Ибраксион

НОВЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ДЛЯ ЗАЩИТЫ
ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО РИНОТРАХЕИТА КРС
НОВЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ДЛЯ ЗАЩИТЫ
ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО РИНОТРАХЕИТА КРС
ИБРАКСИОН
ИБРАКСИОН
ТЕХНИЧЕСКИЙ СПРАВОЧНИК
125009, Россия, г.Москва
ул. Тверская, д.22
Тел.: 8 (495) 721 1400
Официальный сайт: www.merial.ru
ИНАКТИВИРОВАННАЯ АДЪЮВАНТНАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ ИРT, ИЗГОТОВЛЕННАЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДЕЛЕЦИИ ГЕНА GE
КОМПАНИЯ ГРУППЫ САНОФИ
ИНАКТИВИРОВАННАЯ АДЪЮВАНТНАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ ИРT, ИЗГОТОВЛЕННАЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДЕЛЕЦИИ ГЕНА GE
СОДЕРЖАНИЕ
1.Введение............................................................................................4
2.
ИРТ: данные о заболевании............................................................4
2.1
Этиология...................................................................................................... 4
2.2 Эпизоотология............................................................................................... 4
2.3 Патогенез....................................................................................................... 5
2.4
Клинические признаки.................................................................................. 5
2.5 Диагностика................................................................................................... 6
3.ИБРАКСИОН........................................................................................6
3.1
Описание вируса............................................................................................ 6
3.2
Данные по безопасности............................................................................... 6
3.3
Данные по эффективности............................................................................ 7
3.4
Техническое резюме................................................................................... 14
4.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ........................................................................15
5.Ссылки .............................................................................................16
6.Библиография.................................................................................16
7.
2
ИБРАКСИОН – Вопросы и ответы.................................................17
3
ИБРАКСИОН
Инактивированная адъювантная вакцина против ИРT, изготовленная
с использованием делеции гена gE
1. ВВЕДЕНИЕ
Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота/инфекционный пустулезный
вульвовагинит (ИРТ/ИПВ) – герпесвирусная инфекция крупного рогатого скота,
вызываемая вирусом типа 1 (BHV-1).
У крупного рогатого скота герпесвирус 1 типа (BHV-1) вызывает ряд заболеваний, из
которых наиболее распространенными являются инфекционный вирусный ринотрахеит
крупного рогатого скота (ИРT), инфекционный пустулезный вульвовагинит (ИПВ) и
инфекционный пустулезный баланопостит (ИПБ).
Кроме того, указанный вирус может вызывать развитие конъюнктивита,
менингоэнцефалита, заболеваний желудочно-кишечного тракта, абортов и
генерализованных инфекций у новорожденных.
2. ИРT: ДАННЫЕ О ЗАБОЛЕВАНИИ
2.1 Этиология
Герпесвирус КРС 1 типа является типичным альфа-герпесвирусом, состоящим из закрытого
капсида, содержащего двухцепочечную ДНК. Нуклеокапсид развивается в ядре клетки
хозяина и приобретает оболочку при выходе из клетки. Вирус имеет относительно короткий
цикл репликации, составляющий около 12 часов.
Подобно другим герпесвирусам, BHV-1 неустойчив при низком уровне pH, а также
восприимчив к повышенной температуре. При температуре 37 °C инактивация вируса
происходит в течение 10 дней, а при температуре 4 °C вирус стабилен минимум в течение
одного месяца. Вирус быстро инактивируется большинством дезинфектантов.
2.2Эпизоотология
Крупный рогатый скот является основным хозяином BHV-1, однако, восприимчивыми
к инфекции также являются козы, свиньи и буйволы.
Животные-носители вируса являются «хранилищем» инфекции в период между вспышками
заболевания.
Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота
Относительно более низкая встречаемость и меньшая выраженность клинических
проявлений заболевания у крупного рогатого скота при выпасном содержании в сравнении
с крупным скотом при содержании на откормочных площадках, возможно, связаны
с интенсивностью индивидуальной экспозиции к вирусу, напряженностью пассивного
иммунитета, скученностью животных и постоянным поступлением новых животных
с разным иммунным статусом.
Указанные стресс-факторы могут усиливать выделение вируса BHV-1 животными
со скрытой инфекцией (носителями) и повышать уровень контаминации воздушнокапельным путем: в экспериментальных условиях инфекционные дозы BHV-1 в пределах
103,6–105,4 при внутриназальном введении достаточны для того, чтобы вызвать
характерные клинические проявления ИРТ, а телята носители могут выделять до 106,8–
108,5 бляшкообразующих единиц/мл носовой слизи при повторном выведении вируса.
4
Первичная инфекция BHV-1 является частью комплекса респираторных заболеваний,
однако ряд других вирусов (BRSV (респираторно-синцитиальный вирус КРС), BVD (вирусная
диарея), адено-, рино- и реовирусы), а также бактерии (Pasteurella spp. Hemophilus) тоже
могут участвовать в развитии заболевания.
Инфекционный пустулезный вульвовагинит/баланопостит
Интродукция и распространение ИПВ/ИПБ обычно являются результатом передачи возбудителя
половым путем или использования контаминированной спермы при искусственном осеменении.
2.3Патогенез
При ИРТ размножение вируса происходит в верхних дыхательных путях, после чего вирус
может распространиться по всем органам респираторной системы. Репликация вируса
также может проходить в тканях глаза. Виремия наблюдается редко, однако, вирус может
обнаруживаться в головном мозге, почках, брыжеечных лимфоузлах и перитонеальной
жидкости. Системное заболевание наблюдается редко, за исключением плодов и
новорожденных телят.
При ИПВ и ИПБ репликация вируса происходит исключительно в эпителии вульвы, вагины,
пениса и препуция, при этом виремия не наблюдается.
После развития первичной инфекции BHV-1 заболевание, как правило, приобретает
латентное течение, при этом вирус локализуется в нейронах тройничного нерва и
крестцовых ганглиев при ИРТ и ИПВ, соответственно. Периодически наблюдается
обострение латентной инфекции, при этом происходит перемещение вируса по тканям
нервной системы и его последующая репликация в эпителиальных тканях, иннервируемых
данными нервами. Такое обострение инфекции может объяснить вспышки ИРТ,
происходящие в отсутствии очевидных источников инфекции.
Активация латентной инфекции может произойти в результате введения кортикостероидов,
это используется для выявления скрытой инфекции. После реактивации BHV-1 наиболее
часто выделяется из секретов и тканей органов респираторного тракта.
Латентная инфекция может иметь место при наличии выраженного антительного ответа,
у большинства животных с гуморальными антителами наблюдается латентная инфекция.
2.4 Клинические признаки
Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота
Продолжительность инкубационного периода при ИРТ варьирует от одного до двух дней
при экспериментальной инфекции и от 2 до 20 дней при спонтанной инфекции
при переводе крупного рогатого скота на откормочные площадки.
Течение заболевания может продолжаться до двух недель в неосложненных случаях.
Считается, что на клинические проявления заболевания оказывают влияние возраст
животного, доза вируса, путь проникновения инфекции и наличие сопутствующих
инфекций, вызванных другими патогенами.
При эпизоотиях заболеваемость может достигать 100 %. Уровень смертности составляет
от 1 до 7 процентов.
Обычно у крупного рогатого скота, содержащегося на откормочных площадках,
наблюдается более высокий уровень смертности, чем у молочных коров, возможно, ввиду
того, что такие животные в большей степени подвержены стрессу.
К обычно наблюдаемым клиническим проявлениям относится лихорадка (температура тела
до 42°C), тахипноэ, гиперпноэ, снижение аппетита, периодический кашель, слезотечение,
серозные или слизисто-гнойные выделения из носа, галитоз (запах изо рта), снижение
надоев, а также снижение массы тела. Реже наблюдаются выраженная гиперемия и
очаговые некротические поражения слизистой оболочки носовой полости.
5
При вспышках ИРТ обычно наблюдаются аборты в период между четвертым и седьмым
месяцами стельности.
Имеются сообщения о том, что в редких случаях ИРТ наблюдается у новорожденных телят.
Инфекционный пустулезный вульвовагинит/баланопостит
Острый ИПВ обычно развивается в течение одного-трех дней после осеменения и
на начальном этапе характеризуется беспокойством, частым мочеиспусканием,
обмахиванием хвостом, отеком, гиперемией и образованием пустул на слизистой оболочке
вульвы и вагины. Обычно наблюдается спонтанное излечение поражений в течение 10–14
дней.
Неврологический синдром
Возраст больных животных, как правило, составляет от двух недель до трех лет, у них
может наблюдаться незначительное нарушение координации движений, прогрессирующее
в атаксию, угнетение или возбуждение, опистотонус, судороги и амавроз (разновидность
слепоты).
Гастроинтестинальный синдром
Герпесвирус КРС 1 типа был выделен из фекалий взрослого крупного рогатого скота
с энтеритом. У молодых телят диарея является проявлением системной инфекции,
вызываемой BHV-1, которая характеризуется высоким уровнем смертности.
2.5Диагностика
Окончательный диагноз ставится на основании данных лабораторных исследований,
по результатам которых было установлено наличие вирусных антигенов или антител к
вирусу. Вирус может быть изолирован из образцов ткани, полученных в острой фазе ИРТ,
максимальный уровень выделения вируса наблюдается через три–шесть дней после
инфицирования в период, когда наблюдается лихорадка и выделения из глаз и носа.
3. ИБРАКСИОН
3.1 Описание вируса
Вакцинный штамм: в производстве вакцины ИБРАКСИОН используется штамм ST
герпесвируса КРС 1 типа, полевой штамм, изолированный от животных с клиническими
признаками ИРТ во Франции, который характеризуется оптимальной иммуногенностью.
Данный штамм ранее использовался компанией Мериал в производстве вакцин (IBEPUR и
IFFAVAX).
Данный штамм был подвергнут модификации с помощью рекомбинации отдела генома,
кодирующего протеин gE.
ИБРАКСИОН является маркерной вакциной против инфекционного ринотрахеита крупного
рогатого скота.
Делеция гена не оказывает влияния на эффективность продукта.
Для того, чтобы гарантировать безопасность продукта, активный компонент вакцины
прошел инактивацию. Титр инактивированного активного компонента выражается в мкг gB
протеина/мл (так называемым GL), выбранного ввиду того, что он индуцирует образование
антител, обеспечивающих защиту от заболевания.
3.2 Данные по безопасности: испытания безопасности
В испытании использовалось 262 головы крупного рогатого скота: телята (120) с
колостральными антителами к вирусу ИРT или без них; бычки (20); стельные коровы
6
(20); подсосные коровы (80) и молочные коровы (22) различных пород, разного возраста
и физиологического статуса, которые содержались в стандартных условиях; животные
получали одну рекомендованную стандартную дозу вакцины, дозу, превышающую
рекомендованную, или рекомендованную дозу, которая вводилась два или три раза, либо
дозу, превышающую рекомендованную, которая вводилась два раза. Вакцина вводилась
подкожно.
Общие выводы:
В условиях настоящих испытаний переносимость инактивированной вакцины,
изготовленной с использованием штамма, модифицированного с использованием делеции
gE-гена, была очень хорошей. Никаких системных побочных реакций на введение вакцины
не наблюдалось, были отмечены лишь незначительные местные реакции в месте введения
вакцины, которые исчезли спонтанно в течение нескольких недель после введения.
3.3 Данные по эффективности
Эффективность вакцины ИБРАКСИОН оценивалась в испытаниях, проведенных в
соответствии с требованиями Директивы 81/852/EEC, с учетом дополнений Директивы
92/18/EEC, а также требований к инактивированным вакцинам в соответствии со
следующими протоколами:
■
Экспериментальное заражение с титрованием дозы
■
Экспериментальное заражение с целью оценки длительности иммунитета
■
Эффективность в производственных условиях
В ходе всех испытаний вакцина вводилась в рекомендованной дозе (2 мл), введение
осуществлялось подкожно, использовалась стандартная схема вакцинации (2 инъекции с
интервалом в три недели).
3.3.1 Лабораторные исследования
Для определения активности и эффективности вакцины ИБРАКСИОН было проведено 4
лабораторных исследования, в которых использовалось 75 телят.
1) Экспериментальное заражение с титрованием дозы с использованием
восприимчивых к инфекции телят в возрасте одного месяца
В данном исследовании эффективности использовались двадцать девять телят в возрасте
одного месяца, у которых отсутствовали антитела к вирусу ИРТ.
Вывод:
Эффективность вакцины ИБРАКСИОН против ИРТ, изготовленной с использованием делеции
гена gE, была продемонстрирована в настоящем исследовании с помощью серологического
мониторинга и экспериментального заражения.
Каждая партия вакцины обеспечивала защиту более высокого уровня, или, как минимум,
аналогичного уровню, обеспечиваемому конкурентными продуктами.
2) Длительность иммунитета и экспериментальное заражение телят,
не имеющих колостральных антител
Целью настоящего исследования было определение эффективности инактивированной
вакцины против ИРТ, изготовленной с использованием делеции гена gE, при введении
телятам, у которых отсутствовали колостральные антитела и которые были подвергнуты
экспериментальному инфицированию вирусом ИРТ через шесть месяцев после вакцинации.
7
Вывод:
Через шесть месяцев после иммунизации с использованием инактивированной вакцины
против ИРТ ИБРАКСИОН, изготовленной с использованием делеции гена gE, было
показано наличие защиты от клинических проявлений заболевания и выделения вируса.
■
Было предложено установить заявленную продолжительность иммунитета для данной
маркерной вакцины равную шести месяцам.
6
4
2
-1
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
Группа А – Вакцинация
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
Группа В – Контроль
5
5
4
4
3
3
2
2
1
1
0
00
0
28
28
56
56
84
84
112
112
Дней после провокационного испытания
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
6
Средний титр
(log10)титр (log10)
Средний
Для данной маркерной вакцины может быть предложена заявленная продолжительность
иммунитета равная шести месяцам.
0
7
Рисунок 2:
Изменение уровня
выделения вируса в
разных экспериментальных
группах в период после
экспериментального
заражения
■
Рисунок 4:
Изменение титра
серонейтрализующих
антител к вирусу ИРТ в
разных экспериментальных
группах в период
исследования (вакцинации
в День 78 и День 99
– Экспериментальное
заражение в День 280)
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
8
Было продемонстрировано наличие защиты от клинических проявлений заболевания и
снижение уровня выделения вируса при вакцинации телят с колостральными антителами
за 6 месяцев до провокационного испытания с использованием инактивированной
вакцины против ИРТ ИБРАКСИОН, изготовленной с использованием делеции гена gE.
Средний
Средний
титр
титр
серонейтрализующих
серонейтрализующих
антител
антител
(log
(log
) )
10 10
Средний клинический показатель
Рисунок 1:
Изменение среднего
клинического показателя в
разных экспериментальных
группах в течение
экспериментального заражения
■
■
5
7
4
6
3
5
2
4
1
3
0
2 -1
Дни
Дни
168
168
196
196
224
224
252
252
280
280
308
308
4) Эффект вакцины против ИРТ ИБРАКСИОН, изготовленной с использованием делеции
гена gE, при введении телятам, ранее контаминированным вирусом ИРТ, которым
также был введен дексаметазон
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
Цель:
0
1
2
3
1
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
11
12
13
14
Целью настоящего исследования было определение эффективности инактивированной
вакцины против ИРТ ИБРАКСИОН, изготовленной с использованием делеции гена gE,
при введении телятам, ранее контаминированным вирусом ИРТ, в ходе испытания с
экспериментальным заражением. Телята получали вакцину дважды с интервалом в 21 день,
им также был введен дексаметазон через 14 дней после последней вакцинации.
В исследовании использовались двенадцать телят.
Дней после провокационного испытания
0
-1
140
140
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Дней после провокационного испытания
Результаты:
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
3
4
Изменение среднего клинического показателя было значительно менее выраженным в
группе вакцинации, в сравнении с контрольной группой (p<0,01) (Рисунок 5).
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
2
3
1
2
0
10
0
21
42
63
84
105
126
147
168
189
210
231
252
189
210
231
252
Дней после вакцинации
0
21
42
63
84
105
126
147
168
Дней после вакцинации
3) Продолжительность иммунитета и экспериментальное заражение с участием
телят с колостральными антителами
Целью настоящего исследования было определение эффективности инактивированной
вакцины против ИРТ, изготовленной с использованием делеции гена gE, при введении
телятам в возрасте от 3 до 4 месяцев с колостральными антителами и последующем
проведении испытания с экспериментальным заражением ИРТ через шесть месяцев после
последней вакцинации.
8
Клинический показатель:
■
Рисунок 5:
Изменение среднего
клинического показателя в
разных экспериментальных
группах в период проведения
мониторинга
Средний
Средний
клинический
клинический
показатель
показатель
4
Средний титр
антител
(logантител
)
Средний
титр
(log10)
10
Рисунок 3:
Изменение титра
серонейтрализующих
антител к ИРТ в разных
экспериментальных группах
в период исследования
(вакцинация в День 0 и День
21 – Экспериментальное
заражение в День 218)
6
6
5
5
4
4
3
3
2
2
1
1
0
00
0
Группа А – Вакцинация
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
Группа В – Контроль
1
1
2
2
3
3
4
4
5
5
6
6
7
7
8
8
9
9
10
10
Дней после последней инъекции дексаметазона
Дней после последней инъекции дексаметазона
11
11
12
12
13
13
14
14
15
15
9
Выделение вируса:
3.3.2 Полевые испытания
Выделение вируса ИРТ наблюдалось в обеих группах с 102 по 107 День (от 4 до 9 дней после
первой инъекции дексаметазона).
7 полевых испытаний с использованием 288 голов крупного рогатого скота, как телят,
так и взрослых животных разных пород, возраста и физиологического статуса, которые
содержались в стандартных условиях, были проведены для определения эффективности
вакцины ИБРАКСИОН в хозяйствах, свободных от ИРТ, и хозяйствах с установленной
контаминацией вирусом ИРТ.
Средний уровень
выделение
Средний
уровеньвируса
выделение вируса
(log10)
(log10)
Уровень выделения вируса был значительно ниже (p<0,05) в вакцинированной
группе,
Группа А – Вакцинация
в сравнении9с контрольной группой (Рисунок 6).
Группа В – Контроль
Рисунок 6:
Изменение уровня
выделения вируса в разных
экспериментальных группах
в период проведения
мониторинга в настоящем
исследовании
8
7
6
95
84
73
62
51
40
3 15
2
1
0
15
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
49
84
99
101
103
105
107
109
111
113
105
107
109
111
113
А. ПРОИЗВОДСТВЕННЫЕ ИСПЫТАНИЯ В ХОЗЯЙСТВЕ, СВОБОДНОМ ОТ ИРТ,
(подкожное введение 2 доз вакцины с интервалом 3 недели)
1) Безопасность и эффективность вакцины против ИРТ ИБРАКСИОН,
изготовленной с использованием делеции гена gE, в хозяйстве, свободном от ИРТ
Дни
49
84
99
101
103
Целью настоящего исследования кинетики антителообразования было определение эффективности вакцины против ИРТ ИБРАКСИОН, изготовленной с использованием делеции гена gE.
Дни
■
Вывод:
Вакцина против ИРТ, изготовленная с использованием делеции гена gE, в условиях
настоящего исследования (молочные телята, 2 подкожные инъекции вакцины с интервалом в
21 день) обеспечивает наступление выраженного специфического иммунного ответа
с образованием серонейтрализующих антител.
Сывороточные антитела:
Рисунок 7:
Изменение уровня
выделения вируса в разных
экспериментальных группах
в период проведения
мониторинга в настоящем
исследовании
Средний титрСредний
серонейтрализующих
титр серонейтрализующих
)
антител (log10антител
(log10)
Титры серонейтрализующих антител к вирусу ИРТ были значительно выше в группе
вакцинации в сравнении с контрольной группой в День 84 (p=0,032 – односторонний
критерий) и День 98 (p<0,001). Средние значения титров серонейтрализующих антител не
различались значительно в другие контрольные моменты времени (Рисунок 7).
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
4.5
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
3.5
4.5
Вывод:
43
Введение вакцины против ИРТ ИБРАКСИОН, изготовленной с использованием делеции гена gE,
восприимчивым телятам вызывало выраженный специфический серологический ответ
после двух инъекций с интервалом в 21 день, который сохранялся на достаточном уровне
через 6 месяцев, а после проведения третьей инъекции через 6 месяцев после первого
введения вакцины наблюдался бустерный эффект.
2.5
3.5
32
0
14
28
42
56
2.5
2
70
84
98
112
126
70
84
98
112
126
Дни
0
14
28
42
56
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ ПО ЛАБОРАТОРНЫМ ИССЛЕДОВАНИЯМ:
10
Целью настоящего исследования кинетики антителообразования было определение
эффективности вакцины против ИРТ, изготовленной с использованием делеции гена gE, при
введении 3-месячным телятам-отъемышам.
4
Дни
■
Во всех группах вакцинированных животных наблюдалась выраженная
сероконверсия.
■
После экспериментального заражения: у всех вакцинированных животных,
в независимости от наличия колостральных антител на момент вакцинации, через
шесть месяцев после иммунизации с использованием инактивированной вакцины
ИБРАКСИОН, изготовленной с использованием делеции гена gE, отмечались:
– Защита против клинических проявлений заболевания при проведении
экспериментального заражения.
– Снижение уровня выделения вируса.
■
2) Эффективность вакцины против ИРТ, изготовленной с использованием делеции
гена gE: кинетика антителообразования у восприимчивых к заболеванию телят
Рисунок 8:
Средний титр
серонейтрализующих антител
в разных экспериментальных
группах (log10)
Средний титр серонейтрализующих
антител (log10)
■
Группа В – Контроль
Группа А – Вакцинация
4
3
2
1
0
0
21
42
63
84
105
126
147
168
189
210
Дни
Было наглядно продемонстрировано наличие устойчивого иммунитета
при введении данной маркерной вакцины телятам с колостральными антителами
или без них на момент вакцинации.
11
3) Эффективность и безопасность вакцины против ИРТ, изготовленной
с использованием делеции гена gE, при введении молодым бычкам
6) Эффективность вакцины против ИРТ, изготовленной с использованием
делеции гена gE, при введении подсосным коровам, содержащимся в хозяйстве,
контаминированном вирусом ИРТ
Целью настоящего исследования кинетики антителообразования было определение
эффективности вакцины, содержащей 6 мкг gB в одной дозе.
Целью настоящего исследования кинетики антителообразования было определение
эффективности вакцины против ИРТ, изготовленной с использованием делеции гена gE.
В исследовании использовались 97 взрослых подсосных коров, содержавшихся в хозяйстве,
контаминированном вирусом ИРТ.
Вывод:
Введение вакцины вызывает выраженный, специфический и продолжительный иммунный
ответ с образованием серонейтрализующих антител.
Вывод:
Вакцина ИБРАКСИОН, изготовленная с использованием делеции гена gE, вызывала у
взрослых подсосных коров, содержавшихся в хозяйстве, контаминированном вирусом ИРТ,
выраженный специфический иммунный ответ с образованием серонейтрализующих антител.
4) Эффективность и безопасность вакцины против ИРТ, изготовленной
с использованием делеции гена gE, при введении подсосным коровам,
содержащимся в хозяйстве, свободном от ИРТ
Рисунок 10:
Изменение среднего титра
серонейтрализующих
антител в разных
экспериментальных группах
в День 0, 21 и 35
Целью настоящего исследования было определение безопасности и эффективности
вакцины против ИРТ, изготовленной с использованием делеции гена gE, содержащей
6 мкг gB в одной дозе вакцины.
Вывод:
Введение вакцины против ИРТ ИБРАКСИОН, изготовленной с использованием делеции гена gE,
вызывало выраженный специфический иммунный ответ с образованием
серонейтрализующих антител у подсосных коров, содержащихся в хозяйстве,
свободном от ИРТ.
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
День 0
День 0
День 21
День 21
День 35
День 35
0
Б. ПОЛЕВЫЕ ИСПЫТАНИЯ В ХОЗЯЙСТВАХ С УСТАНОВЛЕННОЙ КОНТАМИНАЦИЕЙ
ВИРУСОМ ИРТ
(подкожное введение 2 доз вакцины с интервалом в 3 недели)
0
2
3
Титр серонейтрализующих
антител (log10)2
1
3
Титр серонейтрализующих антител (log10)
7) Эффективность вакцины против ИРТ, изготовленной с использованием
делеции гена gE, при введении молочным коровам, содержащимся в хозяйстве,
контаминированном вирусом ИРТ
5) Безопасность и эффективность вакцины против ИРТ, изготовленной
с использованием делеции гена gE, при введении подсосным коровам,
содержащимся в хозяйствах, контаминированных вирусом ИРТ
Рисунок 9:
Средний титр
серонейтрализующих
антител в разных
экспериментальных
группах в День 0, 20 и 35
1
Целью настоящего исследования кинетики антителообразования было определение
эффективности вакцины против ИРТ, изготовленной с использованием делеции гена gE.
Целью настоящего исследования кинетики антителообразования было определение
эффективности вакцины против ИРТ, изготовленной с использованием делеции гена gE,
содержащей 6 мкг gB в одной дозе.
Вакцина вводилась 22 лактирующим коровам в возрасте от 32 до 90 месяцев (от первой
до пятой лактации).
Вывод:
Вывод:
Введение вакцины против ИРТ ИБРАКСИОН, изготовленной с использованием делеции
гена gE, вызывало у подсосных коров, содержащихся в хозяйстве, контаминированном
вирусом ИРТ, выраженный специфический иммунный ответ с образованием
серонейтрализующих антител.
После введения вакцины против ИРТ ИБРАКСИОН, изготовленной с использованием
делеции гена gE, наблюдался выраженный специфический иммунный ответ
с образованием серонейтрализующих антител у коров, содержащихся в
хозяйстве, контаминированном вирусом ИРТ.
Рисунок 11:
Средние титры
серонейтрализующих
антител (log10) в разных
экспериментальных группах
в День 0, 21 и 35
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
День 0
День 20
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
Группа А – Вакцинация
Группа В – Контроль
День 0
День 0
День 21
День 21
День 35
День 35
День 35
0
1
2
Средний титр (log10)
12
3
4
0
1
0
1
2
Титр антител (log
2 10)
3
4
3
4
Титр антител (log10)
13
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ ПО РЕЗУЛЬТАТАМ ПРОИЗВОДСТВЕННЫХ
ИСПЫТАНИЙ:
В различных производственных условиях:
– молочные телята, содержавшиеся в хозяйстве, свободном от ИРТ
– восприимчивые 3-месячные телята-отъемыши
– бычки в возрасте от 7 до 9 месяцев, содержавшиеся в хозяйстве, свободном от ИРТ
– взрослые подсосные коровы, содержавшиеся в хозяйстве, свободном от ИРТ
– взрослые подсосные коровы, содержавшиеся в хозяйстве, контаминированном
вирусом ИРТ
– молочные коровы (в период лактации), содержавшиеся в хозяйстве,
контаминированном вирусом ИРТ
■
■
Введение инактивированной вакцины против ИРТ ИБРАКСИОН, изготовленной
с использованием делеции гена gE, вызывало выраженный специфический
иммунный ответ с образованием серонейтрализующих антител. Введение
вакцины осуществлялось дважды, вводилось по одной дозе вакцины подкожно
с интервалом в 21 день. Значительный уровень антител отмечался
через 6 месяцев после вакцинации.
Наблюдался бустерный эффект после введения третьей дозы вакцины через
6 месяцев после первичной вакцинации.
для определения эффективности вакцины ИБРАКСИОН в хозяйствах, свободных от ИРТ и
хозяйствах, контаминированных вирусом ИРТ.
Результаты:
■
В различных производственных условиях:
– Вакцина ИБРАКСИОН вызывала выраженный специфический иммунный
ответ с образованием серонейтрализующих антител после введения двух
доз вакцины подкожно с интервалом в 21 день, наблюдалась персистенция
значительного уровня антител через 6 месяцев после проведения вакцинации.
– Наблюдался бустерный эффект после введения третьей дозы вакцины через 6
месяцев после первичной вакцинации.
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ:
■
ИБРАКСИОН может использоваться для крупного рогатого скота в возрасте от
2 недель при отсутствии колостральных антител и с 3 месяцев при наличии
колостральных антител.
■
ИБРАКСИОН может использоваться для стельных и лактирующих коров.
■
ИБРАКСИОН не оказывает отрицательного воздействия на надой молока.
3.4 Техническое резюме
1) ДАННЫЕ ПО БЕЗОПАСНОСТИ:
В условиях проведенных исследований наблюдалась очень хорошая переносимость
вакцины ИБРАКСИОН. Системных побочных реакций не наблюдалось, были отмечены лишь
незначительные местные реакции в месте введения вакцины, которые спонтанно исчезли в
течение нескольких недель после проведения вакцинации.
2) ДАННЫЕ ПО ЭФФЕКТИВНОСТИ:
Для определения эффективности вакцины ИБРАКСИОН было проведено четыре
лабораторных исследования, в которых использовались 75 телят.
Результаты:
■
У всех вакцинированных животных наблюдалась выраженная сероконверсия.
■
После проведения провокационного испытания: у всех иммунизированных животных
с колостральными антителами или без них на момент вакцинации через шесть
месяцев после вакцинации с использованием инактивированной вакцины против ИРТ
ИБРАКСИОН наблюдалось:
– наличие защиты от клинических проявлений заболевания при проведении
провокационного испытания;
– снижение уровня выделения вируса.
■
Было продемонстрировано наличие устойчивого иммунитета при введении вакцины
ИБРАКСИОН телятам с колостральными антителами или без них на момент вакцинации.
Семь производственных испытаний с использованием 288 голов крупного рогатого
скота, как телят, так и взрослых животных разного пола, разных пород, разного возраста и
физиологического статуса, которые содержались в стандартных условиях, были проведены
14
4. КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
1. ТОРГОВОЕ НАИМЕНОВАНИЕ
ИБРАКСИОН
2. ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА И СОСТАВ
Эмульсия для инъекций.
Вакцина изготовлена из культуральной жидкости линии клеток MDBK, инфицированной
вирусом инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота с делецией гена gE,
инактивированной бетапропиолактоном, с добавлением легкого парафинового масла
(224,8-244,1 мг/мл).
3. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
Вакцина вызывает формирование иммунного ответа у крупного рогатого скота к
возбудителю инфекционного ринотрахеита через 14 дней после двукратного применения
продолжительностью 6 месяцев.
В одной иммунизирующей дозе вакцины (2 мл) содержится 0,75 Ед РН (титр
вируснейтрализующих антител после введения вакцины морским свинкам)
инактивированного вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота с
делецией гена gE.
Вакцина безвредна, лечебными свойствами не обладает.
4. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ
Вакцина предназначена для профилактики инфекционного ринотрахеита крупного рогатого
скота в неблагополучных и угрожаемых по данной болезни хозяйствах. Вакцина может
быть использована для стельных и лактирующих коров.
15
Вакцину вводят подкожно в заднюю треть шеи в дозе 2 мл, по следующей схеме:
– при отсутствии материнских антител против инфекционного ринотрахеита крупного
рогатого скота: начиная с 2-недельного возраста двукратно с интервалом 21 день;
– при наличии материнских антител против инфекционного ринотрахеита крупного
рогатого скота: начиная с 3-месячного возраста двукратно с интервалом 21 день.
Ревакцинацию проводят однократно через 6 месяцев.
5. ПЕРИОД ОЖИДАНИЯ ПЕРЕД УБОЕМ
Продукты убоя и мясо от вакцинированных животных реализуют без ограничения
независимо от сроков вакцинации.
6. СРОК ГОДНОСТИ
18 Месяцев.
4. Иммунизация с использованием инактивированной вакцины на основе BHV 1 не может считаться
стимулом реактивации (OC Straub – 1996)
5. Элиминация инфекции ринотрахеита крупного рогатого скота в стадах молочных коров с высокой
экстенсивностью инфекции (GC Pritchard – 1996)
6. Персистенция специфических антител к герпесвирусу КРС 1 типа у крупного рогатого скота после
интраназальной вакцинации с использованием живой вирусной вакцины (WHM Van der Poel, JA
Kramps, J Quak, A Brand, JT Van Oirschot – 1995)
7. Использование инактивированной вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого
скота, изготовленной с использованием делеции гена gE, в усовершенствованных программах по
борьбе с герпесвирусом КРС 1 типа (W Strube, S Auer,W Block, E Heinen, D Kretzdorn, C Rodenbach, N
Schmeer – 1996)
8. Раннее формирование иммунитета при использовании живой gE негативной маркерной вакцины
против герпесвируса КРС 1 типа (MJ Kaashoek, JT van Oirschot – 1996)
7. ХРАНЕНИЕ
Вакцину хранят и транспортируют в сухом темном месте при температуре от 2ºС до 8ºС.
Не допускается замораживание вакцины.
5. ССЫЛКИ
Babuik, L.A., van Drunen Little-van den Hurk, S., Tikoo, S.K. 1996. Immunology of bovine herpesvirus 1 injection.
Veterinary Microbiology, 53: 31 – 41
Bradshaw, B.J.F., Edwards,S., 1996. Antibody isotype responses to experimental infection with bovine herpesvirus 1
in calves with colostrally derived antibody. Veterinary Microbiology, 53:143 – 151
Denis, M. et al. 1996. The role of glycoproteins gC, gE, gl and gG in the induction of cell-mediated immune
responses to bovine herpesvirus 1. Veterinary Microbiology 53:121 – 132
Engels, M., Ackerman, M. 1996. Pathogenesis of ruminant herpesvirus infections. Veterinary Microbiology, 53: 3 – 15
Godfroid,J., et al.v 1996. Assessment of the cell-mediated immunity in cattle infection after bovine herpesvirus 4
infection, usins an in vitro antigen-specific interferon –gamma assay. Veterinary Microbiology, 53: 133 – 141
Hage, J.J., Schukken, Y.H., Barkema, H.W., Benedictus, G., Rijsewijk, F.A.M., Wentink, G.H., 1996. Population
dynamics of bovine herpesvirus 1 infection in a dairy herd. Veterinary Microbiology, 53: 169 – 180
Kramps,J.A., Perrin,B., Edwards,S.v Van Oirschot, J.T., 1996. A European inter-laboratory trial to evaluate the
reliability of serological diagnosis of bovine herpesvirus 1 infections. Veterinary Microbiology, 53: 153 – 161
Kaashoek, M.J., Rijswijk, F.A.M., Van Oirschot, J.T., 1996. Persistence of antibodies against bovine herpesvirus 1
and virus reactivation two to three years after infection. Veterinary Microbiology, 53: 103 – 110
Kaashoek, M.J., Straver, P.H., Van Rooij, E.M.A., Quak,J., Van Oirschot, J.T., 1996 Virulence, immunogenicity and
reactivation of seven bovine herpesvirus 1.1 strains: clinical and virological aspects. Veterinary Record, 139: 416 – 421
Kramps, J.A., Perrin,B., Edwards,S., Van Oirschot, J.T., 1996. A European inter-laboratory trial to evaluate the
reliability of serological diagnosis of bovine herpesvirus 1 infections. Veterinary Microbiology, 53: 153 – 161
Van Oirschot, J.T., Kaashoek, M.J., Rijsewijk, F.A.M., 1996. Advances in the development and evaluation of
bovine herpesvirus 1 vaccines. Veterinary Microbiology, 53: 43 – 54.
6. БИБЛИОГРАФИЯ
МАРКЕРНЫЕ ВАКЦИНЫ:
1. Маркерные вакцины – новые возможности в борьбе с ИРТ (S Siebert, S Auer, E Heinen, D Kretzdorn, W
Strube – 1995)
2. Маркерные вакцины на основе штамма коровьего герпесвируса типа 1 позволяют снизить
инцидентность инфекций (Bosch JG, Frankena K, Franken P, Hage JJ, De Jong MCM, Kaashoek MJ, MarisVeldhuis MA, Noordhuizen JPTM, Van der Poel WHM,Verhoeff J,Weerdmeester K, Zimmer GM and Van
Oirschot JT – 1996)
16
3. Опыт использования двух маркерных вакцин на основе BHV (OC Straub – 1996)
9. Разработка программ по борьбе с заболеванием на основе использования инактивированной
вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота (Z Pospisil, J Krejci, P Jinek, P
Lany, D Zendulkova, P Cihal – 1996)
7. ИБРАКСИОН – ВОПРОСЫ И ОТВЕТЫ
1. Что такое Ибраксион?
Ибраксион – это маркерная вакцина против инфекционного ринотрахеита крупного
рогатого скота (ИРT).
2. Что такое маркерная вакцина?
Маркерная вакцина – это вакцина, которая была модифицирована с помощью делеции
гена. Это позволяет использовать вакцину в качестве маркерной в отношении ИРT.
Маркерная вакцина позволяет дифференцировать вакцинированных животных и спонтанно
инфицированных животных.
3. Что такое инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота?
Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота представляет собой самое
распространенное заболевание, вызываемое герпесвирусом КРС 1 типа (BHV-1). Как
правило, у инфицированных животных наблюдается развитие внезапной лихорадки и
респираторного дистресса, вызванного воспалительным процессом в носовой полости,
трахее и легких. ИРТ является высококонтагиозным заболеванием и при отсутствии
лечения быстро распространяется среди поголовья. Инфицированные животные становятся
пожизненными носителями вируса и возможным источником инфекции. Заболевание
может оказывать значительный экономический ущерб и иногда может вызывать аборты и
падеж больных животных.
4. Является ли Ибраксион GM-вакциной (генно-модифицированной)?
Да, это рекомбинантная GM-вакцина.
5. Является ли Ибраксион живой или инактивированной вакциной?
Ибраксион представляет собой инактивированную вакцину, обладающую эффективностью
живой вакцины.
17
6. Каким образом осуществляется генетическая модификация
вакцины?
Используемый в производстве вакцины Ибраксион штамм ST герпесвируса КРС 1 типа был
модифицирован с помощью делеции гена при рекомбинации.
Вакцина Ибраксион является маркерной вакциной в отношении ИРТ. Животные,
иммунизированные с помощью вакцины Ибраксион, будут оставаться негативными
по результатам специфичного gE-теста, в сравнении с животными, инфицированными
полевым штаммом вируса.
7. Существует ли способ установить, какие животные были
иммунизированы с использованием данной вакцины?
Да. Животные могут пройти простой специфичный gE-тест. Иммунизированные
животные по результатам данного теста будут негативными, в сравнении с животными,
инфицированными полевым штаммом вируса.
8. По какой причине компанией Мериал была разработана данная
вакцина, учитывая сложившееся мнение о ГМ технологиях?
Вакцина была разработана по просьбам ветеринарных врачей. Им требовалась вакцина,
которая была бы достаточно эффективна для проведения первичной вакцинации и которая
могла бы использоваться для повторной вакцинации крупного рогатого скота, позитивного
по результатам тестирования, для предотвращения выделения вируса.
Вакцина является высокоэффективной и безопасной в использовании и позволяет
контролировать выделение вируса, тем самым снижая уровень контаминации.
9. Содержит ли вакцинный штамм ген-маркер резистентности
к антибиотикам?
Нет. В процессе мультипликации введения генов-маркеров резистентности к
антибиотикам не отмечается.
10. Существуют ли не-GM вакцины против данных заболеваний?
Да.
11. Каким образом осуществлялось тестирование вакцины?
Эффективность вакцины Ибраксион оценивалась в испытаниях, проведенных в
соответствии с требованиями Директивы 81/852/EEC, с учетом дополнений Директивы
92/18/EEC, а также требований к инактивированным вакцинам в соответствии со
следующими протоколами:
• Испытания с экспериментальным заражением с титрованием дозы
• Испытания с экспериментальным заражением по оценке продолжительности
иммунитета
• Эффективность в производственных испытаниях
на момент вакцинации отсутствовали или имелись колостральные антитела, через
шесть месяцев после вакцинации с использованием инактивированной вакцины
Ибраксион наблюдалось:
– наличие защиты при проведении экспериментального заражения,
– снижение уровня выделения вируса.
• Было показано наличие иммунитета в течение шести месяцев после использования
вакцины Ибраксион у телят с колостральными антителами или без них на момент
вакцинации.
Вакцина обеспечивает больший или, как минимум, такой же уровень защиты, как и
аналогичные конкурентные продукты.
13. В каком возрасте может проводиться вакцинация крупного
рогатого скота?
Программа вакцинации может использоваться для крупного рогатого скота в возрасте
от 2 недель при отсутствии колостральных антител и начиная с 3 месяцев при наличии
колостральных антител.
14. Может ли употребление людьми молока и мяса от крупного
рогатого скота, иммунизированного с использованием
GM - вакцины, представлять риск для их здоровья?
Экспертиза качества, безопасности и эффективности вакцины, проведенная ФГБУ
Всероссийским государственным Центром качества и стандартизации лекарственных
средств для животных и кормов в рамках государственной регистрации вакцины, показала,
что продукты убоя и мясо от вакцинированных животных реализуют без ограничения
независимо от сроков вакцинации. Это отражено в п.16 инструкции по применению
препарата, утвержденной Россельхознадзором.
15. Необходима ли специальная маркировка молока и мяса,
полученных от крупного рогатого скота, иммунизированного
данной вакциной?
Не требуется.
16. Что может произойти с человеком в случае потребления мяса
от животных, вакцинированных этой GМ-вакциной?
Ничего. Вакцина произведена с использованием штамма вируса, специфичного для
крупного рогатого скота.
17. Возможно ли проведение вакцинации стельных или
лактирующих коров?
Да, и кроме того, Ибраксион не оказывает никакого влияния на удой.
12. Какова эффективность вакцины?
Ибраксион обладает высокой эффективностью и безопасна в использовании.
По результатам лабораторных и полевых испытаний было показано:
• Наличие выраженной сероконверсии у всех вакцинированных животных.
• После экспериментального заражения: у всех иммунизированных животных, у которых
18
19