɦ (20% 1,3ɞɢɷɬɢɥɛɟɧɡɢɦɢɞɚɡɨɥɢɹ ɬɪɢɣɨɞɢɞɚ + 80% ɉȼɉ) - ɫɬɟɥɥɚɧɢɧ. Ɉɩɪɟɞɟɥɟɧɢɟ ɩɪɨɬɢɜɨɜɢɪɭɫɧɨɣ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧɚ. Ɉɩɪɟɞɟɥɟɧɢɟ ɩɪɨɬɢɜɨɜɢɪɭɫɧɨɣ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɟ ɤɥɟɬɨɤ ɆȾɋɄ ɜ ɨɬɧɨɲɟɧɢɢ ɜɢɪɭɫɚ ɝɪɢɩɩɚ Ⱥ/Aichi/2/68 ɩɪɨɜɟɞɟɧɨ ɫ ɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɧɢɟɦ ɞɜɭɯ ɦɟɬɨɞɨɜ: ɩɨ ɫɧɢɠɟɧɢɸ ɬɢɬɪɚ ɜɢɪɭɫɚ ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɚɥɶɧɨɣ ɠɢɞɤɨɫɬɢ, ɜɵɹɜɥɹɟɦɨɝɨ ɜ ɊȽȺ, ɢ ɫɧɢɠɟɧɢɸ ɷɤɫɩɪɟɫɫɢɢ ɜɢɪɭɫɧɵɯ ɚɧɬɢɝɟɧɨɜ, ɜɵɹɜɥɹɟɦɨɣ ɦɟɬɨɞɨɦ ɢɦɦɭɧɨɮɟɪɦɟɧɬɧɨɝɨ ɚɧɚɥɢɡɚ (ɂɎȺ). ɉɪɢ ɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɧɢɢ ɨɛɨɢɯ ɦɟɬɨɞɨɜ ɤɥɟɬɤɢ ɆȾɋɄ ɜɵɪɚɳɢɜɚɥɢ ɜ 96-ɥɭɧɨɱɧɵɯ ɩɥɚɧɲɟɬɚɯ ɞɨ ɩɨɥɧɨɝɨ ɦɨɧɨɫɥɨɹ ɢ ɩɟɪɟɞ ɞɨɛɚɜɥɟɧɢɟɦ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ 2 ɪɚɡɚ ɩɪɨɦɵɜɚɥɢ ɫɪɟɞɨɣ MEM ɫ ɞɜɨɣɧɵɦ ɧɚɛɨɪɨɦ ɚɦɢɧɨɤɢɫɥɨɬ ɛɟɡ ɫɵɜɨɪɨɬɤɢ ɞɥɹ ɫɧɢɠɟɧɢɹ ɜɨɡɦɨɠɧɨɣ ɧɟɫɩɟɰɢɮɢɱɟɫɤɨɣ ɪɟɚɤɰɢɢ. ɋɬɟɥɥɚɧɢɧ ɞɨɛɚɜɥɹɥɢ ɤ ɤɥɟɬɤɚɦ ɜ 100 ɦɤɥ ɫɪɟɞɵ MEM. Ɋɚɡɜɟɞɟɧɢɟ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɨɫɭɳɟɫɬɜɥɹɥɢ ɇȿɉɈɋɊȿȾɋɌȼȿɇɇɈ ɩɟɪɟɞ ɜɧɟɫɟɧɢɟɦ ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɭ. ɉɪɟɩɚɪɚɬ ɜɧɨɫɢɥɢ ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɭ ɩɨɫɥɟ ɚɞɫɨɪɛɰɢɢ ɜɢɪɭɫɚ ɤɥɟɬɤɚɦɢ ɤɭɥɶɬɭɪɵ ɞɨ ɤɨɧɟɱɧɵɯ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɣ 5,0; 0,5; 0,05 ɢ 0,005 ɦɝ ɤɨɦɩɥɟɤɫɚ/ɦɥ (ɱɬɨ ɫɨɨɬɜɟɬɫɬɜɭɟɬ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ ɚɤɬɢɜɧɨɝɨ ɜɟɳɟɫɬɜɚ 1,0; 0,1; 0,01 ɢ 0,001 ɦɝ/ɦɥ). Ⱦɥɢɬɟɥɶɧɨɫɬɶ ɢɧɤɭɛɢɪɨɜɚɧɢɹ ɡɚɪɚɠɟɧɧɵɯ ɤɥɟɬɨɤ ɫ ɩɪɟɩɚɪɚɬɨɦ: 30 ɦɢɧ, 2 ɱɚɫɚ. Ʉɪɚɬɧɨɫɬɶ ɜɧɟɫɟɧɢɹ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ: 1 -ɤɪɚɬɧɨ, 5-ɤɪɚɬɧɨ. Ⱦɥɹ ɢɡɭɱɟɧɢɹ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧɚ ɧɚ ɢɧɮɟɤɰɢɨɧɧɵɣ ɬɢɬɪ ɜɢɪɭɫɚ ɞɨɛɚɜɥɹɥɢ ɞɟɫɹɬɢɤɪɚɬɧɵɟ ɪɚɡɜɟɞɟɧɢɹ ɜɢɪɭɫɚ ɫ ɭɱɟɬɨɦ ɪɚɡɜɟɞɟɧɢɹ ɩɪɟɩɚɪɚɬɨɦ (1:5, 1:50, 1:500 ɢ ɬ.ɞ.) ɜ ɨɛɴɟɦɟ 100 ɦɤɥ ɫ ɞɨɛɚɜɥɟɧɢɟɦ ɬɪɢɩɫɢɧɚ (ɌɊɋɄ treated, Sigma) ɜ ɤɨɧɟɱɧɨɣ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ 2 ɦɤɝ/ɦɥ. ɉɚɧɟɥɢ ɢɧɤɭɛɢɪɨɜɚɥɢ 24 ɱɚɫɚ ɩɪɢ 37°ɋ ɫ ɩɨɫɥɟɞɭɸɳɢɦ ɭɱɟɬɨɦ ɪɚɡɜɢɬɢɹ ɰɢɬɨɩɚɬɢɱɟɫɤɨɝɨ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɢ ɬɢɬɪɨɜɚɧɢɟɦ ɜ ɪɟɚɤɰɢɢ ɝɟɦɚɝɝɥɸɬɢɧɚɰɢɢ, ɜ ɤɨɬɨɪɨɣ ɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɥɢ 1,0% ɜɡɜɟɫɶ ɷɪɢɬɪɨɰɢɬɨɜ ɱɟɥɨɜɟɤɚ 0(1) ɝɪɭɩɩɵ ɤɪɨɜɢ. Ɋɚɫɱɟɬ ɢɧɮɟɤɰɢɨɧɧɵɯ ɬɢɬɪɨɜ ɩɪɨɜɨɞɢɥɢ ɩɨ ɦɟɬɨɞɭ Ɋɢɞɚ ɢ Ɇɟɧɱɚ [3]. Ⱦɨɫɬɨɜɟɪɧɵɦɢ ɪɚɡɥɢɱɢɹɦɢ ɫɱɢɬɚɥɢ ɪɚɡɧɢɰɭ ɦɟɠɞɭ ɢɧɮɟɤɰɢɨɧɧɵɦɢ ɬɢɬɪɚɦɢ ɜɢɪɭɫɚ ɢ ɜɢɪɭɫɚ ɫ ɩɪɟɩɚɪɚɬɨɦ ɧɟ ɦɟɧɟɟ ɱɟɦ ɧɚ 2 lg. ɉɪɢ ɨɩɪɟɞɟɥɟɧɢɢ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧɚ ɧɚ ɷɤɫɩɪɟɫɫɢɸ ɜɢɪɭɫɧɵɯ ɚɧɬɢɝɟɧɨɜ ɤ ɤɥɟɬɤɚɦ, ɢɫɤɥɸɱɚɹ ɤɥɟɬɨɱɧɵɣ ɤɨɧɬɪɨɥɶ, ɞɨɛɚɜɥɹɥɢ ɩɨ 100 ɦɤɥ ɜɢɪɭɫɚ ɧɚ ɫɪɟɞɟ MEM. Ɇɧɨɠɟɫɬɜɟɧɧɨɫɬɶ ɡɚɪɚɠɟɧɢɹ ɫɨɫɬɚɜɥɹɥɚ 0,1 ɌɐɂȾ5ɨ ɧɚ ɤɥɟɬɤɭ. ȼɫɟ ɩɪɨɰɟɞɭɪɵ ɩɪɨɜɨɞɢɥɢ ɧɚ ɫɪɟɞɟ MEM ɫ ɞɨɛɚɜɥɟɧɢɟɦ ɬɪɢɩɫɢɧɚ (ɌɊɋɄ treated, Sigma) ɜ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ 2 ɦɤɝ/ɦɥ. ɉɥɚɧɲɟɬɵ ɢɧɤɭɛɢɪɨɜɚɥɢ ɜ ɬɟɪɦɨɫɬɚɬɟ ɫ ɋɈ2 ɜ ɬɟɱɟɧɢɟ 24 ɱɚɫɨɜ ɩɪɢ 37°ɋ. ɉɨɫɥɟ ɢɧɤɭɛɚɰɢɢ ɤɥɟɬɤɢ ɢɫɫɥɟɞɨɜɚɥɢ ɩɨɞ ɢɧɜɟɪɬɢɪɨɜɚɧɧɨɦ ɦɢɤɪɨɫɤɨɩɨɦ, ɱɬɨɛɵ ɡɚɪɟɝɢɫɬɪɢɪɨɜɚɬɶ ɨɬɫɭɬɫɬɜɢɟ ɜ ɧɢɯ ɰɢɬɨɬɨɤɫɢɱɟɫɤɢɯ ɢ ɰɢɬɨɩɚɬɢɱɟɫɤɢɯ ɢɡɦɟɧɟɧɢɣ. ɋɪɟɞɭ ɭɞɚɥɹɥɢ ɢ ɤɥɟɬɤɢ ɮɢɤɫɢɪɨɜɚɥɢ 80% ɚɰɟɬɨɧɨɦ ɜ ɮɨɫɮɚɬɧɨ-ɫɨɥɟɜɨɦ ɛɭɮɟɪɟ (PBS) ɜ ɬɟɱɟɧɢɟ 15 ɦɢɧɭɬ, ɯɨɪɨɲɨ ɜɵɫɭɲɢɜɚɥɢ ɢ ɡɚɬɟɦ ɨɬɦɵɜɚɥɢ 3 ɪɚɡɚ ɪɚɫɬɜɨɪɨɦ (PBS ɫ 0,05% Tween-20). ɗɬɢ ɢ ɜɫɟ ɞɚɥɶɧɟɣɲɢɟ ɩɪɨɰɟɞɭɪɵ ɨɬɦɵɜɤɢ ɩɪɨɜɨɞɢɥɢ ɭɤɚɡɚɧɧɵɦ ɪɚɫɬɜɨɪɨɦ. Ɂɚɬɟɦ ɤ ɤɥɟɬɤɚɦ ɞɨɛɚɜɥɹɥɢ ɩɨ 100 ɦɤɥ ɪɚɫɬɜɨɪɚ PBS ɫ 1% ɮɟɬɚɥɶɧɨɣ ɫɵɜɨɪɨɬɤɨɣ ɢ 0,05% Tween-20, ɢɧɤɭɛɢɪɨɜɚɥɢ ɩɪɢ 37°ɋ ɜ ɬɟɱɟɧɢɟ 30 ɦɢɧ. ɉɨɫɥɟ ɭɞɚɥɟɧɢɹ ɪɚɫɬɜɨɪɚ, ɤ ɤɥɟɬɤɚɦ ɞɨɛɚɜɥɹɥɢ ɩɨ 100 ɦɤɥ ɩɨɥɢɤɥɨɧɚɥɶɧɵɯ ɚɧɬɢɬɟɥ ɤ ɜɢɪɭɫɭ ɝɪɢɩɩɚ Ⱥ ɜ ɪɚɛɨɱɟɦ ɪɚɡɜɟɞɟɧɢɢ. ɉɨɫɥɟ ɢɧɤɭɛɚɰɢɢ ɫ ɚɧɬɢɬɟɥɚɦɢ ɜ ɬɟɱɟɧɢɟ 1 ɱɚɫɚ ɩɪɢ 37°ɋ ɜ ɥɭɧɤɢ ɜɧɨɫɢɥɢ ɩɨ 100 ɦɤɥ IgG ɤɨɡɵ ɩɪɨɬɢɜ IgG ɤɪɨɥɢɤɚ, ɦɟɱɟɧɧɵɟ ɩɟɪɨɤɫɢɞɚɡɨɣ ɯɪɟɧɚ, ɜ ɪɚɛɨɱɟɦ ɪɚɡɜɟɞɟɧɢɢ. ɉɨɫɥɟ 4-ɯ ɤɪɚɬɧɨɣ ɨɬɦɵɜɤɢ ɥɢɝɢɪɨɜɚɧɧɭɸ ɩɟɪɨɤɫɢɞɚɡɭ ɜɵɹɜɥɹɥɢ ɞɨɛɚɜɥɟɧɢɟɦ ɜ ɥɭɧɤɢ 100 ɦɤɥ ɫɭɛɫɬɪɚɬɚ - ɈɎ/ (ɨɪɬɨɮɟɧɢɥɟɧɞɢɚɦɢɧ). Ɋɟɚɤɰɢɸ ɭɱɢɬɵɜɚɥɢ ɩɨ ɨɩɬɢɱɟɫɤɨɣ ɩɥɨɬɧɨɫɬɢ ɩɪɢ 492 ɧɦ ɧɚ ɫɩɟɤɬɪɨɮɨɬɨɦɟɬɪɟ «ɍɧɢɩɥɚɧ». Ʉɚɠɞɨɟ ɪɚɡɜɟɞɟɧɢɹ ɜɢɪɭɫɚ ɢɫɫɥɟɞɨɜɚɥɢ ɜ 3-> ɩɨɜɬɨɪɚɯ, ɞɥɹ ɤɨɬɨɪɵɯ ɜɵɱɢɫɥɹɥɢ ɫɪɟɞɧɟɟ ɡɧɚɱɟɧɢɟ Ɉɉ-492. ɉɪɨɰɟɧɬ ɢɧɝɢɛɢɪɨɜɚɧɢɹ ɨɩɪɟɞɟɥɹɥɢ, ɤɚɤ ɨɬɧɨɲɟɧɢɟ (Ɉɉ-492 ɨɩɵɬɚ ɦɢɧɭɫ Ɉɉ-492 ɤɥɟɬɨɱɧɨɝɨ ɤɨɧɬɪɨɥɹ / Ɉɉ-492 ɜɢɪɭɫɧɨɝɨ ɤɨɧɬɪɨɥɹ ɦɢɧɭɫ Ɉɉ-492 ɤɥɟɬɨɱɧɨɝɨ ɤɨɧɬɪɨɥɹ) ɭɦɧɨɠɟɧɧɨɝɨ ɧɚ 100%. Ⱦɨɫɬɨɜɟɪɧɵɦɢ ɪɚɡɥɢɱɢɹɦɢ ɫɱɢɬɚɥɢ ɪɚɡɧɢɰɭ Ɉɉ ɩɨ ɫɧɢɠɟɧɢɸ ɜɢɪɭɫɧɨɣ ɪɟɩɪɨɞɭɤɰɢɢ ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɟ ɤɥɟɬɨɤ MDCK ɦɟɠɞɭ ɨɩɵɬɨɦ ɢ ɤɨɧɬɪɨɥɟɦ ɧɟ ɦɟɧɟɟ ɱɟɦ ɧɚ 50%[1]. Ɋɟɡɭɥɶɬɚɬɵ Ɋɟɡɭɥɶɬɚɬɵ ɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɹ ɰɢɬɨɬɨɤɫɢɱɟɫɤɨɝɨ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧɚ ɜ ɨɬɧɨɲɟɧɢɢ ɜɢɪɭɫɚ ɝɪɢɩɩɚ Ⱥ/Aichi/2/68 ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɟ ɤɥɟɬɨɤ ɆȾɋɄ ɩɪɟɞɫɬɚɜɥɟɧɵ ɜ ɬɚɛɥɢɰɟ 1. Ʉɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢ ȼɪɟɦɹ Ʉɪɚɬɧɨɫɬɶ ɐɢɬɨɬɨɤɫɢɱɟɫɤɨɟ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɢɧɤɭɛɚɰɢɢ ɜɧɟɫɟɧɢɹ ɞɟɣɫɬɜɢɟ ɦɝ/ ɦɥ ɜ ɦɢɧ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ 5,0 30 1 50 30 5 70 120 1 60 120 5 80 30 1 40 30 5 60 120 1 15 120 5 65 30 1 5 30 5 15 120 1 15 120 5 30 30 1 0 30 5 10 120 1 5 120 5 15 30 1 0 30 5 0 120 1 0 120 5 0 5,0 4,0 4,0 0,5 0,5 0,05 0,05 0,005 0,005 ɂɡɭɱɟɧɢɟ ɰɢɬɨɬɨɤɫɢɱɟɫɤɨɝɨ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɫɬɟɥɚɧɢɧɚ ɩɪɨɜɟɞɟɧɨ ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɟ ɤɥɟɬɨɤ ɆȾɋɄ ɉɪɢ ɜɢɡɭɚɥɶɧɨɣ ɨɰɟɧɤɟ ɫɨɫɬɨɹɧɢɹ ɤɨɧɬɪɨɥɶɧɵɯ, ɧɟɢɧɮɢɰɢɪɨɜɚɧɧɵɯ ɤɥɟɬɨɤ, ɢ ɤɭɥɶɬɢɜɢɪɭɟɦɵɯ ɫ ɢɫɩɵɬɭɟɦɵɦ ɩɪɟɩɚɪɚɬɨɦ ɜ ɬɟɱɟɧɢɟ 72 ɱɚɫɨɜ ɭɫɬɚɧɨɜɥɟɧɨ, ɱɬɨ 50% ɞɨɡɚ ɞɥɹ ɫɬɟɥɚɧɢɧɚ ɫɨɫɬɚɜɥɹɟɬ 5 ɦɝ/ɦɥ. Ɋɟɡɭɥɶɬɚɬɵ ɰɢɬɨɬɨɤɫɢɱɟɫɤɨɝɨ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɫɬɟɥɚɧɢɧɚ ɩɪɢ ɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɧɢɢ ɨɤɪɚɫɤɢ ɤɥɟɬɨɤ ɧɟɣɬɪɚɥɶɪɨɬɨɦ ɩɨɤɚɡɚɥɢ, ɱɬɨ ɩɪɟɩɚɪɚɬ ɢɧɝɢɛɢɪɭɟɬ ɡɧɚɱɟɧɢɟ Ɉɉ-525 ɧɚ 50% ɩɨ ɫɪɚɜɧɟɧɢɸ ɫ ɤɥɟɬɨɱɧɵɦ ɤɨɧɬɪɨɥɟɦ ɩɪɢ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɫɬɟɥɚɧɢɧ 5 ɦɝ/ɦɥ ɩɪɢ ɨɞɧɨɤɪɚɬɧɨɦ ɜɨɡɞɟɣɫɬɜɢɢ, ɜ ɭɫɥɨɜɢɹɯ ɩɹɬɢɤɪɚɬɧɨɝɨ ɜɧɟɫɟɧɢɹ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɩɪɢ ɜɫɟɯ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɹɯ ɧɟɝɚɬɢɜɧɨɟ ɜɨɡɞɟɣɫɬɜɢɟ ɜɨɡɪɚɫɬɚɟɬ. Ɋɟɡɭɥɶɬɚɬɵ ɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɹ ɷɮɮɟɤɬɢɜɧɨɫɬɢ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧɚ ɜ ɨɬɧɨɲɟɧɢɢ ɜɢɪɭɫɚ ɝɪɢɩɩɚ Ⱥ/Aichi/2/68 ɩɨ ɩɨɞɚɜɥɟɧɢɸ ɪɟɩɪɨɞɭɤɰɢɢ ɜɢɪɭɫɚ ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɟ ɤɥɟɬɨɤ ɩɪɟɞɫɬɚɜɥɟɧɵ ɜ ɬɚɛɥɢɰɟ 2. Ʉɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɹ ȼɪɟɦɹ Ʉɪɚɬɧɨɫɬɶ ɉɪɨɰɟɧɬ ɋɧɢɠɟɧɢɟ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɢɧɤɭɛɚɰɢɢ ɜɧɟɫɟɧɢɹ ɩɨɞɚɜɥɟɧɢɹ ɢɧɮɟɤɰɢɨɧɧɨɝɨ ɦɝ/ ɦɥ ɜ ɦɢɧ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɜɢɪɭɫɧɨɣ ɬɢɬɪɚ ɜɢɪɭɫɚ ɜ lg ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ 5,0 5,0 4,0 4,0 0,5 0,5 0,05 0,05 0,005 0,005 30 1 ɐɉȾ 30 5 ɐɉȾ 120 1 ɐɉȾ 120 5 ɐɉȾ 30 1 80 30 5 ɐɉȾ 120 1 95 120 5 ɐɉȾ 30 1 30 0,5 30 5 40 1,0 120 1 40 1,0 120 5 45 1,5 30 1 20 0,5 30 5 28 0,5 120 1 25 0,5 120 5 35 0,75 30 1 5 0 30 5 10 0 120 1 10 0 120 5 15 0 ɂɧɮɟɤɰɢɨɧɧɵɣ ɬɢɬɪ ɜɢɪɭɫɚ 4,0 5,0 ɆȾɋɄ ɉɪɢɦɟɱɚɧɢɟ: ɐɉȾ – ɰɢɬɨɩɚɬɨɝɟɧɧɨɟ ɞɟɣɫɬɜɢɟ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ Ɋɟɡɭɥɶɬɚɬɵ ɨɩɪɟɞɟɥɟɧɢɹ ɜɥɢɹɧɢɹ ɪɚɡɥɢɱɧɵɯ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɣ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧɚ ɧɚ ɪɟɩɪɨɞɭɤɰɢɸ ɜɢɪɭɫɚ ɝɪɢɩɩɚ Ⱥ/Aichi/2/68 ɩɨɤɚɡɚɥɢ, ɱɬɨ ɩɪɢɫɭɬɫɬɜɢɟ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɜ ɫɪɟɞɟ ɩɨɫɥɟ ɢɧɮɢɰɢɪɨɜɚɧɢɹ ɤɥɟɬɨɤ 1,5 lg ɌɐɂȾ 50/ɤɥ . ɆȾɋɄ ɜɢɪɭɫɨɦ ɫɧɢɠɚɥɨ ɢɧɮɟɤɰɢɨɧɧɵɣ ɬɢɬɪ ɜɢɪɭɫɚ ɧɚ 0,5- ɜ ɡɚɜɢɫɢɦɨɫɬɢ ɨɬ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ. ɂɡɭɱɟɧɨ ɞɟɣɫɬɜɢɟ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧɚ ɧɚ ɪɟɩɪɨɞɭɤɰɢɸ ɜɢɪɭɫɚ ɝɪɢɩɩɚ Ⱥ ɱɟɥɨɜɟɤɚ ɫ ɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɧɢɟɦ ɦɟɬɨɞɚ ɢɦɦɭɧɨɮɟɪɦɟɧɬɧɨɝɨ ɚɧɚɥɢɡɚ ɦɨɞɢɮɢɰɢɪɨɜɚɧɧɨɝɨ ɞɥɹ ɨɩɪɟɞɟɥɟɧɢɹ ɩɪɨɬɢɜɨɜɢɪɭɫɧɨɣ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ ɫɨɟɞɢɧɟɧɢɣ ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɟ ɤɥɟɬɨɤ ɆȾɋɄ. ɉɪɨɜɟɞɟɧɧɵɟ ɷɤɫɩɟɪɢɦɟɧɬɵ ɩɨɤɚɡɚɥɢ, ɱɬɨ ɩɪɟɩɚɪɚɬ ɜ ɢɫɫɥɟɞɭɟɦɵɯ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɹɯ ɢ ɪɟɠɢɦɟ ɜɨɡɞɟɣɫɬɜɢɹ ɢɧɝɢɛɢɪɭɟɬ ɪɟɩɪɨɞɭɤɰɢɸ ɜɢɪɭɫɚ ɝɪɢɩɩɚ ɧɚ 5-45 % ɜ ɡɚɜɢɫɢɦɨɫɬɢ ɨɬ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɢ ɤɪɚɬɧɨɫɬɢ ɟɝɨ ɜɧɟɫɟɧɢɹ. ɁȺɄɅɘɑȿɇɂȿ. ɉɪɢ ɷɤɫɩɟɪɢɦɟɧɬɚɥɶɧɨɦ ɢɡɭɱɟɧɢɢ ɩɪɨɬɢɜɨɜɢɪɭɫɧɨɣ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧ ɛɵɥɢ ɩɨɥɭɱɟɧɵ ɫɥɟɞɭɸɳɢɟ ɪɟɡɭɥɶɬɚɬɵ: ɐɢɬɨɬɨɤɫɢɱɟɫɤɚɹ ɞɨɡɚ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧɚ ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɟ ɤɥɟɬɨɤ ɆȾɋɄ ɫɨɫɬɚɜɢɥɚ 5,0 ɦɝ/ɦɥ. ɋɬɟɥɥɚɧɢɧ ɜ ɤɨɧɰɟɧɬɪɚɰɢɢ 0,5 ɦɝ /ɦɥ ɢɧɝɢɛɢɪɨɜɚɥ ɪɟɩɥɢɤɚɰɢɸ ɜɢɪɭɫɚ ɝɪɢɩɩɚ ɱɟɥɨɜɟɤɚ Ⱥ/Aichi/2/68 (ɇ3N2) ɜ ɤɭɥɶɬɭɪɟ ɤɥɟɬɨɤ MDCK , ɫɧɢɠɚɹ ɢɧɮɟɤɰɢɨɧɧɵɣ ɬɢɬɪ ɜɢɪɭɫɚ ɧɚ 1,0-1,5 lg ɩɪɢ ɜɪɟɦɟɧɢ ɷɤɫɩɨɡɢɰɢɢ 120 ɦɢɧɭɬ ɢ ɫɨɨɬɜɟɬɫɬɜɭɸɳɟɣ ɤɪɚɬɧɨɫɬɢ ɜɧɟɫɟɧɢɹ ɩɪɟɩɚɪɚɬɚ . ɉɪɟɩɚɪɚɬ ɫɬɟɥɥɚɧɢɧ ɦɨɠɟɬ ɛɵɬɶ ɪɟɤɨɦɟɧɞɨɜɚɧ ɞɥɹ ɞɚɥɶɧɟɣɲɟɝɨ ɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɢɹ ɜ ɤɚɱɟɫɬɜɟ ɮɚɪɦɚɤɨɥɨɝɢɱɟɫɤɨɝɨ ɫɪɟɞɫɬɜɚ ɞɥɹ ɩɪɟɞɨɬɜɪɚɳɟɧɢɹ ɝɪɢɩɩɨɡɧɨɣ ɢɧɮɟɤɰɢɢ.
