На правах рукописи ЗЕЛЕНУХА ЕВГЕНИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ Профилактика и меры борьбы с комплексным респираторным синдромом в промышленном свиноводстве 06.02.02. – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология. АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва – 2012 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина» (ФГБОУ ВПО МГАВМиБ). Научный руководитель: Сидорчук Александр Андреевич лауреат премии Совета министров СССР, доктор ветеринарных наук, профессор Официальные оппоненты: Фомина Наталья Васильевна доктор биологических наук, профессор кафедры ветеринарной вирусологии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина» Куринов Виктор Васильевич доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий лабораторией диагностики Государственного научного учреждения «Всероссийский научно исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии», г.Покров, Владимирская обл. Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины» Защита состоится «20» сентября 2012 г. в «10.00» часов на заседании диссертационного совета Д.220.042.01 при ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина» по адресу: 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина» Автореферат разослан «___» ____________ 2011 г. и размещен на сайте http://www.vak.ed.gov.ru Ученый секретарь диссертационного совета, профессор 2 Т.Н. Грязнева Общая характеристика работы Актуальность темы. Свиноводство в настоящее время является одной из важнейших отраслей животноводства в России, которая в настоящее время успешно развивается и достаточно успешно конкурирует на продовольственном рынке страны с зарубежной продукцией. В значительной степени это связано с привлечением в последнее 10-летие серьезных финансовых ресурсов, внедрением в отраслевых предприятиях современных мировых технологий содержания, выращивания, кормления и переработки продукции свиноводства. По-прежнему, решение вопросов производства качественной и безопасной свиноводческой продукции наиболее реально на крупных свиноводческих предприятиях (комплексах) ряд из которых были построены или получили второе рождение в последнее десятилетие. Вместе с тем, значительное количество свинины в стране производится на мелких частных фермах или т.н. «домашних подворьях». Однако поголовье на них не превышает обычно десятков или сотен свиней, в связи с этим ветеринарные и ветеринарно-санитарные проблемы в таких хозяйствах, как правило, отличаются от аналогичных проблем в крупных хозяйствах промышленного типа. В крупных свиноводческих хозяйствах основную проблему среди инфекционной патологии представляют респираторные и желудочно-кишечные заболевания, диагностика, профилактика и ликвидация которых в силу их полиэтиологичности, наличия ассоциированных, смешанных, секундарных, факторных инфекций решаются очень трудно, несмотря на многолетние усилия научных специалистов и практических ветеринарных работников. Как известно, инфекционные респираторные болезни свиней широко распространены во многих странах мира с развитым свиноводством и наносят основной экономический ущерб (Шахов А. и др. 2004, и др.). Причем респираторные болезни чаще отмечают у молодняка 1-5 месячного возраста, заболеваемость поросят может достигать 30-70%, летальность доходит до 40%. Наибольшая гибель поросят наблюдается обычно в 2-3 месячном возрасте. Проявление таких болезней в значительной степени зависит от поголовья свиней в хозяйстве, технологических процессов производства и иммунного статуса животных различных возрастных групп (Шевцов А.А. и др. 2008; Орлянкин Б.Г. 2005, Орлянкин Б.Г., Мишин А.М., 2010; Done S.H., 2002). В борьбе с такими болезнями наиболее эффективным методом является комплексная профилактика, основанная на системе организационнохозяйственных, зоотехнических, ветеринарно-санитарных мероприятий в сочетании со специфической вакцинопрофилактикой и применением антимикробных препаратов (Прудников С.И. и др., 2010). Возбудителями респираторных болезней свиней являются большое количество вирусов и бактерий (Орлянкин Б.Г.2005,2010, Орлянкин Б.Г., Мишин А.М., 2010). Кроме того, в ряде случаев имеют место паразитоценозы, при которых возможно дополнительное поражение легких гельминтами, в частности метастронгилюсами и личинками аскарид (Thacker E.L. 2001; Choi Y.K., et al. 2003; и др.). В свое время Halbur P.G.(1998) предложил, в зависимости от способности вызывать заболевание, разделить вирусные респираторные патогенны на три группы. В 1-ю группу им были отнесены главные патогены, вызывающие клинические признаки и поражения легких. 3 Сюда вошли вирус репродуктивного и респираторного синдрома свиней (РРСС), цирковирус свиней типа 2 (ЦВС-2), вирусы гриппа свиней (ВГС), герпесвирус болезни Ауески (ВБА) и респираторный коронавирус свиней (РКВС), который является мутантом вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней. Во вторую группу был отнесен широко распространенный в свиноводческих хозяйствах цитомегаловирус свиней, который проявляет патогенное действие только у поросят с низким иммунным статусом, или при смешанных инфекциях с другими вирусами и бактериями. Третья группа – вирусы, которые редко обнаруживаются при респираторных болезнях, и играют низкую роль в респираторной патологии, такие как: парамиксовирусы, парвовирусы, аденовирусы, реовирусы и вирус энцефаломиокардита свиней. В дальнейшем такое разделение было поддержано другими исследователями, в частности российскими (Орлянкин Б.Г. и др. 2005,2010, Орлянкин Б.Г., Мишин А.М., 2010 и др.). В связи с возникновением на ряде крупных свинокомплексов (ЗАО Мордовский бекон, республика Мордовия и ООО АК Горноуральский, Свердловской обл.) неблагополучной ситуации по абортам свиноматок и респираторным болезням поросят была определена цель работы. Цель и задачи исследований: Цель работы: Провести исследования для выяснения причин респираторной патологии поросят различных возрастных групп и разработать эффективные схемы и методы контроля заболеваний с целью стабилизации экономических показателей хозяйств. Задачи исследований: 1. Провести в указанных хозяйствах комплексное эпизоотологическое обследование с выявлением клинико-патологических особенностей респираторных болезней инфекционной природы. 2. Установить с использованием методов лабораторной диагностики достоверные окончательные диагнозы с целью выявления нозологических форм имеющих место респираторных болезней, оценки возможных путей передачи инфекции. 3. Испытать для специфической профилактики ряд вакцин отечественного и зарубежного производства против респираторных болезней свиней и предложить хозяйствам наиболее эффективные из них. 4. Провести оценку поствакцинального, в том числе колострального, иммунитета к основным респираторным болезням в динамике развития энзоотий. 5. Разработать и применить современные схемы лечебно-профилактических мероприятий, включающих вакцинацию и другие специфические средства и методы. Научная новизна. Установлен нозологический профиль заболеваний свиней в 2-х промышленных комплексах с проявлением респираторной патологии. При заболевании, вызванном ассоциированным действием ряда вирусных и бактериальных патогенов – возбудителей репродуктивно-респираторного синдрома свиней (РРСС) европейского и американского генотипа, цирковирусной инфекции свиней (ЦВС-2), энзоотической пневмонии (ЭПС) вызываемой 2-я видами микоплазм (M. hyopneumonia., M.hyorihnis), актинобацилезной плевропневмонии (АППС), гемофилезного полисерозита (ГПС). 4 Проведено сравнительное испытание для специфической профилактики вирусных респираторных болезней ряда вакцин отечественного и зарубежного производства и предложены научно-обоснованные схемы их применения на различных половозрастных группах свиней. Проведена оценка поствакцинального, в том числе колострального, иммунитета к основным респираторным болезням в динамике развития энзоотий. Разработаны схемы лечебно-профилактических мероприятий, включающие вакцинацию и применение лечебно-профилактических антибактериальных препаратов. Практическая значимость. Разработана система мероприятий по диагностике, профилактике и ликвидации основных вирусных и бактериальных болезней, вызывающих поражения респираторных органов у свиней, апробированная в 2-х крупных свиноводческих комплексах. На основании проведенных исследований разработаны, согласованы и утверждены «Рекомендации по диагностики, профилактике и ликвидации вирусных и бактериальных респираторных болезней в промышленных свиноводческих хозяйствах», которые используются в практической работе при проведении консультаций в свиноводческих хозяйствах ряда регионов России. Личный вклад соискателя. Личный вклад соискателя заключается в организации и проведении всего комплекса исследований, а также анализе и обобщении результатов работы. Автор непосредственно проводил все исследования в хозяйствах, отбирал материал для лабораторных исследований и участвовал в их проведении, проводил оценку эффективности вакцинации и лечебно-профилактических обработок. Апробация работы. Материалы работы были представлены, на межобластной ветеринарной конференции по болезням свиней (Курск, 2010). Результаты работы включены в годовые отчеты по НИР кафедры эпизоотологии и инфекционных болезней ФГБОУ ВПО МГАВМиБ в 2010-2011 гг. Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 научных статей, в том числе 4 - в изданиях, рекомендованных ВАК РФ. Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 201 страницах компьютерного текста. Работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций, приложения и списка использованной литературы, включающего 288 источников (в т.ч. 194 иностранных). Работа содержит 64 таблицы и 71 рисунок. Основные положения, выносимые на защиту. 1. Результаты комплексных диагностических исследований по установлению ассоциированной инфекции свиней, вызывающей проявление респираторной патологии в 2-х крупных свинокомплексах. 5 2. Оценка эпизоотологической и иммунологической эффективности ряда вакцин отечественного и зарубежного производства для специфической профилактики вирусных респираторных болезней свиней. 3. Методы и схемы проведения лечебно-профилактических мероприятий при респираторных болезнях свиней, включающих применение вакцинации и антибактериальных препаратов. Материалы и методы исследований Работа была выполнена в период 2008-2011 г.г. на базе кафедры эпизоотологии и инфекционных болезней ФГБОУ ВПО МГАВМиБ и в 2-х крупных свинокомплексах России: ЗАО «Мордовский бекон» (республика Мордовия) и ООО АК «Горноуральский» (Свердловская область) Проводились эпизоотологические, клинические, патологоанатомические и лабораторные исследования с целью определения этиологии основных вирусных респираторных болезней свиней, а также дополнительно проводились выборочные исследования для обнаружения других инфекционных патогенов. Текущую эпизоотическую обстановку хозяйства оценивали при проведении комиссионных (с участием специалистов хозяйства) эпизоотологических обследований. Эпизоотологические обследования проводили в соответствие с Методическими указаниями «Система эпизоотологического мониторинга особо опасных и экзотических болезней животных. Раздел 6.2. Метод эпизоотологического исследования» (ВНИИВВиМ, 2000). В эти же сроки на основных отделениях хозяйства проводили клинические осмотры свинопоголовья различных половозрастных групп, вскрытия павших или вынужденно убитых животных, абортированных плодов. Пробы патологического материала в соответствии с «Правилами взятия и пересылки патологического материала для исследований» отправляли для лабораторных исследований. От исследуемых групп свиней брали кровь и получали пробы сыворотки крови, которые также отправляли для лабораторных исследований. Лабораторные исследования проводили в специализированных лабораториях Федерального центра здоровья животных (ФГУ ВНИИЗЖ, г. Владимир). Сыворотки крови на наличие специфических антител исследовали в ИФА со стандартными диагностическими наборами против вирусов РРСС, ЦВИС-2, ВБА, и бактериальных патогенов. Сыворотки крови для исследований получали методом произвольной выборки, в основном у свиноматок 1-8 опоросов и поросят 1-25 недель жизни, а также больных и слабых поросят, хряков. Как правило, кровь брали от 5-10 животных из каждой половозрастной группы. Пробы патологического материала от павших и вынужденно убитых свиней различного возраста (кишечника, селезенки, лимфоузлов, легких), сперму хряков, пробы внутренних органов от абортированных плодов исследовали методом ПЦР на наличие геномов РРСС, ПВИС, ЦВИС-2, РКВС, ВБА и др. а также ряда бактериальных патогенов (M. hyopneumonia, M. hyorhinis, P.multocida, H.parasuis, A.pleuropneumonia, и др.). Серологические исследования проводились для: диагностических целей подтверждения серопозитивности к основным специфическим и хозяйственно 6 значимым вирусным и бактериальным возбудителям болезней; определения сроков и путей заражения (горизонтальный и вертикальный); продолжительности колострального иммунитета; определения сроков вакцино-профилактики; разработки эффективных схем противоэпизоотических мероприятий. Кроме того, проводились исследования с целью оценки эффективности вакцинопрофилактики основных вирусных респираторных болезней поросят при использовании вакцин отечественных и зарубежных производителей. Вакцинацию животных проводили согласно соответствующих инструкций по применению вакцин. В ЗАО «Мордовский бекон» за этот период было проведено 5 клиникоэпизоотологических исследований в хозяйстве и 7 серий лабораторных исследований (экспертизы: № 01-12/3448 от 01.09.08г.; № 01-12/1620 от 27.04.09 г.; № 01-12/5652от 30.11.09 г.; № 01-12/5762 от 03.12.09 г.; б/№ от 22.12.09г.; б/№ от 02.04.10г.; б/№ от 24.05.10 г.). В ООО Агрокомплекс «Горноуральский» проведено 4 клиникоэпизоотологических исследования и 6 серии лабораторных исследований (экспертизы: № 01-12/2607 от 24.06.09; б/№ от 06.07.09; № 01-12/ 2831 от 22.07.09; № 01-12/5652 от 30.11.09; № 01 – 12/3102, от 16.08.10 г. № 01-12/3393, от 18.08.11 г). Для статистической обработки ряда показателей использовали пакет прикладных программ Microsoft Office Excel. Результаты исследований Диагностические и лечебно профилактические мероприятия в ЗАО «Мордовский бекон» Результаты клинико-эпизоотологическиого исследования. Основные причины падежа молодняка в хозяйстве - респираторные и желудочно-кишечные болезни. В группе доращивания от 20 до 50% животных проявляют признаки бронхопневмонии. Падеж свиней на откорме составляет от 30 до 500 голов в месяц с основными проявлениями заболевания также в виде бронхопневмонии. Подъем заболеваемость и падежа при респираторной патологии устойчиво наблюдается в осенне-зимний период. Падеж среди взрослого продуктивного поголовья незначительный. Основной отход поросят в подсосных группах отмечается в период 2-15 суточного возраста. У поросят групп доращивания - с 14 по 35 сутки постановки в группы (т.е. в возрасте 4565 суток). Проведен клинический осмотр всех возрастных групп животных, патологоанатомические вскрытия трупов павших животных. При вскрытие видны увеличения подчелюстных и паховых лимфатических узлов (серозный лимфаденит), мезентериальных лимфоузлов. Отмечались также дистрофии печени, отеки серозных оболочек кишечника, инъекция сосудов брызжейки, катарально-геморрагичекие воспаления слизистой оболочки желудка и тонкого отдела кишечника. Среди поросят групп доращивания (45-50 суток) много животных угнетенных, с признаками истощения, дерматитами, некрозами ушей и хвостов, отмечали респираторные расстройства и признаки параличей. При вскрытие у них отмечены увеличение и воспаление подчелюстных, бронхиальных, легочных, мезентериальных и паховых лимфоузлов, атрофия тимуса, гепатит, увеличение селезенки, отеки легких, скопление жидкостей в грудной и брюшной полостях (что характерно для ЦВИС), а также студенистые отеки в подчелюстном пространстве и паховой области, вокруг 7 почек. В сердечной сорочке и грудной полости находили фибринозное воспаление (характерно для гемофилезного полисерозита), кровоизлияния на почках, признаки гепатита и геморрагического гастрита. Результаты исследований импортных свиноматок показали отсутствие в их крови антител к вирусам РРСС, болезни Ауески и возбудителю АППС. В то же время у 20 из 38 исследованных свиней (52,6%) установлены положительные результаты на ЦВИС-2 (1 сомнительный и 7 отрицательных) и у 7 из 38 (18,4%) положительные результаты на ЭПС (1 сомнительная и 30 отрицательных). Большая часть животных этих групп положительно реагировала также на АППС. На ЦВИС и микоплазмоз данные группы животных не исследовали. В результате данных исследований клинически здоровых поросят групп доращивания, в возрасте 40 суток (свиноферма Ковылкино) геномы возбудителей РРСС, ЦВИС, РКВС, ЭПС, АППС, пастерелл и гемофилов не были обнаружены. При исследовании 40-60-суточных поросят с проявлением респираторной патологии (свиноферма Апраксино), выявлены геномы вирусов РРСС европейского генотипа, ЦВИС-2, АППС, M. hyorhinis пастерелл и гемофилов. Полученные результаты свидетельствуют о циркулировании на данной ферме возбудителей комплекса респираторных болезней свиней (КРБС). Учитывая, что имели место патологические признаки характерные для проявления поражений бактериальными патогенами, целесообразно дополнительно ввести в комплекс мероприятий лечебно-профилактические обработки поросят в период c 45 по 60 сутки жизни, в смеси с кормом доксипрекс (доксициклин 10%), в дозировке 2,5 кг на тонну корма. Результаты лабораторных исследований. По результатам клинического обследования, принято решение о проведении комплексных лабораторных исследований на вирусные и бактериальные патогенны (РРСС, ПВИС, грипп, болезнь Ауески, микоплазмозную пневмонию, гемофилез и актинобациллезную плевропневмонию). Исследовать патологический материал на ЦВИС методом ПЦР, а сыворотки крови на наличие антител методом ИФА по результатам проведенных вакцинаций. Пробы крови брали от ремонтных свинок возраста 180 и 220 суток (по 10 голов) и 8 голов основных свиноматок на 90 сутки супоросности. Учитывая, что ремонтные свинки были вакцинированы моновалентной инактивированной вакциной против РРСС, производства ВНИИЗЖ, в 180 дн жизни и в 200 дней жизни вакциной ПЛАР, производства НАРВАК, а свиноматки также вакцинированы моновалентной инактивированной вакциной против РРСС, производства ВНИИЗЖ, в 55 дней супоросности и на 20 день лактации вакциной ПЛАР, при исследовании на РРСС все пробы дали положительные результаты. Вместе с тем исследование патматериала (внутренние органы мертворожденных поросят и поросят-сосунов 2-5 суточного возраста) в ПЦР дало отрицательные результаты, что говорит об отсутствии инфекционного процесса данной болезни в указанный период и эффективности проводимой вакцинации. При выборочном исследовании 10 сывороток крови 160-ти суточных ремонтных свинок фермы Кочелаево, установлены положительные результаты на ЦВИС (50% 8 проб) и ЭПС (40% проб), при отсутствии положительных результатов на РРСС и АППС и другие респираторные патогены. Примечание: по горизонтали - парные сыворотки крови свиноматок; по вертикали - показания ИФА в %. Показания титра >30% - являются положительными, <20% - отрицательные. Рис. 1. Титр антител у супоросных свиноматок к европейскому генотипу PRRS В июле 2009 г. проводили двукратное исследование парных сывороток крови от 8 абортировавших свиноматок (в день аборта и повторно через 2 недели) отделения Апраксино методом ИФА. (экспертизы № 01-12/2607от 06.07.09 г. и № 01-12/2831 от 22.07.09 г.). Результаты представлены на рис.1, 2. Провели также исследования патологического материала от поросят методом ПЦР на наличие инфекционных агентов болезней свиней. Исследование внутренних органов аборт плодов и мертворожденных поросят дало положительный результат на вирус РРСС европейского генотипа и стрептококки. Из внутренних органов (5 проб легких, селезенок, лимфатических узлов) поросят 50 – 60 дней жизни выделили вирус РРСС европейского и американского генотипов, ЦВС-2 типа. Примечание: по горизонтали - парные сыворотки крови свиноматок; по вертикали - показания ИФА в %. Показания титра >30% - являются положительными, <20% - отрицательные. Рис. 2. Титр антител у супоросных свиноматок к американскому генотипу PRRS В октябре 2009 г. (экспертиза № 01-12/5652от 30.11.09 г.) проводили исследование патологического материала в ПЦР от поросят отделений Апраксино и Лада на бактериальные и вирусные патогенны, а также сывороток крови супоросных 9 свиноматок. Исследования легких 112-ти суточных поросят отд. Апраксино дало положительные результаты на вирус РРСС европейского генотипа, ЦВИС-2 , возбудители ЭПС, гемофилеза и пастереллеза. Аналогичные исследования 112-ти суточных поросят отд. Лада дало положительные результаты на ЦВИС-2, АППС, микоплазмоз, гемофилез и пастереллез. По результатам патологоанатомического вскрытия установлено, что основной причиной падежа поросят на доращивании является респираторная патология, обусловленная инфекцией РРСС (ранее установленная лабораторными методами). При этом в сыворотках крови 10 произвольно выбранных супоросных свиноматок отмечены достаточно высокие поствакцинальные титры антител против РРСС в результате применения живой вакцины Амервак . При исследовании поросят 1-25-ти недельных возрастов, матери которых были двухкратно привиты инактивированной вакциной ПЛАР, а также вакцинированные против БА получены следующие результаты. Антитела против РРСС обнаружены у поросят до 4-х недельного возраста, что характерно для пассивного иммунитета, затем практически исчезали и вновь появлялись с 10-ти недельного возраста и сохранялись до 25 недель (срок исследований), что свидетельствует о перезаражении животных в указанный период (рисунок 3). Примечание: по горизонтали – возраст поросят в нед. ; по вертикали - показания ИФА в %. Показания титра >30% - являются положительными, <20% - отрицательные. Рис. 3. Титры антител у поросят с 1 по 25 недели жизни к РРСС Учитывая полученные результаты, было предложено заменить инактивированную вакцину ПЛАР, на живую вакцину Амервак РРСС, но оставить в плане мероприятий вакцинацию супоросных свиноматок (60 дней супоросности) инактивированной вакциной против РРСС, производства ВНИИЗЖ. Для ремонтных свинок предложено применение вакцины Амервак-РРСС, двукратно, на 130 и 150 сутки жизни. В мае 2010 г. были проведены дополнительные исследования (экспертиза б/№ от 24.05.10 г.) по аналогичной схеме на 2-х отделениях хозяйства. При этом на отделении «Апраксино» была применена живая вакцина Амервак РРСС, а на отделении «Алово» применяли инактивированные вакцины против РРСС, производства НАРВАК и ВНИИЗЖ. 10 Таблица 1. Результаты исследований свиней на отделении «Апраксино» Группа поросят Колво жив-х в группе 1 1 неделя 3 недели 5 недель 7 недель 9 недель 11 недель 13 недель 15 недель 17 недель 19 недель 21 неделя 23 недели 27 недель Основные свиноматки Проверяем ые свиноматки 2 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 РРССевропейски й геноти п 3 7 6 5 1 9 10 10 10 10 10 9 10 10 Из них положительно реагировали на: РРССЦиркови- Болезн Энзоот Актиноамерирусная ь .пневбац. канский инфекция Ауески мония пневмония генотип 4 4 7 4 9 10 10 10 10 10 10 7 5 2 2 1 2 7 6 10 10 1 5 1 6 9 10 10 9 6 10 7 1 10 10 10 10 10 9 7 2 1 5 10 2 8 8 10 10 7 4 6 5 10 10 10 8 9 1 10 4 10 От поросят возрастов 1-27 недель, основных и проверяемых свиноматок выборочно брали кровь от 10 животных из каждой группы. Результаты исследований показаны в таблицах 1 и 2. Как видно из данных таблиц, специфические антитела у животных разных возрастных групп присутствовали на оба генотипа вируса РРСС (животные вакцинированы), ЦВС-2, БА (животные вакцинированы) и АППС, а также у части животных на ЭПС. Таблица 2. Результаты исследований свиней на отделении «Алово» Группа поросят Кол-во жив-х в группе 1 неделя 3 недели 5 недель 7 недель 9 недель 10 10 10 10 10 Из них положительно/сомнительно реагировали на: РРССРРССЦиркови- Болезнь Энзоот. Актиноевроамерирусная Ауески пневмобац. пейский канский инфекция ния пневмония генотип генотип 5 4 10 2 9 2 1 1 10 9 10 8 5 10 9 1 6 10 4 11 11 недель 13 недель 15 недель 17 недель 19 недель 21 неделя 23 недели 27 недель Основны е свинома тки Проверя емые свинома тки 10 3 9 6 10 - 3 10 2 10 7 6 5 - 10 6 10 10 6 1 1 10 6 9 7 3 - 6 10 9 10 7 9 5 10 10 8 9 5 3 - 10 10 10 10 8 9 1 10 10 9 9 5 10 6 10 10 3 4 3 10 2 10 10 5 5 4 10 6 10 В результате исследований в хозяйстве установлено следующее: 1. Применение вакцинации живой вакциной против РРСС оправдано, в связи с результатами серологических исследований. 2. Наличие высокого содержания антител против возбудителя актинобациллезной плевропневмонии свидетельствует о циркуляции возбудителя в стаде и передачи его от свиноматок поросятам. Необходимы дальнейшие исследования с целью определения стратегии борьбы с данной инфекцией. 3. Серологические исследования свидетельствуют о носительстве ЦВС-2 в стаде. 4. Результаты исследований по антителам к антигену БА свидетельствуют о напряженном иммунитете к данной болезни после вакцинации у свиноматок и поросят. Диагностические и лечебно профилактические мероприятия в ООО «Горноуральский» Максимальный отход поросят-сосунов приходился на весенний период и составлял 8 %, что является неплохим производственным показателем для давно работающего свинокомплекса. Гибель поросят групп доращивания в течение 10 мес. данного года превышал 10% в начале года, достигал максимума в летние месяцы 14-17% и в конце года снижался до 9%. Отход поросят группы доращивания до 17% существенно превышает технологические нормы (до 10%). Опорос проходит по секциям производственного корпуса и длится в среднем 10 суток. При опоросе наблюдался достаточно высокий процент мертворожденных и слабых поросят (слабо развитых и мелковесных, с нарушением пропорции голова-туловище). 12 По нашим наблюдениям и литературным данным это обстоятельство характерно для стационарно неблагополучного по РРСС стада. При проведении эпизоотологического обследования установлено также следующее. Постановка поросят в группы доращивания осуществляется партиями в течение 30 суток. После постановки поросят в группы доращивания, примерно через 2 недели, начинается клиническое проявление респираторных болезней. Практически в каждом станке регистриуются поросята с проявлением респираторной патологии, некрозом кончиков ушей. В ряде случаев отмечено нарушение технологии содержания животных – формирование групп с разным иммунным статусом, не соблюдение принципа «пустозанято», слабый менеджмент при опоросе. При опоросе встречаются поросята с нарушением пропорции голова-туловище, слабым сосательным рефлексом, заниженной массой тела при рождении, так же отмечено рождение слабых, мертвых и мумифицированных поросят. У свиноматок отмечен значительный процент агалактии. К 5-7 сут. возрасту появляются отстающие в развитие поросята . При патологоанатомическом вскрытии трупов были отмечены изменения, характерные для поражений АППС и микоплазмоза. При проведении патологоанатомических исследований кроме респираторных поражений установлено значительное увеличение мезентериальных лимфатических узлов у животных и изменения селезенки, что, по нашему мнению, характерно для ЦВИС. Таким образом, комплексный респираторный синдром – как предварительный диагноз и основная причина заболевания и гибели поросят по результатам клиникоэпизоотологических и патологоанатомических исследований был очевиден. По результатам данной работы было организовано проведение лабораторных исследования для определения основных вирусных и бактериальных возбудителей болезней и дальнейшей разработки схемы противоэпизоотических мероприятий. Кроме того, при постановке в группу доращивания ранее применялись оральные антибиотики в смеси с кормом. По нашим рекомендациям введение оральных антибиотиков в этот период отменили и для подавления бактериальной микрофлоры применили двукратную инъекционную обработку поросят 15% амоксициллином. Результаты лабораторных исследований. Результаты исследований показывают, что в сыворотках крови свиноматок обнаружены антитела против возбудителей РРСС (32% исследованных проб), ЦВИС (28,5% исследованных проб), возбудителей микоплазмоза (31% исследованных проб) и актинобациллеза (97,2% исследованных проб). Причем у ремонтных свиноматок, в отличие от основных, антитела ко всем данным возбудителям были обнаружены у всех исследованных животных. В сыворотках крови поросят различного возраста обнаружены антитела против всех указанных возбудителей, кроме М. хиопневмония (два сомнительных результат за все сроки исследований являются не достоверными). Антитела против вируса РРСС появляются с 11-13 недель жизни и сохраняются у большинства животных до 25 недельного возраста (сроки исследований). На рисунке 4 отдельно даны показатели 13 отражающие уровень титров антител у поросят с 1 по 25 недели жизни к репродуктивно-респираторному синдрому. Примечание: по горизонтали – возраст поросят в нед.; по вертикали – титры антител в %. Показания титра >30% - являются положительными, <20% - отрицательные. Рис. 4. Динамика титров антител к вирусу РРСС у поросят Из данного рисунка наглядно видно, что у поросят в первую неделю жизни имеется незначительный гуморальный иммунитет, который быстро исчезает. Антитела вновь появляются к 40-м суткам жизни. С 9-ой недели уровень их возрастает волнообразно и держится выше диагностического уровня (30%) практически до конца откорма вследствие контакта организма животных с полевым вирусом РРСС. Аналогичную картину наблюдали и у ремонтных свинок. Это говорит о циркуляции вируса РРСС у поросят в группе доращивания и откорма и этим очевидно объясняется и начало заболеваемости и падежа от респираторного синдрома поросят, начиная с 40 дневного возраста. Кроме того, вирус РРСС может обуславливать и скачкообразные увеличения заболеваемости и падежа свиней на всем протяжении доращивания и откорма. Примечание: по горизонтали - возраст поросят в нед.; по вертикали – титры антител в %. Показания титра >30% - являются положительными, <25% - отрицательные. Рис. 5. Динамика титров антител к возбудителю АППС у поросят Из рисунка 5 наглядно видно, что у поросят с первой по седьмую недели жизни имеется значительный гуморальный иммунный ответ на АППС. С девятой по семнадцатую недели титр антител практически исчезает и появляется только в 40% исследованных проб на девятнадцатой недели, что свидетельствует о контакте животных с полевым возбудителем. 14 Примечание: по горизонтали - возраст поросят в нед.; по вертикали – титры антител в %. Показания титра >15% - являются положительными, <10% - отрицательные. Рис. 6. Динамика титров антител к возбудителю ЦВИС у поросят Интересны, с точки зрения изучения причин заболеваемости поросят, уровни титров антител к ЦВИС-2. Результаты этого исследования приведены на рисунке 6. Антитела к ЦВИС-2 отмечаются у поросят первых 7-9 недель жизни, но не постоянно (не у всех исследованных животных). С 9 до 23 недель регистрируются практически у всех поросят и к 25 недели начинают снижаться. От абортировавших свиноматок были проведены выборочные серологические исследования парных сывороток на РРСС. Для этого исследовали кровь 10 свиноматок абортировавших после 90 суток супоросности, с интервалом 21 день на наличие антител к европейскому и американскому серотипам вируса РРСС. (экспертиза №01-12/2831 от 22.07.09 г.). Результаты исследований представлены на рисунках 7 и 8. Примечание: по горизонтали - парные пробы сывороток; по вертикали - показания ИФА в %. Показания свыше 30% считаются положительными. Рис. 7. Результаты исследований парных сывороток к европейскому генотипу РРСС При исследовании на европейский генотип в 6 из 10 проб от свиноматок, взятых в день аборта (первичные исследования), получены положительные результаты. При повторном исследовании положительные результаты дали все 10 проб. Рост титров антител в исследованном интервале был значительным (2-4 раза). Поскольку вакцинация в этот период не проводилась можно расценивать данные показания как проявление инфекционного процесса. 15 Результаты исследований парных сывороток к американскому генотипу РРСС показали следующее. При первичном исследовании положительных результатов не отмечено. При повторном исследовании в 4 пробах были получены положительные результаты, в одной сомнительные и в 5 пробах отрицательные. Примечание: по горизонтали - парные пробы сывороток; по вертикали показания ИФА в %. Показания свыше 25% считаются положительными Рис. 8. Результаты исследований парных сывороток к американскому генотипу РРСС В результате исследований в хозяйстве установлено следующее: 1. В данном хозяйстве животные одновременно инфицируются двумя иммунодепресантными вирусами - РРСС и ЦВИС. При такой ситуации значительная заболеваемость и отход поросят вполне закономерны. 2. Очевидно предположение, что основной причиной абортов и падежа поросят сосунов в первые дни жизни является репродуктивная форма вируса РРСС. Применяемая схема мероприятий не полностью дает возможность контролировать эпизоотическую ситуацию и нуждается в совершенствовании. 3. Необходимо проведение вакцинации свинопоголовья против репродуктивнореспираторного синдрома свиней и цирковирусной инфекции, а также применить медикаментозную профилактику бактериальных инфекций. Разработка эффективных схем профилактики и контроля болезней Основываясь вышеизложенным, было принято решение о введении в план противоэпизоотических мероприятий вакцинацию свиноматок против РРСС, ремонтных свинок против РРСС, поросят против ЦВС-2. Для вакцинации свиноматок против РРСС использовали инактивированную вакцину ВНИИЗЖ, двукратно на 10 сутки лактации и на 60 сутки супоросности. Ремонтных свинок вакцинировали на 170 и 190 сутки с последующим осеменением их на 240 сутки. Вакцинацию поросят против ЦВС-2 предложено провести вакциной Порцилис PCV, на 17 и 21 сутки жизни. Помимо этого, ввести в план мероприятий антибиотикотерапию поросятотъемышей с 29 по 43 день жизни орально в смеси с кормом антибактериальным препаратом «Доксипрекс» в дозировке 2,5 кг/тонну. С 48 по 58 сутки жизни, орально в смеси с кормом или водой антибактериальный препарат амоксицилин (Амоксиклав или Ремокс). Дополнительно, при переводе в группу откорма однократно, внутримышечно препаратом «Тетрокси ЛА». Подсвинков откорма с 105 по 115 сутки жизни, предложено обрабатывать орально в смеси с кормом антибактериальной 16 добавкой содержащей тиамулин 200г/тонну + окситетрациклин 600г/тонну корма. В результате проведенной работы в период 2010-11 г.г. произошло существенное улучшение экономических показателей деятельности предприятия представленное в нижеследующих рисунках 9-12. Рис. 9. Отход поросят в динамике за 2010- 11 г.г. Рис. 10. Выход свинины в живом весе на одну свиноматку в 2010-11 г.г. В динамике по месяцам наблюдается заметный рост с 1500 кг до 1800 кг в течение 2010 года и более 1953 в 2011 году. При этом средний вес животного при реализации был на уровне 98-102 кг, то есть его эффективность определяется не за счет увеличения живой массы животного при убое и продаже, а прямо связана с ростом продуктивности животных (среднесуточный привес). Рис. 11. Динамика выхода поросят в 2010-2011 гг. 17 Рис. 12. Динамика получения приплода и реализации молодняка Выводы 1. В свиноводческих предприятиях ЗАО «Мордовский бекон» и ООО АК «Горноуральский» установлен комплекс респираторных болезней свиней (КРБС) который вызывает основные экономические потери при выращивании поросят. КРБС вызывается несколькими возбудителями инфекционных болезней: вирусами РРСС и ЦВС-2 а также бактериями M. hyopneumonia., M.hyorihnis., A.pleuropneumonia, H.parasuis, P.multocida. 2. Наибольшая заболеваемость и отход поросят от респираторных болезней отмечается в периоды отъема и доращивания. Кроме этого, имеет место мертворождение, рождение слабых, не жизнеспособных, отстающих в росте поросят. Отход поросят в ЗАО Мордовский бекон достигал 20-60%; в АК Горноуральский 1017%, в котором также высок процент абортов свиноматок. Рост заболеваемости и падежа поросят от респираторной патологии устойчиво наблюдается в осенне-зимний период. 3. При клиническом осмотре и патологоанатомическом вскрытие павших поросят различного возраста установлены признаки характерные для инфекционных болезней: РРСС, ЦВИС, микоплазмозной (энзоотической) пневмонии, актинобациллезной пневмонии и гемофилезного полисерозита. В результате лабораторных исследований внутренних органов (в основном легких поросят и свиней) методом ПЦР в обоих хозяйствах получены положительные результаты на РРСС, ЦВИС (европейский генотип), ЦВС-2, АППС, 2 вида микоплазм (M. hyopneumonia., M.hyorihnis), A.pleuropneumonia, H.parasuis, P.multocida типов А и D. 4. В ООО АК «Горноуральский» установлено наличие вируса РРСС европейского генотипа, в ЗАО «Мордовский бекон» установлена циркуляция обоих генотипов возбудителя РРСС (европейского и американского). 5. Несмотря на циркуляцию возбудителя энзоотической пневмонии свиней в исследованных хозяйствах, можно предположить, что он не передается вертикальным путем, поскольку антитела к нему у поросят почти не обнаружены. 6. Среди поголовья свиней обоих хозяйств отмечается широкое, почти поголовное носительство возбудителя АППС и передача его от свиноматок поросятам – вакцинация против которого не проводится. 18 7. Вакцинацию против РРСС (с использованием живой вакцины Амервак) и ЦВИС в ЗАО «Мордовский бекон» следует признать эффективной в плане как создания активного иммунитета у животных, так и пассивного (молозивного), поскольку у большинства исследованных поросят и свиней при серологических исследованиях отмечали антитела в достаточно высоких тирах (положительные результаты). Несмотря на возможность циркуляции возбудителей этих инфекций среди поголовья. 8. Вакцинация против РРСС в АК «Горноуральский» с использованием отечественных вакцин была не достаточно эффективна на первом этапе. Установлено, что в хозяйстве циркулирует европейский генотип вируса РРСС и титры поствакцинальных антител были не достаточно высокими у части привитых животных. Эффективность живой вакцины Амервак оказалась значительно выше. В дальнейшем при использовании этой вакцины удалось существенно снизить количество абортов у свиноматок, отход поросят подсосного периода и групп доращивания. 9. Применение вакцины против РРСС «Амервак» (производства фирмы Хипра, Испания) дает возможность формирования активного иммунитета у свиноматок и пассивного у поросят к обоим генотипам возбудителя – европейскому и американскому. 10. Результаты диагностических исследований подтверждают необходимость постоянной плановой иммунизации свинопоголовья указанных хозяйств, против репродуктивно-респираторного синдрома свиней и цирковирусной инфекции. Кроме этого в системе профилактических, противоэпизоотических мероприятий необходимо применение антибактериальных препаратов для профилактики вторичных бактериальных инфекций. Практические предложения Разработана система мероприятий по диагностике, профилактике и ликвидации основных вирусных и бактериальных инфекций вызывающих поражения респираторных органов у свиней. На основании проведенных исследований согласованы и утверждены Генеральным директором ООО «ПРОВИМИ» « 05 » мая 2012 г. «Рекомендации по диагностике, профилактике и ликвидации вирусных и бактериальных респираторных болезней в промышленных свиноводческих хозяйствах». Материалы диссертации используются в практической работе при проведении консультаций в свиноводческих хозяйствах ряда регионов России, а также используются в учебном процессе на кафедре эпизоотологии и инфекционных болезней ФГБОУ ВПО МГАВМиБ. Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Зеленуха Е.А., Гречухин А.Н. Мероприятия при респираторных болезнях свиней в промышленных свинокомплексах // Ветеринария.- 2007.- № 5.- С. 13-15. 2. Зеленуха Е.А., Гречухин А.Н. Мероприятия при респираторных болезнях свиней в промышленных свинокомплексах //Эффективне тваринництво.- 2007- № 7.- С. 47-50. 3. Зеленуха. Е.А., Гречухин А.Н. Лечебно-профилактические средства при респираторных болезнях свиней //Свиноводство.-2008.- № 1.- С.57-58. 19 4. Гречухин А.Н., Зеленуха Е.А. Анализ противоэпизоотических мероприятий при репродуктивно-респираторном синдроме свиней на крупном свинокомплексе // Свиноводство.- 2011.- № 4.- С.54-55. 5. Гречухин А.Н., Зеленуха Е.А. Эпизоотологические данные болезней свиней группы доращивания и откорма на свинокомплексе, расчитанном на 3000 свиноматок // Перспективное свиноводство.- 2011.- № 1.-С.12-13. 6. Зеленуха Е.А., Сидорчук А.А. Проблема комплексного респираторного синдрома в промышленном свиноводстве // Российский ветеринарный журнал.- 2012.№ 2.- С.22-25. 20