Исследование суммарной антиоксидантной активности

Рисунок. Градуировочный график для определения разных АО в моль-экв/дм3.
При оценке суммарного содержания АО в моль-экв/дм3
систематическая погрешность определения при прочих равных
условиях снижается с 50–60 % до 10–20 %.
Исследование суммарной антиоксидантной активности
сыворотки крови человека при
сердечно-сосудистой патологии
М.В. Букель, Е.И. Короткова, А.М. Гусакова, О.А. Воронова,
Т.Е. Суслова, Т.В. Емельянова, Е.В. Дорожко
Томский политехнический университет, 634050, г. Томск,
проспект Ленина, 30, e-mail: maria.bukel@yandex.ru
Определение антиоксидантной активности (АОА) сыворотки крови
человека является важной задачей для медико-биологических
исследований, поскольку АОА определяет защитную систему
организма для борьбы с окислительным стрессом.
Участие АФК в сердечно-сосудистой патологии в настоящее время
не оставляет сомнений, наряду с чрезмерной активации перекисного
окисления липидов они вызывают также и окислительную
модификацию белков, приводящую к патологическим изменениям их
конформации, свойств и функций. К настоящему времени накоплены
многочисленные данные, позволяющие рассматривать окислительный
стресс в качестве одного из ключевых патогенетических компонентов,
инициирующих возникновение и развитие сердечно-сосудистых
заболеваний. Поэтому исследование антиоксидантного статуса
организма по биологическим жидкостям в норме и при
патологических состояниях представляется весьма перспективным
направлением как в современной медицинской диагностике, так и для
научных разработок.
Цель исследования — изучение суммарной АОА сыворотки крови
8 пациентов с заболеваниями сердечно-сосудистой системы двумя
независимыми
методами
(вольтамперометрический
и
колориметрический) на разных этапах оперативного вмешательства и
сопоставление полученных результатов.
Методика определение антиоксидантной активности сыворотки
крови вольтамперометрическим методом заключается в съемке
вольтамперограмм катодного восстановления кислорода без
добавления и с последующим добавлением 0,1 мл сыворотки крови.
Определение антиоксидантной активности сыворотки крови
колориметрическим
методом
основывается
на
определении
содержания общих биопероксидов в сыворотке крови с помощью тестсистемы OxyStat колориметрическим методом на спектрофотометре.
Поскольку существует прямая зависимость между присутствием
свободных
радикалов
и
циркулирующими
биологическими
пероксидами, набор Biomedica OxyStat, предназначенный для
измерения общей концентрации перекиси, позволяет оценить
окислительный статус в биологических образцах.
Результаты исследования показали, что в сыворотке крови
большинства пациентов присутствует достаточное количество
соединений антиоксидантной природы, определяющие доминирующие
процессы взаимодействия компонентов плазмы крови с кислородом и
его радикалами. Так же прослеживается зависимость между
значениями суммарной АОА сыворотки крови по периоду забора
крови. Для большинства пациентов до оперативного вмешательства
наблюдается некий средний уровень суммарной АОА сыворотки
крови, который во время операции уменьшается. После операции
почти у всех пациентов значения суммарной АОА сыворотки крови
восстанавливаются до первоначального состояния.
Таким образом, в работе было проведено сравнение двух
независимых
методов
(колориметрического
и
вольтамперометрического) определения суммарной АОА сыворотки
крови. Показано, что во время операции после пережатия сонной
артерии показатель суммарной АОА сыворотки крови снижается, а
после
восстановления
кровотока
восстанавливается
до
первоначального состояния
Список литературы
1. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в
биологических мембранах. — М.: Наука, 1972. — 252 с.
2. Панасенко О.М., Сергиенко В.И. Свободнорадикальная модификация
липопротеинов крови и атеросклероз // Биол. мембраны. 1993. Т. 10. № 4.
С. 341–382.
3. Меньщикова Е.Б., Зенков Н.К., Сафина А.Ф. Окислительный стресс при
ишемическом и реперфузионном повреждении миокарда. // Успехи соврем.
биологии. 1997. № 3. С. 362–373.
4. Белякова Н.А., Семесько С.Г. Антиоксидантная активность биологических
жидкостей человека. Методология и клиническое значение. // Эфферентная
терапия. — 2005. — Т.11, № 1. — с.5–23.
5. Bartos G. Total antioxidant capacity // Adv. Clin. Chem. — 2003. — Vol. 37. —
P. 219–292.
6. Громовая В.Ф., Шаповал Г.С., Мионюк И.Е., Луйк А.И.
Электрохимическое исследование антиоксидантной активности крови //
Журнал обшей химии. — 1997. — т.67, № 3. — с.510–513.
7. Ziyatdinova G.K., Budnikov H.C., Pogorel’tzev V.I. Electrochemical
determination of the total antioxidant capacity of human plasma // Analytical
and Bioanalytical Chemistry. — 2005. — v. 381, №8. — р.1546–1551.
8. Kohen R., Vellaichamy E., Hrbac J., Gati I., Nirosh O., Quantification of the
overall reactive oxygen species scavenging capacity of biological fluids and
tissues // Free Radical Biology And Medicine — 2000. — v.28, №6. — p.871–
879.
9. О.И. Липских, Е.И., Короткова, А.А. Бакибаев. Метод вольтамперометрии
в исследование каталитических свойств каталазы и супероксиддисмутазы /
Изв. вузов. Химия и хим. технология. 2008. Т.51. вып.5. С.48–50.
10. Е.В.Плотников, Е.И.Короткова, Е.В.Дорожко, М.Букель, В.Линерт.
Исследование суммарной антиоксидантной активности сыворотки крови
человека в норме и патологии алкоголизма методом вольтамперометрии /
Заводская лаборатория, 2009, Том 75, №12, С.14–17.
11. Korotkova E.I., Avramchik O.A., Angelov T.M., Karbainov Y.A. Investigation
of antioxidant activity and lipophilicity parameters of some preservatives //
Electrochim. Acta. 2005. V.51. № Р.324–332.